施美君；刘丹；胡克；陈国忠；杨炯
目的:探讨慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达, 以探讨老年抑郁症的发病机制. 方法:将20只Wistar老年大鼠随机分为实验组和对照组,每组10只.实验组大鼠每天强迫游泳20 min,并每周给予电刺激和强光照射各1次,经过21 d应激制作老年大鼠慢性应激抑郁模型,对照组正常喂养,不给予上述处理.采用特异性抗体标记的免疫组织化学方法,检测实验21 d后老年大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达情况,并观察大鼠开场行为和排便情况.结果:①实验组老年大鼠中央格停留时间延长,水平穿越格数减少,修饰行为减少,排便次数增多;② c-fos平均灰度值:实验组(166.56±9.73),对照组(149.62±12.91),有显著差异P=0.000;③阳性细胞数:实验组(41.12±4.72),对照组(31.12±3.25),P=0.000;④ caspase-3平均灰度值:实验组(202.59±2.64),对照组(179.74±8.24),有显著差异P=0.000;⑤阳性细胞数:实验组(24.73±2.57),对照组(18.86±1.13),有显著差异P=0.000.结论:慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和caspase-3蛋白表达增加,行为表现异常, 可能与慢性应激所致细胞凋亡增强,海马区脑组织损伤有关.
作者：侯安继；胡艳；周维；张红卫；唐志佼 刊期： 2008年第01期
目的:探讨几种血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)卡托普利、培哚普利、咪达普利、贝那普利、福辛普利对糖尿病大鼠左室心功能及心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白影响的类效应.方法:将48只SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病模型,随机分为5个给药组和1个糖尿病组(每组8只),另选8只做正常对照组.给药组每日分别灌胃给予卡托普利(50 mg/kg ),培哚普利(雅施达 4 mg/kg),咪达普利(达爽 10 mg/kg),贝那普利(洛汀新10 mg/kg ),福辛普利(蒙诺 10 mg/kg),糖尿病组给予生理盐水灌胃,共8周.对照观察心肌细胞凋亡、心肌组织Fas、FasL蛋白、Caspase-3及其Fas mRNA表达的变化.结果:与正常对照组相比,糖尿病给药组及未给药组的心肌细胞凋亡指数明显增高(均为P＜0.05);Caspase-3阳性蛋白表达率明显增高(均为P＜0.05);Fas蛋白阳性染色指数增高(均为P＜0.05);Fas的mRNA表达明显增高(均为P＜0.05).但糖尿病给药组的较未给药组低(均为P＜0.05).所有各组的FasL蛋白阳性染色指数差异不明显(均为P＞0.05).各种ACEI治疗组之间差异无显著性(均为P＞0.05).结论:糖尿病心肌病的发生、发展过程中有心肌细胞凋亡的变化和Caspase家族及Fas、FasL系统的参与;糖尿病大鼠心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas蛋白以及Fas的mRNA表达水平、Caspase-3蛋白表达水平增高.ACEI干预糖尿病心肌病,能够降低细胞凋亡及Fas基因的表达及Caspase-3蛋白表达水平,且几种ACEI具有类效应.
作者：宋陈芳；熊世熙；尹学恩；王海蓉；龚斐 刊期： 2008年第01期
目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)周期中血管内皮生长因子(VEGF)水平与卵母细胞成熟及早期胚胎质量的关系.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测78例接受IVF和ICSI助孕治疗的患者采卵日卵泡液中VEGF的水平,实验室观察同一卵泡腔内对应的卵母细胞的成熟度及其受精后胚胎发育情况,并结合临床上患者的年龄、促排卵方案等情况,分析两者之间的关联.结果:①卵泡液中VEGF的水平与卵母细胞成熟度研究表明:中间型及成熟型卵母细胞与未成熟型比较,差异有显著性(P＜0.05),而其它型之间差异没有显著性差异(P＞0.05).②卵泡液中VEGF的水平与早期胚胎发育研究表明:优质胚胎(Ⅰ、Ⅱ级)与非优质胚胎(Ⅲ、Ⅳ级)差异有显著性(P＜0.05).③卵母细胞成熟度处于中间型和成熟型组,年龄》35岁接受治疗的患者卵泡液中VEGF水平相比于年龄低于35岁的患者,差异有显著性(P＜0.05).结论:①卵泡液中VEGF浓度在一定范围内对卵母细胞成熟有促进作用,可作为评估卵母细胞质量、胚胎质量的有效指标之一.②在IVF和ICSI周期中,卵泡液中VEGF的水平可以作为筛选优质卵母细胞质量的参考指标,并可以作为指导及预测妊娠结局的有效指标之一,但是要注意患者年龄的因素.
