李猛；邢怡桥；陈长征；候炜；陈静；李颖
目的:观察不同病程糖尿病大鼠视网膜血管超微结构的改变与核因子-κB(NF-κB)在视网膜中的表达情况,并研究两者间的关系,以探讨NF-κB在糖尿病视网膜病变(DR)发病机制中的作用.方法:SD大鼠48只,随机分为糖尿病组24只,对照组24只.糖尿病模型的建立采用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射.应用免疫组化SP三步法分别于1,3,5个月对大鼠视网膜的NF-κB表达情况进行观察,并用透射电镜进行超微结构的观察.结果:大鼠视网膜血管超微结构:对照组,微血管管壁完整,基底膜连续完整,内皮细胞、周细胞结构正常,异染色质分布均匀.糖尿病组,1个月时,微血管形态基本正常;3个月时内皮细胞明显肿胀、变形,周细胞异染色质边集、浓染,细胞器结构不清,基底膜增厚;5个月时,内皮细胞肿胀、变形更加明显,并有不同程度增生,血管腔明显变窄,周细胞内异染色质分布不均、边集、浓染,基底膜显著增厚.免疫组化结果:对照组,NF-κB仅表达于视网膜神经节细胞和内皮细胞胞质中,细胞核内未见其表达.糖尿病组,从1个月开始,可见视网膜各层细胞均有表达,并主要表达于细胞核内,随病程延长,表达进行性增高.结论:在糖尿病视网膜病变早期,视网膜微血管还未出现明显改变时,NF-κB已被激活,并且随着病程的延长,视网膜微血管超微结构明显改变,NF-κB的表达活性也不断增强.因此,NF-κB在DR的早期发生和后期增殖性发展中可能发挥着重要作用,对今后治疗DR也提供了新的依据.
作者：王苏；邢怡桥；周炼红 刊期： 2008年第01期
目的:研究吉西他滨(GEM)对体外培养非小细胞肺癌细胞的细胞周期改变和凋亡影响,及其放疗增敏的作用及机制.方法:体外培养非小细胞肺癌细胞株A-549,分单纯培养细胞组、单纯照射组、单纯吉西他滨组及吉西他滨联合放疗组(联合放疗组);单纯照射组采用源皮距(SSD)为100 cm,剂量2 Gy,6 MV光子线照射;吉西他滨组采用MTT法选择对细胞生长抑制率≤10%的药物浓度(IC10)即为GEM的佳实验浓度;联合放疗组采用佳实验浓度的GEM加上述同等条件的照射剂量和方法;流式细胞仪分析上述各组细胞的细胞周期和凋亡率.结果:经MTT法检测显示,GEM在0.020-0.030 μmol/L 之间时为佳实验浓度.流式细胞仪分析各处理组细胞的细胞周期和凋亡率结果表明,各处理组之间细胞在S期时的比例有显著差异(P＜0.05),G2/M、S期比值变化为明显;细胞凋亡率亦有统计学差异(P＜0.05);单纯采用GEM浓度为0.02, 0.03 μmol/L时没有明显差别(P＞0.05).结论:吉西他滨可以具有放射增敏和协同作用,其机制可能与吉西他滨能改变A-549细胞生长周期并诱导其凋亡有关.
作者：李林均；陈元 刊期： 2008年第01期
目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)周期中血管内皮生长因子(VEGF)水平与卵母细胞成熟及早期胚胎质量的关系.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测78例接受IVF和ICSI助孕治疗的患者采卵日卵泡液中VEGF的水平,实验室观察同一卵泡腔内对应的卵母细胞的成熟度及其受精后胚胎发育情况,并结合临床上患者的年龄、促排卵方案等情况,分析两者之间的关联.结果:①卵泡液中VEGF的水平与卵母细胞成熟度研究表明:中间型及成熟型卵母细胞与未成熟型比较,差异有显著性(P＜0.05),而其它型之间差异没有显著性差异(P＞0.05).②卵泡液中VEGF的水平与早期胚胎发育研究表明:优质胚胎(Ⅰ、Ⅱ级)与非优质胚胎(Ⅲ、Ⅳ级)差异有显著性(P＜0.05).③卵母细胞成熟度处于中间型和成熟型组,年龄》35岁接受治疗的患者卵泡液中VEGF水平相比于年龄低于35岁的患者,差异有显著性(P＜0.05).结论:①卵泡液中VEGF浓度在一定范围内对卵母细胞成熟有促进作用,可作为评估卵母细胞质量、胚胎质量的有效指标之一.②在IVF和ICSI周期中,卵泡液中VEGF的水平可以作为筛选优质卵母细胞质量的参考指标,并可以作为指导及预测妊娠结局的有效指标之一,但是要注意患者年龄的因素.
