范钰；满昌峰；徐娟；沈荣
目前已发现上百种微小RNA(miRNAs,miR)在胰腺癌组织中表达异常,其中miR-148a表达异常下调[1].本研究旨在观察去甲基化药物5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胰腺癌Bxpc-3细胞miR-148a表达、CpG岛甲基化状态以及细胞增殖的影响.
作者：肖卫东；胡伟；蔡军；熊海蔚；廖国良；李勇 刊期： 2014年第03期
目的 观察RNA干扰(RNAi)靶向下调微管不稳定蛋白(Stathmin)基因表达对人胃癌细胞株BGC803细胞恶性生物学行为的影响.方法 利用脂质体LipofectaminTM RNAi Max将Stathmin 小干扰RNA (siRNA)转染至BGC803细胞中,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot 法分别检测Stathmin mRNA和蛋白的表达;MTT法检测细胞的增殖;划痕实验及Transwell侵袭小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 RNA干扰转染siRNA组Stathmin mRNA和蛋白表达水平分别为0.263±0.008和0.156±0.003,阴性对照组分别为0.680±0.020和0.671±0.019,空白对照组分别为0.657±0.013和0.737±0.023,转染Stathmin mRNA及蛋白表达水平较后两组显著下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).生长曲线显示Stathmin siRNA转染组细胞的增殖能力较阴性对照组及空白对照组明显减慢(P＜0.05);同时,转染细胞的侵袭和迁移能力较对照组细胞明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 下调Stathmin的表达水平能够影响胃癌细胞BGC803的增殖,并降低其迁移及侵袭能力.
作者：柯彬；王宝贵；吴亮亮；王长利；梁寒 刊期： 2014年第03期
目的 观察脑转移瘤组织中骨桥蛋白(OPN)和细胞黏附因子CD44v6的表达,探讨两者在脑转移瘤发生发展中的作用及机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组织化学法,检测50例脑转移瘤标本中OPN和CD44v6的表达,并探讨两者之间的相关性.结果 OPN和CD44v6 mRNA在脑转移瘤中的相对表达量分别为0.82±0.05、0.77 ±0.05;在原发肿瘤中的相对表达量为0.75±0.07、0.69±0.04,均显著高于正常脑组织(P＜0.05),两者的蛋白表达在脑转移瘤中的阳性率分别为92％ (46/50)、88％ (44/50),与正常脑组织比较明显增高(P＜0.05).OPN和CD44v6 mRNA及蛋白在脑转移瘤中的表达均呈明显正相关(r =0.632,P＜0.01;r =0.915,P＜0.05).结论 OPN和CD44v6在恶性肿瘤的脑转移形成与发展中发挥重要作用,且两者存在一定的协同关系.
作者：李建峰；扈玉华；赵振翔；王喜旺 刊期： 2014年第03期
B细胞淋巴瘤/白血病-2/腺病毒E1B 19000相互作用蛋白3(BNIP3)是一种能和腺病毒E1B 19000蛋白相互作用的线粒体促凋亡蛋白.随着对BNIP3基因靶向治疗研究的深入,近年还发现其诱导细胞自噬的作用.BNIP3相关的凋亡与自噬可能导致肿瘤细胞截然不同的结果.现对两者的机制及相互关系做一综述.
作者：马钊；陈传贵；于振涛 刊期： 2014年第03期
目的 探讨在胰腺导管癌中丛生蛋白和抑凋亡蛋白及细胞增殖标志物间的关系.方法 用双重荧光染色法对17例胰腺导管腺癌中丛生蛋白和生存素(Survivin)进行染色并计数阳性细胞进行统计;同法对丛生蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)及Ki-67的表达进行检测.结果 在胰腺导管癌中丛生蛋白阳性细胞数为420个,Survivin阳性细胞数为72个,其中丛生蛋白和Survivin均阳性的细胞数为59个.丛生蛋白、PCNA及Ki-67共同表达的癌细胞数为0个.结论 丛生蛋白在胰腺导管癌中的抗凋亡范围比Survivin更广泛,并且其表达和细胞增殖无相关.