作者：张四林；杨菁；尹太郎；黄诗韵；李小丹 刊期： 2008年第01期
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中S100A4蛋白的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化SP法检测S100A4蛋白在90例NSCLC组织中的表达,分析其与临床病理学特征的关系.结果:S100A4蛋白在NSCLC的表达阳性率为64.4%;S100A4蛋白的表达阳性率在鳞状细胞癌与腺癌、腺鳞癌、大细胞癌之间差异有显著性 (P＜0.05).S100A4蛋白的表达与NSCLC分化程度、淋巴结转移和年龄有关(P＜0.05).结论:S100A4蛋白在NSCLC中的表达与肿瘤的进展密切相关;S100A4蛋白可作为判断NSCLC生物学行为、预测转移趋势及指导临床治疗的有价值的标记物.
作者：李昊；韩继彪；张洪福 刊期： 2008年第01期
目的:观察不同浓度的苦参碱对宫颈癌HeLa细胞的作用.方法:浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.0 g/L的苦参碱体外培养HeLa细胞24,48,72 h后,分别用MTT法观察苦参碱对HeLa细胞的生长抑制作用、AnnexinV-PI双标染色用流式细胞仪检测苦参碱对HeLa细胞凋亡的影响.结果:不同浓度(0.5,1.0,1.5,2.0 g/L)的苦参碱具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,呈明显的时间、剂量依赖性.各浓度和时间之间比较具有显著差异性(P＜0.01).FCM检测结果显示苦参碱作用后,细胞的凋亡率增加,呈现随时间和剂量依赖性.各浓度和时间之间比较也具有显著差异性(P＜0.01).结论:苦参碱对人宫颈癌HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用,能诱导细胞凋亡的凋亡.
作者：李丹；张蔚；李福敏；黄晶；洛若愚 刊期： 2008年第01期
目的:检测PI3'K/Akt通路抑制剂对抗肿瘤药物诱导人胃癌细胞凋亡过程的影响.方法:将胃癌细胞系BGC-823细胞分为6组:空白对照组、渥曼青霉素组、足叶乙甙组、渥曼青霉素+足叶乙甙组、阿霉素组和渥曼青霉素+阿霉素组.按照上述分组用药物干预BGC-823细胞24 h,采用NaI法提取各组细胞的DNA,Western blot检测caspase-9表达变化及用琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况.结果:① DNA琼脂糖凝胶电泳示空白对照组未见DNA 梯状谱,其他5组均出现明显的DNA梯状谱;② Western blot 结果提示阿霉素与足叶乙甙干预后,BGC-823的Caspase-9活性与未处理组相比增强,加用渥曼青霉素处理后,BGC-823的Caspase-9活性与未处理组相比明显增强,与单用阿霉素或足叶乙甙处理组相比有所增强.结论:PI3K/AKT通路抑制剂能促进胃癌细胞凋亡,增强抗肿瘤化疗药物的疗效 .
作者：李欢；于皆平；于红刚；曹俊；杨艳；胡晓雯 刊期： 2008年第01期
目的:探讨阴茎包埋对海绵体结构和功能的影响.方法:通过建立隐匿阴茎动物模型获得实验标本,分2月组、4月组和6月组进行观测.通过分析海绵体内平滑肌和纤维结缔组织的含量及组织匀浆中NO合酶(NOS)的活性来了解海绵体结构和功能的变化.结果:包埋导致大鼠阴茎海绵体平滑肌含量下降(2月组P＞0.05,4月和6月组P＜0.05),纤维结缔组织含量增加(2月和4月组P》0.05,6月组P＜0.05),且组织的正常形态发生改变.包埋使大鼠阴茎海绵体组织的NOS活性较正常低 (2月组P＞0.05,4月组P＜0.05,6月组P＜0.01).结论:阴茎包埋对海绵体组织的结构和功能都存在影响,且与包埋时间正相关.
作者：余伟民；程帆；张孝斌；刘修恒；夏樾；胡志雄 刊期： 2008年第01期
预构皮瓣是皮瓣外科发展过程中的一个重要组成部分,在过去的30多年时间里,预构皮瓣的发展由初的理论提出到动物实验,再到应用于临床修复组织毁损性损伤,预构皮瓣类型由初的血管植入,发展为异体组织,取得了令人瞩目的成绩.目前预构皮瓣仍还有待完善,尽可能以少的供区破坏获得佳的受区修复将是该领域以后发展的方向.
