学术投稿

慢病毒介导的shRNA对大鼠脑纹状体GCDH蛋白的沉默效应研究

付溪;高洪杰;娄丽萍;高金枝;张文迪;罗小平

关键词:GCDH, 慢病毒载体, 脑立体定位注射, 纹状体
摘要:目的:利用已成功构建的慢病毒载体,检测慢病毒介导的GCDH基因沉默对大鼠脑纹状体GCDH蛋白表达下调的能力。方法:30只健康雄性刚断乳3~4周SD大鼠随机分为绿色荧光蛋白(GFP)对照病毒注射组(对照组)和GCDH慢病毒注射组(GCDH组)各15只。各组分别在脑立体定位仪下定位纹状体组织后单侧给予GFP对照病毒2μL和GCDH慢病毒原液2μL。注射后14 d及1、3月,分别处死大鼠,并取注射区域的脑纹状体组织蛋白质通过Western blot及石蜡切片免疫组化法检测大鼠纹状体GCDH蛋白表达水平,同时测定肝肾功能、血清有机酸及Rotarod行为学。结果:GCDH慢病毒注射14 d及1、3月后,GCDH组可检测到注射区域GCDH蛋白在脑纹状体区域表达有明显降低,同对照组比较差异有统计学意义(<0.05),2组肝肾功能、血清有机酸及行为学未发现明显差异。结论:成功注射GCDH慢病毒到刚断乳3~4周SD大鼠脑纹状体,并在注射后不同时间均检测到GCDH蛋白的表达稳定下调。
神经损伤与功能重建杂志相关文献
  • 神经梅毒的临床特征分析

    目的:探讨神经梅毒的临床特征及早期诊断依据。方法:回顾性分析2010年5月至2013年1月收治的10例神经梅毒患者的临床资料。结果:本组神经梅毒患者首发症状为痴呆3例、脊髓痨3例、脑梗死1例、脑膜炎1例、帕金森综合征1例和癫痫1例。10例患者的血浆梅毒螺旋体血凝试验(TPPA)及快速血浆反应素试验(RPR)均呈阳性。腰穿脑脊液压力均正常,脑脊液蛋白增高9例,白细胞增高(以淋巴细胞为主)4例。脑脊液TPPA阳性8例,RPR阳性5例。头颅MRI显示不同程度的脑萎缩,部分患者脑内或脊髓多发散在长T1长T2信号。驱梅治疗后大部分患者症状明显改善。结论:结合临床表现、实验室及影像学检查有助于神经梅毒的早期诊断,早期治疗可明显改善预后。

    作者:徐志鹏;黎红华;陈文军;武强;林琅 刊期: 2014年第01期

  • 巨噬细胞参与颅内动脉瘤发病机制的研究进展

    颅内动脉瘤是颅内动脉壁病理性局限性扩张产生的瘤样突起,是造成自发性蛛网膜下腔出血的常见原因。在我国脑血管意外中,仅次于脑缺血性疾病和高血压脑出血。确切的颅内动脉瘤发病率目前尚属未知。颅内动脉瘤的发病机制目前并无定论,通常认为是由遗传因素、血流动力异常以及后天退行性变等多种因素综合作用的结果,其中血流动力学异常引起的剪切力和炎症被认为是颅内动脉瘤病理生理过程的关键因素。研究证实,动脉瘤壁中的炎性细胞浸润主要有单核巨噬细胞,且可以分泌多种炎性因子以及活性物质,削弱或者破坏动脉瘤壁。本文对巨噬细胞的浸润、巨噬细胞分泌的炎症因子及巨噬细胞的趋化因子在颅内动脉瘤发病机制中的作用作一综述。

    作者:梅其勇;白如林;黄承光;孙克华;侯立军 刊期: 2014年第01期

  • 《神经损伤与功能重建》杂志撰稿要求

    作者:《神经损伤与功能重建》编辑部 刊期: 2014年第01期

  • 慢性进行性眼外肌瘫痪1例报告并文献学习

    慢性进行性眼外肌瘫痪(chronic progressive extemal ophthalmoplegia ,CPEO)是一种以慢性进行性眼睑下垂及眼球活动障碍,特别是上转障碍为特征的线粒体肌病[1]。部分患者可有咽部肌肉和四肢无力,而且对新斯的明试验不敏感。本文报告1例如下。

