陈陵；王宗华；宋航；黄一；王国威；王仙园；任辉
手术切除气管成人若超过全长50％(即超过6 cm)、儿童超过全长30％时,端端吻合困难,须植入气管替代物才能重建气道[1].由于供应气管的血管纤细且呈节段性分布,使得气管无法通过显微外科技术直接进行血管吻合.气管移植亦多因血供问题而终导致失败,严重制约了气管外科的发展[2].干细胞定位到靶组织后,在体内微环境的特异信号作用下,能定向分化成组织所需的细胞类型[3];或者通过模拟体内环境,在体外实现干细胞的定向诱导分化,这为干细胞治疗疾病提供了理论基础[4].骨髓单个核细胞(BM-MNCs)包括造血干细胞、间充质干细胞(MSCs)、内皮祖细胞(EPCs)、中胚层来源细胞等多种分化潜能的细胞群,且具有容易采集、操作简单和低免疫排斥反应等优点,因而目前干细胞临床应用较多的仍以自体骨髓和外周血单个核细胞为主[3-4].
作者：潘枢；孙飞；史宏灿 刊期： 2014年第03期
目的 探讨Fas相关因子l(FAF1)基因表达与幽门螺杆菌感染(Hp)及胃癌发生之间的关系.方法 人胃癌细胞株HGC-27、人胃黏膜上皮细胞GES-1 8×105个与Hp标准菌株NCTC11637共培养24h,按细胞/细菌比分为3组:空白对照组、1∶100和1∶200共培养组,每组实验设3个复孔,采用噻唑蓝(MTT)比色法490 nm波长处测量吸光度值计算细胞存活率,流式细胞仪检测l×104个细胞凋亡率,荧光实时定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测细胞FAFl mRNA相对表达量,扩增片段长度为164 bp.结果 HGC-27和GES-1细胞与Hp共培养后,细胞增殖均减少,凋亡率增加.与各自空白对照组比较,FAFl mRNA在HGC-27细胞1∶100和1∶200共培养组表达量明显降低(0.67 ±0.20比0.99 ±0.27,F=11.51,P＜0.05;0.44 ±0.30比0.99±0.27,F=11.51,P＜0.01);FAFl mRNA在GES-1细胞1∶100共培养组表达量明显升高(1.61 ±0.77比0.99 ±0.41,F=14.45,P＜0.05),1∶200共培养组表达量明显降低(0.36 ±0.22比0.99±0.41,F=14.45,P＜0.05).与GES-1细胞空白对照组、1∶100和1∶200共培养组比较,FAF1 mRNA在HGC-27相应各组表达量均明显降低(0.33 ±0.16比0.99 ±0.41,t =4.74,P＜0.01;0.17±0.12比1.08 ±0.53,t=5.28,P＜0.01;0.39 ±0.24比0.98±0.23,t=5.67,P＜0.01).结论 Hp感染下调FAF1基因表达,导致细胞增殖和凋亡失衡,诱发胃癌的发生.
作者：冯洁；袁燕玲；刘爱群；葛莲英 刊期： 2014年第03期
目的 探讨胰岛素样生长因子受体(IGF-1R)基因干扰对人胃癌细胞株MKN28增殖的影响及其机制.方法 构建针对IGF-1R的小干扰RNA(siRNA-IGF-1R),采用Western blot检测转染后MKN28细胞IGF-1R、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p21、整合酶相互作用分子1(INI1)的表达变化.流式细胞仪检测各组细胞生长周期.噻唑蓝(MTT)法检测MKN28细胞株的增殖.结果 与对照组比较,siRNA组IGF-1R、PI3K及Akt的表达水平均显著降低,同时p21及INI1表达水平升高.流式细胞仪检测细胞周期和MTT实验结果显示,G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,细胞增殖能力被显著抑制,第2～4天siRNA-IGF-1R对细胞增殖的抑制率分别为31.12％、36.22％和42.03％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抑制IGF-1R基因表达可下调PI3K、Akt表达,上调p21、INI1表达,从而有效抑制MKN28细胞的增殖能力.
