学术投稿

人血管内皮生长因子基因的克隆及在人成肌细胞中的表达

于大海;王代友;邝晓聪;周柳艳

关键词:血管内皮生长因子, 基因克隆, 基因扩增, 基因表达
摘要:目的克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段,构建pCDNA3/VEGF165真核表达载体,观察其在人成肌细胞中的表达.方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人肝癌细胞株SMMC-7721中扩增出血管内皮生长因子VEGF165基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pCDNA3真核表达载体上,构建成pCDNA3/VEGF165重组质粒,分别用酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定,应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入体外培养的人成肌细胞内,并用免疫组化法观察其表达.结果经酶切电泳分析和DNA测序证实,本实验克隆的基因片段为人VEGF165cDNA,重组质粒pCDNA3/VEGF165转染人成肌细胞后,VEGF表达明显增高.结论本实验成功地克隆了VEGF165基因,为进一步研究用肌肉细胞内转染VEGF基因的方法来恢复或增强放疗后组织的血管生成能力奠定了基础.
临床口腔医学杂志相关文献
  • 缝衣针存留根管1例

    临床上医源性牙体内断针偶有发生,但是缝衣针存留根管长达3年,实属少见,报告如下:

    作者:锁云华;刘玉柱;马斌 刊期: 2002年第06期

  • Pendulum矫治器远移及竖直磨牙的研究

    目的通过对Pendulum矫治器的临床应用及竖直曲的设计,探讨上颌磨牙远移及竖直的临床效果.方法选择13例安氏Ⅱ类错牙合伴轻、中度拥挤病例,应用Pendulum矫治器治疗,并对治疗前后的头影测量进行分析比较.结果 13例患者的上颌磨牙均能充分远移,且上颌磨牙的远中倾斜均能通过竖直曲的应用明显改善.结论 Pendulum矫治器是矫治安氏Ⅱ类错牙合方便、有效的矫治器.

    作者:史建陆;官玉芹;林艺翠;柯云翔;曾韶华 刊期: 2002年第06期

  • 舍格林综合征患者唾液腺病变中IL-1β、TNF-α的表达及意义

    目的探讨舍格林综合征患者唇腺组织中的淋巴细胞过度浸润及激活与白细胞介素-1(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系.方法通过HE染色观察淋巴细胞的浸润,采用免疫组织化学法检测IL-1β和TNF-α蛋白的表达,运用图象分析技术对结果进行定量分析.结果唇腺组织中的IL-1β和TNF-α蛋白表达与淋巴细胞浸润密切相关;淋巴细胞浸润密集的组织,炎症浸润广泛,导管上皮增生与腺泡破坏显著.结论与IL-1β和TNF-α等细胞因子相关的淋巴细胞浸润与激活促进了舍格林综合征的发展.

    作者:高文信;刘明 刊期: 2002年第06期

  • 年轻恒牙牙髓电活力测试的临床研究

    目的研究年轻恒牙电活力试验多出现假阴性的原因.方法通过对全颌曲面断层X线片上牙根尖孔宽度的测量.比较不同根尖孔宽度的电活力试验结果.结果根尖孔宽大者,假阴性率高.随着根尖孔宽度减小,电活力试验的准确率提高,它们之间呈负相关.结论新生恒牙出现电活力试验假阴性是由于根尖孔面积过大,通过根尖部牙髓单位面积的电流强度相对较小,达不到刺激阈值而产生的.

    作者:叶维卡;徐如生;黄力子 刊期: 2002年第06期

  • 生物溶菌酶在口腔病防治中的应用

    生物溶菌酶广泛存在于高等动物组织及分泌物、原生动物、昆虫以及微生物中.随着生物技术的迅速发展,除了天然的溶菌酶外,还有各种通过生物工程方法生产的酶.生物溶菌酶在实验和应用研究中都取得重要的突破,在口腔病防治领域展现出令人瞩目的前景.本文就生物溶菌酶在口腔病防治中的应用进行综述.

