常伟龙；帅晓明；张鹏；马牧原；李伟；尹玉平；陶凯雄
骨肉瘤(OS)的转移需要新生血管的形成[1].恶性黑色素瘤细胞黏附分子(CD146、Mel-CAM、MUC18)、血管内皮生长因子(VEGF)是近年来研究比较多的肿瘤血管相关因子.我们采用免疫组织化学方法检测43例骨肉瘤患者CD146、VEGF的表达以及CD34标记的微血管密度(MVD),探讨它们与骨肉瘤血管生成间的关系.
作者：刘宇雷；郭中帅；杨力；胡彤宇；齐典文；扈文海；张国川 刊期： 2014年第03期
椎间盘突出症等椎间盘退变性疾病是当今社会的一种常见疾病,严重影响患者生活质量,造成巨大的社会、经济负担,越来越受到学界的关注和重视.组织工程技术修复椎间盘退变是近年来脊柱外科领域基础研究的热点,研究开发符合椎间盘结构与功能的移植物,对退变椎间盘进行功能重建,已成为治疗椎间盘退变性疾病比较理想的解决方案[1].本研究旨在设计构建1种新型组织工程椎间盘复合体,并分析其生物学性能,为利用组织工程技术修复退变椎间盘奠定实验基础.
作者：庄颖；陈建明；李长青；黄博；周跃 刊期： 2014年第03期
目的 探讨癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAMl)在胃癌中的表达与微血管生成的关系.方法 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测179例胃癌及40例癌旁非肿瘤胃组织中CEACAM1、CD34的表达.结果 CEACAM1在癌旁非肿瘤胃组织中并无阳性表达.174例胃腺癌标本均有CEACAM1表达,69.0％呈高表达,高、低表达CEACAMI标本中CD34-微血管密度(MVD)分别为(57.32±6.56)、(44.26 ±7.25)个/视野,两者差异有统计学意义(P＜0.05).CEACAM1高表达及CD34-MVD分别与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P＜0.05).结论 胃癌中CEACAM1的表达上调可能参与胃癌微血管生成,提高其侵袭和转移能力.
作者：陆海炳；王嘉玮；杨金虎；曹华祥；游庆军 刊期： 2014年第03期
目的 观察应用反义B7-1在大鼠肝移植术后对共刺激分子B7-1的影响及其抗排斥反应的作用.方法 建立DA→Lewis大鼠配对组合的原位肝移植(ROLT)急性排斥反应模型,随机分为2组.A组:注射生理盐水(1 ml)组,B组:pcDNA3B-B7-1(1 ml)转染组.每组均分为移植术后1、2、3、4、5d组及生存情况观察组6组(10只/组);Western blot检测B7-1蛋白的表达,按Banff系统确定排斥活动性指数(RAI),观察A组和B组大鼠的长期生存时间.结果 B组B7-1各时间点表达水平均较A组相应时间点降低(0.0253±0.0063比0.0366±0.0252;0.0583 ±0.0184比0.0875 ±0.025 1;0.0599±0.0135比0.1075 ±0.021 1;0.0622 ±0.0150比0.161 0±0.0165;0.0636±0.0179比0.257 1±0.025 1,P＜O.01).B组各时间点RAI均较A组相应时间点降低(1.4±0.5比2.0±0.7,P ＜0.05;1.9±0.6比2.7±0.7,P＜0.05;2.0±0.7比4.4±1.0,P＜0.01;2.3±0.7比6.3±0.9,P＜0.01;2.9±1.2比7.2±1.4,P＜0.01).B组大鼠的生存期较A组明显延长[(42.6±13.3)d比(8.6±2.3)d,P＜0.01].结论 应用反义B7-1可以降低移植肝组织中B7-1的表达,有效抑制急性排异反应.
作者：李蕊；翟慧；王飞；肖岩 刊期： 2014年第03期
目前已发现上百种微小RNA(miRNAs,miR)在胰腺癌组织中表达异常,其中miR-148a表达异常下调[1].本研究旨在观察去甲基化药物5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胰腺癌Bxpc-3细胞miR-148a表达、CpG岛甲基化状态以及细胞增殖的影响.