作者：金俊硕；高英兰；董玉玺；任志远；李星；陆文浩；李德旭 刊期： 2014年第03期
目的 观察阿曼托双黄酮(AF)对匹罗卡品点燃小鼠癫痫发作、海马神经元的影响,并探讨其机制.方法 建立匹罗卡品小鼠点燃模型,并给予AF进行干预.综合应用神经电生理、病理学、分子生物学等技术,观察AF对点燃小鼠癫痫发作以及海马神经元的影响.结果 与癫痫组比较,AF组小鼠行为学和局部场电位信号(LFP)表现均相对稳定,海马CA1区存活神经元数目显著增加[(121.40 ±8.72)个,P＜0.05],原位末端转移酶标记(TUNEL)染色结果显示凋亡神经元数目减少[(1.70±0.98)个,P＜0.01],免疫组织化学(4 894.25±771.18)和Western blot结果(0.49±0.13)显示核因子-κB(NF-κB) p65表达明显降低(P＜0.01).结论 AF对小鼠癫痫模型具有明显的预防惊厥发生和神经保护作用,其作用机制与AF抑制癫痫发生时的脑内炎性反应有关.
作者：张震；孙涛；杨武；高攀；李子标；李杨；夏令宝；刘阳；王峰 刊期： 2014年第03期
目的 探讨高迁移率族蛋白A1(HMGAl)表达与胸中段食管鳞癌患者预后的关系.方法 收集手术治疗189例胸中段食管癌患者临床资料,采用免疫组织化学法进行HMGA1检测,采用Kaplan-meier法进行生存分析、用Cox回归分析判定独立预后因素.结果 T1、T2和T3患者HMGA1表达率分别为54.5％、61.4％和78.5％(P＜0.05);有、无淋巴结转移患者HMGA1表达率分别为82.7％和63.9％ (P＜0.01).T2患者中,有、无HMGA1蛋白表达者5年生存率分别为.34.3％和68.2％ (P ＜0.05);T3患者中,有、无HMGA1蛋白表达组的5年生存率分别为25.3％和54.5％ (P＜0.05).无淋巴结转移(pN0)患者中,有、无HMGA1蛋白表达患者5年生存率分别为42.0％和66.7％ (P ＜0.05);有淋巴结转移(pNl)患者中,有、无HMGA1蛋白表达患者5年生存率分别为14.9％和50.0％ (P＜0.05).结论 食管鳞癌不同的T、N分期中HMGA1蛋白表达存在差异;HMGA1蛋白过度表达者5年生存率降低;肿瘤浸润、淋巴结转移和HMGA1蛋白过度表达是独立的不利预后因素.
作者：李剑；孙智；宋亮；史墨；何晓鹏；刘曦；刘相燕 刊期： 2014年第03期
目的 观察手术对肠道上皮细胞胰岛素信号通路的影响.方法 制作阻塞性黄疸大鼠模型,分别于手术前及手术后1、3、24h采血,计算胰岛素抵抗(IR)指数,免疫组织化学检测小肠上皮细胞胰岛素受体表达,Western blot检测肠上皮细胞胰岛素受体底物(IRS)-1、-2及蛋白激酶B(PKB)的表达.结果 手术组的IR指数在术后各时间点分别为3.40±0.12、4.29±0.11、5.34±0.18,其中24h值明显高于对照组和假手术组(P＜0.05).手术组的胰岛素受体强阳性表达数分别为3/10、2/10、2/10,其中术后24h较其他时间点下降明显(P＜0.05).手术组术后24h的胰岛素受体底物IRS-1相对表达量为0.42±0.04,较其他组下降明显(P＜0.05),而各组的IRS-2变化不明显.PKB的相对灰度值(0.52±0.10)在手术组中也明显下降(P＜0.05).结论 手术应激后IR的发生与肠上皮细胞的胰岛素受体表达降低及受体底物下降有关.PKB是术后IR信号途径中的重要一环.
作者：陈洪流；谭庆丰；陈振勇 刊期： 2014年第03期
目的 探讨大鼠胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空功能的变化及胃空肠吻合口Cajal间质细胞(ICC)的再生.方法 20只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术,对照组行幽门切断再吻合术.术后4周进行以下实验:放射性核素显像法评估胃液体排空功能;扫描电镜观察胃空肠吻合口ICC再生.结果 术后4周实验组大鼠胃液体半排空时间(t1/2)为(23.5 ±4.5) min,对照组为(10.2±2.3)min,实验组胃液体排空延迟(P＜0.01);胃空肠吻合口ICC可以再生.结论 大鼠幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空延迟,而胃空肠吻合口ICC再生可能是其重要原因之一.