    作者:黄青山;陆婉英;励俊 刊期: 2002年第06期

  • 正常男性青、老年人上气道结构的矢状面测量分析

    目的探讨无鼾正常男性青年及老年人群上气道及周围组织52项测量项目的正常值范围,比较两组间差异.方法摄取无鼾正常男性青年47名、老年38名的X线头颅定位侧位片并使用开发软件测量上气道及周围结构52个测量项目,对测量值进行统计学T检验.结果两组人群多为低角面型.老年组下颌骨颏部靠后,会厌及舌骨靠前下方,上气道鼻咽径及会厌至咽后壁距较宽,悬雍垂尖至咽后壁距较窄,软腭长而肥厚,舌体厚而较直立,与软腭接触长度大,舌及软腭占口腔及上气道面积较大.结论二组上气道结构有差异,应分年龄段建立上气道及周围结构的正常值范围.

    作者:黄敏方;周嫣;陈世稳;方志欣 刊期: 2002年第06期

  • 诱导型一氧化氮合酶表达在口腔癌前病变口腔鳞癌发展过程中的作用研究

    目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在口腔癌前病变、口腔鳞癌发展过程中的表达情况及其作用.方法采用免疫组化SABC法检测10例正常口腔黏膜、8例上皮单纯增生、20例上皮异常增生和32例鳞状细胞癌组织中iNOS的表达.结果正常口腔黏膜iNOS阴性表达;上皮异常增生组和鳞癌组中iNOS的表达较上皮单纯增生组均显著增加(P<0.05 );随着上皮异常增生程度的加重,iNOS的标记指数逐级显著上升(P<0.05 );上皮异常增生组与鳞癌组之间以及鳞癌的各病理分级之间iNOS的表达均无显著性差异(P>0.05).结论 iNOS的表达可能参与了口腔鳞癌的衍进过程.

    作者:杨萍;高文信;赵桂芳 刊期: 2002年第06期

  • 舌鳞状细胞癌中p73、p63和p53基因的表达

    目的研究p73、p63和p53基因蛋白在舌鳞状细胞癌中的表达及其意义.方法用免疫组织化学S-P法检测64例舌鳞状细胞癌组织标本p73、p63和p53基因蛋白表达.结果舌鳞癌中p73、p63和p53基因蛋白阳性率分别为61%、92%和50%.p73蛋白表达与T分类(r=0.344, P=0.057)、区域淋巴结转移(r=0.334 , p=0.007)、肿瘤侵袭方式(r=0.340, P=0.060)和不良预后(r= -0.473, P=0.000)相关.p63与所有临床病理特征和预后无关.p53与区域淋巴结转移(r= 0.263 , P=0.036)和不良预后(r=-0.342,P=0.013)相关.结论 p73和p53表达有助于判断舌鳞癌的生物学行为和预后.p63可能是鳞状上皮源性肿瘤的标记物.

    作者:杨亦萍;曹阳;卿海云 刊期: 2002年第06期

  • 1023中药合剂对口腔癌前病变的治疗和阻癌作用的临床研究

    目的探讨1023对口腔白斑(OLK)、口腔扁平苔藓(OLP)和盘状红斑狼疮(DLE)等癌前病变的治疗作用和阻断癌变的作用.方法将1023合剂用于48例OLK、139例OLP和38例DLE,并设对照组,实验组和对照组均接受相同的常规治疗.结果 1023对OLK和OLP治疗有明显的效果,其有效率明显高于对照组(P<0.05),而OLK的癌变率明显低于对照组(P<0.05).结论 1023合剂对OLK和OLP均有治疗作用,对OLK有阻止癌变的作用.

    作者:陈作良;陈宏柏;官玉芹;邵金铨;陈晓玲;林晨;陈宝猜 刊期: 2002年第06期

  • 口腔扁平苔藓与过敏原

    目的研究口腔扁平苔藓的发生、发展与吸入性和食物性过敏原的关系.方法应用 20种食物性过敏原溶液和 18种吸入性过敏原溶液,采用皮内注射法,对 95例口腔扁平苔藓患者进行过敏原过敏反应检查.结果 95例全部呈现过敏反应.其中 84例同时存在食物性和吸入性过敏原过敏反应. 6例单纯对食物性过敏原过敏, 5例单纯对吸入性过敏原过敏.部分食物过敏原呈现迟发性超敏反应.结论口腔扁平苔藓的发生、发展与吸入性和食物性过敏原相关.限制接触过敏物质有益于口腔扁平苔藓的治疗.