作者：王晓春；李中；刘现义；李靖华 刊期： 2014年第03期
骨肉瘤(OS)的转移需要新生血管的形成[1].恶性黑色素瘤细胞黏附分子(CD146、Mel-CAM、MUC18)、血管内皮生长因子(VEGF)是近年来研究比较多的肿瘤血管相关因子.我们采用免疫组织化学方法检测43例骨肉瘤患者CD146、VEGF的表达以及CD34标记的微血管密度(MVD),探讨它们与骨肉瘤血管生成间的关系.
作者：刘宇雷；郭中帅；杨力；胡彤宇；齐典文；扈文海；张国川 刊期： 2014年第03期
目的 观察榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体对人肿瘤细胞克隆形成和侵袭的影响.方法 制备榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体,采用不同浓度的榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理人喉癌Hep-2细胞后,以平板克隆形成方法检测癌细胞克隆形成,以Transwell方法检测肿瘤细胞侵袭能力.结果 平板克隆实验结果显示,对照组、不同浓度(2.5、5.0、10.0 mg/L)榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理组克隆形成数分别为(102±8)、(82 ±5)、(57±6)和(25 ±3)个.Transewell结果显示,空白对照组、不同浓度(2.5、5.0、10.0 mg/L)榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理组细胞穿过滤膜的细胞分别为(123 ±8)、(89±7)、(60±6)和(35 ±5)个.结论 榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体可抑制人喉癌细胞克隆形成和侵袭,具有潜在的应用价值.
作者：范钰；满昌峰；徐娟；沈荣 刊期： 2014年第03期
目的 分离培养前列腺癌相关成纤维细胞(CAF)及正常成纤维细胞(NPF),探讨两者生物学差异.方法 用Percoll技术分离培养CAF及NPF细胞,用免疫荧光法检测上皮细胞标志物(Pan-CK),成纤维细胞标志物波形蛋白(Vimentin)和平滑肌细胞标志物平滑肌肌动蛋白(SMA);用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长能力;用软琼脂糖实验检测两种细胞诱导良性细胞BPH-1恶变.结果 CAF与NPF细胞形态相似,均高表达Vimentin,不表达Pan-CK,CAF细胞高表达SMA.CAF细胞生长速度快于NPF细胞,第4天吸光度值分别为0.98 ±0.07、0.74±0.04,P＜0.05;第6天吸光度值分别为2.06±0.13、1.59±0.14(P ＜0.05),且能诱导BPH-1恶性变.结论 CAF细胞高表达SMA,增殖能力强,能促进前列腺良性细胞恶性变.
作者：于胜强；王科；杨典东；王健涛；李光磊；高振利 刊期： 2014年第03期
传统组织工程骨种子细胞存在各种不足,严重限制了骨组织工程技术的研究和发展[1].2003年Romanov等[2]首次发现脐带间充质干细胞(UC-MSCs),其增殖活性高、来源广泛、含量丰富、培养简单,避免了伦理争议,是近年来组织工程领域的研究热点[3-4].我们从人脐带沃顿胶中分离出UC-MSCs,并进行成骨诱导,证实UC-MSCs是潜在的组织工程骨种子细胞.
作者：郭艳萍；李强；张爱君；陶常波；李雪阳；李政道；金培生 刊期： 2014年第03期
目的 观察可溶性CD40配体(sCD40L)联合磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路特异性阻断剂LY294002对胃癌AGS细胞体外生长及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 将细胞分成对照组(仅加入含10％胎牛血清的RPMI 1640培养液)、LY294002组(20 μmol/L)、sCD40L组(2 mg/L)和LY294002+ sCD40L组.噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖变化;流式细胞术观察细胞周期和凋亡变化;透射电镜检测细胞形态变化;Western blot检测细胞PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的变化.结果 与单独使用sCD40L或LY294002比较,sCD40L与LY294002联合应用后细胞生存率显著降低,LY294002组、sCD40L组及联合用药组细胞生存率分别为(65.72±3.19)％、(70.14±2.98)％、(41.25±2.74)％(P＜0.05).LY294002及sCD40L单独作用胃癌AGS细胞48 h后均可使细胞周期分布发生明显改变,细胞周期阻滞于G1期,两者联合作用比单独用药周期阻滞明显增强(P＜0.05).对照组、sCD40L组、LY294002组、联合用药组细胞凋亡率分别为(4.10±0.86)％、(4.23±0.74)％、(8.97±1.23)％、(29.32±2.37)％,与对照组比较,sCD40L组细胞没有明显的凋亡,LY294002组细胞有一定的凋亡,两者联合作用后细胞凋亡明显增多(P＜0.05).与对照组比较,sCD40L促进PI3K、p-Akt蛋白表达升高;与LY294002联合作用后,PI3K 、p-Akt蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 阻断PDK/Akt信号通路可显著增强sCD40L对人胃癌AGS细胞生长的抑制作用.