    作者:肖君;陈博;田代实 刊期: 2014年第01期

  • 桥脑梗死的研究进展

    桥脑梗死是严重危害人类健康及生活的疾病,具有较高的致残率、致死率。本文对桥脑梗死的病因、危险因素、临床特点和影像学进展做一综述。

    作者:尼沙古丽·吐尔逊;朱沂 刊期: 2014年第01期

  • 早期高压氧联合依达拉奉治疗对重型颅脑外伤患者IL-6及TNF-α的影响

    目的:研究早期高压氧联合依达拉奉治疗对重型颅脑外伤患者IL-6及TNF-α的影响,并观察治疗效果。方法:随机选取符合标准的急性重度颅脑外伤患者60例,随机分为对照组和治疗组,各30例,同时选取健康体检者30例为正常组;对照组和治疗组均给予脑外伤常规治疗,治疗组早期加用高压氧及依达拉奉治疗28 d。于伤后第1、4、14天检测各组血IL-6及TNF-α水平;伤后3个月采用格拉斯哥预后量表(GOS)评价患者预后。结果:治疗前,对照组及治疗组的TNF-α及IL-6水平均显著高于正常组(<0.01);治疗后第4、14天,治疗组的TNF-α及IL-6水平均低于对照组(<0.05);治疗后3个月,治疗组预后良好率高于对照组(<0.05)。结论:高压氧联合依达拉奉治疗能有效降低颅脑外伤患者血清IL-6及TNF-α水平,改善患者预后。

    作者:封林森;马建华;印佳;李晓兴 刊期: 2014年第01期

  • 以急腹症为首发症状的脑梗死1例

    1临床资料患者,男,65岁,因“腹痛、胸闷1d,加重伴头晕7h”入住我院急诊科。高血压病史1年余,血压高达180/120mmHg(1mmHg=0.133kPa),5年前曾患“脑梗死”未留后遗症。入院查体:体温36.2℃,血压150/91mmHg,神志清楚,痛苦病容,双侧瞳孔等大等圆,对光反射灵敏,双下肺呼吸音减低,双肺可闻及少量湿性啰音,心脏查体正常。腹稍胀,肠鸣音活跃,上腹压痛,无反跳痛,未及包块,肝脾肋下未及,双肾区无叩压痛,双下肢不肿,四肢肌力V级,病理征未引出。

    作者:张正洪;阎平建;刘建光;胡博;佟德华;周青珍;王峥;何宏生 刊期: 2014年第01期

  • 磁共振成像在多系统萎缩诊断与鉴别诊断中的应用价值

    目的:探讨磁共振成像(MRI)在诊断多系统萎缩(MSA)及鉴别MSA与帕金森病(PD)中的应用价值。方法:对26例MSA患者(MSA组)、20例PD患者(PD组)及18例健康对照者(对照组)进行MRI检查,观察脑实质萎缩、脑桥十字征、壳核外侧缘裂隙征、MCP高信号、壳核低信号,并测量所有受试者的MCP宽度。结果:所有MSA患者均可见不同程度的小脑、脑桥、延髓、壳核萎缩,四脑室及桥延池扩大,其中15例(57.7%)可见脑桥十字征,6例(23.1%)可见T2像轴位MCP高信号,8例(30.8%)可见裂隙征,4例(15.4%)可见T2像壳核低信号。MSA组MCP宽度(6.4±1.4)mm明显小于PD组(9.2±1.1)mm与对照组(9.4±0.8)mm(均<0.01),PD组MCP宽度与对照组差异无统计学意义。15例MRI有脑桥十字征的MSA患者 MCP宽度平均为(5.3±1.0)mm,11例 MRI无脑桥十字征的 MSA患者 MCP宽度平均为(7.2±1.6)mm,两者比较差异有统计学意义(<0.05)。结论:MRI有助于MSA的诊断;MRI测定MCP宽度可作为鉴别MSA与PD的一个指标。

    作者:林志坚;陈旭辉;车秀娟;张海鸥;吴军 刊期: 2014年第01期

  • SPECT联合血清S100β蛋白在血管性认知障碍无痴呆诊断中的应用

    目的:探讨SPECT脑血流灌注显像联合血清S100β蛋白的检测在血管性认知障碍无痴呆(VCIND)诊断中的应用价值。方法:收集VCIND患者60例为VCIND组,30例体检合格者为对照组,对2组进行一般检查、神经功能评定、脑SPECT检查局部脑血流量(rCBF)和血清S100β蛋白含量检测。结果:与对照组比较,VCIND组双侧额叶、左侧顶上小叶、左侧丘脑rCBF明显降低(<0.05);左侧额叶、左侧顶上小叶、左侧丘脑均较右侧rCBF明显降低(<0.05);VCIND组血清S100β蛋白含量明显升高(<0.05)。结论:SPECT脑灌注显像联合血清S100β蛋白检测对早期发现VCIND患者具有重要的临床价值。

