马钊；陈传贵；于振涛
目的 探讨曲美他嗪(TMZ)抗大鼠心肌缺血再灌注损伤中炎性反应的作用及其机制.方法 雄性健康成年SD大鼠24只,体质量为180～220 g.采用随机区组设计将大鼠随机分为对照组(A组)和TMZ组(B组),B组于实验前6d,每日给予生理盐水稀释的TMZ 10 mg/kg灌胃,各组均采用冠状动脉结扎法制作缺血再灌注损伤(IRI)模型,缺血30 min,再灌注90 min.分别于缺血前、再灌注30、60、90 min后,取大鼠静脉血2ml,测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,实验结束后处死大鼠,再灌注区取组织,免疫组织化学检测血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达.结果 对照组缺血前、再灌注后30、60、90 min血清TNF-α含量分别为(0.18 ±0.10)、(1.15 ±0.29)、(0.98±0.27)、(0.52±0.23) μg/L,TMZ组TNF-α含量在再灌注各测试时点[(0.16±0.12)、(0.87±0.22)、(0.73±0.32)、(0.38 ±0.17) μg/L]均显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);TMZ组与对照组比较,可显著降低心肌组织内VCAM-1(4.571 2±1.121 3比6.203 5±1.451 3)的表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TMZ可通过限制再灌注损伤中炎性反应保护大鼠缺血再灌注损伤心肌.
作者：文冰；韩辉；焦周阳；刘超；夏冰；赵文增 刊期： 2014年第03期
目的 观察微小RNA(miR)-29a对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 以磷酸盐缓冲液(PBS)为空白对照,以负载cel-miR67的复制缺陷型腺病毒(Ad-cel)为阴性对照,注射负载miR-29a的复制缺陷型腺病毒(Ad-miR29a)液于移植瘤内,观察移植瘤生长曲线和抑瘤率;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测移植瘤内miR-29a表达丰度;采用免疫组织化学技术检测CD34表达以计算移植瘤内微血管密度(MVD).结果 与PBS组比较,Ad-miR29a组移植瘤内miR-29a表达显著上调(3.06±0.73比1.00±0.21,P＜0.01),而Ad-cel组与PBS组比较差异无统计学意义(P＞0.05);Ad-miR29a组移植瘤生长速度低于PBS组,而Ad-cel组与PBS组差异无统计学意义(P＞0.05);于第5周末Ad-miR29a组抑瘤率达49.30％;Ad-miR29a组的移植瘤内MVD显著低于PBS组(21.3±8.1比42.6±11.2,P＜0.01),而Ad-cel组与PBS组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-29a可显著抑制裸鼠胃癌移植瘤生长,其机制可能为抑制移植瘤内MVD,miR-29a有望成为新型的胃癌基因治疗靶标.
作者：陈陵；王宗华；宋航；黄一；王国威；王仙园；任辉 刊期： 2014年第03期
目的 观察人胃癌组织中分离培养的间充质干细胞(hGC-MSCs)对胃癌细胞株SGC-7901增殖与侵袭能力的影响.方法 提取hGC-MSCs条件培养液(MSC-CM),用不同浓度(20％、40％、60％)的MSC-CM作用于SGC-7901细胞,噻唑蓝(MTT)法及Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力;实时聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot和细胞免疫化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶(MMP)-9在各组细胞中的表达.结果 MTT法证实MSC-CM对SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P＜0.05),抑制率与MSC-CM的浓度和作用时间呈正比.Transwell侵袭实验表明,经MSC-CM处理后,对照组及20％、40％、60％ MSC-CM组穿膜细胞数分别为(75.71±7.32)、(63.68 ±7.12)、(54.29 ±6.97)和(41.36±3.29)个,随MSC-CM浓度升高,细胞侵袭能力明显下降(P＜0.05).Real-time PCR结果证实MSC-CM能明显下调PCNA和MMP-9的表达(P＜0.01).Western blot检测20％、40％、60％ MSC-CM组PCNA表达分别为对照组的(73.99 ±16.71)％、(51.56±12.18)％和(40.11±9.37)％,MMP-9表达分别为对照组的(74.35±19.12)％、(53.59 ±10.41)％和(29.58±7.93)％,细胞免疫化学结果显示PCNA在对照组、20％、40％、60％ MSC-CM组中的平均吸光度值分别为0.201 ±0.049、0.185 ±0.031、0.154±0.019和0.128 ±0.012,MMP-9在4组中的平均吸光度值分别为0.182±0.032、0.164±0.028、0.136±0.017和0.098±0.008,各组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HGC-MSCs能抑制SGC-7901细胞的增殖及侵袭能力,其机制可能与下调PCNA和MMP-9的表达有关.
