学术投稿

杆状病毒早期启动子载体的构建及报道基因的表达

邓小昭;朱反修;刁振宇;高健;齐义鹏

关键词:昆虫杆状病毒, IE1基因, p10基因, 转移载体, 新霉素抗性基因(neo)
摘要:目的:用苜蓿尺蠖核多角体病毒(AcNPV)的IE 1基因启动子构建杆状病毒早期基因启动子载体。方法:以AcNPV p10基因为侧翼序列,并将新霉素抗性基因(neo)插入IE 1基因启动子下游,得到转移载体pAcPIneo。将它和野生型AcNPV DNA共转染昆虫细胞Sf9,由于neo基因的表达,通过G418的选择和富集作用,得到重组病毒vAcPIneo的纯培养。结果:用酶切和Southern印迹杂交证明,neo基因整合于AcNPV基因组的p10基因位相。结论:成功地构建了杆状病毒早期启动子载体,neo基因在受染细胞内从早期到晚期均可发生转录。
医学研究生学报杂志相关文献
  • 鼻息肉中转化生长因子β亚型的表达及分布

    目的:研究转化生长因子β(TGF-β)亚型在鼻息肉病患者息肉组织中的表达和分布,了解其在上呼吸道慢性炎症过程中的作用,探讨鼻息肉病的发病机制。方法:采用免疫组化APAAP法和Western-blot检测25例鼻息肉病患者的息肉组织和下鼻甲粘膜中TGF-β1~3亚型的表达,并以8例健康人下鼻甲粘膜作对照。结果:①TGF-β亚型的表达在鼻息肉病患者的鼻息肉中高于下鼻甲粘膜,而健康人下鼻甲粘膜中几乎不能检测到。②在TGF-β亚型中可以检测到大量TGF-β1而很少检测到TGF-β2 和TGF-β3 。结论:TGF-β1是鼻息肉中TGF-β家族的优势表达亚型,也能在炎性鼻息肉和鼻粘膜中表达。TGF-β1诱导粘膜上皮和结缔组织的多种变化,可能是鼻息肉病发病的重要机制之一。

    作者:王秋萍;陈峰;王天友;程向荣;吴昆旻 刊期: 2001年第03期

  • 针刺治疗单纯性肥胖病的实验研究

    目的:通过自制高热量饲料喂养SD大鼠制造肥胖模型,观察针刺对其治疗作用。方法:用自制高热量饲料喂养雄性SD大鼠,并以普通饲料喂养作为对照。观察针刺前后大鼠摄食量、饮水量、体重、体长、Lee指数、腹股沟和肾周脂肪、血中TG、TC、BG等指标的变化。结果:以高热量饲料喂养的大鼠体重超过普通饲料喂养大鼠的20%作为肥胖标准,致肥率为56%。针刺一疗程后,上述指标均有不同程度变化,而且具有统计学意义。结论:营养过剩是肥胖病的原因之一,使用的高热量饲料制造肥胖动物模型是合理的,针刺对单纯性肥胖病具有较好的治疗作用。

    作者:魏群利;郭郡浩;白红 刊期: 2001年第03期

  • 角膜内皮细胞损伤后早期超微结构改变

    目的:了解角膜内皮细胞损伤的超微结构特征及其临床意义。方法:对20只成年灰兔进行定量角膜内皮细胞损伤,伤后定期进行眼部裂隙灯检查、角膜厚度及眼压测定,预期取角膜材料进行透射电镜和扫描电镜检查。结果:角膜内皮细胞损伤后1天可见细胞膜破损,细胞肿胀,细胞器颗粒粗大;伤后3天内皮细胞崩解,胞质脱落,胞核裸露;伤后5天出现细胞缺损区,膜脂降解聚积而形成脂质球,附着于细胞缺损区,角膜上皮细胞间隙增宽;伤后7天角膜内皮细胞移行修复细胞缺损区;伤后9天后内皮细胞异形明显,上皮细胞出现变性。角膜混浊与角膜厚度呈正相关。眼压增高者角膜厚度增加,内皮细胞损伤加重。结论:超微结构检查结果提示,角膜内皮细胞受损后细胞崩解似乎是必然的结局。动态测定角膜厚度可以判断角膜内皮细胞损伤的程度。控制眼压是预防内皮细胞损伤加重的重要措施之一。

