学术投稿

金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体制备与应用

龙军;陈清;俞守义

关键词:金黄葡萄球菌, 肠毒素, 单克隆抗体, 腹水
摘要:目的制备抗B型金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体.方法纯化B型金黄色葡萄球菌肠毒素(SEB)免疫BALB/C小鼠的脾细胞与SO2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选及克隆化,共获得6株能稳定分泌抗B型金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株并进行了鉴定.结果6株单克隆抗体除两株属于Ig G2A外,其余均属于IGG1亚类,其培养上清和腹水的滴度分别为1:256~1:512和1:12 800~1:25 600,6株单克隆抗体均不与SEA发生交叉反应,仅有2株与SEC1有弱交叉反应.WESTERN-BLOT实验显示出一条特异性带,位于分子量28.5KDA处,证明了其特异性.结论成功获得抗B型金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体,为检测SEB打下了基础.
中国公共卫生杂志相关文献
  • 艾滋病病毒1型流行株分子流行病学调查

    目的了解广东省HIV-1亚型的流行规律及其与国际参考株的同源性.方法应用套式聚合酶链反应(PCR)对108例广东省HIV-1感染者淋巴细胞富集液的核酸样品进行扩增,并使用ABI377型测序仪对扩增产物测序后,对其外膜蛋白(ENV)基因C2-V3段的核酸序列进行比较分析.结果108份血样中,44份为AE重组亚型,与国际参考株01AE.TH.90.CM240近,基因离散率为(8.644±1.273)%,组内离散率为(7.302±4.639)%;40份为07-BC重组亚型,与国际参考株CN.97.C54A近,基因离散率为(2.163±1.313)%,组内离散率为(3.388±1.686)%;14份为08-BC重组亚型,与国际参考株97CNGX-9F近,基因离散率为(2.757±2.027)%,组内离散率为(3.728±1.971)%;10份为B亚型,其中9份为泰国B',与国际参考株RL42近,基因离散率为(5.687±2.232)%,组内离散率为(5.879±2.542)%;1份为欧美B,与国际参考株US.86.JRFL近,基因距离为8.50%.结论广东省HIV-1流行株以AE和07-BC重组亚型为主,也存在08-BC重组亚型、泰国B亚型和欧美B亚型.

    作者:颜瑾;王玉;李杰;马鹏飞;林鹏;邢辉;刁丽梅;邵一鸣 刊期: 2005年第01期

  • 胃癌危险因素病例对照研究

    目的调查本溪地区胃癌发生危险因素,为胃癌防治提供科学依据.方法采用1:1配对病例对照研究方法,问卷调查2002年2月~2004年2月经病理组织学确诊的新发胃癌298例,对可疑致癌因素进行Logistic回归模型单因素和多因素分析,筛选与胃癌发生有关的危险因素.结果缺乏体育锻炼、精神压抑、吸烟量大、喜食烟熏食品、喜食重盐饮食、过量摄入动物肉类、幽门螺杆菌感染、胃溃疡、恶性肿瘤家族史是胃癌的危险因素,OR值依次为2.181,19.502,2.920,6.985,3.013,12.882,32.624,13.006,5.550.喜食香菇和蘑菇(OR=0.443)、喜食新鲜水果(OR=0.665)是胃癌的保护因素.结论本溪地区胃癌发生主要与幽门螺杆菌感染、精神压抑、胃溃疡史、过量摄入肉类、缺乏体育锻炼等因素有关,应开展幽门螺杆菌检测,提倡保持心理平衡,适当进行体育锻炼;经常进食香菇、蘑菇和新鲜水果,以有效预防胃癌.

    作者:张忠;韩春丽;车欣;代俊峰 刊期: 2005年第01期

  • 甲醛致V79细胞DNA交联作用的体外研究

    目的研究甲醛对V79细胞DNA的交联作用,探讨甲醛的基因毒作用及可能的形成机制.方法中国仓鼠肺细胞(V79)分别暴露于浓度为75,150,300,600,1 200μmol/L的甲醛溶液中1,2,4 h,以紫外线照射作为标准断裂剂,用单细胞凝胶电泳技术对不同浓度、不同暴露时间甲醛诱导的V79细胞DNA-交联作用进行体外实验.结果在本研究所用的剂量范围内,除75 μmol/L组外,其它4个浓度组3个染毒时间点甲醛均可引起显著的V79细胞DNA的交联作用,彗星尾长和彗星细胞率显著低于紫外线照射的对照组(P<0.01),随着甲醛浓度的增加,交联作用加强,彗星尾长存在明显剂量-效应关系(P<0.01).且细胞暴露在甲醛中4,2 h;150,300,600 μmol/L浓度组彗星尾长和彗星细胞率显著低于暴露于1h的相应浓度组(P<0.01).结论甲醛是一种DNA交联剂,具有诱导V79细胞DNA交联的作用,并有明显的剂量、时间效应关系.