作者：乃比尔；梁届东；余国荣；胡炳炎 刊期： 2008年第01期
目的:建立胃肠道平滑肌细胞的分离及离子通道检测方法,为胃肠道动力性疾病和离子通道相关性疾病的研究提供技术平台.方法:酶消化法急性分离胃肠道平滑肌细胞,运用离子通道膜片钳技术在全细胞模式下检测单个平滑肌细胞膜上离子通道的状况.结果:用酶消化法急性分离可获得细胞膜完整生物活性状态良好的单个胃肠道平滑肌细胞,该细胞符合膜片钳实验的要求;运用离子通道膜片钳技术在全细胞模式下可以记录基础状态和干预后单个胃肠道平滑肌细胞细胞膜上离子通道的开放状况,可用于相关的病理、生理、药理研究.结论:酶消化急性分离法是获得单个胃肠道平滑肌细胞的一种简单、有效、易操作的方法,运用该方法结合离子通道膜片钳技术可以准确记录胃肠道平滑肌细胞细胞膜上离子通道的开放状况.
作者：陈明锴；罗和生 刊期： 2008年第01期
目的:探讨P57kip2蛋白在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及意义.方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中P57kip2的表达水平,并结合第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达P57kip2的细胞是血管内皮细胞.利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织P57kip2表达的平均光密度和平均阳性面积率.结果::P57kip2在增生期血管瘤内皮细胞的表达低于退化期,差异有显著性(P＜0.005);退化期血管瘤内皮细胞P57kip2表达水平与正常组织相比,差异有显著性(P＜0.05).结论:P57kip2蛋白在血管退化期可能发挥抑制血管瘤内皮细胞增殖的作用,与血管瘤的消退有一定的关系.
作者：杨勇；刘平；张端莲；陕声国；张杰 刊期： 2008年第01期
目的:研究吉西他滨(GEM)对体外培养非小细胞肺癌细胞的细胞周期改变和凋亡影响,及其放疗增敏的作用及机制.方法:体外培养非小细胞肺癌细胞株A-549,分单纯培养细胞组、单纯照射组、单纯吉西他滨组及吉西他滨联合放疗组(联合放疗组);单纯照射组采用源皮距(SSD)为100 cm,剂量2 Gy,6 MV光子线照射;吉西他滨组采用MTT法选择对细胞生长抑制率≤10%的药物浓度(IC10)即为GEM的佳实验浓度;联合放疗组采用佳实验浓度的GEM加上述同等条件的照射剂量和方法;流式细胞仪分析上述各组细胞的细胞周期和凋亡率.结果:经MTT法检测显示,GEM在0.020-0.030 μmol/L 之间时为佳实验浓度.流式细胞仪分析各处理组细胞的细胞周期和凋亡率结果表明,各处理组之间细胞在S期时的比例有显著差异(P＜0.05),G2/M、S期比值变化为明显;细胞凋亡率亦有统计学差异(P＜0.05);单纯采用GEM浓度为0.02, 0.03 μmol/L时没有明显差别(P＞0.05).结论:吉西他滨可以具有放射增敏和协同作用,其机制可能与吉西他滨能改变A-549细胞生长周期并诱导其凋亡有关.
作者：李林均；陈元 刊期： 2008年第01期
目的:利用大鼠制作相关的动物模型来研究精索静脉曲张(VC)持续时间对精索内静脉结扎术(VT)效果的影响. 方法:将制作成左侧VC模型的SD大鼠分别于6,12,18周,行VT.于VT 8周后摘取各组大鼠左侧睾丸,检测其Johnsen's评分、生精小管的超微结构、睾丸组织的睾酮浓度(ITC)和生精细胞的凋亡指数(AI). 结果:VC持续6周和12周后治疗组各项指标与其对照组比较无显著性差异(P＞0.05).VC持续18周后治疗组Johnsen's评分显著低于其对照组(P＜0.05),AI显著高于对照组(P＜0.05),ITC无显著性差异(P＞0.05),生精小管的超微结构明显异常. 结论:长期VC将导致同侧睾丸生精功能不可逆性损害.
作者：郑轶群；张孝斌；戴冀斌；程帆；饶婷；姚颐 刊期： 2008年第01期
目的:研究原发性视神经萎缩(PONA)患者二极管发光器(LED)的多焦视网膜电图(mf-ERG)二阶反应波形特点.方法:选取正常人18例18只眼和11例原发于视神经挫伤、球后视神经炎、缺血性视乳头病变导致PONA 15眼,采用视觉电生理记录仪(RETI Scan3.15)分别作阴极射线管(CRT)及LED的mf-ERG二阶反应检查.CRT刺激器记录采用国际临床视觉电生理推荐标准记录,LED刺激时间为10/10(16.7 ms).观察CRT及LED的mf-ERG总和反应波形特点,两种刺激器记录波形分别比较正常组和PONA组mf-ERG二阶反应形态、振幅密度.结果:PONA组CRT刺激器的mf-ERG二阶反应波形N2波振幅比正常组增加,但两组之间没有显著性差异(P＞0.05).而PONA组LED刺激器N2波振幅比正常组减小,两组之间有显著性差异(P＜0.05).结论:LED刺激器mf-ERG二阶反应波形更丰富,其N2波可能包涵了更多视网膜内层信息.