作者：张四林；杨菁；尹太郎；黄诗韵；李小丹 刊期： 2008年第01期
目的:利用大鼠制作相关的动物模型来研究精索静脉曲张(VC)持续时间对精索内静脉结扎术(VT)效果的影响. 方法:将制作成左侧VC模型的SD大鼠分别于6,12,18周,行VT.于VT 8周后摘取各组大鼠左侧睾丸,检测其Johnsen's评分、生精小管的超微结构、睾丸组织的睾酮浓度(ITC)和生精细胞的凋亡指数(AI). 结果:VC持续6周和12周后治疗组各项指标与其对照组比较无显著性差异(P＞0.05).VC持续18周后治疗组Johnsen's评分显著低于其对照组(P＜0.05),AI显著高于对照组(P＜0.05),ITC无显著性差异(P＞0.05),生精小管的超微结构明显异常. 结论:长期VC将导致同侧睾丸生精功能不可逆性损害.
作者：郑轶群；张孝斌；戴冀斌；程帆；饶婷；姚颐 刊期： 2008年第01期
目的:检测PI3'K/Akt通路抑制剂对抗肿瘤药物诱导人胃癌细胞凋亡过程的影响.方法:将胃癌细胞系BGC-823细胞分为6组:空白对照组、渥曼青霉素组、足叶乙甙组、渥曼青霉素+足叶乙甙组、阿霉素组和渥曼青霉素+阿霉素组.按照上述分组用药物干预BGC-823细胞24 h,采用NaI法提取各组细胞的DNA,Western blot检测caspase-9表达变化及用琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况.结果:① DNA琼脂糖凝胶电泳示空白对照组未见DNA 梯状谱,其他5组均出现明显的DNA梯状谱;② Western blot 结果提示阿霉素与足叶乙甙干预后,BGC-823的Caspase-9活性与未处理组相比增强,加用渥曼青霉素处理后,BGC-823的Caspase-9活性与未处理组相比明显增强,与单用阿霉素或足叶乙甙处理组相比有所增强.结论:PI3K/AKT通路抑制剂能促进胃癌细胞凋亡,增强抗肿瘤化疗药物的疗效 .
作者：李欢；于皆平；于红刚；曹俊；杨艳；胡晓雯 刊期： 2008年第01期
目的:观察不同浓度的苦参碱对宫颈癌HeLa细胞的作用.方法:浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.0 g/L的苦参碱体外培养HeLa细胞24,48,72 h后,分别用MTT法观察苦参碱对HeLa细胞的生长抑制作用、AnnexinV-PI双标染色用流式细胞仪检测苦参碱对HeLa细胞凋亡的影响.结果:不同浓度(0.5,1.0,1.5,2.0 g/L)的苦参碱具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,呈明显的时间、剂量依赖性.各浓度和时间之间比较具有显著差异性(P＜0.01).FCM检测结果显示苦参碱作用后,细胞的凋亡率增加,呈现随时间和剂量依赖性.各浓度和时间之间比较也具有显著差异性(P＜0.01).结论:苦参碱对人宫颈癌HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用,能诱导细胞凋亡的凋亡.