作者：王凯；李玉明；张明凯；姜吉祥；苏庆亮 刊期： 2014年第03期
目的 探讨术前影像学检查判定肾脏小肿瘤(SRMs)性质的临床价值.方法 分析武汉协和医院收治59例SRMs患者临床资料,比较术前各种影像学检查在SRMs诊断中的优势及价值.结果 彩色多普勒超声、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)及正电子发射显像(PET)/CT判定SRMs良恶性的准确率分别为93.22％、94.73％、95.00％及100％;敏感性分别为97.87％、83.33％、94.12％及100％;特异性分别为75.00％、96.07％、100％及100％.结论 术前影像学检查有助于提示SRMs的性质,CT及MRI两者价值相当,具有重要参考价值,超声可作为筛查SRMs的首选方法,PET/CT诊断价值高,但因价格高不作为常规检查.
作者：刘周强；李俊平；陈朝晖；赵军 刊期： 2014年第03期
目的 观察核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂BAY11-7082对胰腺癌细胞增殖及对不同浓度5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导胰腺癌细胞凋亡的影响.方法 人胰腺癌细胞SW1990经5μmoL/LNF-κB抑制剂BAY11-7082预处理1h后,Western blot法检测磷酸化NF-κB p65蛋白表达量.加入含有50、200 μg/L、1.0 mg/L 5-Fu的培养基,未经处理组作为对照,噻唑蓝(MTT)法检测各组胰腺癌细胞的抑制率,实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2) mRNA表达量,Western blot法检测抗凋亡基因bcl-2基因蛋白表达量,流式细胞术检测24 h胰腺癌细胞的凋亡率.结果 经BAY11-7082预处理1h后磷酸化NF-κB p65蛋白表达量较对照组明显降低.不同浓度的5-Fu作用下,经BAY11-7082预处理的各组胰腺癌细胞抑制率较对照组均明显升高(P＜0.05).bcl-2基因mRNA表达量(0.75±0.09、0.52 ±0.01、0.41±0.06)较对照组(0.92 ±±0.01、0.81±0.05、0.72±0.01)均明显降低(P＜0.05),bcl-2蛋白表达量较对照组明显降低,胰腺癌细胞的凋亡率[(16.79±1.23)％、(26.82±1.26)％、(38.20±5.89)％]较对照组[(8.64±0.30)％、(14.02±0.32)％、(24.13±1.60)％]明显增高(P＜0.05).结论 BAY11-7082能通过抑制NF-κB的活化,增加5-Fu抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖及诱导胰腺癌SW1990细胞的凋亡.
作者：胡明星；付强；刘传江；王玉柱；秦涛 刊期： 2014年第03期
目的 观察手术对肠道上皮细胞胰岛素信号通路的影响.方法 制作阻塞性黄疸大鼠模型,分别于手术前及手术后1、3、24h采血,计算胰岛素抵抗(IR)指数,免疫组织化学检测小肠上皮细胞胰岛素受体表达,Western blot检测肠上皮细胞胰岛素受体底物(IRS)-1、-2及蛋白激酶B(PKB)的表达.结果 手术组的IR指数在术后各时间点分别为3.40±0.12、4.29±0.11、5.34±0.18,其中24h值明显高于对照组和假手术组(P＜0.05).手术组的胰岛素受体强阳性表达数分别为3/10、2/10、2/10,其中术后24h较其他时间点下降明显(P＜0.05).手术组术后24h的胰岛素受体底物IRS-1相对表达量为0.42±0.04,较其他组下降明显(P＜0.05),而各组的IRS-2变化不明显.PKB的相对灰度值(0.52±0.10)在手术组中也明显下降(P＜0.05).结论 手术应激后IR的发生与肠上皮细胞的胰岛素受体表达降低及受体底物下降有关.PKB是术后IR信号途径中的重要一环.
作者：陈洪流；谭庆丰；陈振勇 刊期： 2014年第03期
目的 构建乏氧/辐射双敏感启动子(HRE/Egrl)介导Smac的表达载体,观察其在人肺腺癌A549细胞中常氧和乏氧条件下的表达特点和在乏氧条件下的增殖抑制作用.方法 成功构建表达质粒pcDNA3.l-Egrl-Smac和pcDNA3.1-HRE/Egrl-Smac后转染A549细胞,分别采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Smac mRNA和蛋白表达;应用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞的增殖变化.结果 常氧条件下,与对照组比较,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射能显著增加A549细胞中Smac mRNA表达(P＜0.05),且乏氧能显著增加这种效应(P＜0.05);同时,Smac蛋白表达规律与mRNA表达规律相似.常氧和乏氧条件下,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射细胞均较相同时间点对照组细胞增殖水平显著降低(P＜0.05);而且乏氧各组较常氧各组细胞增殖水平显著降低(P＜0.05).结论 乏氧和辐射均能诱导A549细胞中Smac表达增加,且联合2 Gy照射能显著抑制乏氧条件下A549细胞的增殖能力.