作者：周芸芸；陈长征；熊莎；左成果；易莲芳 刊期： 2008年第01期
目的:研究缺血缺氧培养条件下,骨髓间充质干细胞(MSCs)生物学特点、细胞凋亡改变及对Caspase-3 mRNA表达的影响.方法:体外培养SD大鼠MSCs,取生长活性较好的同代细胞进行研究.组1为对照组,常规培养;组2、组3、组4为实验组,分别予缺血缺氧处理2.5,4.5,6.5 h.倒置显微镜下观察MSCs形态,荧光显微镜下观察DAPI染色后胞核改变,Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率,RT-PCR技术分析Caspase-3 mRNA表达水平.结果:倒置显微镜下MSCs形态纤长,多呈梭形、纺锤形、成纤维细胞样.对照组细胞核染色均匀,无明显凋亡改变;实验组MSCs细胞核出现染色质凝聚、边缘化,部分细胞核裂解为碎块的凋亡形态学改变.缺血缺氧处理2.5, 4.5, 6.5 h后MSCs凋亡率分别为(5.30±0.56)%、(9.83±0.87)%、(19.87±1.88)%,与对照组相比,P均《0.05.实验组细胞Caspase-3 mRNA表达较对照组明显上调,且随缺血缺氧时间的延长,其表达水平逐步增加.结论:缺血缺氧培养条件下,MSCs可出现凋亡改变,且细胞凋亡率随缺血缺氧时间的延长呈上升趋势.Caspase-3参与了MSCs的这一凋亡过程,且表达水平随缺血缺氧干预时间延长而逐渐增加.
作者：彭静；林国生 刊期： 2008年第01期
目的:回顾分析肺叶切除肺动脉重建术治疗中心型肺癌的效果.方法:采取肺叶切除肺动脉重建术治疗中心型肺癌,其肺动脉均受到肿瘤侵犯.肺部肿瘤部位左上叶45例,右上叶29例.处理方法为:浸润血管壁局部切除+直接缝合术27例;浸润血管壁局部切除+缺损血管壁补片术21例;浸润血管壁袖状切除+端端缝合术11例;浸润血管袖状切除+再造导管间置术15例.结果: 本组74例患者中,无手术死亡,术后发生并发症15例,肺炎13例次,心律失常1例次,心功能不全1例次,胸腔积液5例,经保守治疗均痊愈.结论: 肺血管成形肺叶切除是治疗中心型肺癌安全可靠的方法之一.
作者：肖永光；毛志福；黄杰；吴伟；谢颂平 刊期： 2008年第01期
目的:观察烟碱对内脏动脉阻断性(SAO)休克大鼠总体生存率、颈动脉平均动脉压(MAP)、血气分析及乳酸值的影响,探讨胆碱能抗炎通路在SAO休克中的作用.方法:采用阻断肠系膜上动脉和腹腔干动脉复制SAO休克模型.30只健康雄性大鼠随机分为5组:对照组(假手术组)、SAO组、烟碱组、六烃季胺组和α银环蛇毒素(α-BGT)组,每组6只.实验期间连续观察平均动脉压,再灌注1 h后取血行血气分析和乳酸值检测.另取30只SD大鼠随机分为对照组、SAO组和烟碱组,每组10只,记录3组大鼠4 h总体生存率和平均生存时间.结果:与假手术组比较,SAO组平均生存时间显著缩短,各时间点的生存率均显著降低(均为P＜0.01);再灌注后MAP持续低下,并有严重的代谢性酸中毒和高乳酸血症.与SAO组比较,烟碱组平均生存时间延长,各时间点的生存率均显著提高(均为P＜0.01);再灌注后MAP下降幅度减轻,代谢性酸中毒缓解.经六烃季胺及α-BGT拮抗后,烟碱处理的上述效应则完全抵消.结论:烟碱能够提高整体生存率,逆转SAO休克中严重低血压,改善休克状况,减轻酸中毒.其作用机制可能与激活胆碱能抗炎通路有关.
