李蕊；翟慧；王飞；肖岩
目的 制成以羟丁基壳聚糖(HBC)为壳,以巯基烷基化壳聚糖(TACS)包埋基因质粒为核的核壳结构,探讨其作为缓释基因载体的可行性.方法 TACS与增强型绿色荧光蛋白基因(pEGFP)以复凝聚法制成纳米微球作为核结构(TACS/pEGFP),然后与温敏性HBC混合包裹以及冷冻干燥合成羟丁基壳聚糖-巯基烷基化壳聚糖/pEGFP(HBC-TACS/pEGFP)核壳结构;利用动态光散射仪器、透射电镜对核及核壳结构进行表征.凝胶电泳实验检测复合基因纳米粒子对pEGFP的携载以及保护作用.对HEK293T细胞和小鼠的骨骼肌进行体外和体内转染,检测基因复合纳米粒能否作为缓释基因载体.结果 HBC-TACS/pEGFP纳米微球多呈球形,粒径为(317.6±55.9) nm,表面Zeta电位为(2.3 ±1.1) mV,可有效保护pEGFP免受DNase I的降解.在体外转染经流式细胞仪测定,HBC-TACS/pEGFP的基因转染率为(8.00±5.69)％,明显小于TACS/pEGFP[(37.66±5.18)％],差异有统计学意义(P＜0.01).但是在小鼠体内随着时间的推移,核壳结构组EGFP荧光蛋白表达量逐渐增加,第45天激光共聚焦显微镜下观察到HBC-TACS/pEGFP的荧光强度强于TACS/pEGFP.结论 HBC-TACS/pEGFP可以作为基因载体并且在体内有缓释基因,延长基因表达的作用.
作者：王云；林福星；汪谟贞；葛学武；赵宇 刊期： 2014年第03期
目的 观察应用反义B7-1在大鼠肝移植术后对共刺激分子B7-1的影响及其抗排斥反应的作用.方法 建立DA→Lewis大鼠配对组合的原位肝移植(ROLT)急性排斥反应模型,随机分为2组.A组:注射生理盐水(1 ml)组,B组:pcDNA3B-B7-1(1 ml)转染组.每组均分为移植术后1、2、3、4、5d组及生存情况观察组6组(10只/组);Western blot检测B7-1蛋白的表达,按Banff系统确定排斥活动性指数(RAI),观察A组和B组大鼠的长期生存时间.结果 B组B7-1各时间点表达水平均较A组相应时间点降低(0.0253±0.0063比0.0366±0.0252;0.0583 ±0.0184比0.0875 ±0.025 1;0.0599±0.0135比0.1075 ±0.021 1;0.0622 ±0.0150比0.161 0±0.0165;0.0636±0.0179比0.257 1±0.025 1,P＜O.01).B组各时间点RAI均较A组相应时间点降低(1.4±0.5比2.0±0.7,P ＜0.05;1.9±0.6比2.7±0.7,P＜0.05;2.0±0.7比4.4±1.0,P＜0.01;2.3±0.7比6.3±0.9,P＜0.01;2.9±1.2比7.2±1.4,P＜0.01).B组大鼠的生存期较A组明显延长[(42.6±13.3)d比(8.6±2.3)d,P＜0.01].结论 应用反义B7-1可以降低移植肝组织中B7-1的表达,有效抑制急性排异反应.
作者：李蕊；翟慧；王飞；肖岩 刊期： 2014年第03期
目的 观察微小RNA(miR)-29a对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 以磷酸盐缓冲液(PBS)为空白对照,以负载cel-miR67的复制缺陷型腺病毒(Ad-cel)为阴性对照,注射负载miR-29a的复制缺陷型腺病毒(Ad-miR29a)液于移植瘤内,观察移植瘤生长曲线和抑瘤率;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测移植瘤内miR-29a表达丰度;采用免疫组织化学技术检测CD34表达以计算移植瘤内微血管密度(MVD).结果 与PBS组比较,Ad-miR29a组移植瘤内miR-29a表达显著上调(3.06±0.73比1.00±0.21,P＜0.01),而Ad-cel组与PBS组比较差异无统计学意义(P＞0.05);Ad-miR29a组移植瘤生长速度低于PBS组,而Ad-cel组与PBS组差异无统计学意义(P＞0.05);于第5周末Ad-miR29a组抑瘤率达49.30％;Ad-miR29a组的移植瘤内MVD显著低于PBS组(21.3±8.1比42.6±11.2,P＜0.01),而Ad-cel组与PBS组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-29a可显著抑制裸鼠胃癌移植瘤生长,其机制可能为抑制移植瘤内MVD,miR-29a有望成为新型的胃癌基因治疗靶标.