作者：李丹；张蔚；李福敏；黄晶；洛若愚 刊期： 2008年第01期
目的:观察瘦素对结肠癌细胞株HT-29的细胞生长的作用.方法:贴壁培养HT-29细胞,分别给予不同浓度的瘦素(0.5×10-6、5×10-5,1×10-4,2×10-4g/L).并同时以浓度为1×10-4g/L的表皮生长因子(EGF)作为阳性对照组,通过测定生长曲线、四甲基谷氮唑蓝实验MTT法观察瘦素对HT-29细胞生长的影响.结果:通过生长曲线,发现在相同时间段,瘦素浓度在5×10-6 -2×10-4g/L时,呈剂量依赖性促进HT-29细胞增殖.但即使在瘦素促细胞增殖为明显的2×10-4g/L组中,和阳性对照组EGF比较,其细胞增殖数量仍为低.MTT法结果显示,不同浓度的瘦素作用于HT-29细胞后,在72 h内,呈时间、剂量依赖性促进HT-29细胞生长,其增长率在5.1%-67.9%之间.细胞计数和MTT法均显示瘦素可促进结肠癌细胞HT-29的生长和增殖.提示瘦素作为多功能的细胞因子和结肠癌的发生密切相关.结论:在离体实验中,瘦素具有促结肠癌细胞HT-29生长增殖的作用,且和其浓度、时间相关.
作者：高国仿；沈磊；罗和生；谭诗云；孙军；沈志祥 刊期： 2008年第01期
目的:探讨乳腺浸润性导管癌尿激酶型纤溶酶激活物受体(uPAR)和人类表皮生长因子2(HER2)表达、相关性及临床意义.方法:采用免疫组织化学技术检测15例正常乳腺组织和60例原发性乳腺浸润性导管癌中尿激酶型纤溶酶激活物(uPA)、uPAR和HER2基因的表达.结果:乳腺浸润性导管癌组织uPA和uPAR蛋白表达的总阳性率分别为60.00%和63.33%,而支持组织无表达,uPAR的阳性表达与乳腺癌转移淋巴结个数有关;HER2表达总阳性率为67%,有淋巴结转移者其阳性率(65.22%)明显高于无淋巴结转移者(35.14%) (P《0.05);与uPAR阴性表达的癌组织相比,uPAR阳性的癌组织中HER2表达阳性率显著升高(84.21%±36.36%,P＜0.05),uPAR与HER2之间的表达高度相关.结论:uPAR和HER2蛋白在乳腺浸润性导管癌中高度表达,且密切相关;HER2过度表达与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移有关,而uPAR表达与转移的淋巴结个数有关.
作者：敖金娥；邹先进 刊期： 2008年第01期
Brugada综合征是特发性室颤的一种特殊类型,是常染色体不完全性遗传疾病,其发病相关联SCN5A基因编码心肌钠通道.本文综述了国内外关于Brugada综合征中SCN5A基因突变的电生理报道,探讨了Brugada综合征与SCN5A基因突变编码的通道电生理特性之间的联系.
作者：叶琤；李晓艳；舒周伍；蒋学俊 刊期： 2008年第01期
目的:比较经直肠超声引导前列腺神经阻滞术和直肠内灌注2%利多卡因凝胶在前列腺穿刺活检术中的镇痛疗效.方法:160例接受经直肠超声引导13点前列腺系统穿刺活检术的患者随机分为A、B两组.A组患者84例,在经直肠超声引导下,于前列腺基底部,左、右两侧精囊与前列腺交接处分别注射1%利多卡因5 ml,B组患者76例,于活检前5 min直肠内灌注2%利多卡因凝胶10 ml.采用视觉模拟评分(VAS)评估两组患者在穿刺活检术中的疼痛程度. 结果: 两组患者在平均年龄、PSA水平和前列腺体积的差异无显著性(P＞0.05),具有可比性.A组患者VAS评分0-3分者76例,4-5分者6例,6-10分者2例.B组患者则分别为48例、18例、10例.两组患者平均疼痛评分(VAS)分别为1.2分、2.6分, 差异具有高度显著性意义(t=4.73,P＜0.01).两组患者均未出现局麻药的不良反应.结论:经直肠超声引导前列腺神经阻滞术的镇痛疗效明显优于直肠内灌注2%利多卡因凝胶,值得临床推广应用.
