学术投稿

CEQTM8800型遗传分析系统检测DNA序列的影响因素研究

季敬璋;张洁;吕建新

关键词:DNA, 测序, 影响因素
摘要:目的:研究DNA循环测序过程中一些影响因素及其序列图谱.方法:对测序中模板、引物、测序反应条件和体系及其产物的纯化等因素进行比较研究.结果:模板因素是测序成败的主要原因,模板的质量直接影响着测序图谱;引物失效,与模板匹配不完全,Tm值过低等因素也能引起测序失败;利用乙醇沉淀纯化测序反应产物、效果好且简单、经济.结论:模板的纯度和浓度对测序成功与否起决定作用.佳反应条件可降低成本,提高测序成功率.仪器操作熟练、正确与否也会影响测序结果.
温州医科大学学报杂志相关文献
  • 女性生殖道感染患者阴道加德纳菌的检测及耐药性分析

    目的:为了解本地区女性生殖道阴道加德纳菌(GV)感染情况以及阴道加德纳菌对抗菌药物的敏感性,探讨阴道加德纳菌实验室检测方法的应用效果,为细菌性阴道病的诊断和治疗提供切实可行的检测依据.方法:阴道加德纳菌分离培养鉴定和K-B法抗菌药物敏感试验、生殖道分泌物常规检查、涂片革兰染色找线索细胞、BV试验、胺试验.结果:156例阴道病患者GV的总检出率为39.7%,其中100例宫颈炎患者GV的检出率为41%;56例阴道炎患者的GV检出率为37.5%;健康妇女GV检出率为8.3%.抗菌药敏感率依次为头孢噻肟98.5%(64/65)、氧哌嗪青霉素93.8%(61/65)、先锋霉素V92.3%(60/65)、氨苄青霉素84.6%(55/65)、红霉素69.2%(45/65)、林可霉素52.3%(34/65)、环丙沙星38.5%(25/65)、庆大霉素32.3%(21/65).结论:细菌性阴道病与加德纳菌感染密切相关;GV的分离率与阴道分泌物的pH值、白细胞数、取材部位相关;本地区BV患者分离出的GV对头孢类、青霉素类抗菌药物敏感,而对喹诺酮类、氨基糠苷类抗菌药物耐药性较高.

    作者:吕旭军;陈建江;李旭英;陈勤;茅利明;朱遐;张丽霞 刊期: 2006年第06期

  • 冷冻法治疗皮肤瘢痕性病变的探讨

    目的:探讨冷冻疗法治疗皮肤瘢痕增生性病变的疗效.方法:对我院近年来85例皮肤瘢痕增生性病变的患者应用液氮治疗,观察其疗效,其中80例得到随访.结果:显效43例,有效35例,无效2例.结论:液氮冷冻治疗皮肤瘢痕增生性病变有较好的疗效.

    作者:郑君达;李力群;李建凤 刊期: 2006年第06期

  • 婴幼儿法洛四联症的外科治疗

    目的:总结婴幼儿法洛四联症根治术治疗经验,探讨手术时机、手术技术和术后处理方法.方法:从2001年1月至2005年3月共行婴幼儿法洛四联症根治术72例.全部病例术前均行二维超声心动图或心导管造影检查确诊,均在体外循环下行根治性手术.结果:围手术期死亡4例,手术死亡率达5.5%,其余患儿均治愈.62例患儿术后随访4~38个月,紫绀消失,生长发育改善.结论:对法洛四联症患儿行早期根治术能获得满意的疗效,改善手术技术和加强术后监护是提高手术成功率的关键.