作者：李长锋；金景鹏；刘大海；张斌 刊期： 2014年第03期
目的 采用骨髓基质干细胞(BMSCs)复合包芯结构骨支架修复兔桡骨缺损.方法 成骨诱导培养3周的BMSCs与包芯结构骨支架复合构建细胞支架复合体(A组),BMSCs/聚乳酸羟基乙酸(PLGA)/β磷酸三钙(β-TCP)复合体(B组)、空白缺损(C组)作为对照.采用两因素随机区组设计植入36只兔(72侧)桡骨1.5 cm缺损部位,术后12、24、48周取材,进行相关分析.结果 大体观察、影像学、组织学检测示术后12周,A组骨缺损两断端骨性相连,24周A组支架内部大量新生骨生成,髓腔部分再通,48周A组髓腔再通,骨缺损完全修复,Lane-Sandhu评分示A组(5、8、12分)骨缺损修复效果明显好于B组(1、4、6分)、C组(0、0、1分)(P＜0.05,n=4).结论 BMSCs/包芯结构骨支架复合体可修复兔桡骨1.5 cm缺损.
作者：王闯建；张春霖；吴学建；朱旭；李莹；严旭 刊期： 2014年第03期
目的 制成以羟丁基壳聚糖(HBC)为壳,以巯基烷基化壳聚糖(TACS)包埋基因质粒为核的核壳结构,探讨其作为缓释基因载体的可行性.方法 TACS与增强型绿色荧光蛋白基因(pEGFP)以复凝聚法制成纳米微球作为核结构(TACS/pEGFP),然后与温敏性HBC混合包裹以及冷冻干燥合成羟丁基壳聚糖-巯基烷基化壳聚糖/pEGFP(HBC-TACS/pEGFP)核壳结构;利用动态光散射仪器、透射电镜对核及核壳结构进行表征.凝胶电泳实验检测复合基因纳米粒子对pEGFP的携载以及保护作用.对HEK293T细胞和小鼠的骨骼肌进行体外和体内转染,检测基因复合纳米粒能否作为缓释基因载体.结果 HBC-TACS/pEGFP纳米微球多呈球形,粒径为(317.6±55.9) nm,表面Zeta电位为(2.3 ±1.1) mV,可有效保护pEGFP免受DNase I的降解.在体外转染经流式细胞仪测定,HBC-TACS/pEGFP的基因转染率为(8.00±5.69)％,明显小于TACS/pEGFP[(37.66±5.18)％],差异有统计学意义(P＜0.01).但是在小鼠体内随着时间的推移,核壳结构组EGFP荧光蛋白表达量逐渐增加,第45天激光共聚焦显微镜下观察到HBC-TACS/pEGFP的荧光强度强于TACS/pEGFP.结论 HBC-TACS/pEGFP可以作为基因载体并且在体内有缓释基因,延长基因表达的作用.
作者：王云；林福星；汪谟贞；葛学武；赵宇 刊期： 2014年第03期
已有报告外源性血管内皮生长因子(VEGF)能显著降低急性肝衰竭(ALF)大鼠的死亡率[1].然而,VEGF半衰期和作用时间短.我们通过比较VEGF静脉注射和载VEGF纳米粒子培养肝细胞移植(HT)后ALF大鼠存活率、肝功能、肝脏VEGF mRNA的表达量、肝脏CD34标记的微血管密度(MVD),观察载VEGF纳米粒子对肝再生的影响.
作者：陈红健；陈佳慧；陈钟 刊期： 2014年第03期
我们通过检测二尖瓣置换术(传统手术比微创手术)患者围手术期肺功能变化,对比两种手术方式对肺功能的影响.一、资料和方法1.一般资料:2010年至2013年华中科技大学附属同济医院心脏大血管外科二尖瓣置换手术患者60例,其中传统开胸二尖瓣置换34例(传统组)及微创二尖瓣置换26例(微创组).2.检测指标:所有患者检查术前、术后1周、术后1个月肺功能.检测指标包括用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEVl)、大呼气流量(PER)、肺总量(TLC)下降、残气量(RV).