作者：陈陵；王宗华；宋航；黄一；王国威；王仙园；任辉 刊期： 2014年第03期
目的 将不同浓度曲拉通(Triton X-100)联合核酸酶对同种异体气管实施脱细胞处理,观察其形态结构与生物力学性能.方法 健康新西兰兔30只,随机分为5组(n=6).以新鲜未处理的气管作为对照组(A组),按1％、2％、3％、4％ Triton X-100处理的气管作为实验组(B、C、D、E组),对照组和实验组处理后行组织学观察,电镜扫描气管内外腔的超微结构,并测量气管长度、厚度、横截面的横径和纵径、弹性模量、大应力等力学性能指标.并将2％riton X-100处理的脱细胞气管和新鲜气管埋入SD大鼠背下,并于1、4、8周后取出进行组织学观察.结果 A组气管可见大量的气管上皮细胞和软骨细胞,C、D、E组的软骨细胞较A、B组减少,电镜扫描结果显示A组气管内表面有大量的气管上皮细胞纤毛,B、C组气管内表面上皮细胞消失,基底膜完整,D、E组气管基底膜破裂.随着浓度的增加,气管大应力、弹性模量逐渐降低,只有E组与A组比较差异有统计学意义(P＜0.05).植入大鼠背下的2％ Triton X-100处理的脱细胞气管生物相容性良好.结论 2％ Triton X-100处理的脱细胞兔气管基质在形态学及力学方面具有明显优势.
作者：章方彪；史宏灿；张卫东；叶钢；刘星辰；潘枢；孙飞；李广宇 刊期： 2014年第03期
本实验旨在建立稳定有效的转移性人肝癌裸小鼠原位种植合并姑息性氩氦刀冷冻治疗模型,现报道如下.一、材料与方法采用48只BALB/c-nu/nu裸小鼠,建立转移性人肝癌裸小鼠原位种植模型[1];随机分为2组,移植瘤术后30 d进行姑息性氩氦刀冷冻治疗和仅开腹为假手术组.用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,开腹后暴露肝移植瘤,经多次预实验,使用3 mm氩氦刀头,选定输出功率为5％,温度降至-40℃后插入肿瘤2 mm左右,根据肿瘤大小,持续20 ～30 s,温度回升至10℃后重复1次;假手术组开腹后将不接电源的氩氦刀头插入肿瘤内1 min后关腹.
作者：周建炜；卢创新；王朝杰；马宁；罗执芬；崔勇霞；王威；王梦啸；周云 刊期： 2014年第03期
目的 分离培养前列腺癌相关成纤维细胞(CAF)及正常成纤维细胞(NPF),探讨两者生物学差异.方法 用Percoll技术分离培养CAF及NPF细胞,用免疫荧光法检测上皮细胞标志物(Pan-CK),成纤维细胞标志物波形蛋白(Vimentin)和平滑肌细胞标志物平滑肌肌动蛋白(SMA);用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长能力;用软琼脂糖实验检测两种细胞诱导良性细胞BPH-1恶变.结果 CAF与NPF细胞形态相似,均高表达Vimentin,不表达Pan-CK,CAF细胞高表达SMA.CAF细胞生长速度快于NPF细胞,第4天吸光度值分别为0.98 ±0.07、0.74±0.04,P＜0.05;第6天吸光度值分别为2.06±0.13、1.59±0.14(P ＜0.05),且能诱导BPH-1恶性变.结论 CAF细胞高表达SMA,增殖能力强,能促进前列腺良性细胞恶性变.