作者：孙井军；尤承忠；汤文浩 刊期： 2014年第03期
目的 通过量子点(QDs)即新型半导体免疫荧光标记试剂结合组织芯片技术检测p53及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白在人胃癌组织中的表达,并与免疫酶组织化学法比较,探讨免疫荧光组织化学试剂量子点技术的有效性和实用性.方法 采用半导体免疫荧光标记试剂-量子点结合组织芯片技术(QDs-IHC)观察人胃癌组织芯片中p53及MMP-2蛋白的表达,并且检测p53及MMP-2蛋白在胃癌组织中的共表达,并与常规免疫酶法的结果比较.结果 新型QDs-IHC和常规的免疫组织化学(IHC)法检测分析显示:p53(胃癌组p53蛋白两种方法的阳性检测率分别为72.86％和65.71％)及MMP-2蛋白(胃癌组:MMP-2蛋白两种方法检测的阳性率为87.14％和82.86％)表达在对照组和胃癌组之间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).p53及MMP-2蛋白表达之间呈显著正相关(r =0.533,P＜0.01).QDs-IHC检测2种蛋白表达的阳性率均高于IHC所检测的结果,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新型QDs-IHC和常规IHC两种方法可检测到p53及MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达,QDs-IHC技术检测其灵敏度比IHC高,图片显色背景比IHC干净.p53及MMP-2在胃癌患者的癌组织中共同表达.
作者：罗浩；李力；潘晟 刊期： 2014年第03期
目的 探讨甲状腺癌发生与EB病毒(EBV)感染的相关性.方法 选取155例甲状腺癌患者手术切除标本为研究对象,根据WHO分类进行分组,并以癌旁正常甲状腺组织为对照,应用免疫组织化学法和原位杂交法检测各组EBV的潜伏膜蛋白-1(LMP-1)和EB病毒基因编码的核糖核酸(EBER-1)的表达.结果 LMP-1和EBER-1在甲状腺癌组织中的阳性表达率分别为41.94％ (65/155)和56.13％(87/155),明显高于在正常甲状腺组织中的20.00％(31/155)和27.10％ (42/155),差异均有统计学意义(P＜0.05).LMP-1和EBER-1在乳头状癌表达阳性率分别为52.13％和60.64％,高于其他病理类型,差异均有统计学意义(P＜0.05).原位分子杂交技术测定EBER-1的阳性率为56.13％,高于免疫组织化学技术检测LMP-1的阳性率(41.94％),两种方法检测甲状腺癌组织中EBV感染的结果差异有统计学意义(P＜0.05),且两种检测方法明显相关(r=0.70).结论 EBV感染与甲状腺癌的发生发展明显相关,特别是与乳头状癌的关系更为密切.
作者：李清怀；李筱雨；孙建平；底旺；张霖雷 刊期： 2014年第03期
目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默垂体瘤转化基因(PTTG)对原代培养的人泌乳素型垂体瘤细胞(HPAs)生长的影响.方法 原代培养人泌乳素型垂体腺瘤细胞,稳定传代后分为3组:空白对照组、阴性对照组、siRNA-PTTG转染组,转染48 h后细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法测定PTTG mRNA、蛋白的表达;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)试剂盒检测Caspase-3的活性;放射免疫法测定各组细胞上清中泌乳素的水平.结果 与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA-PlTG转染组HPAs细胞PTTG mRNA和蛋白表达明显下调,细胞增殖受到抑制[阴性对照组、转染组抑制率分别为(3.02±1.77)％、(25.38±0.11)％,P＜0.05],凋亡明显增多[3组凋亡率分别为:(6.21±2.36)％、(7.23±3.56)％、(32.33±5.69)％,P＜0.05],Caspase-3活性增加(P＜0.05);放射免疫法显示siRNA-PTTG转染组上清中泌乳素分泌水平下降,为空白对照组的32.9％ (P ＜0.05).结论 下调PTTG基因可抑制人泌乳素型垂体瘤细胞生长,促进其凋亡,从而降低泌乳素分泌水平.