    作者:陈穗桦;黄振平;薛春燕;王毅;曹春林;王理理 刊期: 2001年第03期

  • 自身免疫性甲状腺病的致病因素

    自身免疫性甲状腺病(AITD)的发病机制尚未完全明了,某些遗传和环境因素可能与AITD发病有关,但在不同个体,不同致病因素所起的作用可能亦不相同。因而造成AITD临床和病理学表现的异质性。本文回顾近年来有关AITD致病因素的研究进展。

    作者:王坚;王扬天 刊期: 2001年第03期

  • 嗜铬细胞瘤的诊断和治疗(附53例报告)

    总结我院1969年~1998年经手术治疗的嗜铬细胞瘤53例,现报告如下。1 资料与方法 本组53例,男24例,女29例,年龄16~68(平均38.3)岁;病程1个月~19年,平均4.2年;49例(92.5%)术前有不同程度的高血压;肿瘤大径1.2~10.3(平均4.3)cm;左侧23例,右侧27例,双侧3例;单发47例,多发6例;肿瘤位于肾上腺内42例,肾上腺外11例(包括膀胱1例);良性46例,恶性7例;静止型4例。49例术前明确诊断或怀疑嗜铬细胞瘤的患者均服降压药(尼卡地平、哌唑嗪、特拉唑嗪和硝苯地平)准备14天以上。3例术前未怀疑嗜铬细胞瘤,未作相应准备。经腰切口35例,经腹切口18例;45例行同侧肾上腺切除术,7例行包膜下肿瘤切除术,1例膀胱嗜铬细胞瘤行膀胱部分切除术。硬膜外麻醉31例,全麻20例,另2例先行硬膜外麻醉,后改为全麻。

    作者:葛京平;高建平;许宏;蔡荣星 刊期: 2001年第03期

  • 涡轮钻在拔牙术中的应用

    近年来,我们采用高速涡轮钻磨切法去除难拔牙齿的阻力,取得较好的效果,现报告如下。1 资料和方法 1.1 一般资料选择门诊拔牙困难的患者100例,其中男36例,女64例,年龄14~63(平均32.5)岁。拔牙原因:残根或残冠36例,阻生牙58例,纵折牙6例。100例患者共拔牙118颗,其中前磨牙11颗,磨牙43颗,阻生牙64颗。1.2 方法1.2.1 钻磨阻生牙①去除牙冠部阻力:牙冠部阻力主要是阻生牙与邻牙、周围骨组织之间所产生,钻磨法与劈开法的目的相同,都是要去除阻力。可分为完全磨断和部分钻磨两种方法,前者将整个或部分牙冠完全磨断;后者将牙冠大部或部分钻磨后,将牙挺插入沟槽,用扭力将近中牙冠折断,或将劈冠骨凿置于沟槽,劈断牙冠;离断的牙冠应上大下小,易于取出。②去除牙根部阻力:牙根部阻力主要是牙根解剖形态与骨组织之间所产生,一般骨阻力较小,在牙冠阻力被去除后,无需任何处理,即可将牙根挺出。但在多根、长根、弯根、肥大根、根分叉较大或环抱根时,牙根阻力较大,可采用钻磨分根、磨除根周骨质的方法,去除牙根部的阻力。③去除骨组织:对埋伏牙或牙冠暴露较少的阻生牙,可去除牙冠周围的骨组织。1.2.2 多根磨牙分根死髓牙、残根冠和多根牙比较牢固,尤其是根分叉大,近远中有邻牙者,可钻磨分根或钻磨后用骨凿分根拔除。1.2.3 残根去骨弯根、肥大根、环抱根或牙根与骨组织形成骨性粘连者,取根较难,可采用磨除根周围骨质的方法,去除牙根部阻力后将根取出;在上颌后牙难以将根掏出的情况下,可采用加长钻头直接将根磨除。

    作者:王;杨震;寿柏泉 刊期: 2001年第03期

  • 肺部转移性肿瘤肺动脉、支气管动脉双介入治疗(附25例报告)