    作者:张美荣;周建华;时锡金 刊期: 2005年第01期

  • 苯并[a]芘对小鼠肺细胞的DNA损伤

    苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,BaP)是一种广泛存在于环境中的多环芳烃类(PAHs)化合物,是目前公认的人类致癌物.动物实验证明苯并[a]芘可诱发肝癌、肺癌.流行病学调查也表明,接触较高浓度苯并[a]芘的钢铁厂炼焦车间工人肺癌患病率明显增高.

    作者:李晓燕;余日安;鲁文清;朱建林;梅云华;陈秀娜 刊期: 2005年第01期

  • 乙酸铜对黄鳝白细胞及过氧化氢酶活性的影响

    目的以黄鳝为材料研究不同浓度的乙酸铜对黄鳝外周血白细胞数目、肝脏过氧化氢酶(CAT)活性的影响.方法采用鱼类致突变实验方法,以0.25,1.00,3.00,9.00,15.00,30.00mg/kg不同剂量乙酸铜处理黄鳝.结果在低剂量范围内,随着乙酸铜剂量的增加黄鳝外周血白细胞的数目下降,而CAT活性升高;至1.00mg/kg时白细胞的数目达低值,至3.00mg/kg剂量时CAT活性达大值;剂量再增加,白细胞的数目上升、CAT活性下降.结论一定剂量乙酸铜能明显影响黄鳝外周血白细胞数目及CAT活性,且乙酸铜的作用具有双向性.

    作者:钱晓薇 刊期: 2005年第01期

  • 冷原子吸收测定水中汞的方法改进

    冷原子吸收测汞法为水质国际检验方法[1].但该方法在样品消化上存在着影响检测结果的因素[2].本实验通过改进样品消化方法,使消化过程中因爆沸现象而致的样品损失降低,从而提高检测的准确性.现报告如下.

    作者:汪士蔷 刊期: 2005年第01期

  • 预热对白血病患者胸腔渗出细胞H2O2的影响

    目的探讨预热对肿瘤细胞过氧化氢敏感性的影响及其机制.方法将白血病患者胸腔渗出细胞(K562)在40℃预热不同时间,诱导细胞热应激蛋白70(HSP70)高表达,用RT-PCR检测细胞HSP70 mRNA水平;将细胞暴露于0.1,0.2,0.4,0.8 mmol的H2O2 16 h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,观察预热对不同水平H2O2敏感性的影响;保持H2O2浓度为0.2 mmol不变,观察不同预热时间对细胞H2O2敏感性的影响.结果40℃预热后细胞的HSP70含量升高,在预热120 min后达到高,以后缓慢下降,可维持10 h以上;预热细胞对不同浓度H2O2的敏感性均显著低于未预热细胞;对于相同浓度的H2O2而言,预热120 min的细胞对敏感性低.结论预热可以引起细胞HSP70表达增高,降低细胞对H2O2的敏感性.

    作者:王枫;徐文;于芳;曹瑞;曹子鹏 刊期: 2005年第01期

  • 硝基苯污染井水调查

    2003年11月中旬,锦州市太和区大许村村民反映近半年来井水中有苦杏仁味,尤其雨后异味加重.为此,我们进行了调查.现将结果报告如下.

    作者:王敏;马波 刊期: 2005年第01期

  • 卡氏肺孢子虫病鼠发病与氧自由基的关系

    目的探讨卡氏肺孢子虫感染大鼠后氧自由基产生组织氧化损害与发病之间的关系.方法观察大鼠感染卡氏肺孢子虫后,肺、脑组织感染虫数、病理以及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)3项指标的变化.结果病鼠肺组织印片中有大量原虫,镜下见肺泡壁充血和炎性细胞浸润,肺泡腔内有大量炎性渗出液,一些病灶呈实变.肺组织和脑组织中MDA和XOD升高,而GSH下降.结论卡氏肺孢子虫病鼠发病除与虫体本身所致肺组织的炎性损伤外,还可能与该虫体在宿主组织内引发多种氧化酶类产生严重的氧自由基损害有关.