作者：肖卫东；胡伟；蔡军；熊海蔚；廖国良；李勇 刊期： 2014年第03期
目的 观察单克隆抗体CD44-生物素(Biotin)-亲和素(Avidin)绑定(CBA)技术,在体外构建的组织工程软骨移植修复猪膝关节负重区软骨缺损的效果.方法 分3组构建组织工程软骨:常规组:壳聚糖三维支架+软骨细胞;Biotin-Avidin绑定(BA)技术组:生物素+亲和素化壳聚糖三维支架+软骨细胞;CBA技术组:生物素化单抗CD44+亲和素化壳聚糖三维支架+软骨细胞.分4组修复猪膝关节负重区软骨全层缺损:A组植入常规组织工程软骨;B组植入BA技术构建的组织工程软骨;C组植入CBA技术构建的组织工程软骨;D组植入自体软骨.12周后取标本行大体观察并行Moran评分;生物力学方法评估标本弹性模量和刚度;Western blot检测新生软骨组织内的Ⅱ型胶原(colⅡ)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)目的蛋白含量;对标本行苏木素-伊红染色、甲苯胺蓝染色并行Wakitani评分.结果 Moran大体评分,D组为(4.48 ±0.23)分,与C组差异无统计学意义(P＞0.05),但优于A、B两组(P＜0.05);D组弹性模量为(20.61 ±±2.02) mPa,刚度为(72.28±6.16) N/mm、colⅡ及aggreean目的蛋白含量比值分别为1.59 ±0.14和1.44±0.13,均优于其他组(P＜0.05);组织学染色及Wakitani评分均显示D组修复效果较好.结论 BA绑定技术比常规接种方法所构建组织工程软骨对猪膝关节负重区软骨缺损修复效果好,但是比较而言,单克隆抗体CBA绑定技术所构建组织工程软骨修复效果更佳,虽仍未达到自体移植修复水平.
作者：林红；周健；王会仁；沈龙祥；郭常安；董健；陈峥嵘 刊期： 2014年第03期
目的 观察阿曼托双黄酮(AF)对匹罗卡品点燃小鼠癫痫发作、海马神经元的影响,并探讨其机制.方法 建立匹罗卡品小鼠点燃模型,并给予AF进行干预.综合应用神经电生理、病理学、分子生物学等技术,观察AF对点燃小鼠癫痫发作以及海马神经元的影响.结果 与癫痫组比较,AF组小鼠行为学和局部场电位信号(LFP)表现均相对稳定,海马CA1区存活神经元数目显著增加[(121.40 ±8.72)个,P＜0.05],原位末端转移酶标记(TUNEL)染色结果显示凋亡神经元数目减少[(1.70±0.98)个,P＜0.01],免疫组织化学(4 894.25±771.18)和Western blot结果(0.49±0.13)显示核因子-κB(NF-κB) p65表达明显降低(P＜0.01).结论 AF对小鼠癫痫模型具有明显的预防惊厥发生和神经保护作用,其作用机制与AF抑制癫痫发生时的脑内炎性反应有关.
作者：张震；孙涛；杨武；高攀；李子标；李杨；夏令宝；刘阳；王峰 刊期： 2014年第03期
目的 分离培养前列腺癌相关成纤维细胞(CAF)及正常成纤维细胞(NPF),探讨两者生物学差异.方法 用Percoll技术分离培养CAF及NPF细胞,用免疫荧光法检测上皮细胞标志物(Pan-CK),成纤维细胞标志物波形蛋白(Vimentin)和平滑肌细胞标志物平滑肌肌动蛋白(SMA);用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长能力;用软琼脂糖实验检测两种细胞诱导良性细胞BPH-1恶变.结果 CAF与NPF细胞形态相似,均高表达Vimentin,不表达Pan-CK,CAF细胞高表达SMA.CAF细胞生长速度快于NPF细胞,第4天吸光度值分别为0.98 ±0.07、0.74±0.04,P＜0.05;第6天吸光度值分别为2.06±0.13、1.59±0.14(P ＜0.05),且能诱导BPH-1恶性变.结论 CAF细胞高表达SMA,增殖能力强,能促进前列腺良性细胞恶性变.