作者：杨柳平；邓军洪；马胜利；叶章群 刊期： 2008年第01期
目的:研究电离辐射能否导致人结肠癌细胞系HT-29中信号转导子与转录活化子6(STAT6)蛋白活化,从而探讨肿瘤出现放射抗拒的可能机制.方法:用流式细胞仪检测HT-29细胞接受2 Gy射线照射后30 min、1 h、2 h细胞内STAT6蛋白的活化情况.结果:HT-29细胞接受射线照射后出现STAT6的活化,在照射后1 h达高峰(P＜0.01),2 h后稍高于照射前水平(P＜0.05).结论:射线可以引起HT-29细胞中STAT6蛋白的活化,从而导致细胞出现放射后的凋亡抑制,可能部分解释肿瘤细胞的放射抗拒性.
作者：秦琴；谢丛华；曹传华；彭冰；张阿丽 刊期： 2008年第01期
目的:探讨慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达, 以探讨老年抑郁症的发病机制. 方法:将20只Wistar老年大鼠随机分为实验组和对照组,每组10只.实验组大鼠每天强迫游泳20 min,并每周给予电刺激和强光照射各1次,经过21 d应激制作老年大鼠慢性应激抑郁模型,对照组正常喂养,不给予上述处理.采用特异性抗体标记的免疫组织化学方法,检测实验21 d后老年大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达情况,并观察大鼠开场行为和排便情况.结果:①实验组老年大鼠中央格停留时间延长,水平穿越格数减少,修饰行为减少,排便次数增多;② c-fos平均灰度值:实验组(166.56±9.73),对照组(149.62±12.91),有显著差异P=0.000;③阳性细胞数:实验组(41.12±4.72),对照组(31.12±3.25),P=0.000;④ caspase-3平均灰度值:实验组(202.59±2.64),对照组(179.74±8.24),有显著差异P=0.000;⑤阳性细胞数:实验组(24.73±2.57),对照组(18.86±1.13),有显著差异P=0.000.结论:慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和caspase-3蛋白表达增加,行为表现异常, 可能与慢性应激所致细胞凋亡增强,海马区脑组织损伤有关.
作者：侯安继；胡艳；周维；张红卫；唐志佼 刊期： 2008年第01期
目的:观察PIDD基因在肝癌组织中的表达情况,以及与肝癌患者的临床病理关系.方法:运用RT-PCR方法检测29例肝癌组织、12例癌旁组织和7例正常肝组织中PIDD基因的表达水平,分析PIDD表达水平与患者的组织分化、肿瘤大小、门脉转移以及术后复发时间之间的关系,分析其表达与P53表达之间的联系.结果:肝癌组织中PIDD的表达水平较正常肝脏组织(P＜0.001)以及癌旁组织均低(P＜0.001),分化越差,表达水平越低(P＜0.001);其表达水平与患者的肿瘤大小、门静脉转移之间无明显关系,而与患者术后的复发时间之间有明显相关性,PIDD水平越低,复发时间越短(P＜0.001).结论:PIDD在肝癌组织中的表达水平下降,分化越差的组织,其表达水平越低,且与患者术后复发时间之间有密切关系,可作为预测患者的一个独立指标.
作者：周猛；王卫星；兰明银；菅志远；严斌 刊期： 2008年第01期
目的:探讨阴茎包埋对海绵体结构和功能的影响.方法:通过建立隐匿阴茎动物模型获得实验标本,分2月组、4月组和6月组进行观测.通过分析海绵体内平滑肌和纤维结缔组织的含量及组织匀浆中NO合酶(NOS)的活性来了解海绵体结构和功能的变化.结果:包埋导致大鼠阴茎海绵体平滑肌含量下降(2月组P＞0.05,4月和6月组P＜0.05),纤维结缔组织含量增加(2月和4月组P》0.05,6月组P＜0.05),且组织的正常形态发生改变.包埋使大鼠阴茎海绵体组织的NOS活性较正常低 (2月组P＞0.05,4月组P＜0.05,6月组P＜0.01).结论:阴茎包埋对海绵体组织的结构和功能都存在影响,且与包埋时间正相关.
