潘枢;孙飞;史宏灿
已有报告外源性血管内皮生长因子(VEGF)能显著降低急性肝衰竭(ALF)大鼠的死亡率[1].然而,VEGF半衰期和作用时间短.我们通过比较VEGF静脉注射和载VEGF纳米粒子培养肝细胞移植(HT)后ALF大鼠存活率、肝功能、肝脏VEGF mRNA的表达量、肝脏CD34标记的微血管密度(MVD),观察载VEGF纳米粒子对肝再生的影响.
作者:陈红健;陈佳慧;陈钟 刊期: 2014年第03期
目的 构建乏氧/辐射双敏感启动子(HRE/Egrl)介导Smac的表达载体,观察其在人肺腺癌A549细胞中常氧和乏氧条件下的表达特点和在乏氧条件下的增殖抑制作用.方法 成功构建表达质粒pcDNA3.l-Egrl-Smac和pcDNA3.1-HRE/Egrl-Smac后转染A549细胞,分别采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Smac mRNA和蛋白表达;应用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞的增殖变化.结果 常氧条件下,与对照组比较,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射能显著增加A549细胞中Smac mRNA表达(P<0.05),且乏氧能显著增加这种效应(P<0.05);同时,Smac蛋白表达规律与mRNA表达规律相似.常氧和乏氧条件下,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射细胞均较相同时间点对照组细胞增殖水平显著降低(P<0.05);而且乏氧各组较常氧各组细胞增殖水平显著降低(P<0.05).结论 乏氧和辐射均能诱导A549细胞中Smac表达增加,且联合2 Gy照射能显著抑制乏氧条件下A549细胞的增殖能力.
作者:李长锋;金景鹏;刘大海;张斌 刊期: 2014年第03期
我们通过检测二尖瓣置换术(传统手术比微创手术)患者围手术期肺功能变化,对比两种手术方式对肺功能的影响.一、资料和方法1.一般资料:2010年至2013年华中科技大学附属同济医院心脏大血管外科二尖瓣置换手术患者60例,其中传统开胸二尖瓣置换34例(传统组)及微创二尖瓣置换26例(微创组).2.检测指标:所有患者检查术前、术后1周、术后1个月肺功能.检测指标包括用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEVl)、大呼气流量(PER)、肺总量(TLC)下降、残气量(RV).
作者:杨小威;陈涛;潘铁成;李军;程才 刊期: 2014年第03期
股骨近端防旋髓内钉(PFNA)和粗隆部伽马钉(TGN)渐渐地被应用于治疗股骨粗隆间骨折.我们应用Meta分析比较TGN和PFNA治疗股骨粗隆间骨折的手术效果和并发症的发生率,现报道如下.一、材料和方法1.材料:计算机检索Cochrane(2013年第3期)、PubMed(1978至2013年)、Medline(1966年1月至2013年10月)、中国生物医学文献数据库(CMB1978年1月至2013年10月)、中文学术期刊全文数据库(CNKI1989年1月至2013年10月)及相关文章的参考文献,并手工检索相关杂志及会议论文中未发表的文献.检索语种限制于英文和中文.