作者：于胜强；王科；杨典东；王健涛；李光磊；高振利 刊期： 2014年第03期
目的 检测大肠腺癌中肺癌肿瘤抑制因子-1(TSLC-1)的表达及其基因的甲基化状态,探讨其临床意义.方法 用免疫组织化学Envision二步法检测大肠癌组织中TSLC-1蛋白的表达,分析其表达与临床病理参数和预后的相关性,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测TSLC-1基因的甲基化状态.结果 癌旁正常肠黏膜与大肠腺癌的TSCL-1表达阳性率分别为100％(20/20)和 41.51％ (22/53),差异有统计学意义(P＜0.05).大肠腺癌中,TSLC-1表达阴性组具有更高的淋巴结转移率和临床分期(P ＜0.05);TSLC-1表达阴性组的平均生存时间为32.22个月,明显低于TSLC-1表达阳性组(平均生存时间为47.55个月,P＜0.05);TSLC-1表达阴性组中TSLC-1基因的甲基化检出率为41.94％(13/31),明显高于TSLC-1表达阳性组[9.09％(2/22)]及癌旁正常黏膜组[5.00％ (1/20),P＜0.05].结论 TSLC-1在大肠腺癌中表达下降,对预后的判断具有重要的参考价值,其基因的甲基化可能是大肠腺癌TSLC-1表达下调的重要机制.
作者：刘剑；顾栋桦 刊期： 2014年第03期
目的 构建乏氧/辐射双敏感启动子(HRE/Egrl)介导Smac的表达载体,观察其在人肺腺癌A549细胞中常氧和乏氧条件下的表达特点和在乏氧条件下的增殖抑制作用.方法 成功构建表达质粒pcDNA3.l-Egrl-Smac和pcDNA3.1-HRE/Egrl-Smac后转染A549细胞,分别采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Smac mRNA和蛋白表达;应用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞的增殖变化.结果 常氧条件下,与对照组比较,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射能显著增加A549细胞中Smac mRNA表达(P＜0.05),且乏氧能显著增加这种效应(P＜0.05);同时,Smac蛋白表达规律与mRNA表达规律相似.常氧和乏氧条件下,2 Gy照射和转染质粒后进行2 Gy照射细胞均较相同时间点对照组细胞增殖水平显著降低(P＜0.05);而且乏氧各组较常氧各组细胞增殖水平显著降低(P＜0.05).结论 乏氧和辐射均能诱导A549细胞中Smac表达增加,且联合2 Gy照射能显著抑制乏氧条件下A549细胞的增殖能力.
作者：李长锋；金景鹏；刘大海；张斌 刊期： 2014年第03期
目的 观察人胃癌组织中分离培养的间充质干细胞(hGC-MSCs)对胃癌细胞株SGC-7901增殖与侵袭能力的影响.方法 提取hGC-MSCs条件培养液(MSC-CM),用不同浓度(20％、40％、60％)的MSC-CM作用于SGC-7901细胞,噻唑蓝(MTT)法及Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力;实时聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot和细胞免疫化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶(MMP)-9在各组细胞中的表达.结果 MTT法证实MSC-CM对SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P＜0.05),抑制率与MSC-CM的浓度和作用时间呈正比.Transwell侵袭实验表明,经MSC-CM处理后,对照组及20％、40％、60％ MSC-CM组穿膜细胞数分别为(75.71±7.32)、(63.68 ±7.12)、(54.29 ±6.97)和(41.36±3.29)个,随MSC-CM浓度升高,细胞侵袭能力明显下降(P＜0.05).Real-time PCR结果证实MSC-CM能明显下调PCNA和MMP-9的表达(P＜0.01).Western blot检测20％、40％、60％ MSC-CM组PCNA表达分别为对照组的(73.99 ±16.71)％、(51.56±12.18)％和(40.11±9.37)％,MMP-9表达分别为对照组的(74.35±19.12)％、(53.59 ±10.41)％和(29.58±7.93)％,细胞免疫化学结果显示PCNA在对照组、20％、40％、60％ MSC-CM组中的平均吸光度值分别为0.201 ±0.049、0.185 ±0.031、0.154±0.019和0.128 ±0.012,MMP-9在4组中的平均吸光度值分别为0.182±0.032、0.164±0.028、0.136±0.017和0.098±0.008,各组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HGC-MSCs能抑制SGC-7901细胞的增殖及侵袭能力,其机制可能与下调PCNA和MMP-9的表达有关.