作者：余伟民；程帆；张孝斌；刘修恒；夏樾；胡志雄 刊期： 2008年第01期
目的:研究原发性视神经萎缩(PONA)患者二极管发光器(LED)的多焦视网膜电图(mf-ERG)二阶反应波形特点.方法:选取正常人18例18只眼和11例原发于视神经挫伤、球后视神经炎、缺血性视乳头病变导致PONA 15眼,采用视觉电生理记录仪(RETI Scan3.15)分别作阴极射线管(CRT)及LED的mf-ERG二阶反应检查.CRT刺激器记录采用国际临床视觉电生理推荐标准记录,LED刺激时间为10/10(16.7 ms).观察CRT及LED的mf-ERG总和反应波形特点,两种刺激器记录波形分别比较正常组和PONA组mf-ERG二阶反应形态、振幅密度.结果:PONA组CRT刺激器的mf-ERG二阶反应波形N2波振幅比正常组增加,但两组之间没有显著性差异(P＞0.05).而PONA组LED刺激器N2波振幅比正常组减小,两组之间有显著性差异(P＜0.05).结论:LED刺激器mf-ERG二阶反应波形更丰富,其N2波可能包涵了更多视网膜内层信息.
作者：周芸芸；陈长征；熊莎；左成果；易莲芳 刊期： 2008年第01期
目的:比较复合骨髓间充质干细胞(MSCs)的β-TCP生物陶瓷和单纯β-TCP生物陶瓷在大鼠体内与不同带血管蒂组织瓣联合植入后的血管再生能力.方法:80只成年SD大鼠,根据植入材料不同分2 组,即左侧的复合MSCs的β-TCP生物陶瓷(实验组)和右侧的单纯β-TCP生物陶瓷(空白组),再按不同的处理因素分为带膝上血管骨膜支的骨膜瓣包裹组和贯穿组,带腹壁浅血管的深筋膜包裹组和直接股部皮下埋放组.于术后第2, 4, 8, 16周处死动物后进行Masson染色、墨染大体透明标本、墨染切片HE染色及血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ-RAg)免疫组织化学染色观察比较新血管的生成.结果:实验组墨染区和Ⅷ-RAg阳性区比例(Pv值和Pr值)在2-8周时均高于对照组.(实验组和对照组)带血管蒂组织瓣处理组4-8周时的Pv值和Pr值均高于非组织瓣处理组.结论:MSCs在材料植入后2周内对诱导新血管形成起主要作用;带血管蒂组织瓣在材料植入后4-8周对诱导新血管生成起主要作用;带血管蒂骨膜瓣有较好的血管化和成骨能力.
作者：孔劲松；陈振光；郑晓晖；陶圣祥；杨玉华；林海涛 刊期： 2008年第01期
目的:研究从重组腺相关病毒介导血红素氧合酶-1(rAAV+HO-1)基因对大鼠慢性脑缺血认知能力改变和抗氧化应激作用.方法:成年雄性Wistar大鼠45只,每组各15只,随机分为假手术组(SH)、缺血2月组(2-VO),缺血2月+HO-1治疗组(2-VOH).各组在脑立体定位仪下定位大鼠海马部位, 2-VOH 组缓慢注射rAAV+HO-1基因2 μl,余组注入等量生理盐水.7 d后,采用永久节扎双侧颈总动脉方法制备慢性脑缺血动物模型.大鼠慢性缺血8周后,Morris水迷宫检测大鼠空间学习能力,Western blotting检测大鼠海马组织HO-1蛋白表达水平的变化,酶学法检测大鼠海马SOD活性、MDA含量、NO水平改变.结果:2-VO组大鼠认知水平下降与SH组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),2-VOH组比2-VO组逃避潜伏期明显减少,空间探索试验穿过平台次数增多,差异具有统计学意义(P＜0.01),2-VOH组HO-1蛋白水平表达与2-VO组对比有统计学差异(P＜0.01),2-VOH组与2-VO组对比SOD活性增多、MDA含量和NO水平下降,有统计学差异(P＜0.05),2-VOH组与SH组SOD活性、MDA和NO含量无统计学差异(P＞0.05).结论:海马注射重组腺相关病毒介导HO-1基因,能够使慢性脑缺血大鼠海马组织HO-1蛋白水平表达升高,增加SOD活性,降低MDA、NO含量,减少氧化应激损伤,一定程度上改善大鼠空间认知学习能力.