    作者:崔昱;秦元华;陈红 刊期: 2005年第01期

  • 彗星实验检测吸毒人群淋巴细胞DNA

    目的应用彗星实验方法对吸毒人群淋巴细胞DNA损伤情况进行检测.方法在湖北省某市戒毒所随机抽取123名吸毒人员作为暴露组,同时选择79名非吸毒者作为对照组,进行彗星实验.结果暴露组和对照组的彗星细胞拖尾率分别为10.03%和1.26%,差异有统计学意义;两组的彗星细胞拖尾的尾长分别为(2.35±0.88)和(2.05±0.76)μm,差异有统计学意义;吸毒年限长者彗星细胞拖尾率(11.49%)显著高于吸毒年限短者(2.98%).多因素非条件Logistic回归分析结果表明,吸毒人群DNA损伤的可能性明显高于对照组.结论吸毒对人体淋巴细胞DNA有一定损伤,吸毒时间越长,DNA损伤越严重.

    作者:王凤婕;林健燕;罗兰;吴磊;谭晓东 刊期: 2005年第01期

  • 牛磺酸对汞致肾细胞凋亡的影响

    目的探讨牛磺酸对汞致肾细胞凋亡的影响.方法昆明种小鼠24只随机分成3组,第1组为阴性对照组,第2组为单纯染汞组,第3组为牛磺酸干预组.单纯染汞组小鼠腹腔注射3.0 mg/kg的氯化汞溶液,对照组注射0.9%的氯化钠溶液,注射容量为0.2ml/10g.牛磺酸干预组于注射3.0mg/kg的HgCl2前2 h腹腔注射4mmol/kg牛磺酸溶液.24 h后将小鼠颈椎错位处死,制备透射电镜标本,观察凋亡细胞形态;免疫组化法检测bcl-2和bax凋亡相关基因表达.制备单细胞悬液,流式细胞仪进行凋亡细胞百分数分析.结果透射电镜观察,对照组小鼠肾近曲小管细胞形态规则,单纯染汞组表现微绒毛排列紊乱,染色质聚集成块,核破碎释放出凋亡小体,凋亡小体被邻近细胞吞噬等典型细胞凋亡形态.牛磺酸组显示接近正常的肾小管上皮细胞的形态,仅见到少量的线粒体嵴溶解.流式细胞仪分析染汞组明显高于对照组,牛磺酸干预组均显著低于染汞组.免疫组化检测牛磺酸干预组bcl-2蛋白的表达显著高于染汞组;bax蛋白的表达显著低于染汞组.结论牛磺酸可以抵抗汞所致的肾细胞凋亡,使凋亡相关基因bcl-2的表达上调,bax的表达下调.

    作者:于佳明;徐兆发;徐斌;杨敬华;王家骏 刊期: 2005年第01期

  • 云南大理地区泌尿生殖道沙眼衣原体检测分析

    近年来,非淋菌性尿道炎已成为我国常见的性传播疾病,其致病原因主要为沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct),但Ct在边远地区人群中的感染状况国内少有报道.为了解Ct在大理地区人群及少数民族中泌尿生殖道的感染状况,评估Ct在该地区人群中传播的危险性,本文调查了2000~2003年云南大理地区406例临床疑诊为泌尿生殖道感染患者,采用免疫学方法检测Ct抗原,分析Ct感染率以及年龄、性别、民族分布及合并其它主要性病病原体(溶脲脲原体,Ureaplasma urealyticum,Uu)感染的情况.现将结果报告如下.

    作者:白丽;申元英;王晶;王涛;郭利军;潘云华 刊期: 2005年第01期

  • 小麦胚芽营养成分分析及其降脂作用

    近来小麦各种等级粉的深入加工发展很快,但其加工副产品如麦麸、麦胚等的研究工作还很落后,造成营养资源的极大浪费.本文就胚芽的营养价值做了初步研究.

    作者:陈黎亚 刊期: 2005年第01期

  • 番茄汁对人前列腺癌细胞DNA损伤作用的影响

    目的探讨番茄汁对人前列腺癌细胞株(PC-3)DNA损伤作用的影响.方法于人前列腺癌PC-3细胞的细胞培养液中分别加入番茄汁40,80,120μl/ml,培养48 h;用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞DNA损伤程度.结果番茄汁可引起PC-3细胞DNA链断裂,细胞尾长与拖尾率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论番茄汁能导致人前列腺癌PC-3细胞的DNA损伤.