作者：王凯；李玉明；张明凯；姜吉祥；苏庆亮 刊期： 2014年第03期
B细胞淋巴瘤/白血病-2/腺病毒E1B 19000相互作用蛋白3(BNIP3)是一种能和腺病毒E1B 19000蛋白相互作用的线粒体促凋亡蛋白.随着对BNIP3基因靶向治疗研究的深入,近年还发现其诱导细胞自噬的作用.BNIP3相关的凋亡与自噬可能导致肿瘤细胞截然不同的结果.现对两者的机制及相互关系做一综述.
作者：马钊；陈传贵；于振涛 刊期： 2014年第03期
目的 观察铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝菌毛株(PA-MSHA)对膀胱癌细胞株的作用,探讨其作用机制.方法 使用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测肿瘤细胞的增殖,荧光染色法检测细胞凋亡形态,分光光度法检测凋亡因子半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-2和Caspase-9的水平.结果 磷酸盐缓冲液(PBS)组作用T24和5637细胞A450值分别为1.31和1.62,PA-MSHA组A450值分别为0.28和0.41,两组差异有统计学意义(P＜0.05);PA-MSHA处理后的膀胱癌细胞出现凋亡小体;PA-MSHA能够活化T24和5637细胞中Caspase-3及Caspase-9蛋白,与PBS组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PA-MSHA可以抑制T24和5637细胞增殖,并诱导凋亡.
作者：李劲然；丛乐乐；杜珍武；孙然；张乐宁 刊期： 2014年第03期
目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化代表的mTOR通路激活在Ⅰ期肺腺癌中与临床指标及预后的关系.方法 应用组织微阵列和免疫组织化学方法检测222例Ⅰ期肺腺癌中磷酸化mTOR蛋白,并与临床指标和生存率进行统计学分析.结果 mTOR通路在55％(122/222例)的肺腺癌标本中呈激活状态,其与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤分化等临床指标间无明显相关.生存分析显示,肿瘤中mTOR通路激活的患者预后好(P＜0.05).结论 mTOR通路的激活是Ⅰ期肺腺癌中的普遍事件,且患者预后较好.
作者：杨帆；陈克终；姜冠潮；王俊 刊期： 2014年第03期
尽管目前对于腰椎滑脱是否应当解剖复位还存在争议,但多数脊柱外科医师都认同腰椎滑脱的解剖复位对患者远期疗效更佳这一观点[1].我们在腰椎滑脱模型上通过设定唯一可变量方式手术模观察内固定使用对腰椎滑脱复位的影响.
作者：黄志海；徐跃根；胡安全；陆永强；杨亚东 刊期： 2014年第03期
近年来,随着实验研究的进展,结直肠外科医生对大肠癌、炎性肠病(IBD)、结直肠息肉、微创外科等专业领域的认识提升到一个新的阶段.目前,结直肠癌发生的遗传证据逐渐被揭示,遗传不稳定机制得以阐释,表观遗传学研究不断进展,肠癌干细胞的实验依据不断积累;IBD发病相关的遗传及屏障机制逐渐完善,炎症相关大肠癌的认识逐步深入;结直肠息肉的恶变风险及机制日渐得到认识,防治手段得以进步;微创外科技术不断得以推广,在保证治疗效果的同时减少了创伤,提高了患者生活质量.现对相关实验研究进展做一简要回顾与展望.
作者：王存；周总光 刊期： 2014年第03期
目的 观察大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)模型基底动脉蛋白酶激活受体1(PARl)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的变化,探讨PAR1、TNF-α与脑血管痉挛(CVS)之间的关系.方法 采用枕大池二次注血的方法,建立大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型.实验动物分组:正常组、SAH 3 d组、SAH 5 d组、SAH 7 d组.模型制作成功后灌杀大鼠,取基底动脉标本行组织学检查,计算机软件测量各组大鼠模型脑基底动脉内腔横截面积;免疫组织化学检测各组大鼠模型基底动脉PAR-1、TNF-α表达水平.结果 SAH各时间组模型大鼠基底动脉横截面积较正常组小,随着时间变化痉挛严重程度不同,同时SAH 3 d组、SAH 5 d组及SAH 7 d组基底动脉PAR1与TNF-α表达也呈逐渐增强趋势,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)通过枕大池二次注血法成功建立大鼠SAH模型,基底动脉存在CVS,表现为管壁显著增厚,管腔显著狭窄,该模型可用于对SAH后脑血管疾病的研究平台;(2)经免疫组织化学检测,大鼠模型痉挛的血管壁有PAR1及TNF-α表达上调,并与CVS呈正相关.