作者：刘晓东；苗旺；王宏勤；赵艳；张秀峰；范益民 刊期： 2014年第03期
目的 观察铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝菌毛株(PA-MSHA)对膀胱癌细胞株的作用,探讨其作用机制.方法 使用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测肿瘤细胞的增殖,荧光染色法检测细胞凋亡形态,分光光度法检测凋亡因子半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-2和Caspase-9的水平.结果 磷酸盐缓冲液(PBS)组作用T24和5637细胞A450值分别为1.31和1.62,PA-MSHA组A450值分别为0.28和0.41,两组差异有统计学意义(P＜0.05);PA-MSHA处理后的膀胱癌细胞出现凋亡小体;PA-MSHA能够活化T24和5637细胞中Caspase-3及Caspase-9蛋白,与PBS组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PA-MSHA可以抑制T24和5637细胞增殖,并诱导凋亡.
作者：李劲然；丛乐乐；杜珍武；孙然；张乐宁 刊期： 2014年第03期
目的 探讨Fas相关因子l(FAF1)基因表达与幽门螺杆菌感染(Hp)及胃癌发生之间的关系.方法 人胃癌细胞株HGC-27、人胃黏膜上皮细胞GES-1 8×105个与Hp标准菌株NCTC11637共培养24h,按细胞/细菌比分为3组:空白对照组、1∶100和1∶200共培养组,每组实验设3个复孔,采用噻唑蓝(MTT)比色法490 nm波长处测量吸光度值计算细胞存活率,流式细胞仪检测l×104个细胞凋亡率,荧光实时定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测细胞FAFl mRNA相对表达量,扩增片段长度为164 bp.结果 HGC-27和GES-1细胞与Hp共培养后,细胞增殖均减少,凋亡率增加.与各自空白对照组比较,FAFl mRNA在HGC-27细胞1∶100和1∶200共培养组表达量明显降低(0.67 ±0.20比0.99 ±0.27,F=11.51,P＜0.05;0.44 ±0.30比0.99±0.27,F=11.51,P＜0.01);FAFl mRNA在GES-1细胞1∶100共培养组表达量明显升高(1.61 ±0.77比0.99 ±0.41,F=14.45,P＜0.05),1∶200共培养组表达量明显降低(0.36 ±0.22比0.99±0.41,F=14.45,P＜0.05).与GES-1细胞空白对照组、1∶100和1∶200共培养组比较,FAF1 mRNA在HGC-27相应各组表达量均明显降低(0.33 ±0.16比0.99 ±0.41,t =4.74,P＜0.01;0.17±0.12比1.08 ±0.53,t=5.28,P＜0.01;0.39 ±0.24比0.98±0.23,t=5.67,P＜0.01).结论 Hp感染下调FAF1基因表达,导致细胞增殖和凋亡失衡,诱发胃癌的发生.
作者：冯洁；袁燕玲；刘爱群；葛莲英 刊期： 2014年第03期
本实验旨在建立稳定有效的转移性人肝癌裸小鼠原位种植合并姑息性氩氦刀冷冻治疗模型,现报道如下.一、材料与方法采用48只BALB/c-nu/nu裸小鼠,建立转移性人肝癌裸小鼠原位种植模型[1];随机分为2组,移植瘤术后30 d进行姑息性氩氦刀冷冻治疗和仅开腹为假手术组.用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,开腹后暴露肝移植瘤,经多次预实验,使用3 mm氩氦刀头,选定输出功率为5％,温度降至-40℃后插入肿瘤2 mm左右,根据肿瘤大小,持续20 ～30 s,温度回升至10℃后重复1次;假手术组开腹后将不接电源的氩氦刀头插入肿瘤内1 min后关腹.
作者：周建炜；卢创新；王朝杰；马宁；罗执芬；崔勇霞；王威；王梦啸；周云 刊期： 2014年第03期
我们通过检测二尖瓣置换术(传统手术比微创手术)患者围手术期肺功能变化,对比两种手术方式对肺功能的影响.一、资料和方法1.一般资料:2010年至2013年华中科技大学附属同济医院心脏大血管外科二尖瓣置换手术患者60例,其中传统开胸二尖瓣置换34例(传统组)及微创二尖瓣置换26例(微创组).2.检测指标:所有患者检查术前、术后1周、术后1个月肺功能.检测指标包括用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEVl)、大呼气流量(PER)、肺总量(TLC)下降、残气量(RV).