    作者:胡型锑;王胜利;杨美高;黄宪平;赵曙光;赵琦峰 刊期: 2006年第06期

  • GlideScope视频喉镜和Macintosh直接喉镜在经口气管插管应用中的对比研究

    目的:比较GlideScope视频喉镜和Macintosh直接喉镜在经口气管插管应用中的优缺点.方法:对20例择期妇科或普外科病人,予术前行常规气管插管困难程度评估.全麻诱导后先后采用Macintosh直接喉镜和GlideScope视频喉镜行喉部显露,评估声门的Cormack分级,再行气管插管.结果:采用GlideScope视频喉镜后20例病人均在显示器上清晰显示声门,Cormack分级:Ⅰ级为18例,Ⅱ级为2例;采用Macintosh直接喉镜组Cormack分级Ⅰ级为6例,Ⅱ级为12例,Ⅲ级为2例.与Macintosh直接喉镜组比较,GlideScope视频喉镜组的Cormack分级显著低(P<0.01),Cormack分级Ⅰ级显露率(90%vs 30%)显著高(P<0.01).GlideScope视频喉镜组和Macintosh直接喉镜组显露声门的时间分别为(25±14)s和(27±19)s,组间比较无显著意义.GlideScope视频喉镜组经口气管插管成功率为100%,但各有1例病人分别重复插管2次和3次才取得成功,原因为气管导管置入口腔变形,无法将气管导管对准声门.结论:GlideScope视频喉镜用于临床经口气管插管具有操作简单、改善Cormack分级、声门显露清晰等优点,但气管导管通过口咽拐角处困难是其缺点.

    作者:金勉;李挺;徐旭仲 刊期: 2006年第06期

  • 血液透析患者钙磷紊乱的调查

    目的:了解血液透析患者骨代谢和骨病控制情况.方法:对我院血液净化中心血液透析的92例患者骨代谢指标进行调查,并与国际肾脏病基金会慢性透析患者骨代谢和骨病控制指南进行比较.结果:92例中,有84例(91.05%)血清钙浓度、42例(45.36%)磷浓度、60例(67.2%)钙磷乘积、65例(59.79%)PTH达到K/DOQI所要求的目标,但仅有20例(占21.7%)患者所有指标均达到要求目标.结论:多数血液透析患者骨代谢和骨病控制仍然不能达到K/DOQI要求的目标.

    作者:刘毅;潘慧君;郑尘飞;汪延辉;徐玉兰 刊期: 2006年第06期

  • 正常大小卵巢癌综合征的临床分析

    目的:探讨正常大小卵巢癌综合征的临床特点、诊断标准、有效的治疗方法及预后.方法:回顾性分析1997-2003年我院治疗及病理复核证实的正常大小卵巢癌综合征12例,其中7例为性腺外苗勒氏管肿瘤,也称卵巢外腹膜浆液性乳头状腺癌(epspc extraovarian peritoneal seous papillary carcinoma,EPSPC),2例为卵巢浆液性腺癌,1例为恶性间皮瘤,2例为原发灶不明的转移性腺癌.无论上述何种类型均宜大限度切除肿瘤,使术后残存肿瘤<2 cm,并辅以有效的多疗程综合化疗.结果:2例EPSPC存活80个月,随访至2005年10月仍健在;1例原发灶不明的转移性腺癌已存活70个月,目前仍健在.9例已死亡,患者平均生存13.2个月.结论:卵巢正常大小,尤其是绝经后妇女,伴有综合征的患者应高度疑似卵巢癌综合征;对此综合征患者必须高度重视鉴别诊断,首选手术治疗,行肿瘤细胞减灭术,术后辅以有效的化疗或放疗,可以获得较长的生存期.

    作者:陈利琼;曹华妹;蔡珠华 刊期: 2006年第06期

  • 子宫内膜间质肉瘤临床病理分析

    子宫内膜间质肉瘤是一类起源于苗勒氏管的较少见恶性肿瘤.它具有向上皮和间叶分化的潜能[1],在病理形态和免疫组化方面可显示多种变异[2],病理诊断有一定难度.现就26例子宫内膜间质肉瘤临床病理特征分析如下.

    作者:郭瑞华;张品南 刊期: 2006年第06期

  • CEQTM8800型遗传分析系统检测DNA序列的影响因素研究

    目的:研究DNA循环测序过程中一些影响因素及其序列图谱.方法:对测序中模板、引物、测序反应条件和体系及其产物的纯化等因素进行比较研究.结果:模板因素是测序成败的主要原因,模板的质量直接影响着测序图谱;引物失效,与模板匹配不完全,Tm值过低等因素也能引起测序失败;利用乙醇沉淀纯化测序反应产物、效果好且简单、经济.结论:模板的纯度和浓度对测序成功与否起决定作用.佳反应条件可降低成本,提高测序成功率.仪器操作熟练、正确与否也会影响测序结果.