    作者:陈瑞扬;张文萍 刊期: 2002年第06期

  • 腮腺导管损伤的临床诊断及治疗

    目的通过临床资料的分析,探讨腮腺导管损伤的诊断方法和治疗原则.方法对13例腮腺导管损伤患者一般情况、致伤部位、致伤方式、治疗原则及治疗方法、愈后等方面作分析.结果腮腺导管损伤易发生于20~29岁年龄组;易发部位为导管嚼肌段,多为金属、玻璃等利器损伤.B超检查无创伤、直接、数据精确、可提高诊断的准确性.腮腺导管损伤一般采取导管修复重建治疗,可采用端端吻合、自体静脉移植等方法.结论经过正确的诊断及治疗,可恢复腮腺的正常功能.

    作者:卿安蓉;张伟雄 刊期: 2002年第06期

  • 异体陶瓷化骨粉复合盖髓剂用于活髓保存的临床研究

    目的观察异体陶瓷化骨粉复合盖髓剂直接盖髓保存活髓的临床疗效及探讨影响疗效的因素.方法在陶瓷化骨粉中加入克林霉素,经材料学及动物实验研究证实性能良好后,临床用于126例露髓患牙直接盖髓,追踪观察临床症状、牙髓活力状态、X线片表现,按疗效标准记录分析.结果 126例中成功117例,成功率达92.85%.认为盖髓剂性状、适应症选择(牙髓状况)、规范操作及充填材料的微渗漏预防诸因素与疗效关系密切.结论异体陶瓷化骨粉复合盖髓剂是一种新型理想的活髓保存材料,有很好的临床应用价值.

    作者:周先略;徐靳;孙莹;周秀英;倪红英;唐祎;杨宗珍;章宏毅 刊期: 2002年第06期

  • X线颅颌面影像标志点的自动识别

    目的研究计算机对X线颅颌面影像标志点的自动识别.方法使用计算机提取出的X线颅颌面图象, 对标志点的自动识别过程为:①以FH平面为基准进行分区;②运用三次样条插值法使曲线光滑;③使用轮廓跟踪技术进行标志点的寻找;④使用拟合逼近进行拟圆;⑤进行二值化以确定两曲线的交点.结果提取出了颅颌面31个标志点.结论进行计算机对X线颅颌面影像特征点的识别研究,为全自动识别分析奠定了基础.

    作者:邵金陵;林珠;李东;赵荣椿;任金昌 刊期: 2002年第06期

  • 平阳霉素治疗口腔颌面部血管瘤785例临床总结

    目的总结平阳霉素(PYM)瘤体内注射治疗口腔颌面部各种血管瘤的疗效.方法收集1992.1~2002.1,用PYM注射治疗口腔颌面部海绵状、草莓状和混合性等血管瘤785例 (996个瘤体).7~10天注射1次,3~5次为一个疗程.结果经6个月~10年随访,治愈和基本治愈率为 85.73%,好转11.59%,总有效率为97.32%.结论 PYM治疗海绵状、草莓状和混合性血管瘤疗效高,疗程短,是一种简便、安全的有效方法.

    作者:寿柏泉;寿卫东;孟昭业;杨震;张森林 刊期: 2002年第06期

  • 牙源性透明细胞瘤1例

    患者男,62岁.因右下颌肿胀2个月入院.检查:嚼肌前缘触及1.5 cm×2.0 cm坚硬包块,不活动.X线曲面断层片示|6根尖下方0.9 cm×1.5 cm透光影,位于下颌神经管之上,周围欠光滑.术中见肿物突破骨皮质,约2 cm×2 cm×1 cm大小.

    作者:姜英;叶大雄;张晋夏 刊期: 2002年第06期

  • 大鼠成骨细胞中蛋白激酶A的表达及信号作用

    目的探讨蛋白激酶A(cAMP-dependent protein kinase , PKA)在大鼠成骨细胞中的表达情况.方法纯化培养大鼠成骨细胞后,以cAMP、PKI、rhBMP-2分别刺激细胞30 min,设空白对照,通过免疫细胞化学及图象分析方法,观察细胞内PKA的活化表达情况.结果各实验组均可见PKAα的活化表达,但是空白对照组表达弱(p<0.05),PKI组弱(p<0.01), cAMP组表达强(p<0.01).结论在大鼠成骨细胞中存在功能状态的PKAα,而且,rhBMP-2能激活PKAα.rhBMP-2信号途径与PKA信号途径之间存在交互作用.