    0 引言 两肺转移性肿瘤是全身各器官肿瘤晚期转移途径之一,治疗棘手。近年来,我们选择25例已明确诊断的患者进行了肺动脉、支气管动脉双重介入药物灌注疗法,收到了较好的疗效,现报告如下。1 资料与方法1.1 临床资料本组25例两肺转移性肿瘤,男11例,女14例,年龄35~67岁,>50岁者15例。按原发肿瘤分肝癌6例,肺癌5例,乳癌4例,骨肉瘤4例,绒癌3例,甲状腺癌3例。单发肺转移癌13例,合并纵隔淋巴结及胸膜转移12例。经手术治疗1年后发生转移3例,术后2年转移5例,术后3年转移7例,余10例均失去了手术时机,但均作了病理、生化、影像及超声诊断检查。

    作者:张富强;李成朗 刊期: 2001年第03期

  • 体外循环对肺的影响

    体外循环术后经常伴有肺功能不全,体外循环被认为是急性呼吸窘迫综合征的高危因素。本文就近年来体外循环对肺损伤机制的研究作一综述。

    作者:仇万山;景华 刊期: 2001年第03期

  • 脑实质内神经鞘瘤

    0 引言 颅内神经鞘瘤可以起源于除视神经以外的任何脑神经,但通常发生于脑神经的感觉支,常见于听神经和三叉神经。脑实质内通常无神经膜细胞(Schwann Cell)存在,因而脑实质内神经鞘瘤极其罕见,其组织发生是一个有争议的问题[1~6]。我们自1980年10月至1996年7月共收治脑实质内神经鞘瘤3例,现报告如下。1 病例报告 病例1 患者女性,16岁,因进食呛咳2年,反复咳嗽、发热1年,于1980-10-27入院。查体神志清,消瘦,双侧眼球垂直震颤,双侧视神经盘水肿,右侧软腭上抬无力,咽反射迟钝,右侧舌肌萎缩,伸舌右偏,右侧耸肩无力,右手指鼻试验和跟膝胫试验阳性,右侧轻偏瘫,双侧病理征(+)。脑超声波检查中线居中。金链脑室造影示第四脑室占位性病变。因胸片提示双下肺炎,故入院后先行抗炎治疗。但因病情进一步恶化,于1980-11-27肺炎未完全控制的情况下即行开颅探查。术中发现肿瘤位于脑干,自第四脑室底的下半部向背侧突出,作肿瘤部分切除。病理报告为神经鞘瘤。术后原有的神经功能障碍未见好转也未加重。因痰排出困难,而家属拒绝施行气管切开术,患者自动出院。此后失去随访。

    作者:王汉东;史继新;谭启富;孙克华;成惠林 刊期: 2001年第03期

  • 立体定向治疗脑深部病变

    目的:探讨立体定向技术治疗脑深部病变的疗效。方法:利用ASA-601S和Fischer脑立体定向仪治疗82例脑深部病变患者,行定向活检治疗22例,血肿清除治疗5例(脑干血肿2例),脑脓肿抽吸术2例,囊性颅咽管瘤置入Ommaya管治疗53例。结果:活检确诊为胶质瘤10例,生殖细胞瘤4例,脑寄生虫3例,肺癌脑转移4例,1例第三脑室后部病变活检为胶质细胞增生,后随访为胶质瘤;有4例胶质瘤行手术治疗后病情好转,其余肿瘤行放射治疗,有6例痊愈(4例生殖细胞瘤,2例转移性肿瘤),3例寄生虫经对症治疗后痊愈;2例脑脓肿经抽吸、抗炎治疗后痊愈;脑血肿5例经治疗痊愈;53例颅咽管瘤置放Ommaya管后3例痊愈(行囊内放疗),50例好转。结论:立体定向治疗脑深部病变定位精确、损伤小、操作简便、安全可靠,值得提倡。

    作者:孙康健;谭启富;孙克华 刊期: 2001年第03期

  • 电子束CT仿真内窥镜成像的临床应用

    0 引言 电子束CT(electron beam computed tomography,EBCT)、仿真内窥镜成像(EBCT virtual endoscopy imaging,EBCT-VEI) 技术乃是电子束CT与仿真内窥镜技术相结合,将EBCT快速扫描所获得的大量资料,输入工作站后通过一系列重建处理及经管腔导航技术(flythrough),使受检器官三维成像,逼真模拟内窥镜检查过程,可用于消化道、气管和鼻旁窦等部位的检查。本文对该技术作一简要介绍。