    作者:季敬璋;张洁;吕建新 刊期: 2006年第06期

  • 运动神经元病的电生理分析

    目的:探讨运动神经元病(MMD)的神经电生理表现特征.方法:对29例运动神经元病进行电生理检测,对所记录图像进行分析.结果:运动单位电位时限增宽、巨大电位、运动单位数量减少检出率高,以拇短展肌、第1骨间肌为著.神经电图中运动神经传导速度大多属正常范围,少数稍减慢,可见末端潜伏期延长、复合动作电位波幅降低.感觉神经传导速度可在正常低限.结论:运动神经元病的电生理显示广泛神经源性损害,肌电图(EMG)阳性率高,能提高临床诊断准确率.

    作者:柯将琼;王小同 刊期: 2006年第06期

  • 内窥镜下尺神经松解前置术围手术期的护理

    内窥镜下尺神经松解术是上世纪90年代中期才发展起来的一项新技术[1].国内于2003年初史其林等[2]报道了内窥镜下单纯行尺神经松解术.我院于2005年11月始对3例4侧肘管综合征患者利用腹腔镜技术进行尺神经松解和前置手术,现就围手术期的护理体会报告如下.

    作者:赵宇音;赖红燕;郑文娴 刊期: 2006年第06期

  • 重组人生长激素治疗青春发育后期矮小女孩胰岛素水平和糖耐量试验的观察

    目的:探讨国产重组人生长激素(rhGH)的治疗对青春发育后期女性矮小儿童的空腹胰岛素(FINS)水平及糖耐量试验(OGTT)的影响.方法:测定rhGH治疗组、非rhGH治疗组各12例矮小女孩治疗前后FINS水平及OGTT.结果:两组女孩治疗一年后FINS水平及OGTT结果无显著性差异.结论:rhGH治疗一年的青春发育后期女性儿童血清空腹胰岛素水平及糖耐量试验无明显异常.

    作者:张宇;杨立础;李温慈 刊期: 2006年第06期

  • 口服布洛芬治疗早产儿动脉导管未闭疗效观察

    动脉导管未闭(PDA)是常见的早产儿先天性心脏病,早产儿动脉导管常不能关闭,或功能性关闭后又重新开放.PDA开放可加重呼吸窘迫,促发充血性心力衰竭.口服布洛芬混悬液治疗早产儿PDA在国内外均有报道.为观察不同时间口服布洛芬混悬液对早产儿PDA的疗效和安全性,我们对48例早产儿进行了对照研究,报告如下.

    作者:张淑娟;高原 刊期: 2006年第06期

  • 川崎病并冠状动脉扩张危险因素分析

    目的:探讨川崎病并发冠状动脉扩张的危险因素.方法:确诊为川崎病的患儿126例,根据超声结果分为冠状动脉扩张组和无冠状动脉扩张组,对其性别、年龄、发热天数、急性期C-反应蛋白、血沉、白蛋白、血清钠离子浓度等资料进行比较分析,并作logistic相关分析.结果:126例川崎病患儿并发冠状动脉扩张者66例(占52.38%),无扩张者60例(占47.62%).两组患儿年龄、发热天数、白蛋白、血钠(低钠)差异有显著性(P<0.05);多因素Logistic回归分析提示年龄、发热时间、血钠浓度和冠脉扩张密切相关(P<0.05).结论:川崎病患儿并冠状动脉扩张与患儿年龄小、发热时间长及血钠浓度低密切相关.