    作者:葛成;杨连甲;刘宝林;赵丽君 刊期: 2002年第06期

  • 冠周冲洗上药后即刻拔牙对干槽症相关细菌的研究

    目的比较下颌阻生智齿拔除术前冠周冲洗、上药后即刻拔牙与常规拔牙后干槽症相关细菌检出率的差异,寻找一种有效、简便、经济的预防干槽症的方法.方法选取94例患者随机分为三组,A组冲洗+上药组(33例),B组冲洗组(31例),C组对照组(30例).分别采集术前术后冠周龈盲袋或拔牙创内的细菌进行需氧和厌氧培养.结果 A组产黑素类杆菌检出率术前为33.3%,术后为10.1%;B组产黑素类杆菌的检出率术前为32.3%,术后为16.1%;C组产黑素类杆菌的检出率术前为30.0%,术后为33.3%.三组术前术后链球菌检出率均为100%.结论下颌阻生智齿拔除术前冠周冲洗、上药后即刻拔牙能有效地减少干槽症的发生.

    作者:李运安;欧学志;刘敏;王思宏;陈勇;熊艺辉;史莉 刊期: 2002年第06期

  • 腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统治疗腺样囊性癌的体外实验研究

    目的体外观察腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因及羟基无环鸟苷系统(ADV-HSV-Tk/GCV)对人腺样囊性癌细胞(ACC-2及ACC-M )的杀伤作用.方法分别将人腺样囊性癌细胞株(ACC-2及ACC-M )用腺病毒构建的绿色荧光蛋白按1∶10,1∶20,1∶30转染,在12~36 h内用荧光显微镜观察细胞的转染率.MTT法观察ADV-HSV-TK在不同感染复数(5~60)以及不同浓度GCV处理时对ACC-2及ACC-M的细胞杀伤作用以及“旁观者效应”.结果体外研究发现,ACC-2及ACC-M均能被腺病毒-绿色荧光蛋白转染.小感染复数为10~20,转染率与感染复数呈正相关.在感染复数为5,GCV浓度为25 μg/ml时,能够发挥细胞杀伤效应且出现剂量依赖性.MTT法检测发现经ADV-HSV-TK处理后,当GCV浓度为25 μg/ml或高于该浓度时ACC-2及ACC-M的细胞抑制率为40%-60%,而当GCV单独作用时则无此作用.转染ADV-HSV-TK的细胞与未转染细胞按不同比例混合提示“旁观者效应”的存在,且转染细胞的比例越高,被杀伤的细胞比例越大.结论腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因及羟基无环鸟苷系统(ADV-HSV-TK/GCV)在体外能够有效抑制腺样囊性癌细胞,然而,其细胞杀伤效应及“旁观者效应”仍有待提高.

    作者:邵乐南;朱声荣;汤国雄;陈卫民;卢运萍;赵怡芳 刊期: 2002年第06期

  • 牙痛为首发症状的茎突综合征1例报告

    牙痛患者往往以牙髓炎,根尖周炎或牙周炎,首先就诊于口腔科.以牙痛为首发症状的茎突综合征比较少见,常易误诊误治,现报道1例.

    作者:徐秀娥;耿永志 刊期: 2002年第06期

  • 130个前牙桩冠修复体远期疗效分析

    目的通过病例复查,找出前牙桩冠修复工作中的问题及不足,使前牙桩冠修复技术更加完善.方法收集临床病例进行有关项目复查.结果成品桩钉和铸造桩核固位效果无差异,烤瓷冠满意度100%.塑料冠外观差,对龈组织刺激性大,远期效果不理想.结论桩核的类型不影响桩冠的固位,金属烤瓷冠是前牙桩冠理想的修复材料.

    作者:刘培勤;张敬阳;刘志诚;杨勇;罗浩 刊期: 2002年第06期

临床口腔医学杂志

临床口腔医学杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:华中科技大学同济医学院附属同济医院;中华口腔医学会口腔黏膜病专业委员会;中华医学会武汉分会