作者：杨小威；陈涛；潘铁成；李军；程才 刊期： 2014年第03期
本实验旨在建立稳定有效的转移性人肝癌裸小鼠原位种植合并姑息性氩氦刀冷冻治疗模型,现报道如下.一、材料与方法采用48只BALB/c-nu/nu裸小鼠,建立转移性人肝癌裸小鼠原位种植模型[1];随机分为2组,移植瘤术后30 d进行姑息性氩氦刀冷冻治疗和仅开腹为假手术组.用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,开腹后暴露肝移植瘤,经多次预实验,使用3 mm氩氦刀头,选定输出功率为5％,温度降至-40℃后插入肿瘤2 mm左右,根据肿瘤大小,持续20 ～30 s,温度回升至10℃后重复1次;假手术组开腹后将不接电源的氩氦刀头插入肿瘤内1 min后关腹.
作者：周建炜；卢创新；王朝杰；马宁；罗执芬；崔勇霞；王威；王梦啸；周云 刊期： 2014年第03期
目的 观察左旋棉酚(LG)联合多西紫杉醇(DOC)对肺癌治疗的体内体外影响,探讨两者是否具有协同作用及其机制.方法 LG(3、5μmol/L)联合DOC(0.1、1.0 nmoL/L)作用于A549、A549/DDP和A549/T肺癌细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪法分别检测细胞增殖抑制和凋亡诱导作用;建立C57 BL/6J小鼠肺癌Lewis细胞皮下移植瘤模型,将移植瘤小鼠随机分成7组,每组15只,分别为DOC治疗组(1、2 mg/kg)、LG治疗组(3、5 mg/kg)、联合治疗组(3 mg/kg LG+1 mg/kg DOC、5 mg/kg LG +2 mg/kg DOC)和阴性对照组,进行疗效分析.结果 低剂量联合组对A549、A549/DDP和A549/T的增殖抑制率分别为(67.3±3.1)％、(64.8±2.8)％、(54.1±3.3)％,细胞凋亡率分别为(50.2±1.8)％、(52.3±1.5)％、(42.8±2.4)％;高剂量联合组的增殖抑制率分别为(71.8±1.9)％、(72.4±2.1)％、(60.7±2.6)％,细胞凋亡率分别为(53.2±1.8)％、(55.1±1.9)％、(46.7±2.6)％;高低剂量联合组对肺癌细胞的增殖抑制率和细胞凋亡率均比单独使用DOC显著增加(P＜0.05),且联合指数(CI)均小于0.5,表现出强大的协同作用.低高剂量联合组小鼠肺癌Lewis细胞移植瘤的肿瘤抑制率分别为49.23％和66.87％,明显高于DOC治疗组.结论 LG与DOC的联用对肺癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡具有协同作用,对克服肿瘤细胞耐药性有良好的效果,对小鼠肺癌Lewis细胞移植瘤有明显的抑制作用,且比单独用药效果显著.
作者：吴小进；杨辉；米燕燕；殷咏梅 刊期： 2014年第03期
目的 观察后路硬脊膜切开椎间盘摘除术治疗单间隙高位腰椎间盘突出症的临床疗效.方法 通过治疗单间隙高位腰椎间盘突出症患者35例,腰2～3间隙13例,腰3～4间隙22例;共分为两组,其中A组患者16例,行后路硬脊膜切开椎间盘摘除后外侧植骨融合术;B组患者19例,行侧后方椎间盘摘除椎间融合内固定术,对比两组术中出血量和手术时间,术后平均随访2年4个月,并行日本整形外科协会(JOA)评分和功能障碍指数(ODI)评估.结果 A组患者出血量为150 ～340 ml,平均253 ml;B组患者出血量为320～ 670 ml,平均478 ml.A组患者手术时间为75 ～125 min,平均93 min;B组患者手术时间为105～ 165 min,平均137 min.A组患者术前JOA评分为(10.30±2.27)分,ODI为(54.31±11.07)％,随访期末JOA评分为(24.10±1.26)分,ODI为(18.27±5.81)％,术前与随访期末比较差异有统计学意义(P＜0.05);B组患者术前JOA评分为(10.60±2.33)分,ODI为(53.93±10.46)％,随访期末JOA评分为(24.50±1.25)分,ODI为(18.02±5.78)％,术前与随访期末比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组间各随访期比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经后路硬脊膜切开的方法治疗高位腰椎间盘突出症,术后患者也能达到满意的临床效果.