    作者:仇慧仙;陈其;张园海;任跃 刊期: 2006年第06期

  • 慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠右心室骨桥蛋白及其整合素β3受体mRNA表达的变化

    目的:观察慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体基因表达变化与右心室重塑的关系.方法:48只雄性SD大鼠随机分为四组:对照组(C组)、低O2高CO21 w、低O2高CO22 w和4 w组(1HH、2HH和4HH).除对照组吸入空气外,其他三组大鼠置于含9.O%~11.0%O2,5.5%~6.5%CO2的低O2高CO2氧舱内,每天8 h,每周6 d.测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室肥厚指数;采用RT-PCR法测定不同低O2高CO2组大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体mRNA的表达水平.结果:①低O2高CO2各组大鼠mPAP和RV/LV+S均明显高于C组(P<0.01),并且随着低O2高CO2时间的延长而增高.②C组大鼠右心室心肌OPN和整合素β3 mRNA表达水平均很低,低O2高CO2各组大鼠心肌OPN和整合素β3 mRNA表达水平增高,与C组比较差异均有显著性(P<0.01和P<0.05).相关性分析显示,骨桥蛋白mRNA表达水平与大鼠右心室肥大程度呈显著正相关性(P<0.01).结论:慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压及右室肥大形成过程中,右心室心肌OPN及其受体整合素β 3基因表达增高,可能在右心室心肌重塑中起重要的作用.

    作者:林全;王良兴;施孟如;黄晓颖;陈少贤 刊期: 2006年第06期

  • 东菱精纯克栓酶治疗急性进展型脑梗死的护理

    急性进展型脑梗死是脑梗死的一种类型,其特点是疾病和局部症状缓慢出现,逐渐加重病情可能进展数天或两周,对患者的危害极大,如何激活血纤溶系统活性,防止栓子继续进展,及早建立侧支循环挽救半暗区的神经细胞成为治疗脑梗死的关键[1].东菱精纯克栓酶是新型强力单成分溶血栓微循环治疗剂,具有增强纤溶系统活性,改善流变学,减少血栓形成基质等作用,可有效降低全血黏度,红细胞压积及血纤维蛋白原含量,抑制血栓形成,从而改善脑部血流供应,使因缺血而功能受损的脑细胞恢复功能[2].但该药易导致出血及其他相关的不良反应,我科2005年4月至2006年1月应用东菱精纯克栓酶(DF-521)治疗急性进展型脑卒中患者125例,经过我们的严密观察及用药护理、饮食指导,肢体功能锻炼,并做好基础护理等,减少了不良反应的发生,取得满意的疗效.现将护理体会报告如下.

    作者:周琦;贺彩芳 刊期: 2006年第06期

  • 卒中后抑郁实验动物模型的研究

    目的:探讨脑卒中后抑郁(PSD)大鼠模型建立的可行性、有效性和简便性.方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,并结合孤养、束缚应激制成PSD大鼠模型,观察大鼠糖水消耗试验,自发性行为改变,下丘脑单胺类神经递质的变化.结果:模型组大鼠蔗糖水饮用量与正常组相比明显减少(P<0.01);旷野试验中模型组大鼠水平及垂直得分均小于正常组(P<0.01);模型组大鼠下丘脑NE、5-HT、DA含量均明显小于正常组(P<0.01或0.05).结论:在局灶性脑缺血大鼠模型基础上结合孤养、束缚应激制成的PSD大鼠模型,可为卒中后抑郁的研究提供较为理想的动物模型.