作者:张寅;张潇;周晓中 刊期: 2014年第03期
目的 对比Activ-C颈椎人工椎间盘置换和颈椎融合术后的颈椎运动学及放射学改变,观察两种术式对颈椎功能的影响.方法 手术治疗的单节段颈椎病患者92例,按照手术方法不同分为Activ-C颈椎人工椎间盘置换(ADR)和颈椎椎间融合(ACDF)两组,其中ADR组43例,ACDF组49例.对两组患者术前及术后颈椎功能障碍指数(NDI)、疼痛视觉模拟评分(VAS)、日本矫形外科协会评分(JOA)、颈椎曲度指数(CCI)、颈椎总活动度(ROM)、邻近节段活动度(MAL)进行分析.结果 所有患者均获随访,随访时间12 ~ 36个月,平均18.2个月.ADR组和ACDF组JOA评分分别由术前(8.1±0.7)分和(8.2±0.6)分升高至末次随访时的(14.9±0.8)分(P<0.05)和(14.5 ±0.70)分(P<0.05),VAS评分分别由术前(7.2±0.5)分和(7.4±0.3)分降低至末次随访时的(1.2±0.6)分(P<0.05)和(2.1±0.4)分(P<0.05),NDI评分分别由术前(51.5±28.4)分和(52.1±27.3)分降低至末次随访时的(31.4±20.3)分(P<0.05)和(33.6±18.2)分(P<0.05),两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);CCI分别由术前(14.60±2.94)%和(14.66±3.05)%降低至末次随访时的(14.03±2.76)% (P >0.05)和(12.08±2.65)% (P <0.05);ACDF组ROM术后较术前有明显减少[术后末次随访(35.4±12.7)°,术前(48.2±13.8)°,P<0.05],而ADR组与术前比较差异无统计学意义[术后末次随访(45.2±13.5)°,术前(47.7±13.4)°,P>0.05];ACDF组术后邻近节段活动度变大[术后末次随访上一节段MAL(10.9±1.4)°、下一节段MAL(12.4±2.2)°,术前上一节段MAL(8.9±1.9)°、下一节段MAL(9.0±2.3)°,P<0.05],显著高于ADR组[术后末次随访ADR组上一节段MAL(9.7±1.6)°、下一节段MAL(9.2±2.1)°,P<0.05].结论 Activ-C颈人工椎间盘置换术和颈椎前路减压融合术临床疗效相近,同时保留了手术节段运动功能,手术相邻节段的活动度并无增加,并能有效维持颈椎曲度.
作者:王卫东;王玉强;宋瑞鹏;赵亮;刘屹林;朱忠培;王利民 刊期: 2014年第03期
手术切除气管成人若超过全长50%(即超过6 cm)、儿童超过全长30%时,端端吻合困难,须植入气管替代物才能重建气道[1].由于供应气管的血管纤细且呈节段性分布,使得气管无法通过显微外科技术直接进行血管吻合.气管移植亦多因血供问题而终导致失败,严重制约了气管外科的发展[2].干细胞定位到靶组织后,在体内微环境的特异信号作用下,能定向分化成组织所需的细胞类型[3];或者通过模拟体内环境,在体外实现干细胞的定向诱导分化,这为干细胞治疗疾病提供了理论基础[4].骨髓单个核细胞(BM-MNCs)包括造血干细胞、间充质干细胞(MSCs)、内皮祖细胞(EPCs)、中胚层来源细胞等多种分化潜能的细胞群,且具有容易采集、操作简单和低免疫排斥反应等优点,因而目前干细胞临床应用较多的仍以自体骨髓和外周血单个核细胞为主[3-4].
作者:潘枢;孙飞;史宏灿 刊期: 2014年第03期
目的 观察沉默信息调节因子1(SIRTl)和叉头盒转录因子M1(FOXMl)在病理性瘢痕中的表达及其相互关系,探讨它们在瘢痕形成中的作用及机制.方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法、Western blot检测正常皮肤(10例)、成熟瘢痕(10例)、病理性瘢痕(10例)组织中SIRT1和FOXM1的mRNA、蛋白表达水平并进行统计学分析.结果 正常皮肤、成熟瘢痕、病理性瘢痕组织中SIRT1的mRNA及蛋白相对表达水平分别为1.0、1.187982±0.082916、2.402 178±0.178 598;0.498 614±0.056 342、0.534 159±0.044 509、0.976 829±0.145 736.FOXM1的mRNA及蛋白相对表达水平分别为1.0、1.196 429±0.086 786、2.447 249±0.128 875;0.469 935±0.089 373、0.552 653±0.078 293、0.915 367±0.114097.病理性瘢痕组织中SIRT1与FOXM1的mRNA相对表达水平均显著高于正常皮肤、成熟瘢痕(P<0.01);病理性瘢痕组织中SIRT1与FOXM1的蛋白相对表达水平均明显增高,与正常皮肤、成熟瘢痕对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 SIRT1和FOXM1在病理性瘢痕组织中表达增高,通过调节这两个因子的表达,可能促进瘢痕组织中细胞的增生,对病理性瘢痕的形成可能起重要作用.