作者：汤美；陈建平；陈卫昌；李锐 刊期： 2014年第03期
我们应用激光共聚焦显微镜观察硫化氢(H2S)对心肌细胞缺氧后细胞内Ca2+荧光强度的影响,现报道如下.一、材料与方法1.实验动物及分组:雄性SD大鼠(220～250 g)由河北省实验动物中心提供.大鼠随机分为5组,每组8只:(1)正常组;(2)缺氧组;(3)缺氧+硫氢化钠(NaHS) 100 μmol/L组;(4)缺氧+NaHS 200 μmol/L组;(5)缺氧+NaHS400 μmol/L组.参照文献[1]获得心肌细胞悬液.缺氧3h后缺氧4组心肌细胞分别置于NaHS终质量浓度为0、100、200、400μmol/L的充满95％N2的KB液.
作者：刘芳；刘广杰；张建新；李兰芳 刊期： 2014年第03期
目的 观察扩张皮肤移植后的变化,探讨扩张皮肤远期回缩的机制.方法 选用8条普通成年犬,在每条犬背部设计4个解剖部位相对应的皮瓣下置入扩张器,注水8周后行扩张器取出术,随机将8条犬分为4组,每组2只,在犬皮肤扩张移植时和移植后3、6周及3、6个月检测其组织学、电镜变化及α-平滑肌肌动蛋白(αt-SMA) mRNA和蛋白的表达.结果 表皮层和真皮层移植后6个月基本恢复正常;电镜下可见扩张后表皮细胞排列紧密,真皮层于扩张后成纤维细胞数量较多,功能活跃,真皮深层有肌成纤维细胞存在,其胞质内微丝明显.移植后3个月成纤维细胞功能恢复正常,胶原排列趋于整齐,肌成纤维细胞消失,组织学在3～6个月时恢复到对照组水平.α-SMA mRNA和蛋白水平的表达在3周后达到高,分别为1.204 ±0.011和1.533 ±0.012,3个月时明显降低为0.910±0.008和0.519±0.007,差异有统计学意义(P＜0.05),α-SMA mRNA和蛋白水平变化趋势一致.结论 扩张皮肤的组织学变化在移植后6个月逐渐恢复正常,扩张皮肤远期回缩的机制可能与扩张皮肤内的肌成纤维细胞数量和功能状态有关.
作者：谢锋；张正文；马腾霄；侴海燕；李昊；康深松 刊期： 2014年第03期
我们利用电子颅脑损伤仪(eCCI)制备创伤性颅脑损伤(TBI)动物模型的具体方法并对其进行评价,现报道如下.一、制作方法1.动物及分组:西安交通大学实验动物中心提供(批号:20121023)雌性SD大鼠65只,体质量为220 ～240 g,适应性饲养3d后,随机分为正常对照组(A组)、模型1组(B组)、模型2组(C组)、模型3组(D组)和假手术组(E组).
作者：王瑞辉；郭新荣；吴涛；屈红艳 刊期： 2014年第03期
目的 探讨术前影像学检查判定肾脏小肿瘤(SRMs)性质的临床价值.方法 分析武汉协和医院收治59例SRMs患者临床资料,比较术前各种影像学检查在SRMs诊断中的优势及价值.结果 彩色多普勒超声、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)及正电子发射显像(PET)/CT判定SRMs良恶性的准确率分别为93.22％、94.73％、95.00％及100％;敏感性分别为97.87％、83.33％、94.12％及100％;特异性分别为75.00％、96.07％、100％及100％.结论 术前影像学检查有助于提示SRMs的性质,CT及MRI两者价值相当,具有重要参考价值,超声可作为筛查SRMs的首选方法,PET/CT诊断价值高,但因价格高不作为常规检查.
