学术投稿

稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系的建立

白巍;李黔生;吴刚;彭亮;靳风烁

关键词:BRP44, PC-3细胞系, 稳定转染, 前列腺癌
摘要:目的 建立稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系.方法 下载BRP 44的全长mRNA序列,用Oligo 6进行引物设计,在上下游引物的5'引入相应的Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ限制性内切酶识别序列及保护碱基.提取LNCaP细胞的总RNA反转录成cDNA进行PCR扩增,产物连接到真核表达载体pcDNA 3.1/myc-His A中构建成重组体.重组载体经酶切和测序鉴定后,阳离子脂质体转染法转染PC-3细胞、G 418筛选、Northern杂交检测并挑选出表达强的亚克隆.结果 成功构建BRP 44的真核表达载体并获得高效稳定表达的BRP 44基因的PC-3细胞亚克隆.结论 高效稳定表达BRP44的PC-3细胞亚克隆可用于下一步研究.
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    作者:白巍;李黔生;吴刚;彭亮;靳风烁 刊期: 2007年第03期

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华南国防医学杂志

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