微量法检测指血氟和血清氟的分析评价

中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第四次全国学术会议(第一轮通知)

作者： 刊期： 2002年第01期

景天类植物延缓皮肤衰老的实验研究

为了研究景天类植物提取物对延缓皮肤衰老作用,采用自身配对设计,在6和15月龄豚鼠背部皮肤涂抹0.5%的景天类植物提取物共30天.通过组织学观察及生化方法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及真皮胶原含量.结果表明,涂抹景天类植物提取物的皮肤真皮成纤维细胞明显增多且活跃.皮肤组织SOD及GSH-Px活性增高,真皮酸溶性胶原中羟脯氨酸含量增加,脂质过氧化产物MDA含量减少.提示景天类植物提取物具有良好的延缓皮肤衰老的作用.

作者：关英杰；金锡鹏；魏少敏；林惠芬；沈光祖 刊期： 2002年第01期

钙缺乏对大鼠骨骼发育的影响及其机制探讨

在建立钙缺乏动物模型的基础上,利用骨形态计量学方法观察缺钙对生长期大鼠骨骼发育的影响,并通过测定血清有关激素的变化探讨其机制.组织形态学显示缺钙大鼠骨形成量减少,矿化能力降低,空间结构破坏;同时钙缺乏大鼠骨矿物质含量和骨密度均显著降低,血清甲状旁腺激素水平明显增高,降钙素水平显著降低;骨组织羟脯氨酸含量降低.提示钙缺乏通过影响骨骼矿物质含量、激素分泌以及有机质形成,使骨形态结构发生异常改变,终导致骨骼发育障碍.

作者：洪燕；程义勇；张月红；王冬兰；李树田 刊期： 2002年第01期

赭曲霉毒素A的酶联免疫检测——Ⅰ.抗原的制备

采用活性酯法制备赭曲霉毒素A(OTA)的全抗原,并以正交试验L9(34)来选择活性酯法的佳条件.通过对实验结果的统计分析得出,当OTA与牛血清白蛋白(BSA)的摩尔比为20∶1,OTA∶N-羟基琥珀酰胺∶N',N-二环乙基碳化亚胺的摩尔比为1∶2∶4,OTA的活化时间为60min,偶联时间在90min的情况下,OTA与BSA的连接比可达9.64,OTA的利用率可达48.2%.

作者：陈雪岚；许杨；吴成钢 刊期： 2002年第01期

蛋白A-绿色荧光蛋白融合蛋白的构建与表达

绿色荧光蛋白(GFP)是一种生物发光蛋白.GFP作为基因表达标记物或融合蛋白标记在动物、植物、微生物的研究中广泛应用.本实验将gfp基因与蛋白A基因重组,在大肠杆菌中融合表达为A-GFP蛋白.根据gfp基因与质粒载体pRIT2T的序列,设计一对引物,以PCR技术扩增gfp基因序列,克隆到表达载体pRIT2T的EcoR Ⅰ与BamH Ⅰ酶切位点,与载体中的A蛋白基因融合.重组质粒转化大肠杆菌Top10,菌落在365 nm紫外光下呈现明亮的绿色荧光.本研究成功构建并表达了GFP与蛋白A的重组质粒,为开展GFP的研究及应用提供了生物工程工具的前体.

作者：赵志晶；刘秀梅 刊期： 2002年第01期

转基因食品安全性检验的核酸检测技术研究

以国际市场上转基因食品的主流产品转基因大豆及玉米和我国生产的转基因辣椒为材料,以PCR方法为基础,研究适用于转基因食品安全性检验的核酸检测技术.针对抗除草剂(孟山都公司)GM-大豆,转Bt-176玉米(Novartis/Ciba-Geigy公司)及转抗菌肽辣椒(华农)产品的插入基因及调控序列设计不同引物进行PCR检测.建立了转基因大豆、玉米、辣椒的鉴别和相关标记基因、目的基因检测的技术,该方法简便快速,检测结果与标准及申报材料相符.