作者：刘周强；李俊平；陈朝晖；赵军 刊期： 2014年第03期
目的 观察幼龄大鼠门静脉海绵样变(CTPV)模型左肾上静脉直径的变化,以及经左肾上静脉行门体分流术后,左肾上腺静脉血栓对左肾上腺功能的影响.方法 将80只幼龄Wistar大鼠随机分为4组.采用门静脉部分缩窄法建立CTPV模型,结扎左肾上腺静脉法复制术后左肾上腺静脉血栓的模型.结果 (1)术后6周形成CTPV和左肾上腺静脉血栓的大鼠模型;(2)CTPV组术后6周与对照组比较,门静脉压力升高[(15.05±1.55) cmH2O,P＜0.05]及左肾上腺静脉直径增粗[(0.21±0.02) mm,P＜0.05];(3)左肾上腺静脉血栓组肾上腺功能与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 (1) CTPV模型大鼠左肾上腺静脉均增粗,提供了经左肾上腺静脉行门体分流术的条件.(2)左肾上腺静脉血栓不会影响左肾上腺功能,且左肾上腺病理未见明显变化,该术式合理、可行.
作者：王琪；戈小虎；马志刚；朱兵；卢军 刊期： 2014年第03期
髓母细胞瘤是儿童常见的恶性脑肿瘤,也是中枢神经系统恶性程度高的神经上皮性肿瘤之一,也称为幕下原始神经外胚层肿瘤(PNETs).目前采取手术结合术后放、化疗的综合治疗方案.其中放疗可能对儿童尚处于发育期的中枢神经系统造成严重损害,在3岁以下患儿仅采用化疗.部分髓母细胞瘤对放、化疗抵抗,不可避免发生转移、复发,导致病残和病死.近年来分子病理和肿瘤干细胞(CSC)的研究在髓母细胞瘤领域取得了显著进展,特别是在CSC理论的推动下,明确发现部分亚型的髓母细胞瘤起源于小脑的神经干细胞或前体细胞.
作者：万锋；赵天远；叶飞；郭东生；雷霆 刊期： 2014年第03期
近年来,随着实验研究的进展,结直肠外科医生对大肠癌、炎性肠病(IBD)、结直肠息肉、微创外科等专业领域的认识提升到一个新的阶段.目前,结直肠癌发生的遗传证据逐渐被揭示,遗传不稳定机制得以阐释,表观遗传学研究不断进展,肠癌干细胞的实验依据不断积累;IBD发病相关的遗传及屏障机制逐渐完善,炎症相关大肠癌的认识逐步深入;结直肠息肉的恶变风险及机制日渐得到认识,防治手段得以进步;微创外科技术不断得以推广,在保证治疗效果的同时减少了创伤,提高了患者生活质量.现对相关实验研究进展做一简要回顾与展望.
作者：王存；周总光 刊期： 2014年第03期
目的 采用SD大鼠建立手术治疗2型糖尿病的实验动物模型.方法 将40只成年SD大鼠随机分成造模组(n=30)和正常对照组(NC,n=10),造模组大鼠经高脂高糖饲料喂养及小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.将造模成功的28只大鼠随机分为3组,分别为Roux-en-Y旁路手术组(RYGB,n=10)、假手术组(SO,n=10)和非手术组(NO,n=8).结果 造模组大鼠血糖显著升高,均值大于16.7 mmol/L,胆固醇、三酰甘油均显著高于对照组,2型糖尿病大鼠造模成功;RYGB组大鼠血糖、总胆固醇及三酰甘油水平在术后1周即开始下降,术后4周血糖接近正常水平;改良手术技术,加强围术期管理后RYGB组大鼠术后总生存率达到80％,术后第8周,4组大鼠均长期存活.结论 改良后的2型糖尿病大鼠Rou-xen-Y旁路手术造模技术可行,有助于临床评估手术治疗糖尿病的远期效果和机制研究.