作者：于胜强；王科；杨典东；王健涛；李光磊；高振利 刊期： 2014年第03期
目的 采用SD大鼠建立手术治疗2型糖尿病的实验动物模型.方法 将40只成年SD大鼠随机分成造模组(n=30)和正常对照组(NC,n=10),造模组大鼠经高脂高糖饲料喂养及小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.将造模成功的28只大鼠随机分为3组,分别为Roux-en-Y旁路手术组(RYGB,n=10)、假手术组(SO,n=10)和非手术组(NO,n=8).结果 造模组大鼠血糖显著升高,均值大于16.7 mmol/L,胆固醇、三酰甘油均显著高于对照组,2型糖尿病大鼠造模成功;RYGB组大鼠血糖、总胆固醇及三酰甘油水平在术后1周即开始下降,术后4周血糖接近正常水平;改良手术技术,加强围术期管理后RYGB组大鼠术后总生存率达到80％,术后第8周,4组大鼠均长期存活.结论 改良后的2型糖尿病大鼠Rou-xen-Y旁路手术造模技术可行,有助于临床评估手术治疗糖尿病的远期效果和机制研究.
作者：高寅生；侯亚勃；高鹏；司若湟；梁宗潮；杨晓军 刊期： 2014年第03期
目的 通过量子点(QDs)即新型半导体免疫荧光标记试剂结合组织芯片技术检测p53及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白在人胃癌组织中的表达,并与免疫酶组织化学法比较,探讨免疫荧光组织化学试剂量子点技术的有效性和实用性.方法 采用半导体免疫荧光标记试剂-量子点结合组织芯片技术(QDs-IHC)观察人胃癌组织芯片中p53及MMP-2蛋白的表达,并且检测p53及MMP-2蛋白在胃癌组织中的共表达,并与常规免疫酶法的结果比较.结果 新型QDs-IHC和常规的免疫组织化学(IHC)法检测分析显示:p53(胃癌组p53蛋白两种方法的阳性检测率分别为72.86％和65.71％)及MMP-2蛋白(胃癌组:MMP-2蛋白两种方法检测的阳性率为87.14％和82.86％)表达在对照组和胃癌组之间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).p53及MMP-2蛋白表达之间呈显著正相关(r =0.533,P＜0.01).QDs-IHC检测2种蛋白表达的阳性率均高于IHC所检测的结果,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新型QDs-IHC和常规IHC两种方法可检测到p53及MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达,QDs-IHC技术检测其灵敏度比IHC高,图片显色背景比IHC干净.p53及MMP-2在胃癌患者的癌组织中共同表达.
作者：罗浩；李力；潘晟 刊期： 2014年第03期
目的 观察左旋棉酚(LG)联合多西紫杉醇(DOC)对肺癌治疗的体内体外影响,探讨两者是否具有协同作用及其机制.方法 LG(3、5μmol/L)联合DOC(0.1、1.0 nmoL/L)作用于A549、A549/DDP和A549/T肺癌细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪法分别检测细胞增殖抑制和凋亡诱导作用;建立C57 BL/6J小鼠肺癌Lewis细胞皮下移植瘤模型,将移植瘤小鼠随机分成7组,每组15只,分别为DOC治疗组(1、2 mg/kg)、LG治疗组(3、5 mg/kg)、联合治疗组(3 mg/kg LG+1 mg/kg DOC、5 mg/kg LG +2 mg/kg DOC)和阴性对照组,进行疗效分析.结果 低剂量联合组对A549、A549/DDP和A549/T的增殖抑制率分别为(67.3±3.1)％、(64.8±2.8)％、(54.1±3.3)％,细胞凋亡率分别为(50.2±1.8)％、(52.3±1.5)％、(42.8±2.4)％;高剂量联合组的增殖抑制率分别为(71.8±1.9)％、(72.4±2.1)％、(60.7±2.6)％,细胞凋亡率分别为(53.2±1.8)％、(55.1±1.9)％、(46.7±2.6)％;高低剂量联合组对肺癌细胞的增殖抑制率和细胞凋亡率均比单独使用DOC显著增加(P＜0.05),且联合指数(CI)均小于0.5,表现出强大的协同作用.低高剂量联合组小鼠肺癌Lewis细胞移植瘤的肿瘤抑制率分别为49.23％和66.87％,明显高于DOC治疗组.结论 LG与DOC的联用对肺癌细胞的增殖抑制及诱导凋亡具有协同作用,对克服肿瘤细胞耐药性有良好的效果,对小鼠肺癌Lewis细胞移植瘤有明显的抑制作用,且比单独用药效果显著.
