于胜强;王科;杨典东;王健涛;李光磊;高振利
目的 观察波生坦对肺纤维化(PF)的疗效.方法 48只雄性Wistar大鼠随机均分为6组:对照2、4周组(C2、C4)、模型2、4周组(F2、F4)和治疗组(D1、D2);予以博来霉素建模;DI、D2组分别于2、15d予以波生坦灌胃.2、4周末测定各组大鼠血浆内皮素-1(ET-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平,光镜下观察肺组织肺泡炎、纤维化的程度.结果 (1)造模后ET-1随时间延长升高[(0.10±0.05)、(0.11 ±0.04)、(0.28±0.08)、(0.41±0.13)μg/L],D1组较F4组下降,D2组与F4组差异无统计学意义(P>0.05).(2)病理形态观察:模型组肺泡架构破坏,早期炎性细胞聚集,后期成纤维细胞、胶原纤维增生;早期波生坦治疗病变减轻.(3)ET-1与肺泡炎、纤维化评分呈正相关,MMP-9/TIMP-1与肺泡炎、纤维化评分呈负相关.结论 波生坦可延缓PF进展,早期治疗对肺泡炎、纤维化改善更明显.
作者:左万里;赵洁敏;黄积雄;周伟;黄炎明;黄艳芬 刊期: 2014年第03期
目的 探讨癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAMl)在胃癌中的表达与微血管生成的关系.方法 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测179例胃癌及40例癌旁非肿瘤胃组织中CEACAM1、CD34的表达.结果 CEACAM1在癌旁非肿瘤胃组织中并无阳性表达.174例胃腺癌标本均有CEACAM1表达,69.0%呈高表达,高、低表达CEACAMI标本中CD34-微血管密度(MVD)分别为(57.32±6.56)、(44.26 ±7.25)个/视野,两者差异有统计学意义(P<0.05).CEACAM1高表达及CD34-MVD分别与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05).结论 胃癌中CEACAM1的表达上调可能参与胃癌微血管生成,提高其侵袭和转移能力.
作者:陆海炳;王嘉玮;杨金虎;曹华祥;游庆军 刊期: 2014年第03期
目的 构建p110β基因高表达质粒,转染胃癌MKN28细胞,观察其对胃癌MKN28细胞增殖的影响.方法 以基因组cDNA为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,构建pCMV-Flag-p110β质粒,通过酶切鉴定及测序确定无误后,转染MKN28细胞,通过实时定量PCR(Real-timePCR)和Western blot检测p110β高表达,以及通过噻唑蓝(MTT)法检测其对MKN28细胞增殖的影响.结果 成功构建了Flag-p110β质粒,在胃癌MKN28细胞中高表达p110β能促进蛋白激酶B(AKT)的磷酸化,48 h后噻唑蓝(MTT)法检测空白组、阴性对照组和高表达p110PIK组490 nm波长处的吸光度值分别为:0.791 6±0.0425、0.828 1 ±0.015 6、1.031 2±0.1094,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建Flag-p110β质粒,高表达p110β能够促进MKN28细胞增殖.
作者:刘鹭;曹小年;王桂华;胡俊波;唐锦辉 刊期: 2014年第03期
目的 探讨微小RNA(miR)-129在胃癌组织中的表达及临床意义,并评估其在两种含铂化疗方案治疗晚期胃癌患者的价值.方法 检测52例胃癌患者福马林固定后石蜡包埋(FFPE)肿瘤组织及11例正常胃组织中miR-129的表达水平,并结合临床病理资料进行分析.结果 miR-129在胃癌组织中表达水平显著高于正常胃组织(P <0.01);miR-129的表达水平与既往治疗史比较差异有统计学意义(P<0.05).两个疗程后的疗效与晚期胃癌患者总生存时间明显相关,疗效为部分缓解(PR)、稳定(SD)、疾病进展(PD)的患者中位生存时间分别为8.41(5.29~11.52)、10.16(7.19~13.14)和5.10(3.11~7.08)个月.miR-129高表达患者与低表达患者中位生存时间分别为6.27(5.17 ~7.37)、8.74(6.71 ~10.77)个月,差异有统计学意义(P<0.05).miR-129高表达胃癌患者死亡风险比(HR)为miR-129低表达胃癌患者的2.77倍[95%可信区间(CI):1.12~6.87,P<0.05];SD、PD患者的HR分别为PR患者的0.95(95%CI:0.351 ~2.562,P>0.05)和6.02倍(95%CI:1.683 ~21.570,P<0.01).结论 胃癌组织中miR-129异常表达,其表达水平与晚期胃癌患者预后显著相关.