作者:傅德强;吴文艺;张丽婷;许天文;朱世泽;王朝阳 刊期: 2014年第03期
目的 通过两种手术入路消融术建立兔椎间盘退变模型,探讨其优缺点及可能性.方法 新西兰大白兔24只,随机分为腹膜外入路及侧方入路组各12只.分别通过侧方及腹膜外的手术入路暴露椎间盘,穿刺L3/4~ L5/6椎间隙并消融30 s.术前及术后行CT、MRI检查及病理学检查.结果 两组内CT检查术后各时间点差异均有统计学意义(P<0.01).4周两组间差异有统计学意义(P<0.01).MRI T2矢状位两组均可见髓核信号降低,两组信号差异不明显.病理学检查可见两组均可见髓核丢失及椎间盘纤维化.结论 两种手术入路均可建立与人相似的退变模型,侧方入路早期退变更为明显.
作者:周葳;徐义春;王其友;韦家冬;余灏涛;赵飞 刊期: 2014年第03期
目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默垂体瘤转化基因(PTTG)对原代培养的人泌乳素型垂体瘤细胞(HPAs)生长的影响.方法 原代培养人泌乳素型垂体腺瘤细胞,稳定传代后分为3组:空白对照组、阴性对照组、siRNA-PTTG转染组,转染48 h后细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法测定PTTG mRNA、蛋白的表达;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)试剂盒检测Caspase-3的活性;放射免疫法测定各组细胞上清中泌乳素的水平.结果 与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA-PlTG转染组HPAs细胞PTTG mRNA和蛋白表达明显下调,细胞增殖受到抑制[阴性对照组、转染组抑制率分别为(3.02±1.77)%、(25.38±0.11)%,P<0.05],凋亡明显增多[3组凋亡率分别为:(6.21±2.36)%、(7.23±3.56)%、(32.33±5.69)%,P<0.05],Caspase-3活性增加(P<0.05);放射免疫法显示siRNA-PTTG转染组上清中泌乳素分泌水平下降,为空白对照组的32.9% (P <0.05).结论 下调PTTG基因可抑制人泌乳素型垂体瘤细胞生长,促进其凋亡,从而降低泌乳素分泌水平.
作者:刘晓东;苗旺;王宏勤;赵艳;张秀峰;范益民 刊期: 2014年第03期
肺癌是影响全球居民健康的主要恶性肿瘤,其发病率和死亡率呈现逐年上升趋势.肺癌如能早发现早治疗,治疗效果较理想;晚期的治疗效果差,死亡率高.目前对体检和未确诊者,大多作外周血肺癌相关指标的检查和影像学检查,其优点是简便易行,缺点是检出率偏低[1].本研究旨在探讨G蛋白信号调节因子17(RGS17)在肺癌中的临床应用.
作者:孙红岗;杨明峰;吴东东;卢韬;董学君;王兴木 刊期: 2014年第03期
目的 探讨血浆中雌二醇及其代谢产物与女性骨关节炎(OA)发病的关系.方法 64例女性膝OA(绝经前后各32例)作为实验组,48例健康女性(绝经前后各24例)作为对照组.应用高效液相色谱-电喷雾离子源-串联四极杆质谱联用技术对血浆内6种雌激素及其代谢产物定量测定.结果 实验组与对照组比较,绝经前卵泡期女性OA游离雌二醇水平[(65.0±9.2)比(72.3 ±10.4) ng/L;P <0.05]、绝经前卵泡期[(264.2±40.4)比(296.5 ±31.1) ng/L;P<0.05]及黄体期[(262.7±45.4)比(304.1±51.5) ng/L;P <0.05]女性OA总2-羟基雌酮水平均降低.绝经后女性OA游离雌二醇[(13.7±3.1)比(18.2±5.6) ng/L;P<0.05]及总雌二醇水平[(40.1±8.0)比(51.4±12.1)ng/L;P< 0.05]均降低;而总2-羟基雌二醇水平[(16.9±4.9)比(11.6±4.0) ng/L;P <0.01]升高.在调整体质量指数后,黄体期女性OA总2-羟基雌酮水平与总雌二醇水平明显相关(r =0.683,P<0.01);绝经后女性OA总2-羟基雌二醇水平与游离(r=0.373,P<0.05)及总雌二醇(r =0.416,P<0.05)水平明显相关.结论 除雌二醇缺乏外,绝经前低水平的总2-羟基雌酮及绝经后高水平的总2-羟基雌二醇与女性OA发病明显相关.