作者：王京；王成夭；章军建 刊期： 2008年第01期
目的:探讨P57kip2蛋白在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及意义.方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中P57kip2的表达水平,并结合第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达P57kip2的细胞是血管内皮细胞.利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织P57kip2表达的平均光密度和平均阳性面积率.结果::P57kip2在增生期血管瘤内皮细胞的表达低于退化期,差异有显著性(P＜0.005);退化期血管瘤内皮细胞P57kip2表达水平与正常组织相比,差异有显著性(P＜0.05).结论:P57kip2蛋白在血管退化期可能发挥抑制血管瘤内皮细胞增殖的作用,与血管瘤的消退有一定的关系.
作者：杨勇；刘平；张端莲；陕声国；张杰 刊期： 2008年第01期
目的:探讨高度近视白内障超声乳化术后低视力原因.方法:研究167例(197只眼)高度近视白内障.按眼轴长度分A组26-30 mm 124眼,B组≥30 mm 73眼,术前佳矫正视力光感-0.15,屈光度-8.00--24D.行超声乳化白内障,植入折叠型IOL于囊袋内.术后随访1周-12月,观察与术后低视力有关的因素.结果:术后裸眼或矫正视力≥0.5者A组124眼(94.4%),B组12只眼(16.4%),两组比较有显著差异.术中1眼后囊破裂(0.5%),术后24 h一过性高眼压6眼,45眼(22.84%)后发性白内障,7眼行Nd∶YAG激光后囊切开术,2眼视网膜脱离,25例行预防性视网膜光凝术.结论:高度近视白内障超乳+人工晶体植入术后视力主要与眼底病变有关.术前精确计算人工晶体度数;术中保持后囊完整,降低后性白内发障等并发症;术后早期预防性视网膜光凝有助于提高患者术后视力.
作者：聂鑫；柯敏 刊期： 2008年第01期
目的:研究缺血缺氧培养条件下,骨髓间充质干细胞(MSCs)生物学特点、细胞凋亡改变及对Caspase-3 mRNA表达的影响.方法:体外培养SD大鼠MSCs,取生长活性较好的同代细胞进行研究.组1为对照组,常规培养;组2、组3、组4为实验组,分别予缺血缺氧处理2.5,4.5,6.5 h.倒置显微镜下观察MSCs形态,荧光显微镜下观察DAPI染色后胞核改变,Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率,RT-PCR技术分析Caspase-3 mRNA表达水平.结果:倒置显微镜下MSCs形态纤长,多呈梭形、纺锤形、成纤维细胞样.对照组细胞核染色均匀,无明显凋亡改变;实验组MSCs细胞核出现染色质凝聚、边缘化,部分细胞核裂解为碎块的凋亡形态学改变.缺血缺氧处理2.5, 4.5, 6.5 h后MSCs凋亡率分别为(5.30±0.56)%、(9.83±0.87)%、(19.87±1.88)%,与对照组相比,P均《0.05.实验组细胞Caspase-3 mRNA表达较对照组明显上调,且随缺血缺氧时间的延长,其表达水平逐步增加.结论:缺血缺氧培养条件下,MSCs可出现凋亡改变,且细胞凋亡率随缺血缺氧时间的延长呈上升趋势.Caspase-3参与了MSCs的这一凋亡过程,且表达水平随缺血缺氧干预时间延长而逐渐增加.
作者：彭静；林国生 刊期： 2008年第01期
武汉大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：武汉大学