作者:刘娟;史伟峰;徐斌;郑晓;王琦;卢斌峰;鞠景芳;吴昌平;蒋敬庭 刊期: 2014年第03期
目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默垂体瘤转化基因(PTTG)对原代培养的人泌乳素型垂体瘤细胞(HPAs)生长的影响.方法 原代培养人泌乳素型垂体腺瘤细胞,稳定传代后分为3组:空白对照组、阴性对照组、siRNA-PTTG转染组,转染48 h后细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法测定PTTG mRNA、蛋白的表达;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)试剂盒检测Caspase-3的活性;放射免疫法测定各组细胞上清中泌乳素的水平.结果 与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA-PlTG转染组HPAs细胞PTTG mRNA和蛋白表达明显下调,细胞增殖受到抑制[阴性对照组、转染组抑制率分别为(3.02±1.77)%、(25.38±0.11)%,P<0.05],凋亡明显增多[3组凋亡率分别为:(6.21±2.36)%、(7.23±3.56)%、(32.33±5.69)%,P<0.05],Caspase-3活性增加(P<0.05);放射免疫法显示siRNA-PTTG转染组上清中泌乳素分泌水平下降,为空白对照组的32.9% (P <0.05).结论 下调PTTG基因可抑制人泌乳素型垂体瘤细胞生长,促进其凋亡,从而降低泌乳素分泌水平.
作者:刘晓东;苗旺;王宏勤;赵艳;张秀峰;范益民 刊期: 2014年第03期
目的 构建乏氧/辐射双敏感启动子(HRE/Egrl)介导Smac的表达载体,观察其在人肺腺癌A549细胞中常氧和乏氧条件下的表达特点和在乏氧条件下的增殖抑制作用.方法 成功构建表达质粒pcDNA3.l-Egrl-Smac和pcDNA3.1-HRE/Egrl-Smac后转染A549细胞,分别采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Smac mRNA和蛋白表达;应用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞的增殖变化.结果 常氧条件下,与对照组比较,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射能显著增加A549细胞中Smac mRNA表达(P<0.05),且乏氧能显著增加这种效应(P<0.05);同时,Smac蛋白表达规律与mRNA表达规律相似.常氧和乏氧条件下,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射细胞均较相同时间点对照组细胞增殖水平显著降低(P<0.05);而且乏氧各组较常氧各组细胞增殖水平显著降低(P<0.05).结论 乏氧和辐射均能诱导A549细胞中Smac表达增加,且联合2 Gy照射能显著抑制乏氧条件下A549细胞的增殖能力.
作者:李长锋;金景鹏;刘大海;张斌 刊期: 2014年第03期
目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIGl)在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1在正常脑组织中的阳性表达率为100.0%,明显高于垂体瘤中的表达(54.1%),差异有统计学意义(P<0.05).同时,LRIG1在非侵袭性垂体瘤中的阳性表达率为66.7%,明显高于在侵袭性垂体瘤中的表达(20.0%).Kaplan-Meier生存分析表明LRIG1及垂体瘤类型与患者的预后明显相关(P<0.05).Cox多因素生存分析表明LRIGI可作为患者预后评估的独立因素.结论 LRIG1参与了垂体瘤的发生及发展,低表达患者预后较差.
作者:张焱;祝新根;程祖珏;沈晓黎;肖爵贤 刊期: 2014年第03期
目的 探讨甲状腺癌发生与EB病毒(EBV)感染的相关性.方法 选取155例甲状腺癌患者手术切除标本为研究对象,根据WHO分类进行分组,并以癌旁正常甲状腺组织为对照,应用免疫组织化学法和原位杂交法检测各组EBV的潜伏膜蛋白-1(LMP-1)和EB病毒基因编码的核糖核酸(EBER-1)的表达.结果 LMP-1和EBER-1在甲状腺癌组织中的阳性表达率分别为41.94% (65/155)和56.13%(87/155),明显高于在正常甲状腺组织中的20.00%(31/155)和27.10% (42/155),差异均有统计学意义(P<0.05).LMP-1和EBER-1在乳头状癌表达阳性率分别为52.13%和60.64%,高于其他病理类型,差异均有统计学意义(P<0.05).原位分子杂交技术测定EBER-1的阳性率为56.13%,高于免疫组织化学技术检测LMP-1的阳性率(41.94%),两种方法检测甲状腺癌组织中EBV感染的结果差异有统计学意义(P<0.05),且两种检测方法明显相关(r=0.70).结论 EBV感染与甲状腺癌的发生发展明显相关,特别是与乳头状癌的关系更为密切.