作者：吴小进；杨辉；米燕燕；殷咏梅 刊期： 2014年第03期
实验外科是外科学的重要组成部分、外科学发展的技术先导和理论依据.而在许多外科医生的潜意识中,实验外科带有浓厚的“动物外科”、“实验室外科”和“基础研究”的色彩,这种意识,圈禁了实验外科的发展.究其原因,这种认识有着历史的背景,前两者(即“动物外科”和“实验室外科”意识)多半来源于20世纪实验外科的主体对象,乃至实验外科的起源,后者(即“基础研究”)则与近年来实验外科的导向不无关系.随着医学的发展,外科学也随之进步,传统的实验医学或实验外科正在凸显出其内核与真谛.
作者：龚建平；杨镇；吴在德 刊期： 2014年第03期
目的 探讨高效率的小鼠胰岛细胞分离纯化技术.方法 应用胆总管内灌注胶原酶、消化胰腺分离胰岛(灌注法),并与切碎消化胰腺分离胰岛(碎片法)比较;应用碘克沙醇(Iodixanol)不连续密度梯度(Iodixanol组)纯化胰岛,并与Ficoll不连续密度梯度(Ficoll组)比较.双硫腙(DTZ)染色观测胰岛的数量和纯度,胰岛素释放试验检测胰岛的分泌功能.结果 灌注法消化后每条胰腺可获得(298.00±15.58)个胰岛,较碎片法(36.00±3.89)个胰岛明显增高,两组间差异有统计学意义(P＜0.01).Iodixanol组和Ficoll组纯化后胰岛平均纯度均超过90％,两组间差异无统计学意义(P＞0.05).胰岛糖刺激试验于低糖(2.75 mmol/L)刺激时胰岛素分泌量Iodixanol组为(3.120±0.046) μg/L,Ficoll组为(3.060±0.426) μg/L,两组间差异无统计学意义(P＞0.05);而高糖(16.50 mmol/L)刺激时,Iodixanol组胰岛素释放量为(11.36±0.82) μg/L,明显高于Ficoll组的(7.98±0.56) μg/L,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 应用胆总管内灌注消化分离胰岛(灌注法)得到的胰岛更多,应用Iodixanol不连续密度梯度纯化的胰岛生物活性更高,胶原酶灌注消化Iodixanol纯化是小鼠胰岛分离提纯的较好方法.
作者：高戈；冯喆 刊期： 2014年第03期
目的 探索安全有效、简单易行的后腹腔镜下肾脏低温保护技术.方法 拟行后腹腔镜下保留肾单位手术患者22例,分为研究组和对照组.研究组在后腹腔镜肾脏低温下行保留肾单位手术;对照组行常规后腹腔镜下保留肾单位手术.比较两组患者肾脏温度和直肠温度变化以及手术前后肾功能变化.结果 22例患者手术顺利;术后无继发出血、感染及漏尿.研究组冷缺血时间为(47.2±3.8)min,平均低肾脏温度为(17.73±0.91)℃.研究组术前ECT示患肾肾小球滤过率(GFR)为(30.57±4.07) ml/min,术后1个月患肾GFR为(20.92 ± 4.49) ml/min.对照组术前ECT示患肾GFR为(30.65±5.45) ml/min,术后1个月患肾GFR(17.90±3.50) ml/min.患者术后随访1 ～16个月,未见局部复发、无转移.结论 后腹腔镜下肾脏低温保护技术简单易行、效果确切.