作者:高万里;吴立生;訾金花;蔡道章;宋炎成;李延志 刊期: 2014年第03期
目的 探讨大鼠胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空功能的变化及胃空肠吻合口Cajal间质细胞(ICC)的再生.方法 20只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术,对照组行幽门切断再吻合术.术后4周进行以下实验:放射性核素显像法评估胃液体排空功能;扫描电镜观察胃空肠吻合口ICC再生.结果 术后4周实验组大鼠胃液体半排空时间(t1/2)为(23.5 ±4.5) min,对照组为(10.2±2.3)min,实验组胃液体排空延迟(P<0.01);胃空肠吻合口ICC可以再生.结论 大鼠幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空延迟,而胃空肠吻合口ICC再生可能是其重要原因之一.
作者:孙井军;尤承忠;汤文浩 刊期: 2014年第03期
目的 观察应用反义B7-1在大鼠肝移植术后对共刺激分子B7-1的影响及其抗排斥反应的作用.方法 建立DA→Lewis大鼠配对组合的原位肝移植(ROLT)急性排斥反应模型,随机分为2组.A组:注射生理盐水(1 ml)组,B组:pcDNA3B-B7-1(1 ml)转染组.每组均分为移植术后1、2、3、4、5d组及生存情况观察组6组(10只/组);Western blot检测B7-1蛋白的表达,按Banff系统确定排斥活动性指数(RAI),观察A组和B组大鼠的长期生存时间.结果 B组B7-1各时间点表达水平均较A组相应时间点降低(0.0253±0.0063比0.0366±0.0252;0.0583 ±0.0184比0.0875 ±0.025 1;0.0599±0.0135比0.1075 ±0.021 1;0.0622 ±0.0150比0.161 0±0.0165;0.0636±0.0179比0.257 1±0.025 1,P<O.01).B组各时间点RAI均较A组相应时间点降低(1.4±0.5比2.0±0.7,P <0.05;1.9±0.6比2.7±0.7,P<0.05;2.0±0.7比4.4±1.0,P<0.01;2.3±0.7比6.3±0.9,P<0.01;2.9±1.2比7.2±1.4,P<0.01).B组大鼠的生存期较A组明显延长[(42.6±13.3)d比(8.6±2.3)d,P<0.01].结论 应用反义B7-1可以降低移植肝组织中B7-1的表达,有效抑制急性排异反应.
作者:李蕊;翟慧;王飞;肖岩 刊期: 2014年第03期
目的 观察阿曼托双黄酮(AF)对匹罗卡品点燃小鼠癫痫发作、海马神经元的影响,并探讨其机制.方法 建立匹罗卡品小鼠点燃模型,并给予AF进行干预.综合应用神经电生理、病理学、分子生物学等技术,观察AF对点燃小鼠癫痫发作以及海马神经元的影响.结果 与癫痫组比较,AF组小鼠行为学和局部场电位信号(LFP)表现均相对稳定,海马CA1区存活神经元数目显著增加[(121.40 ±8.72)个,P<0.05],原位末端转移酶标记(TUNEL)染色结果显示凋亡神经元数目减少[(1.70±0.98)个,P<0.01],免疫组织化学(4 894.25±771.18)和Western blot结果(0.49±0.13)显示核因子-κB(NF-κB) p65表达明显降低(P<0.01).结论 AF对小鼠癫痫模型具有明显的预防惊厥发生和神经保护作用,其作用机制与AF抑制癫痫发生时的脑内炎性反应有关.