作者:李清怀;李筱雨;孙建平;底旺;张霖雷 刊期: 2014年第03期
目的 观察自噬在乙醇诱导胃黏膜上皮GES-1细胞凋亡中的作用.方法 体外使用100~1 600 mmol/L浓度乙醇诱导胃黏膜上皮GES-1细胞发生凋亡,并分为4组:空白对照组、乙醇组、乙醇+雷帕霉素(RAPA)组和乙醇+氯喹(CQ)组.流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖程度,免疫荧光显微镜观察自噬小体,Western blot检测各组中微管相关蛋白1轻链32β(LC3)的表达水平.结果 细胞凋亡随着乙醇浓度增加而升高,自噬能有效降低这种凋亡.乙醇组细胞凋亡率[(17.78±7.86)%]明显高于空白对照组[(12.64±6.82)%]和乙醇+RAPA组[(14.88±7.12)%],同时又显著低于乙醇+CQ组[(21.44±8.69)%,P<0.05].在乙醇干预下,诱导细胞自噬可以增加细胞的相对增殖活性.结论 乙醇可以诱导胃黏膜上皮GES-1细胞凋亡.促进细胞自噬可以有效降低乙醇诱导的细胞凋亡,抑制自噬可以有效增高乙醇诱导的细胞凋亡.
作者:常伟龙;帅晓明;张鹏;马牧原;李伟;尹玉平;陶凯雄 刊期: 2014年第03期
B细胞淋巴瘤/白血病-2/腺病毒E1B 19000相互作用蛋白3(BNIP3)是一种能和腺病毒E1B 19000蛋白相互作用的线粒体促凋亡蛋白.随着对BNIP3基因靶向治疗研究的深入,近年还发现其诱导细胞自噬的作用.BNIP3相关的凋亡与自噬可能导致肿瘤细胞截然不同的结果.现对两者的机制及相互关系做一综述.
作者:马钊;陈传贵;于振涛 刊期: 2014年第03期
本研究旨在观察不同手术时间对骨折愈合过程中骨形态发生蛋白(BMP)-2表达的影响.一、材料和方法1.实验动物:Wistar大鼠192只,体质量为220 g.2.实验方法:(1)大鼠麻醉后采用Einhorn动物骨折造模法制造右侧股骨中段闭合骨折模型[1-2].完全随机法分为A、B、C、D、E、F、G共7组.B、C、D、E、F、G组分别在骨折后第1、3、5、7、11、14天行骨折端切开复位克氏针内固定术[3].A组不行手术,A、B组在骨折后第1、3、5、7、11、14、21、35、49天各时间点处死4只大鼠并取材(以骨折端为中心,完整保留外骨膜及骨痂的骨组织1 cm).
作者:董黎强;尹航;王昌兴;胡伟锋 刊期: 2014年第03期
肺癌是影响全球居民健康的主要恶性肿瘤,其发病率和死亡率呈现逐年上升趋势.肺癌如能早发现早治疗,治疗效果较理想;晚期的治疗效果差,死亡率高.目前对体检和未确诊者,大多作外周血肺癌相关指标的检查和影像学检查,其优点是简便易行,缺点是检出率偏低[1].本研究旨在探讨G蛋白信号调节因子17(RGS17)在肺癌中的临床应用.