作者：高寅生；侯亚勃；高鹏；司若湟；梁宗潮；杨晓军 刊期： 2014年第03期
目的 观察铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝菌毛株(PA-MSHA)对膀胱癌细胞株的作用,探讨其作用机制.方法 使用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测肿瘤细胞的增殖,荧光染色法检测细胞凋亡形态,分光光度法检测凋亡因子半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-2和Caspase-9的水平.结果 磷酸盐缓冲液(PBS)组作用T24和5637细胞A450值分别为1.31和1.62,PA-MSHA组A450值分别为0.28和0.41,两组差异有统计学意义(P＜0.05);PA-MSHA处理后的膀胱癌细胞出现凋亡小体;PA-MSHA能够活化T24和5637细胞中Caspase-3及Caspase-9蛋白,与PBS组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PA-MSHA可以抑制T24和5637细胞增殖,并诱导凋亡.
作者：李劲然；丛乐乐；杜珍武；孙然；张乐宁 刊期： 2014年第03期
目的 探讨曲美他嗪(TMZ)抗大鼠心肌缺血再灌注损伤中炎性反应的作用及其机制.方法 雄性健康成年SD大鼠24只,体质量为180～220 g.采用随机区组设计将大鼠随机分为对照组(A组)和TMZ组(B组),B组于实验前6d,每日给予生理盐水稀释的TMZ 10 mg/kg灌胃,各组均采用冠状动脉结扎法制作缺血再灌注损伤(IRI)模型,缺血30 min,再灌注90 min.分别于缺血前、再灌注30、60、90 min后,取大鼠静脉血2ml,测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,实验结束后处死大鼠,再灌注区取组织,免疫组织化学检测血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达.结果 对照组缺血前、再灌注后30、60、90 min血清TNF-α含量分别为(0.18 ±0.10)、(1.15 ±0.29)、(0.98±0.27)、(0.52±0.23) μg/L,TMZ组TNF-α含量在再灌注各测试时点[(0.16±0.12)、(0.87±0.22)、(0.73±0.32)、(0.38 ±0.17) μg/L]均显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);TMZ组与对照组比较,可显著降低心肌组织内VCAM-1(4.571 2±1.121 3比6.203 5±1.451 3)的表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TMZ可通过限制再灌注损伤中炎性反应保护大鼠缺血再灌注损伤心肌.
作者：文冰；韩辉；焦周阳；刘超；夏冰；赵文增 刊期： 2014年第03期
股骨近端防旋髓内钉(PFNA)和粗隆部伽马钉(TGN)渐渐地被应用于治疗股骨粗隆间骨折.我们应用Meta分析比较TGN和PFNA治疗股骨粗隆间骨折的手术效果和并发症的发生率,现报道如下.一、材料和方法1.材料:计算机检索Cochrane(2013年第3期)、PubMed(1978至2013年)、Medline(1966年1月至2013年10月)、中国生物医学文献数据库(CMB1978年1月至2013年10月)、中文学术期刊全文数据库(CNKI1989年1月至2013年10月)及相关文章的参考文献,并手工检索相关杂志及会议论文中未发表的文献.检索语种限制于英文和中文.
作者：张寅；张潇；周晓中 刊期： 2014年第03期
目的 观察大鼠小肠移植排斥反应对肠道紧密连接蛋白表达的影响.方法 建立大鼠异位小肠移植模型,分为3组:假手术组、无排斥反应组和排斥反应组.通过大鼠活动状态及病理评分确定排斥反应程度.采用酶联免疫吸附试验(ELASA)法检测血浆中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-2的水平.透射电镜观察肠道紧密连接的超微结构改变.应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Westem blot法检测紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 排斥反应组随时间延长,病理评分增加[3 d:(32.67±2.34)分;5 d:(43.50 ±±2.07)分;7 d:(69.50±2.43)分],肠黏膜屏障功能损伤加重[DAO:3 d:(35.84±5.60)U/ml;5 d:(46.50±O.80) U/ml;7 d:(54.01±1.70) U/ml],TNF-α和IL-2大量释放,肠道紧密连接损伤严重,紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平降低.线性相关分析发现,病理评分、TNF-α、IL-2与紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达呈负相关(P＜0.01).结论 大鼠小肠移植排斥反应可使肠道功能受损、紧密连接断裂、紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达水平降低,且其蛋白表达水平与排斥反应程度呈负相关.
作者：张文；宋红丽；杨洋；刘涛；沈中阳 刊期： 2014年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