    作者:刘亮;王文静;王前友 刊期: 2014年第01期

  • 卒中单元中西医结合治疗对脑梗死患者生活质量及照料者心理状态的影响

    目的:观察卒中单元中西医结合治疗对脑梗死患者生活质量及照料者心理状态的影响。方法:将197例患者随机分成对照组58例和治疗组139例,其照料者随之分为照料对照组和照料治疗组。对照组采用常规药物治疗、肢体康复、心理治疗、健康教育等,对照组照料者不作任何干预;治疗组在上述治疗的基础上,加用中草药方剂治疗,同时照料治疗组给予系统的脑卒中健康教育、康复知识、技能培训及适当的抗抑郁抗焦虑药物治疗。2组患者均于治疗前和治疗后第4周、8周、24周进行Barthel指数(BI)、Spitzer生活质量指数(QLI)评定;2组照料者均于治疗前和治疗后第4周、8周、24周进行汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评定。结果:治疗4周后,2组BI、QLI评分与治疗前比较均有明显差异;与对照组比较,治疗组的BI及QLI评分有明显差异(<0.05)。2组照料者抑郁41例(21.6%),焦虑55例(28.9%)。治疗后,照料治疗组抑郁、焦虑疗效明显优于照料对照组,差异有统计学意义(<0.05)。结论:卒中单元中西医结合治疗和对照料者的综合干预能明显提高脑梗死患者的生活质量,且明显改善患者及照料者的心理状态。

    作者:罗利俊;陈国华;笱玉兰;梅俊华;陈玲;潘晓峰;唐坤 刊期: 2014年第01期

  • 脑静脉系统血栓形成合并颅内出血的抗凝治疗16例

    目的:探讨脑静脉系统血栓形成(CVT)合并颅内出血后应用抗凝药物的疗效及风险。方法:连续收集CVT合并颅内出血的住院患者16例,确诊后给予低分子肝素抗凝治疗,通过每周1次头颅CT观察血肿体积动态变化,动态MRV观察血栓再通情况,并记录出血并发症的发生。结果:抗凝治疗前基线血肿体积为(13.9±3.7)mL,应用低分子肝素抗凝治疗1周后复查头颅CT测血肿体积为(10.1±2.7)mL,均无血肿扩大,8例明显吸收,2周复查头颅CT血肿体积(5.2±3.3)mL,血肿均吸收≥75%。无严重出血性并发症,14 d MRV复查15例血管再通。结论:抗凝治疗是CVT合并颅内出血的安全有效方法,尽早抗凝治疗可有效缓解症状,改善患者预后。

    作者:刘艳;甘学军;关秀军;林丽晴;胡亚丹 刊期: 2014年第01期

  • 加味菖蒲郁金汤联合艾司唑仑片治疗失眠症临床观察

    目的:观察加味菖蒲郁金汤联合艾司唑仑片对失眠症的临床效果。方法:失眠患者100例,随机分为治疗组和对照组各50例。对照组口服艾司唑仑片30 d,治疗组口服艾司唑仑片15 d,自拟加味菖蒲郁金汤治疗30 d。观察两组患者总体疗效和睡眠质量。结果:治疗后总体有效率对照组为84%,治疗组为有效率94%,差异有统计学意义(<0.05);治疗组匹茨堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分各项目低于对照组,差异有统计学意义(<0.05)。结论:加味菖蒲郁金汤联合艾司唑仑片治疗失眠症疗效显著。

    作者:李智杰;谢谢 刊期: 2014年第01期

  • P2X4受体对活化的小胶质细胞的调控作用

    小胶质细胞是中枢神经系统内的免疫细胞,当脑组织出现损伤时,小胶质细胞被激活,对脑组织起到保护作用。在自身免疫性脑脊髓炎模型大鼠和视神经脊髓炎患者体内,均观察到在脊髓炎性病灶及小胶质细胞内,P2X4受体表达上调。本课题组进行在体和离体实验,用LPS活化小胶质细胞,观察P2X4受体在小胶质细胞炎性反应中的作用。膜片钳检测显示,在LPS激活的小胶质细胞内,P2X4受体活性增加。P2X4受体阻断剂可显著降低小胶质细胞的膜皱缩、TNFα的分泌、细胞形态的改变及LPS导致的小胶质细胞死亡。在体研究显示,LPS髓内注射后会诱发炎性反应,迅速导致小胶质细胞丢失;给予P2X4受体阻断剂可显著减少小胶质细胞的丢失,而P2X4受体激活剂则可显著增加小胶质细胞的丢失。海马齿状回的小胶质细胞特别容易被LPS诱导的炎症反应激活。注射LPS后2 h,位于海马齿状回的小胶质细胞即被激活,大约24 h后死亡,P2X4受体阻断剂可减少LPS诱导的小胶质细胞活化和死亡。上述数据提示,P2X4受体对于小胶质细胞的激活和存活有重要的调控作用。