作者:孙红岗;杨明峰;吴东东;卢韬;董学君;王兴木 刊期: 2014年第03期
目的 观察大鼠小肠移植排斥反应对肠道紧密连接蛋白表达的影响.方法 建立大鼠异位小肠移植模型,分为3组:假手术组、无排斥反应组和排斥反应组.通过大鼠活动状态及病理评分确定排斥反应程度.采用酶联免疫吸附试验(ELASA)法检测血浆中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-2的水平.透射电镜观察肠道紧密连接的超微结构改变.应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Westem blot法检测紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 排斥反应组随时间延长,病理评分增加[3 d:(32.67±2.34)分;5 d:(43.50 ±±2.07)分;7 d:(69.50±2.43)分],肠黏膜屏障功能损伤加重[DAO:3 d:(35.84±5.60)U/ml;5 d:(46.50±O.80) U/ml;7 d:(54.01±1.70) U/ml],TNF-α和IL-2大量释放,肠道紧密连接损伤严重,紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平降低.线性相关分析发现,病理评分、TNF-α、IL-2与紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达呈负相关(P<0.01).结论 大鼠小肠移植排斥反应可使肠道功能受损、紧密连接断裂、紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达水平降低,且其蛋白表达水平与排斥反应程度呈负相关.
作者:张文;宋红丽;杨洋;刘涛;沈中阳 刊期: 2014年第03期
目的 采用骨髓基质干细胞(BMSCs)复合包芯结构骨支架修复兔桡骨缺损.方法 成骨诱导培养3周的BMSCs与包芯结构骨支架复合构建细胞支架复合体(A组),BMSCs/聚乳酸羟基乙酸(PLGA)/β磷酸三钙(β-TCP)复合体(B组)、空白缺损(C组)作为对照.采用两因素随机区组设计植入36只兔(72侧)桡骨1.5 cm缺损部位,术后12、24、48周取材,进行相关分析.结果 大体观察、影像学、组织学检测示术后12周,A组骨缺损两断端骨性相连,24周A组支架内部大量新生骨生成,髓腔部分再通,48周A组髓腔再通,骨缺损完全修复,Lane-Sandhu评分示A组(5、8、12分)骨缺损修复效果明显好于B组(1、4、6分)、C组(0、0、1分)(P<0.05,n=4).结论 BMSCs/包芯结构骨支架复合体可修复兔桡骨1.5 cm缺损.
作者:王闯建;张春霖;吴学建;朱旭;李莹;严旭 刊期: 2014年第03期
我们通过检测二尖瓣置换术(传统手术比微创手术)患者围手术期肺功能变化,对比两种手术方式对肺功能的影响.一、资料和方法1.一般资料:2010年至2013年华中科技大学附属同济医院心脏大血管外科二尖瓣置换手术患者60例,其中传统开胸二尖瓣置换34例(传统组)及微创二尖瓣置换26例(微创组).2.检测指标:所有患者检查术前、术后1周、术后1个月肺功能.检测指标包括用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEVl)、大呼气流量(PER)、肺总量(TLC)下降、残气量(RV).
作者:杨小威;陈涛;潘铁成;李军;程才 刊期: 2014年第03期
目的 探讨术前影像学检查判定肾脏小肿瘤(SRMs)性质的临床价值.方法 分析武汉协和医院收治59例SRMs患者临床资料,比较术前各种影像学检查在SRMs诊断中的优势及价值.结果 彩色多普勒超声、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)及正电子发射显像(PET)/CT判定SRMs良恶性的准确率分别为93.22%、94.73%、95.00%及100%;敏感性分别为97.87%、83.33%、94.12%及100%;特异性分别为75.00%、96.07%、100%及100%.结论 术前影像学检查有助于提示SRMs的性质,CT及MRI两者价值相当,具有重要参考价值,超声可作为筛查SRMs的首选方法,PET/CT诊断价值高,但因价格高不作为常规检查.
作者:刘周强;李俊平;陈朝晖;赵军 刊期: 2014年第03期
目的 观察扩张皮肤移植后的变化,探讨扩张皮肤远期回缩的机制.方法 选用8条普通成年犬,在每条犬背部设计4个解剖部位相对应的皮瓣下置入扩张器,注水8周后行扩张器取出术,随机将8条犬分为4组,每组2只,在犬皮肤扩张移植时和移植后3、6周及3、6个月检测其组织学、电镜变化及α-平滑肌肌动蛋白(αt-SMA) mRNA和蛋白的表达.结果 表皮层和真皮层移植后6个月基本恢复正常;电镜下可见扩张后表皮细胞排列紧密,真皮层于扩张后成纤维细胞数量较多,功能活跃,真皮深层有肌成纤维细胞存在,其胞质内微丝明显.移植后3个月成纤维细胞功能恢复正常,胶原排列趋于整齐,肌成纤维细胞消失,组织学在3~6个月时恢复到对照组水平.α-SMA mRNA和蛋白水平的表达在3周后达到高,分别为1.204 ±0.011和1.533 ±0.012,3个月时明显降低为0.910±0.008和0.519±0.007,差异有统计学意义(P<0.05),α-SMA mRNA和蛋白水平变化趋势一致.结论 扩张皮肤的组织学变化在移植后6个月逐渐恢复正常,扩张皮肤远期回缩的机制可能与扩张皮肤内的肌成纤维细胞数量和功能状态有关.