作者：寇红伟；刘宏建；皮国富；夏跃冲；尚国伟；魏琛 刊期： 2014年第03期
目前已发现上百种微小RNA(miRNAs,miR)在胰腺癌组织中表达异常,其中miR-148a表达异常下调[1].本研究旨在观察去甲基化药物5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胰腺癌Bxpc-3细胞miR-148a表达、CpG岛甲基化状态以及细胞增殖的影响.
作者：肖卫东；胡伟；蔡军；熊海蔚；廖国良；李勇 刊期： 2014年第03期
目的 观察榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体对人肿瘤细胞克隆形成和侵袭的影响.方法 制备榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体,采用不同浓度的榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理人喉癌Hep-2细胞后,以平板克隆形成方法检测癌细胞克隆形成,以Transwell方法检测肿瘤细胞侵袭能力.结果 平板克隆实验结果显示,对照组、不同浓度(2.5、5.0、10.0 mg/L)榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理组克隆形成数分别为(102±8)、(82 ±5)、(57±6)和(25 ±3)个.Transewell结果显示,空白对照组、不同浓度(2.5、5.0、10.0 mg/L)榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理组细胞穿过滤膜的细胞分别为(123 ±8)、(89±7)、(60±6)和(35 ±5)个.结论 榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体可抑制人喉癌细胞克隆形成和侵袭,具有潜在的应用价值.
作者：范钰；满昌峰；徐娟；沈荣 刊期： 2014年第03期
目的 构建针对cortactin基因干扰的胃癌SGC-7901稳定细胞株.方法 设计3条针对皮质肌动蛋白(cortactin)基因的短发卡RNA(shRNA)序列以及l条对照序列,退火后插入到PLKO.1慢病毒质粒载体中,质粒构建完成后和辅助质粒psPAX2,PCMV-VSVG共转染HEK293T细胞,包装成慢病毒颗粒,感染胃癌SGC-7901细胞株,并使用嘌呤霉素筛选.终筛选出3个细胞株,提取该3株细胞的RNA和蛋白质分别进行实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测cortactin基因的mRNA和蛋白的表达.结果 在3株不同的稳定细胞株中,PLKO.1+shRNA3细胞株cortactin基因的mRNA和蛋白质表达下降为明显,约为对照组的10％.结论 成功构建出针对cortactin基因干扰的胃癌SGC-7901稳定细胞株.
作者：魏军；李杨；尤天庚；所广军；赵中辛 刊期： 2014年第03期
目的 探讨在胰腺导管癌中丛生蛋白和抑凋亡蛋白及细胞增殖标志物间的关系.方法 用双重荧光染色法对17例胰腺导管腺癌中丛生蛋白和生存素(Survivin)进行染色并计数阳性细胞进行统计;同法对丛生蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)及Ki-67的表达进行检测.结果 在胰腺导管癌中丛生蛋白阳性细胞数为420个,Survivin阳性细胞数为72个,其中丛生蛋白和Survivin均阳性的细胞数为59个.丛生蛋白、PCNA及Ki-67共同表达的癌细胞数为0个.结论 丛生蛋白在胰腺导管癌中的抗凋亡范围比Survivin更广泛,并且其表达和细胞增殖无相关.
作者：金俊硕；高英兰；董玉玺；任志远；李星；陆文浩；李德旭 刊期： 2014年第03期
我们利用电子颅脑损伤仪(eCCI)制备创伤性颅脑损伤(TBI)动物模型的具体方法并对其进行评价,现报道如下.一、制作方法1.动物及分组:西安交通大学实验动物中心提供(批号:20121023)雌性SD大鼠65只,体质量为220 ～240 g,适应性饲养3d后,随机分为正常对照组(A组)、模型1组(B组)、模型2组(C组)、模型3组(D组)和假手术组(E组).
作者：王瑞辉；郭新荣；吴涛；屈红艳 刊期： 2014年第03期
目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIGl)在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1在正常脑组织中的阳性表达率为100.0％,明显高于垂体瘤中的表达(54.1％),差异有统计学意义(P＜0.05).同时,LRIG1在非侵袭性垂体瘤中的阳性表达率为66.7％,明显高于在侵袭性垂体瘤中的表达(20.0％).Kaplan-Meier生存分析表明LRIG1及垂体瘤类型与患者的预后明显相关(P＜0.05).Cox多因素生存分析表明LRIGI可作为患者预后评估的独立因素.结论 LRIG1参与了垂体瘤的发生及发展,低表达患者预后较差.
作者：张焱；祝新根；程祖珏；沈晓黎；肖爵贤 刊期： 2014年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