作者：方烈奎；杨江根；黄建生；张秩庠；黄向江；熊星；姜敏；肖克峰 刊期： 2014年第03期
目的 探讨癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAMl)在胃癌中的表达与微血管生成的关系.方法 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测179例胃癌及40例癌旁非肿瘤胃组织中CEACAM1、CD34的表达.结果 CEACAM1在癌旁非肿瘤胃组织中并无阳性表达.174例胃腺癌标本均有CEACAM1表达,69.0％呈高表达,高、低表达CEACAMI标本中CD34-微血管密度(MVD)分别为(57.32±6.56)、(44.26 ±7.25)个/视野,两者差异有统计学意义(P＜0.05).CEACAM1高表达及CD34-MVD分别与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P＜0.05).结论 胃癌中CEACAM1的表达上调可能参与胃癌微血管生成,提高其侵袭和转移能力.
作者：陆海炳；王嘉玮；杨金虎；曹华祥；游庆军 刊期： 2014年第03期
目的 制备一种新型的人工软骨材料并对其进行表征及性能评价.方法 将聚甲基丙烯酸羟乙酯(PHEMA)与0.5％二氧化硅(SiO2)及1％～5％羟基磷灰石(HA)复合制备成复合材料,用红外光谱仪和扫描电镜表征了材料的结构,测试材料的吸水性及牛血清白蛋白在材料表面的吸附性.结果 SiO2与HA纳米级均匀地分散在材料的一侧,材料的吸水率为45％ ～ 50％,牛血清白蛋白在材料表面的吸附率约为5％,表明材料具有较好的生物相容性.结论 成功制备1种生物相容性较好的有机/无机复合人工软骨材料.
作者：陈鹏；方善鸿；郑竑；张文明；李文波；杨声波；林建华 刊期： 2014年第03期
股骨近端防旋髓内钉(PFNA)和粗隆部伽马钉(TGN)渐渐地被应用于治疗股骨粗隆间骨折.我们应用Meta分析比较TGN和PFNA治疗股骨粗隆间骨折的手术效果和并发症的发生率,现报道如下.一、材料和方法1.材料:计算机检索Cochrane(2013年第3期)、PubMed(1978至2013年)、Medline(1966年1月至2013年10月)、中国生物医学文献数据库(CMB1978年1月至2013年10月)、中文学术期刊全文数据库(CNKI1989年1月至2013年10月)及相关文章的参考文献,并手工检索相关杂志及会议论文中未发表的文献.检索语种限制于英文和中文.
作者：张寅；张潇；周晓中 刊期： 2014年第03期
高腹腔压力的处理一直非常棘手,静息腹内压(IAP)在0～5 mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)之间,它与个人体形、腹部特征、肌肉张力有关[1].当患者反复或持续腹腔内压力≥12 mmHg时,为腹高压(IAH);当IAP持续≥20 mmHg并伴有1个以上器官功能不全表现时为腹腔间隔室综合征(ACS)[2-3].为此我们专门设计了1种减压装置,当发生了高腹压,安装此装置后,即可以降低腹腔压力,减少IAH引起的并发症,避免进一步发展到ACS状态.本实验旨在观察此装置的减压效果.