作者:张震;孙涛;杨武;高攀;李子标;李杨;夏令宝;刘阳;王峰 刊期: 2014年第03期
目的 观察脑转移瘤组织中骨桥蛋白(OPN)和细胞黏附因子CD44v6的表达,探讨两者在脑转移瘤发生发展中的作用及机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组织化学法,检测50例脑转移瘤标本中OPN和CD44v6的表达,并探讨两者之间的相关性.结果 OPN和CD44v6 mRNA在脑转移瘤中的相对表达量分别为0.82±0.05、0.77 ±0.05;在原发肿瘤中的相对表达量为0.75±0.07、0.69±0.04,均显著高于正常脑组织(P<0.05),两者的蛋白表达在脑转移瘤中的阳性率分别为92% (46/50)、88% (44/50),与正常脑组织比较明显增高(P<0.05).OPN和CD44v6 mRNA及蛋白在脑转移瘤中的表达均呈明显正相关(r =0.632,P<0.01;r =0.915,P<0.05).结论 OPN和CD44v6在恶性肿瘤的脑转移形成与发展中发挥重要作用,且两者存在一定的协同关系.
作者:李建峰;扈玉华;赵振翔;王喜旺 刊期: 2014年第03期
目的 制成以羟丁基壳聚糖(HBC)为壳,以巯基烷基化壳聚糖(TACS)包埋基因质粒为核的核壳结构,探讨其作为缓释基因载体的可行性.方法 TACS与增强型绿色荧光蛋白基因(pEGFP)以复凝聚法制成纳米微球作为核结构(TACS/pEGFP),然后与温敏性HBC混合包裹以及冷冻干燥合成羟丁基壳聚糖-巯基烷基化壳聚糖/pEGFP(HBC-TACS/pEGFP)核壳结构;利用动态光散射仪器、透射电镜对核及核壳结构进行表征.凝胶电泳实验检测复合基因纳米粒子对pEGFP的携载以及保护作用.对HEK293T细胞和小鼠的骨骼肌进行体外和体内转染,检测基因复合纳米粒能否作为缓释基因载体.结果 HBC-TACS/pEGFP纳米微球多呈球形,粒径为(317.6±55.9) nm,表面Zeta电位为(2.3 ±1.1) mV,可有效保护pEGFP免受DNase I的降解.在体外转染经流式细胞仪测定,HBC-TACS/pEGFP的基因转染率为(8.00±5.69)%,明显小于TACS/pEGFP[(37.66±5.18)%],差异有统计学意义(P<0.01).但是在小鼠体内随着时间的推移,核壳结构组EGFP荧光蛋白表达量逐渐增加,第45天激光共聚焦显微镜下观察到HBC-TACS/pEGFP的荧光强度强于TACS/pEGFP.结论 HBC-TACS/pEGFP可以作为基因载体并且在体内有缓释基因,延长基因表达的作用.
作者:王云;林福星;汪谟贞;葛学武;赵宇 刊期: 2014年第03期
目的 探索安全有效、简单易行的后腹腔镜下肾脏低温保护技术.方法 拟行后腹腔镜下保留肾单位手术患者22例,分为研究组和对照组.研究组在后腹腔镜肾脏低温下行保留肾单位手术;对照组行常规后腹腔镜下保留肾单位手术.比较两组患者肾脏温度和直肠温度变化以及手术前后肾功能变化.结果 22例患者手术顺利;术后无继发出血、感染及漏尿.研究组冷缺血时间为(47.2±3.8)min,平均低肾脏温度为(17.73±0.91)℃.研究组术前ECT示患肾肾小球滤过率(GFR)为(30.57±4.07) ml/min,术后1个月患肾GFR为(20.92 ± 4.49) ml/min.对照组术前ECT示患肾GFR为(30.65±5.45) ml/min,术后1个月患肾GFR(17.90±3.50) ml/min.患者术后随访1 ~16个月,未见局部复发、无转移.结论 后腹腔镜下肾脏低温保护技术简单易行、效果确切.