作者：邓平建；赵锦；刘建军；房师松；何雅青；黄自然 刊期： 2002年第01期

同型半胱氨酸对大鼠器官形成早期卵黄囊内吞功能的影响

应用显微解剖和移植术,初步建立了9.5日龄大鼠卵黄囊(VYS)胎盘体外培养模型,并观察了同型半胱氨酸(HCY)对VYS内吞功能及生长发育的影响.结果显示:HCY可抑制VYS的内吞功能,实验组与对照组相比内吞指数明显下降(P<0.01);HCY还可抑制VYS生长及其血管形成,实验组的VYS直径明显小于对照组(P<0.01).结果提示: VYS对胎盘内吞功能的损伤及对其血管形成分化的抑制作用,可能是HCY主要致畸机理之一.

作者：赵如冰；李勇；陈星；赵智榕 刊期： 2002年第01期

对苯二甲酸诱导大鼠膀胱结石与膀胱癌的研究

为研究对苯二甲酸致癌活性及可能的致癌机理,对SD大鼠连续喂饲对苯二甲酸5000、500、50 mg/kg染毒90天,对照组给予正常饲料.结果显示,5000、500 mg/kg剂量组分别发生10例(10/17)和2例(2/18)膀胱结石,5000 mg/kg组雄性大鼠结石发生比例明显高于雌性,其它组未发生结石.5000 mg/kg组发生4例膀胱移行细胞癌(4/17)、5例不典型增生(5/17)和7例单纯增生(7/17);500 mg/kg组有10例不典型增生(10/18)、5例单纯增生(5/18);50 mg/kg组有10例单纯增生(10/17);对照组仅发生1例单纯增生(1/18),病变情况与染毒剂量呈明显等级正相关(Rs=0.69),但与结石的关系不明显.未发生结石的大鼠也发生上述病理改变,高剂量组发生1例膀胱白斑和1例鳞状上皮化生,未见鳞癌.研究提示在本次实验条件下,对苯二甲酸或其代谢产物对SD大鼠可能具有致癌性,结石的机械刺激在肿瘤的发生过程中并非起主要作用.

作者：漆少廷；王心如；徐锡坤；向全永；许娟华；汪建平 刊期： 2002年第01期

绿豆芽的富铬效果及影响因素研究

采用三氯化铬为铬源培养富铬绿豆芽,观察不同浓度和不同培养方法对豆芽生长及含铬量的影响.结果表明,用40mg/kg的铬溶液一次性浸种24h,25℃发芽5天获得富铬豆芽,其铬含量为普通绿豆芽的100倍.用200～320nm波长范围对普通绿豆芽及富铬绿豆芽进行紫外扫描,发现其在257nm处有一特征吸收峰,且随着富铬绿豆芽铬含量的增加,其吸光度值却呈下降趋势.

作者：王盛良；黄杰；黄薇；孙桂菊 刊期： 2002年第01期

乳杆菌抑制黄曲霉孢子萌发的研究

为探讨乳杆菌抑制黄曲霉孢子萌发的可能机制,在乳杆菌培养液、乳杆菌培养液的上清液和乳杆菌的细胞悬浮液中接种一定量的黄曲霉孢子,每隔4 h分别取少量液体在PDA平板上进行霉菌计数,直到30 h.28℃培养72 h后计数萌发的霉菌孢子.结果表明:只有乳杆菌培养液组对黄曲霉孢子萌发有显著的抑制作用,说明乳杆菌抑制黄曲霉孢子萌发的可能机制是低 pH值,乳杆菌的代谢产物与微生物间竞争多因素协同作用的结果.

作者：徐进；冉陆；杨宝兰；李志刚；罗雪云 刊期： 2002年第01期

婴儿自母乳中摄入有机氯农药量的估算

于1982～1998年对北京市母乳中的有机氯农药(DDT、BHC)含量进行检测并对婴儿自母乳中有机氯农药摄入量进行估算分析.结果表明,北京市自1983年停用DDT、BHC农药以来,母乳中有机氯农药量呈现明显下降趋势,1998年城区婴儿每日自母乳中摄入的DDT、BHC平均含量已低于联合国粮农组织和世界卫生组织1989年公布的婴儿高可受摄入量.