作者：郭晓东；杨兴东；李扬；王家坡；崔会专；李子国；华军霞；许爱国；张思永 刊期： 2014年第03期
目的 探讨甲状腺癌发生与EB病毒(EBV)感染的相关性.方法 选取155例甲状腺癌患者手术切除标本为研究对象,根据WHO分类进行分组,并以癌旁正常甲状腺组织为对照,应用免疫组织化学法和原位杂交法检测各组EBV的潜伏膜蛋白-1(LMP-1)和EB病毒基因编码的核糖核酸(EBER-1)的表达.结果 LMP-1和EBER-1在甲状腺癌组织中的阳性表达率分别为41.94％ (65/155)和56.13％(87/155),明显高于在正常甲状腺组织中的20.00％(31/155)和27.10％ (42/155),差异均有统计学意义(P＜0.05).LMP-1和EBER-1在乳头状癌表达阳性率分别为52.13％和60.64％,高于其他病理类型,差异均有统计学意义(P＜0.05).原位分子杂交技术测定EBER-1的阳性率为56.13％,高于免疫组织化学技术检测LMP-1的阳性率(41.94％),两种方法检测甲状腺癌组织中EBV感染的结果差异有统计学意义(P＜0.05),且两种检测方法明显相关(r=0.70).结论 EBV感染与甲状腺癌的发生发展明显相关,特别是与乳头状癌的关系更为密切.
作者：李清怀；李筱雨；孙建平；底旺；张霖雷 刊期： 2014年第03期
骨肉瘤(OS)的转移需要新生血管的形成[1].恶性黑色素瘤细胞黏附分子(CD146、Mel-CAM、MUC18)、血管内皮生长因子(VEGF)是近年来研究比较多的肿瘤血管相关因子.我们采用免疫组织化学方法检测43例骨肉瘤患者CD146、VEGF的表达以及CD34标记的微血管密度(MVD),探讨它们与骨肉瘤血管生成间的关系.
作者：刘宇雷；郭中帅；杨力；胡彤宇；齐典文；扈文海；张国川 刊期： 2014年第03期
目的 观察外源性转化生长因子-β1(TGF-β1)对急性梗阻性胆管炎肝损伤的干预作用,探讨TGF-β1减轻肝损伤的分子机制.方法 健康Wistar大鼠90只,随机分为6组,实验组结扎胆总管并注入大肠杆菌建立大鼠急性梗阻性胆管炎模型,尾静脉直接注射外源性TGF-β1(10 mg/kg)进行干预,观察干预后24 h大鼠肝脏病理改变;并利用生化分析仪检测干预后0～48 h血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平评价外源性TGF-β1对肝损伤的干预作用;酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blot分别检测0～48 h血清及肝脏中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平.结果 TGF-β1干预24h后,急性梗阻性胆管炎(AOC)/TGF-β1组ALT、AST分别为(99.0±11.4)、(92.6±11.8) IU/L;48 h后分别为(145.3 ±15.7)、(133.0±15.5) IU/L,均较AOC组下降,差异有统计学意义(P＜0.05).TGF-β1干预24h后,AOC/TGF-β1组血清中TNF-α、IL-1β表达水平分别为(132.6±10.3)、(145.9±18.5) ng/L;48 h后分别为(243.6±15.7)、(279.2±20.3)ng/L,均较AOC组下降,差异有统计学意义(P＜0.05).TGF-β1干预24h后Western blot检测AOC/TGF-β1组肝组织中TNF-α和IL-1β的蛋白表达量均较AOC组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过外源性TGF-β1直接干预,可以减轻急性梗阻性胆管炎肝损害,改善肝功能,TGF-β1的这一作用可能是通过下调TNF-α、IL-1β在全身或肝脏中的蛋白表达水平来实现的.
作者：高登辉；王恒毅；王景钧；汪继东；方征 刊期： 2014年第03期
目的 探讨大鼠胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空功能的变化及胃空肠吻合口Cajal间质细胞(ICC)的再生.方法 20只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组行幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术,对照组行幽门切断再吻合术.术后4周进行以下实验:放射性核素显像法评估胃液体排空功能;扫描电镜观察胃空肠吻合口ICC再生.结果 术后4周实验组大鼠胃液体半排空时间(t1/2)为(23.5 ±4.5) min,对照组为(10.2±2.3)min,实验组胃液体排空延迟(P＜0.01);胃空肠吻合口ICC可以再生.结论 大鼠幽门切除+胃空肠Roux-en-Y吻合术后早期胃液体排空延迟,而胃空肠吻合口ICC再生可能是其重要原因之一.
作者：孙井军；尤承忠；汤文浩 刊期： 2014年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