作者:谢锋;张正文;马腾霄;侴海燕;李昊;康深松 刊期: 2014年第03期
目的 观察可溶性CD40配体(sCD40L)联合磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路特异性阻断剂LY294002对胃癌AGS细胞体外生长及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 将细胞分成对照组(仅加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液)、LY294002组(20 μmol/L)、sCD40L组(2 mg/L)和LY294002+ sCD40L组.噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖变化;流式细胞术观察细胞周期和凋亡变化;透射电镜检测细胞形态变化;Western blot检测细胞PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的变化.结果 与单独使用sCD40L或LY294002比较,sCD40L与LY294002联合应用后细胞生存率显著降低,LY294002组、sCD40L组及联合用药组细胞生存率分别为(65.72±3.19)%、(70.14±2.98)%、(41.25±2.74)%(P<0.05).LY294002及sCD40L单独作用胃癌AGS细胞48 h后均可使细胞周期分布发生明显改变,细胞周期阻滞于G1期,两者联合作用比单独用药周期阻滞明显增强(P<0.05).对照组、sCD40L组、LY294002组、联合用药组细胞凋亡率分别为(4.10±0.86)%、(4.23±0.74)%、(8.97±1.23)%、(29.32±2.37)%,与对照组比较,sCD40L组细胞没有明显的凋亡,LY294002组细胞有一定的凋亡,两者联合作用后细胞凋亡明显增多(P<0.05).与对照组比较,sCD40L促进PI3K、p-Akt蛋白表达升高;与LY294002联合作用后,PI3K 、p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 阻断PDK/Akt信号通路可显著增强sCD40L对人胃癌AGS细胞生长的抑制作用.
作者:汤美;陈建平;陈卫昌;李锐 刊期: 2014年第03期
内脏反位临床罕见,约8000~20000个存活新生儿中可发生1例[1],是一种特殊的解剖变异.2012年11月至2013年11月,我们收治了2例完全内脏反位合并胸外科疾病的患者,现报道如下.
作者:李向楠;潘雪;赵松;朱登彦;赵佳;张岩;黄祺 刊期: 2014年第03期
目的 探讨高迁移率族蛋白A1(HMGAl)表达与胸中段食管鳞癌患者预后的关系.方法 收集手术治疗189例胸中段食管癌患者临床资料,采用免疫组织化学法进行HMGA1检测,采用Kaplan-meier法进行生存分析、用Cox回归分析判定独立预后因素.结果 T1、T2和T3患者HMGA1表达率分别为54.5%、61.4%和78.5%(P<0.05);有、无淋巴结转移患者HMGA1表达率分别为82.7%和63.9% (P<0.01).T2患者中,有、无HMGA1蛋白表达者5年生存率分别为.34.3%和68.2% (P <0.05);T3患者中,有、无HMGA1蛋白表达组的5年生存率分别为25.3%和54.5% (P<0.05).无淋巴结转移(pN0)患者中,有、无HMGA1蛋白表达患者5年生存率分别为42.0%和66.7% (P <0.05);有淋巴结转移(pNl)患者中,有、无HMGA1蛋白表达患者5年生存率分别为14.9%和50.0% (P<0.05).结论 食管鳞癌不同的T、N分期中HMGA1蛋白表达存在差异;HMGA1蛋白过度表达者5年生存率降低;肿瘤浸润、淋巴结转移和HMGA1蛋白过度表达是独立的不利预后因素.
作者:李剑;孙智;宋亮;史墨;何晓鹏;刘曦;刘相燕 刊期: 2014年第03期