作者：杨小威；陈涛；潘铁成；李军；程才 刊期： 2014年第03期
随着基础医学和技术的不断进步,细胞、分子、蛋白质、基因等不同层面的研究不断深入,对于胃疾病的认识也不断深入.新时代的胃外科医生不应该仅仅将精力集中于临床手术中,而应该时刻关注医学前沿进展,才能把握学科发展方向和趋势,顺应新世纪胃外科的发展潮流.
作者：秦新裕；刘凤林 刊期： 2014年第03期
目的 观察扩张皮肤移植后的变化,探讨扩张皮肤远期回缩的机制.方法 选用8条普通成年犬,在每条犬背部设计4个解剖部位相对应的皮瓣下置入扩张器,注水8周后行扩张器取出术,随机将8条犬分为4组,每组2只,在犬皮肤扩张移植时和移植后3、6周及3、6个月检测其组织学、电镜变化及α-平滑肌肌动蛋白(αt-SMA) mRNA和蛋白的表达.结果 表皮层和真皮层移植后6个月基本恢复正常;电镜下可见扩张后表皮细胞排列紧密,真皮层于扩张后成纤维细胞数量较多,功能活跃,真皮深层有肌成纤维细胞存在,其胞质内微丝明显.移植后3个月成纤维细胞功能恢复正常,胶原排列趋于整齐,肌成纤维细胞消失,组织学在3～6个月时恢复到对照组水平.α-SMA mRNA和蛋白水平的表达在3周后达到高,分别为1.204 ±0.011和1.533 ±0.012,3个月时明显降低为0.910±0.008和0.519±0.007,差异有统计学意义(P＜0.05),α-SMA mRNA和蛋白水平变化趋势一致.结论 扩张皮肤的组织学变化在移植后6个月逐渐恢复正常,扩张皮肤远期回缩的机制可能与扩张皮肤内的肌成纤维细胞数量和功能状态有关.
作者：谢锋；张正文；马腾霄；侴海燕；李昊；康深松 刊期： 2014年第03期
尽管目前对于腰椎滑脱是否应当解剖复位还存在争议,但多数脊柱外科医师都认同腰椎滑脱的解剖复位对患者远期疗效更佳这一观点[1].我们在腰椎滑脱模型上通过设定唯一可变量方式手术模观察内固定使用对腰椎滑脱复位的影响.
作者：黄志海；徐跃根；胡安全；陆永强；杨亚东 刊期： 2014年第03期
目的 观察核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂BAY11-7082对胰腺癌细胞增殖及对不同浓度5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导胰腺癌细胞凋亡的影响.方法 人胰腺癌细胞SW1990经5μmoL/LNF-κB抑制剂BAY11-7082预处理1h后,Western blot法检测磷酸化NF-κB p65蛋白表达量.加入含有50、200 μg/L、1.0 mg/L 5-Fu的培养基,未经处理组作为对照,噻唑蓝(MTT)法检测各组胰腺癌细胞的抑制率,实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2) mRNA表达量,Western blot法检测抗凋亡基因bcl-2基因蛋白表达量,流式细胞术检测24 h胰腺癌细胞的凋亡率.结果 经BAY11-7082预处理1h后磷酸化NF-κB p65蛋白表达量较对照组明显降低.不同浓度的5-Fu作用下,经BAY11-7082预处理的各组胰腺癌细胞抑制率较对照组均明显升高(P＜0.05).bcl-2基因mRNA表达量(0.75±0.09、0.52 ±0.01、0.41±0.06)较对照组(0.92 ±±0.01、0.81±0.05、0.72±0.01)均明显降低(P＜0.05),bcl-2蛋白表达量较对照组明显降低,胰腺癌细胞的凋亡率[(16.79±1.23)％、(26.82±1.26)％、(38.20±5.89)％]较对照组[(8.64±0.30)％、(14.02±0.32)％、(24.13±1.60)％]明显增高(P＜0.05).结论 BAY11-7082能通过抑制NF-κB的活化,增加5-Fu抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖及诱导胰腺癌SW1990细胞的凋亡.
作者：胡明星；付强；刘传江；王玉柱；秦涛 刊期： 2014年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