作者：于慧芳；张晓鸣；赵旭东；朱志琴 刊期： 2002年第01期

类风湿伴肺间质改变患者血中Ⅲ型前胶原变化的研究

用放免法检测30例类风湿关节炎伴或不伴肺间质病变的患者血中Ⅲ型前胶原含量,并以15例正常人为对照.结果显示,类风湿关节炎患者,血中Ⅲ型前胶原明显高于正常对照组,且类风湿关节炎伴肺间质改变患者的血中Ⅲ型前胶原含量也高于类风湿关节炎无肺间质改变者.提示,类风湿关节炎患者易合并肺间质病变,且Ⅲ型前胶原水平变化对反映其是否合并肺间质病变具有一定敏感性.

作者：徐波 刊期： 2002年第01期

甲基汞对脑神经胶质细胞凋亡及c-fos表达的影响

为探讨氯化甲基汞(MMC)所致脑发育损伤及其与c-fos表达的关系,采用光镜、电镜等形态学方法,观察了MMC对体外培养的大鼠脑神经胶质细胞的损害作用,并应用免疫细胞化学方法(SP法)观察MMC对培养神经胶质细胞c-fos 表达的影响.结果表明,体外培养的胶质细胞接触MMC后,出现胞浆浓缩、轴突回缩、染色质边聚、固缩等现象,呈凋亡的典型形态.MMC 0.02 mmol/L作用于神经胶质细胞10 min后,c-Fos蛋白阳性细胞百分率随其后的培养时间而变化:c-Fos蛋白阳性细胞率0.5 h开始增高,2 h达高峰,4～6 h又逐渐减少.MMC 0.00125、0.005、0.02、0.08和0.32mmol/L作用10 min后,0.32 mmol/L组的阳性率显著高于除0.08 mmol/L组外的其他各组(P<0.01).提示MMC可诱导体外培养大鼠脑神经胶质细胞c-fos表达,并诱发其凋亡.MMC诱发神经细胞凋亡可能与c-fos介导有关.

作者：郭丽；毕晓颖；李志超；张春霞；凌翎；陈强 刊期： 2002年第01期

高效液相色谱法测定果冻中人工合成色素

采用色谱条件在可见光波长436nm下,不用梯度洗脱,以0.02mol/L乙酸铵∶甲醇(80∶20)固定配比为流动相,快速测定果冻中柠檬黄、胭脂红、日落黄三种人工合成色素,样品处理简便快速,测定不受紫外有吸收物质的干扰.方法相对标准偏差,柠檬黄0.09%,胭脂红0.11%,日落黄0.25%,添加标准回收率柠檬黄94.4%～96.4%,胭脂红为92.3%～94.4%,日落黄为92.0%～93.3%.本法与国标方法比较,经配对t检验(P>0.05)无显著性差异.

作者：唐岩；张卫平；张廷雨 刊期： 2002年第01期

烹调油油烟的潜在致癌性实验研究

为了研究烹调油油烟冷凝物对人体潜在的致癌危险性.以人胚肺二倍体细胞株建立人类细胞体外转化系统,将烹调油烟冷凝物作为受试物加入培养液中与细胞共培养,观察细胞转化情况,并对转化细胞的生物学性状检测和鉴定.结果表明试验剂量范围内的烹调油烟冷凝物均能诱导细胞转化,且剂量-反应关系明显(r=0.9811),转化细胞表现出失去接触抑制性、饱和密度增大、血清需求降低、ConA凝集能力增强、染色体异倍化和锚着依赖性丧失等多种与肿瘤形成相关的表型改变.提示烹调油烟冷凝物具有诱导人胚肺细胞KMB-17恶性转化的作用,对人体具有潜在致癌危险性.