    作者: 刊期: 2014年第01期

  • 激光散斑成像监测C57小鼠皮质血流及光化学缺血变化

    目的:探索激光散斑成像(LSI)技术在监测C57BL/6小鼠脑皮质血流中的应用,初步观察光化学脑梗死模型的脑皮质血流改变。方法:采用8只8~10周雄性C57BL/6小鼠,麻醉后切开头皮置于LSI系统下观察脑皮质血流变化。5只8~10周雄性C57BL/6小鼠制作光化学梗死灶模型,分别在光化学造模前及造模后24 h观察脑皮质血流变化,同时5只8~10周雄性C57BL/6小鼠假手术作为假手术组。结果:8只C57小鼠可以在不损伤颅骨的条件下实现较长时间的脑血流成像检查,具有较高成像质量,可以辨别脑皮质小血管血流变化。5只小鼠光化学造模取得成功,利用LSI可以观察到24 h后脑皮质梗死区血流量变化,部分小血管血流减少或消失。尼氏染色显示手术组小鼠皮质脑梗死形成。结论:LSI可以观察C57小鼠脑皮质血流变化,具有较高的空间及时间分辨率。

    作者:方瑜;邱占东;闵哲;熊永洁;胡文涛;黄梁江;张苏明 刊期: 2014年第01期

  • 耳鸣患者脑干听觉诱发电位分析147例

    目的:研究耳鸣患者的年龄分布特点及其脑干听觉诱发电位(BAEP)的临床特点。方法:收集147例耳鸣患者(294耳)的临床资料,并进行BAEP检查和分析。结果:本组耳鸣患者294只耳中,BAEP异常率为98.6%,轻度异常所占比例高,为66.7%;女性发病率较高,为59.2%;总体人群发病高峰为31~60岁,占73.5%。结论:耳鸣可早期引起脑干听觉通路的损伤。

    作者:张鸿雁 刊期: 2014年第01期

  • 双侧额叶脑挫裂伤28例手术治疗体会

    双侧额叶脑挫裂伤是较常见的颅脑损伤类型,早期缺乏特有临床征象,但在治疗过程中,病情可能突然恶化导致患者预后不良。我院共手术治疗双侧额叶脑挫裂伤患者28例,疗效满意,现报告如下。选择2005年1月至2012年12月我院收治的双侧额叶脑挫裂伤患者28例,男19例,女9例;年龄16~68岁,平均45.6岁;受伤至入院时间0.5~4.5 h,平均2.8 h。致伤原因为交通伤13例,高空坠落伤6例,暴力打击伤6例,跌倒伤3例;致伤部位为枕部17例,额部7例,其它部位4例。患者均有不同程度头痛、呕吐,伤后短暂昏迷6例,昏迷-清醒-再昏迷5例,持续昏迷2例。入院格拉斯哥昏迷评分(Glasgow coma scale,GCS)评分:13~15分9例,9~12分12例,6~8分5例,3~5分2例。枕部头皮损伤12例,一侧锥体束征4例,双侧锥体束征2例。一侧瞳孔散大,对光反射消失2例。患者入院后均急诊行头颅CT检查,并于受伤后3 d内每6~12 h复查,3~7 d每24 h复查,7~10 d每2~3 d复查头颅CT。如患者临床症状加重,则立即复查头颅CT。首次头颅CT示双额叶斑点状,片状高密度影,并且混杂有片状低密度影。4例血肿量>30 mL,中线结构偏移>1 cm;其余24例,血肿量6~10 mL,中线结构偏移0.5~1 cm 3例,<0.5 cm 21例。侧脑室前角受压6例。合并颞叶脑挫裂伤4例,枕部硬膜外血肿2例,硬膜下血肿1例。复查头颅CT示,原点片状出血融合扩大,血肿体积9~17 mL,侧脑室额角受压19例,环池受压10例,消失2例,中线结构偏移较前增加>0.5 cm者7例,脑水肿范围较前增加10 mL者8例。

    作者:胡胜;竺永健;刘强;吴勇 刊期: 2014年第01期

  • 周细胞在神经血管单元中的作用

    周细胞是神经血管单元和血脑屏障的重要细胞成分,与毛细血管内皮细胞紧密相连。作为微血管的构成成分之一,周细胞参与脑血流的调控、神经血管生长的调节、神经血管单元稳态的调节和血脑屏障完整性的调控,此外周细胞还具有免疫吞噬、迁移和干细胞潜能。