    作者:倪贵华;邵蓓;范虹 刊期: 2006年第06期

  • 骨桥素对高磷诱导的牛血管平滑肌细胞钙化的作用

    目的:研究骨桥素(OPN)对高磷诱导的牛血管平滑肌细胞钙化是否具有抑制作用.方法:用含不同磷(iP)浓度(1.4~2.0 mmol/L)的培养基体外培养牛血管平滑肌细胞,观察细胞钙沉积及OPN的表达;在高磷(2.0 mmol/L)培养基中加入不同浓度外源性OPN测定细胞钙化值的变化.用甲?酚肽络合酮法测定钙化量,用二喹啉甲酸检测法(BCA法)测蛋白含量,并以细胞蛋白含量标化钙化量.以实时荧光定量PCR法检测OPN mRNA的表达,以Western Blotting法测定OPN蛋白表达.结果:①培养基磷浓度1.4 mmol/L组细胞仅有少量钙沉积,随着培养基磷浓度增高及培养时间的延长,细胞钙沉积增加,第9天时,iP 2.0 mmol/L组与iP 1.4 mmol/L组钙沉积[(138.00±12.53) μg/mg protein比(22.67±2.52) μg/mg protein]差异具有显著性.②随着培养液磷浓度增高OPN mRNA表达逐渐增高,iP 2.0 mmol/L组与iP 1.4 mmol/L OPNmRNA表达[(2.51±0.18)×107 拷贝/106 GAPDH与(1.27±0.04)×107 拷贝/106 GAPDH]差异具有显著性.③随着培养基磷浓度增高OPN蛋白表达量亦相应增加.④随着培养基中OPN浓度的增高细胞钙化有减少趋势,OPN浓度0.5 μg/ml和5 μg/ml组钙化分别为(67±6.68) μg/mg protein、48.32±6.55 μg/mg protein,与单纯高磷组比较其差别具显著性(P<0.05).结论:高磷培养基能诱导血管平滑肌发生钙化和OPN表达,且与磷浓度和作用时间有关,外源性OPN能抑制高磷诱导的细胞钙化的产生,而且这种抑制作用具剂量依赖性.

    作者:李占园;刘毅;徐玉兰;毛朝鸣 刊期: 2006年第06期

  • 胃癌根治术前应用立止血对凝血功能变化的影响

    目的:探讨胃癌根治手术(D2,D3)对患者凝血功能的影响以及术前应用立止血对凝血功能的影响.方法:40例胃癌根治手术患者随机分为立止血及对照二组.术前5 min分组静注立止血2 kU或生理盐水5 ml.分别于给药前、给药后30 min和1 h及术毕抽取静脉血,检测血浆凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT).结果:对照组给药后30 min、1 h及术毕,PT、APTT均延长,与术前相比差异有显著性(P<0.05).立止血组术中PT、APTT延长,但与术前比较差异无显著性(P>0.05);术毕PT、APTT延长,与对照组比较差异无显著性.结论:胃癌根治术前静注立止血2 ku可使术中凝血时间趋于正常,从而减少术中渗血,而对术后凝血时间影响不大.

    作者:黄颖鹏;朱冠保;陈哲京;姚建高;韩少良;程骏 刊期: 2006年第06期

  • 颈髓损伤伴呼吸衰竭病人的抢救和护理

    外伤性颈髓损伤是临床较常见而又危险的疾病.急性呼吸衰竭是颈髓损伤及术后严重的并发症,也是常见的死亡原因[1].我院急诊ICU于1999.6-2005.6共收住了33例因车祸或高处坠落等原因而致颈椎骨折伴脱位、颈髓损伤而造成不同程度瘫痪患者,术前或术后并发呼吸衰竭,经过及时抢救和精心护理,22例患者均安全度过急性期,顺利脱机拔管进入后续治疗,4例患者抢救无效死亡,7例患者放弃治疗自动出院.现将抢救和护理体会报告如下.

    作者:朱莉芬;龚裕强;王莹莹;应斌宇 刊期: 2006年第06期

  • 浙江省少数民族农村贫困地区基本医疗及对策研究

    贫困人群的健康服务已经成为21世纪人口与发展的一个新领域,其中核心的服务之一便是对贫困人群实施医疗救助.所谓医疗救助是指政府通过提供财政、政策和技术上的支持使贫困人群直接获得某些或全部基本的医疗健康服务,以改善贫困人群健康状况的一种运行机制.实践证明,这种医疗救助可以大大改善贫困人群的健康状态,并极大提高全人群健康服务的公平性[1].但是,基于国情,政府的医疗救助存在一定的局限性,如何将有限的基金用于真正需要救助的人群,如何使医疗救助更具有针对性,将是医疗救助中有待于解决的重要问题.为此,本文通过对浙江省少数民族农村贫困地区基本医疗及对策分析,为政府和有关部门决策提供依据.

    作者:谢红莉;张国岭;周芬 刊期: 2006年第06期

温州医科大学学报杂志

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主管:温州医科大学

主办:温州医科大学