作者：赵金明；宿飞；周少琴 刊期： 2002年第01期

食品中大肠杆菌O157∶H7快速分离培养方法的研究

为检测食品中大肠杆菌O157∶H7,本研究通过优化培养基成份和筛选选择性抑菌物质设计了一种选择性分离鉴别培养基,CTV-MUG-RSMAC琼脂.使用该培养基不仅可有效抑制杂菌的生长,还能同时鉴定大肠杆菌O157∶H7的三种主要生化特征--不发酵山梨醇、不发醇鼠李糖、不分解MUG,可避免漏检发酵山梨醇的大肠杆菌O157∶H7变异株.样品用选择性增菌肉汤42℃培养过夜后,在CTV-MUG-RSMAC平板上划线接种,37℃培养24小时,挑选特征菌落做O157、H7抗血清凝集试验和肠杆菌科主要生化试验,整个程序可在3天内完成.检测了126份食品样品,结果检出3份阳性,与用FDA方法的检测结果一致.

作者：王静；邱茂锋；林修光 刊期： 2002年第01期

高效液相色谱法测定某些食品中糖精钠、苯甲酸、山梨酸等预处理方法的探讨

高效液相色谱法已广泛应用于食品分析领域,有许多食品营养成分、添加剂、农药残留等的液相分析方法已定为国家标准分析方法[1].但我们在利用液相色谱按国标方法分析样品时,经常会遇到这样的问题:许多样品的预处理方法没有详细的介绍,而参照其他样品的预处理方法处理的样品进样后常会出现柱压力升高、干扰物质与被测物质不能达到基线分离等问题,如在测定冰糕、乳及乳制品、肉制品等中的糖精钠、苯甲酸、山梨酸时.近年来,我们参考有关文献[2,3],通过大量实验摸索出了这几类样品的预处理方法,并应用于实际工作中,取得了满意的结果,现介绍如下,以供分析者参考.

作者：殷茂荣；张存玲；王勤 刊期： 2002年第01期

氯对甲型肝炎病毒抗原性及核酸多态性影响的研究

为了探讨氯灭活甲型肝炎病毒(HAV) 的机制,采用酶联免疫吸附试验和RNA的随机引物扩增指纹图谱技术分别检测在氯灭活HAV前后病毒抗原以及核酸多态性的变化.结果显示:灭活病毒的感染性(加氯10mg/L或20mg/L接触30min)先于破坏病毒的抗原性(加氯10mg /L或20mg/L接触60min),当病毒感染性被灭活时,往往可以看到病毒核酸多态性的变化.结果表明:氯灭活HAV可能是通过破坏核酸局部片段所致.

作者：辛忠涛；李君文；王新为；刘玮；初广运 刊期： 2002年第01期

三种血液胆碱酯酶测定方法的比较

同时采用Ellman法、纸片法及便携式胆碱酯酶测定仪(Biocheck)对95份有机磷中毒患者以及正常人群血液样品的胆碱酯酶活性进行测定,比较Biocheck法与另外2种方法测定的结果,以验证Biocheck法的可靠性.结果显示,Biocheck测定的血液胆碱酯酶活性结果与传统的改良Ellman法以及纸片法的结果具有显著相关性.提示这种操作简单、快速的方法可用于急性有机磷及氨基甲酸酯类农药急性中毒的临床诊断.

作者：王玉萍；王绪玲；李慧；张巡淼；何凤生 刊期： 2002年第01期

膳食脂肪含量对乐果致雄性大鼠生殖毒性的影响

为观察膳食脂肪含量对乐果致雄性大鼠生殖毒性的影响,将32只断乳SD大鼠随机分成三个染毒组和一个对照组,染毒组灌喂乐果12.50mg/(kg*d),并分别饲以高脂、中脂和低脂饲料;对照组每天灌喂生理盐水,同时饲以中脂饲料.各组均连续灌喂60天.结果发现:(1)高脂或低脂饲料可明显减轻乐果对血清睾酮(To)和间质细胞刺激素(LH)水平的影响,而对血清卵泡刺激素(FSH)水平的变化没有明显作用;(2)低脂饲料可明显减轻乐果对大鼠睾丸酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性的抑制,而对睾丸碱性磷酸酶(ALP)活性降低没有明显影响;(3)高脂或低脂饲料可减轻乐果对睾丸组织的损伤.以上结果提示在饲料中添加或减少脂肪含量可能会在相同或不同环节上不同程度地减轻乐果对雄性大鼠生殖系统的损害.

作者：李敏；沈志雷；王炳森；郭俊生 刊期： 2002年第01期