    作者:苏宏;陈君坤 刊期: 2001年第03期

  • 杆状病毒早期启动子载体的构建及报道基因的表达

    目的:用苜蓿尺蠖核多角体病毒(AcNPV)的IE 1基因启动子构建杆状病毒早期基因启动子载体。方法:以AcNPV p10基因为侧翼序列,并将新霉素抗性基因(neo)插入IE 1基因启动子下游,得到转移载体pAcPIneo。将它和野生型AcNPV DNA共转染昆虫细胞Sf9,由于neo基因的表达,通过G418的选择和富集作用,得到重组病毒vAcPIneo的纯培养。结果:用酶切和Southern印迹杂交证明,neo基因整合于AcNPV基因组的p10基因位相。结论:成功地构建了杆状病毒早期启动子载体,neo基因在受染细胞内从早期到晚期均可发生转录。

    作者:邓小昭;朱反修;刁振宇;高健;齐义鹏 刊期: 2001年第03期

  • 急诊科室医患矛盾激化的原因与对策

    0 引言 急诊科是大中型医院为患者服务的前沿,是各种医患矛盾的主要集中地。到急诊科就诊的患者病情危重或紧急,陪同人员常常处于高度紧张状态,情绪多较激动,心境多很复杂。故在就诊过程中容易与医护人员发生矛盾。矛盾激化则常常表现为急诊科医护人员遭攻击。美国急诊医师学会综合研究表明,32%的急诊科每天至少有1次受到口头威胁,43%的急诊科每月至少有1名工作人员受到1次躯体攻击。在过去的5年中,80%的急诊科至少1名成员被攻击受伤,7%的急诊科有1位被暴力致死[1~4]。国内大型综合性医院急诊科尚未进行系统统计,但医患矛盾时有发生,医护人员遭受口头威胁、侮辱频发,遭受躯体攻击亦不鲜见。分析研究发生在急诊科的医患矛盾及矛盾激化的原因、对策是十分必要的。

    作者:钱小明;杨金城;吴学豪;孙海晨 刊期: 2001年第03期

  • 颅后窝手术后脑神经损伤患者的护理

    0 引言 颅后窝虽容腔狭小,但包容许多重要结构,不仅有脑干和椎动脉系统,尚有多组脑神经走行其中。因此,颅后窝病变及手术易损伤这些神经,尤其是面神经及后组脑神经,出现面瘫、饮水呛咳、声音嘶哑、斜颈、舌肌瘫痪等临床表现。在康复过程中患者心理负担重,主要表现为焦虑、悲观,不能顺利实现角色转换。本文对55例颅后窝手术后脑神经损伤患者的若干护理问题进行分析探讨,认为主要问题是:①自我形象紊乱;②营养失调,低于机体需要量;③面瘫并发症;④呼吸道的管理等。我们有针对性地采取相应的护理对策,帮助患者顺利渡过由于脑神经损伤所导致的一系列并发症,提高患者术后生活质量。

    作者:张爱琴;俞群群;杨惠清;叶静 刊期: 2001年第03期

  • 人CD5+B细胞的研究进展

    CD5+B细胞由早期的前体细胞发育而来,不依赖骨髓,是一类具有重要功能的B细胞亚群。在多种自身免疫性疾病和B淋巴细胞系恶性肿瘤患者体内均有CD5+B细胞数量和(或)功能的异常。在艾滋病、肝炎、精神分裂症及肝损伤后再生过程中也有CD5+B细胞的异常改变,提示CD5+B细胞可能具有广泛的临床意义。

    作者:杨瑞宁;武建国 刊期: 2001年第03期

  • 慢性VNS对点燃大鼠大脑皮质及海马神经元兴奋性的影响

    目的:探讨迷走神经刺激(VNS)抗癫作用的细胞机制。方法:用戊四氮(PTZ)行大鼠腹腔注射点燃制作癫模型,行迷走神经刺激抗癫,应用荧光分光光度法测定不同浓度谷氨酸(Glu)对正常、PTZ点燃及VNS治疗动物大脑皮质及海马神经元胞内游离钙升高的影响,同时观察VNS对动物癫行为的影响。结果:VNS组动物胞内游离钙浓度较PTZ点燃组明显降低,并对外源性Glu的升高胞内游离钙有明显抑制作用,行为观察显示VNS能明显抑制癫发作的严重程度,延长癫发作的潜伏期。结论:VNS能明显抑制大鼠PTZ的点燃效应,降低Glu对神经元胞内游离钙的升高作用。VNS可能通过调节神经元兴奋性/抑制性受体的活性来发挥抗癫作用。