作者：李钢；王青松；林婷婷 刊期： 2014年第03期
目的 观察应用高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液(HH40)行血液稀释对胃癌根治术患者血流动力学、血电解质及体液平衡的影响.方法 选取全麻下行胃癌根治术患者60例,随机分为高渗氯化钠羟乙基淀粉组(Ⅰ组)和生理盐水组(Ⅱ组),各30例.在手术进腹后达到麻醉深度稳定[脑双频指数(BIS)在55 ～65]时,分别给予HH40和生理盐水4 mL/kg行血液稀释,25 ～ 30 min输完.术中维持BIS为55 ～ 65.应用FloTrac/Vigileo (FV)心排血量监测系统监测心输出量(C0)、每搏输出量(SV)、每搏变异度(SVV)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)和中心静脉压(CVP)等血流动力学参数,分别在人室后30 min(麻醉前基础值,T0)、血液稀释前(T1)、血液稀释后即时(T2)、稀释后30 min(T3)、稀释后60 min(T4)及稀释后120 min(T5)记录各项指标.经桡动脉采取血样测定T1、T2、T3、T4及T5时点患者的血钾及血钠浓度.统计总输液量、尿量、出血量及使用麻黄碱例次,观察有无出现过敏或肺水肿征象.结果 Ⅰ组在行血液稀释后(T2)MAP、CO、SV较血液稀释前(T1)明显升高,较对照组也显著升高(P＜0.01).Ⅰ组在输注HH40 30 min后(T3)SVV值较Ⅱ组明显降低(P＜0.05).Ⅰ组的血钠浓度在血液稀释后较前升高,与Ⅱ组比较亦较高(P＜0.05),但尚在正常范围,120 min后(T5)与Ⅱ组比较差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅰ组的尿量较Ⅱ组明显增加(P＜0.05).结论 术中以HH40行血液稀释能有效维持患者的血流动力学稳定,在不增加输液量的情况下增加了肾脏灌注使患者尿量明显增加,对肾功能有保护作用.
作者：胡毅平；孙达良 刊期： 2014年第03期
我们应用激光共聚焦显微镜观察硫化氢(H2S)对心肌细胞缺氧后细胞内Ca2+荧光强度的影响,现报道如下.一、材料与方法1.实验动物及分组:雄性SD大鼠(220～250 g)由河北省实验动物中心提供.大鼠随机分为5组,每组8只:(1)正常组;(2)缺氧组;(3)缺氧+硫氢化钠(NaHS) 100 μmol/L组;(4)缺氧+NaHS 200 μmol/L组;(5)缺氧+NaHS400 μmol/L组.参照文献[1]获得心肌细胞悬液.缺氧3h后缺氧4组心肌细胞分别置于NaHS终质量浓度为0、100、200、400μmol/L的充满95％N2的KB液.
作者：刘芳；刘广杰；张建新；李兰芳 刊期： 2014年第03期
目的 探讨协同刺激分子B7-H1、B7-H4和转录因子叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)在胃癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学染色法检测B7-H1、B7-H4和Foxp3在100例胃癌组织及癌旁组织中的表达,分析B7-H1、B7-H4和Foxp3的表达与临床病理参数的关系.结果 B7-H1、B7-H4在胃癌组织中高表达,阳性表达率分别为65.0％和71.0％,其表达水平与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,差异有统计学意义(P＜0.05).Foxp3+调节性T细胞(Treg)在胃癌组织中高表达,并与淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P＜0.05).B7-H1、B7-H4的表达水平和Foxp3+ Treg细胞数量呈正相关,相关系数分别为:r=0.437,P＜0.05;r=0.456,P＜0.05.B7-H1、B7-H4及Foxp3高表达患者的预后差于低表达者(P＜0.05).结论 B7-H1、B7-H4和Foxp3+ Treg细胞在胃癌组织中高表达,并与胃癌患者淋巴结转移和预后有关.
作者：鲁常青；李青；王辉；耿一婷；田波；谢军；谈炎；吴昌平 刊期： 2014年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