作者:方烈奎;杨江根;黄建生;张秩庠;黄向江;熊星;姜敏;肖克峰 刊期: 2014年第03期
髓母细胞瘤是儿童常见的恶性脑肿瘤,也是中枢神经系统恶性程度高的神经上皮性肿瘤之一,也称为幕下原始神经外胚层肿瘤(PNETs).目前采取手术结合术后放、化疗的综合治疗方案.其中放疗可能对儿童尚处于发育期的中枢神经系统造成严重损害,在3岁以下患儿仅采用化疗.部分髓母细胞瘤对放、化疗抵抗,不可避免发生转移、复发,导致病残和病死.近年来分子病理和肿瘤干细胞(CSC)的研究在髓母细胞瘤领域取得了显著进展,特别是在CSC理论的推动下,明确发现部分亚型的髓母细胞瘤起源于小脑的神经干细胞或前体细胞.
作者:万锋;赵天远;叶飞;郭东生;雷霆 刊期: 2014年第03期
目的 观察可溶性CD40配体(sCD40L)联合磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路特异性阻断剂LY294002对胃癌AGS细胞体外生长及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 将细胞分成对照组(仅加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液)、LY294002组(20 μmol/L)、sCD40L组(2 mg/L)和LY294002+ sCD40L组.噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖变化;流式细胞术观察细胞周期和凋亡变化;透射电镜检测细胞形态变化;Western blot检测细胞PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的变化.结果 与单独使用sCD40L或LY294002比较,sCD40L与LY294002联合应用后细胞生存率显著降低,LY294002组、sCD40L组及联合用药组细胞生存率分别为(65.72±3.19)%、(70.14±2.98)%、(41.25±2.74)%(P<0.05).LY294002及sCD40L单独作用胃癌AGS细胞48 h后均可使细胞周期分布发生明显改变,细胞周期阻滞于G1期,两者联合作用比单独用药周期阻滞明显增强(P<0.05).对照组、sCD40L组、LY294002组、联合用药组细胞凋亡率分别为(4.10±0.86)%、(4.23±0.74)%、(8.97±1.23)%、(29.32±2.37)%,与对照组比较,sCD40L组细胞没有明显的凋亡,LY294002组细胞有一定的凋亡,两者联合作用后细胞凋亡明显增多(P<0.05).与对照组比较,sCD40L促进PI3K、p-Akt蛋白表达升高;与LY294002联合作用后,PI3K 、p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 阻断PDK/Akt信号通路可显著增强sCD40L对人胃癌AGS细胞生长的抑制作用.
作者:汤美;陈建平;陈卫昌;李锐 刊期: 2014年第03期
目的 探讨甲状腺癌发生与EB病毒(EBV)感染的相关性.方法 选取155例甲状腺癌患者手术切除标本为研究对象,根据WHO分类进行分组,并以癌旁正常甲状腺组织为对照,应用免疫组织化学法和原位杂交法检测各组EBV的潜伏膜蛋白-1(LMP-1)和EB病毒基因编码的核糖核酸(EBER-1)的表达.结果 LMP-1和EBER-1在甲状腺癌组织中的阳性表达率分别为41.94% (65/155)和56.13%(87/155),明显高于在正常甲状腺组织中的20.00%(31/155)和27.10% (42/155),差异均有统计学意义(P<0.05).LMP-1和EBER-1在乳头状癌表达阳性率分别为52.13%和60.64%,高于其他病理类型,差异均有统计学意义(P<0.05).原位分子杂交技术测定EBER-1的阳性率为56.13%,高于免疫组织化学技术检测LMP-1的阳性率(41.94%),两种方法检测甲状腺癌组织中EBV感染的结果差异有统计学意义(P<0.05),且两种检测方法明显相关(r=0.70).结论 EBV感染与甲状腺癌的发生发展明显相关,特别是与乳头状癌的关系更为密切.
作者:李清怀;李筱雨;孙建平;底旺;张霖雷 刊期: 2014年第03期