    作者:樊友武;谭启富;印红霞 刊期: 2001年第03期

  • 脂质代谢紊乱患者血清脂蛋白氧化易感性的研究

    目的:比较分析脂质代谢紊乱患者血清脂蛋白氧化易感性以及高密度脂蛋白(HDL)对低密度脂蛋白(LDL)氧化抑制能力。方法:采用密度梯度超速离心分离45例肾衰(CRF)、33例心肌梗死 (MIS) 、33例脑梗死(CI)和53例2型糖尿病(DM)患者的血清脂蛋白组分(VLDL, LDL, HDL),用硫代巴比妥酸值(TBARS )分析脂蛋白脂质过氧化程度,A234nm光吸收检测脂蛋白共轭双烯含量分析脂蛋白的氧化易感性,并与正常人(44例)进行了比较。结果:所有患者组VLDL的TBARS值均明显高于对照组,其中MIS组增高程度为显著(与对照组相比,P <0.001); MIS组和DM组LDL、CI组和DM组HDL的TBARS值增高;患者组VLDL、LDL的氧化延滞时间也显著缩短,DM组缩短为明显;但各组HDL与对照组相比无差异;此外患者组HDL对LDL氧化抑制能力均明显减弱, CRF组和MIS组减弱为显著。结论:各种脂质代谢紊乱患者体内血浆脂蛋白均发生一定程度的氧化修饰,促进了动脉粥样硬化的发生发展。

    作者:张春妮;李克;许跃龙;庄一义 刊期: 2001年第03期

  • 组蛋白乙酰化酶和去乙酰化酶在细胞增生分化和肿瘤发生中的作用

    真核细胞组蛋白N端赖氨酸残基的乙酰化与基因的转录激活有关。多种具有组蛋白乙酰化酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性的调节因子,通过对组蛋白乙酰化过程的调节,在基因表达调控中发挥着重要作用。HAT和HDAC的异常与肿瘤发生有密切的关系。

    作者:于亚平;王学文 刊期: 2001年第03期

  • Wortmannin与U73122对缺失磷脂酶C-γ1细胞迁移的影响

    0 引言 磷脂酶C-γ1(phospholipase C-γ1,PLC-γ1)与三磷酸肌醇激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI-3K)是生长因子介导的信号传递过程中的两个重要信号分子。尽管敲除plcgl基因后的小鼠不能正常发育,并于胚胎第9天死亡[1];缺失PLC-γ1小鼠胚胎成纤维细胞(PLC-γ1-/-)在体外却能正常生长,且在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)刺激下其受体激活与内吞、DNA合成、迁移能力等与正常细胞(PLC-γ1+/+)相似[2]。但PLC-γ1-/-并不出现其近亲PLC-γ2的代偿表达,PLC-γ1-/-细胞株迁移过程中PLC-γ1的信号传递功能是否由其他PLC同工酶或PI-3K通路代偿,目前还不清楚。为探讨PLC-γ1通路在信号传递过程中的代偿机制,本研究检测了PLC、PI-3K特异性抑制剂U73122、Wortmannin对PLC-γ1-/-细胞的EGF介导细胞迁移的影响。

    作者:白晓春;罗深秋;白洁;冀群升 刊期: 2001年第03期

  • 早期康复训练对鼻咽癌放疗后张口困难的防治

    0 引言 鼻咽癌放疗的治愈率很高,5年生存率可达50%左右[1],但放疗晚期会产生放射反应,张口困难就是晚期严重放射反应之一,严重影响患者的生存质量。目前,尚无特效的防治方法。传统观念认为,在放疗结束后或当出现张口困难时方开始功能锻炼,而当今理论则认为早期康复训练有助于防治放射性张口困难。本文就此作一对比研究,并将训练方法和体会报告如下。

    作者:朱巧凤;张瑞忠 刊期: 2001年第03期

医学研究生学报杂志

医学研究生学报杂志

主管:南京军区联勤部卫生部

主办:南京军区南京总医院