    作者:余颖;喻志源;谢敏杰;王伟 刊期: 2014年第01期

  • 颅内动脉瘤手术方法的选择及展望

    目前手术治疗颅内动脉瘤的方法中,显微外科手术夹闭、血管内介入、颅内外动脉搭桥占主要地位。笔者根据颅内动脉瘤的解剖位置、大小、形状、数量、病理(血栓及钙化情况)、患者身体状况临床分级及对手术的要求,选择不同的手术方式来实现对患者的佳治疗。本文重点探讨颅内动脉瘤3种手术手术方法的适应症、手术方式、预后等。

    作者:汤荡;龙江 刊期: 2014年第01期

  • 特发性甲状旁腺功能减退症1例

    1临床资料患者,男,58岁。2012年11月28号15:00因“左侧头面部撞伤后出血,意识不清2h”急诊入院。入院前2h因交通事故摔伤左侧头面部,当即意识不清,额面部、口腔出血不止,四肢强直痉挛,小便失禁。急诊颅脑CT提示颅内双侧基底核、小脑多发片状高密度影,左侧裂池、小脑幕密度增高。CT报告诊断:颅内多发高密度影(甲旁减?);外伤性蛛网膜下腔出血,见图1。家属代诉患者有癫痫病史20余年,长期口服卡马西平片100 mg,qd,平时动作稍慢,生活能自理,智力正常,无其他病史。体检:发育正常,急重面容,体温37.1℃,脉搏90次分,血压140/86 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa);浅昏迷,格拉斯哥昏迷量表(Glasgow coma scale,GCS)评分为7分;左侧额部、眶面部、上唇散在挫裂伤,已清创缝合,强疼痛刺激睁眼,含混发音,瞳孔正常等大,对光反射存在,耳鼻腔无出血,颈项强直,四肢强直痉挛,双手指间关节屈曲,双足跖屈强直。心肺无明显异常,腹平,轻度肌紧张,四肢未引出病理征。急查床边心电图和胸腹彩超未发现异常。急查血钾3.50 mmol/L,钠139.0 mmol/L,钙1.42 mmol/L,磷1.62 mmol/L,血常规血象高。立即予以10%葡萄糖酸钙60 mL加入5%葡萄糖盐水静滴,常规脱水、补液,神经营养治疗。患者第2天继续补10%葡萄糖酸钙40 mL,患者逐步清醒,反应迟钝,能部分回答问题,可少量进食,仍四肢肌张力高,右上肢可部分活动,小便失禁。复查血钙1.67 mmol/L,肝肾功能正常,化验血甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)3.95 pg/mL。临床诊断:中度颅脑外伤,蛛网膜下腔出血;甲状旁腺功能减退症。第3天复查颅脑CT加腰椎、骨盆X线片,提示颅内出血大部分吸收,腰椎、双侧髋关节骨质唇样增生。告知家属停用卡马西平,每天静脉补充葡萄糖酸钙40~60 mL,常规营养支持治疗,隔日复查血电解质,患者逐步恢复反应能力,肢体肌张力好转,饮食正常,协助下大小便,间断尿床,床上坐起,搀扶下床边站立。监测血钙波动性上升,入院3周升至1.91 mmol/L,患者出现食欲下降,进食后恶心、呕吐现象,停用静脉补钙。予以高钙片2.5 g,bid,阿法骨化醇7.5μg, ;qd,患者逐步好转,恢复饮食,体力增强,家属扶持行走。住院41 d出院,出院前测血钙1.73 mmol/L,磷1.84 mmol/L,铁5.5μmol/L。住院期间和出院后门诊随访复查未出现癫痫表现,出院后家人看护下生活能自理。

    作者:陈义勇;杨昌 刊期: 2014年第01期

  • 帕金森病患者40例血浆尿酸水平分析

    帕金森病(Parkinson's disease,PD)是常见的神经系统变性疾病,黑质多巴胺能神经元变性死亡系其发病基础。有研究表明,PD患者大脑基底核区的尿酸水平降低[1]。高血浆尿酸水平能够通过抗氧化应激作用阻止PD患者多巴胺能神经元的变性[2]。本研究观察PD患者的血尿酸水平,探讨血尿酸水平与患者性别、病程、不同起病症状之间的关系。

    作者:李洪亮;沈雪峰;黄文忠;王守勇;薛永 刊期: 2014年第01期

神经损伤与功能重建杂志

神经损伤与功能重建杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:华中科技大学同济医学院