作者：吴远波；李建国；王丽；周青；贾宝辉 刊期： 2008年第01期
目的:观察黄连素对肝癌细胞株3B生长的影响,并且探讨其作用的机理.为阐明黄连素作为一种新的治疗肝癌的药物提供理论依据以及实验室的结果.方法:应用不同浓度的黄连素作用于肝癌细胞后,通过细胞免疫组化SP法检测细胞膜表面的Caspase-3蛋白的表达,用流式细胞仪和荧光显微镜观察癌细胞凋亡的情况,并应用RT-PCR法检测Caspase-3 mRNA的含量.结果:黄连素对肝癌细胞株3B 的生长有明显抑制作用,并有浓度依赖性.在时间相同内,药物处理组的Caspase-3蛋白和mRNA的表达与空白对照组相比较均有显著性差异(P＜0.01);流式细胞仪分析存在G2/M阻滞,在G1峰前有明显的凋亡峰;荧光显微镜观察显示细胞形态发生凋亡特征性的改变:细胞膜完整,染色质浓缩,核碎裂,凋亡小体的形成.结论:黄连素能够有效地抑制肝癌细胞的生长,其机理是诱导细胞凋亡;而凋亡的机制可能是通过Caspase-3起作用.
作者：吴刚；刘志苏；钱群；江从庆 刊期： 2008年第01期
目的:制备opticin特异性抗体并探讨opticin在牛眼中的分布.方法:将合成的多肽链免疫以获得OPT-C抗体,运用该抗体从玻璃体提取物中检测opticin,用免疫组织化学方法检测opticin在牛眼中的分布.结果:牛眼玻璃体提取物Western blot在40-50KU可看到2个清晰可辨的分离的条带.牛眼免疫组织化学发现opticin存在于牛眼视网膜、玻璃体和睫状体无色素上皮中.结论:Opticin存在于睫状体中,支持opticin可能由睫状体无色素上皮细胞分泌这一推测.Opticin与玻璃体胶原纤维相边,可能与玻璃体结构的稳定有关.
作者：李猛；邢怡桥；陈长征；候炜；陈静；李颖 刊期： 2008年第01期
目的:观察不同病程糖尿病大鼠视网膜血管超微结构的改变与核因子-κB(NF-κB)在视网膜中的表达情况,并研究两者间的关系,以探讨NF-κB在糖尿病视网膜病变(DR)发病机制中的作用.方法:SD大鼠48只,随机分为糖尿病组24只,对照组24只.糖尿病模型的建立采用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射.应用免疫组化SP三步法分别于1,3,5个月对大鼠视网膜的NF-κB表达情况进行观察,并用透射电镜进行超微结构的观察.结果:大鼠视网膜血管超微结构:对照组,微血管管壁完整,基底膜连续完整,内皮细胞、周细胞结构正常,异染色质分布均匀.糖尿病组,1个月时,微血管形态基本正常;3个月时内皮细胞明显肿胀、变形,周细胞异染色质边集、浓染,细胞器结构不清,基底膜增厚;5个月时,内皮细胞肿胀、变形更加明显,并有不同程度增生,血管腔明显变窄,周细胞内异染色质分布不均、边集、浓染,基底膜显著增厚.免疫组化结果:对照组,NF-κB仅表达于视网膜神经节细胞和内皮细胞胞质中,细胞核内未见其表达.糖尿病组,从1个月开始,可见视网膜各层细胞均有表达,并主要表达于细胞核内,随病程延长,表达进行性增高.结论:在糖尿病视网膜病变早期,视网膜微血管还未出现明显改变时,NF-κB已被激活,并且随着病程的延长,视网膜微血管超微结构明显改变,NF-κB的表达活性也不断增强.因此,NF-κB在DR的早期发生和后期增殖性发展中可能发挥着重要作用,对今后治疗DR也提供了新的依据.
作者：王苏；邢怡桥；周炼红 刊期： 2008年第01期
目的:探讨P-选择素在肺癌转移机制中的作用.方法:采用免疫组化SP法对48例原发性肺癌组织及18例癌旁组织P-选择素的表达进行检测.结果:①腺癌的P-选择素阳性表达明显高于鳞癌和癌旁组织(P＜0.01);②在腺癌中:P-选择素的阳性表达随TNM分期的递增而逐渐加强,Ⅲ+Ⅳ期的阳性表达明显高于Ⅰ+Ⅱ期(P＜0.05);P-选择素的表达与分化程度、淋巴结转移、肿瘤大小无明显相关性(P＞0.05).结论:P-选择素可能与腺癌的易浸润及血行转移有关.
作者：徐西琳；杨炯；李清泉 刊期： 2008年第01期
武汉大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：武汉大学