    作者:庞雅琴;罗琼;李卓能;陈芳芳;闫俊;杨明亮;曾秀林 刊期: 2005年第01期

  • 龙川县地方性氟中毒病情现状调查

    龙川县地处于广东省的东北部,全县人口85万,辖区内30个镇.属亚热带季风区,年平均气温为20.5℃,年平均降雨量为1 695 mm.地质构造比较复杂,火成岩与变质岩相互交错.北半部为山地,南半部多为丘陵地带,土地面积3 089km2.地氟病区分布在3个镇的22个自然村,人口8 572人.全县饮用水源是浅层井水、河水和山泉水,饮用人口比例分别为60.9%,35.6%,3.5%.

    作者:吴锦权;陈伟雄;王勇;张志远 刊期: 2005年第01期

  • 司机消化不良发病因素的Logistic回归分析

    消化不良是以胃为主的一组症候群,严重影响生活质量,在国内外均引起密切关注[1].为了解北京地区出租车司机的消化不良患病情况及其发病因素,为有关部门制定合理的健康干预措施提供科学依据,作者于2003年12月对北京市出租车司机消化不良患病情况及其发病因素进行调查.现将结果报告如下.

    作者:谢立;孙晓东;王萍;李蓬;李永成 刊期: 2005年第01期

  • 上海某区1954~2003年尘肺病例死亡情况分析

    尘肺是危害工人健康的严重的职业病之一,尘肺病占职业病发病数的70%左右,年病死率高达1.2~1.4[1],严重影响了我国的经济发展和职业人群的生命安全.为了解尘肺的病情发展和病死的特点和规律,对上海市长宁区1954~2003年登记在册的尘肺病例死亡情况进行分析,为进一步防治尘肺,延长病人寿命,提高尘肺病人的生活质量提供科学依据.

    作者:夏庆华;徐妙珍;王丽明;唐传喜;徐慧萍 刊期: 2005年第01期

  • 2,5己二酮对大鼠大脑组织骨架蛋白的影响

    目的探讨2,5己二酮(HD)对大脑组织中神经丝、微管、微丝等骨架蛋白的影响.方法Wistar雄性大鼠,经腹腔染毒,剂量分别为200和400 mg/(kg.d),连续8周(每周5次),采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western印迹方法检测大脑组织匀浆28000g、30 min离心后所得上清和沉淀中低分子量神经丝(NF-L)、中分子量神经丝(NF-M)、高分子量神经丝(NF-H)、β-肌动蛋白、α-管蛋白和β-管蛋白的相对含量.结果上清中NF-L和NF-M未能检测到,其它神经丝亚单位的含量在沉淀和上清中均明显降低,下降至对照组的33%~73%,且呈现良好的剂量-反应关系.β-肌动蛋白、α-管蛋白、β-管蛋白的含量与对照组相比无明显变化.结论HD导致大鼠大脑中神经丝含量的降低,神经丝含量的改变和其神经毒性有关.

    作者:张天亮;赵秀兰;谢克勤;朱振平 刊期: 2005年第01期

  • 青海湖环境中放性核素水平与卫生学评价

    为摸清青海湖环境中放射性核素水平,于2001~2002年对青海湖环境样品中放射性水平进行了调查.现将结果报道如下.

    作者:马庆录;刘文华;朱婀娜;马磊;熊成育;王合迅 刊期: 2005年第01期

  • 氯化锂对大鼠体重及学习记忆的影响

    目的探讨锂对大鼠脑发育、体重及学习记忆能力的影响.方法将大鼠随机分为对照组和4个不同剂量氯化锂(LiCl)组,分别给予普通饲料和含LiCl(3,30,300,3000mg/kg)的饲料,喂养60d.测量大鼠体重和进行Y-迷宫实验及还原型辅酶Ⅱ(NADPH)-d组织化学染色方法,观察各组大鼠之间体重增量,学习记忆能力和大脑皮层一氧化氮合酶(NOS)阳性细胞数的差别.结果3及30 mg/kg LiCl组大鼠体重增量和Y-迷宫实验成绩均明显好于正常对照组(P<0.01),300及3 000 mg/kg LiCl组大鼠则明显差于对照组(P<0.05).30及300 mg/kg LiCl组大鼠大脑皮层NOS活性较对照组增强,3 000 mg/kg LiCl组则明显减少(P<0.05).结论较低浓度的锂能促进大鼠体格发育,提高学习记忆能力,而高浓度锂会产生负面影响.

    作者:杨芳;李积胜 刊期: 2005年第01期

中国公共卫生杂志

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主管:中华人民共和国卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会