刘嵘；李天；何泓；濮德敏
目的 通过观察转化生长因子-β(TGF-β)3种不同亚型(β1、β2和β3)对前软骨干细胞(PSCs)的增殖分化及细胞外基质合成的影响,为构建组织工程学软骨组织寻找理想的细胞因子.方法 通过免疫磁珠分选法得到经过筛选和纯化的PSCs细胞,分别用含有浓度为10 ng/mL的3种亚型的重组TGF-β培养液对PSCs进行培养.PSCs培养后第0、3,6、9天,采用MTT法与BrdU/PI双参法测细胞增殖及DNA合成水平,采用RT PCR法测定ColⅡ、Aggrecan基因的表达.采用免疫组化法测定培养2周后各组细胞SOX9蛋白表达情况.结果 培养3d后,TGF-β1组PSCs的增殖活性明显较对照组下降(P＜0.05),而TGF-β2、TGF-β3组增殖活性与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).6d后,与对照组相比,TGF-β1组细胞增殖活性明显降低(P＜0.05);而TGF-β2、TGF-β3组则显示了相反的结果,增殖活性较对照组明显增强,且TGF-β3组高于TGF-β2组(P＜0.05).DNA合成呈同样趋势.RT PCR分析显示,随着时间的延长,与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3组ColⅡ基因表达均呈上升趋势;TGF-β1与TGF-β3组Aggrecan的表达亦较对照组增加,但TGF-β2组Aggrecan的基因表达无明显改变.免疫组化检测结果显示,TGF-β1、TGF-β3组的SOX9蛋白合成高于对照组(P＜0.05),而TGF-β2组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TGF-β1能抑制PSCs增殖活性,而TGF-β2和TGF-β3具有促进PSCs增殖的作用,TGF-β1与TGF-β3均能促进PSCs细胞分化,而TGF-β2对于分化的诱导作用不明显.
作者：丁然；王庆；蔡贤华 刊期： 2013年第06期
目的 探讨1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对联合培养的大鼠骨骼肌成肌细胞及新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧所致细胞损伤的影响.方法 体外分离与培养新生大鼠心肌细胞,并与大鼠骨骼肌成肌细胞共同培养,构建缺氧/复氧损伤模型,于复氧期开始给予S1P干预.利用2,4二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,并比较各组间差异,从而观察S1P对共同培养新生大鼠心肌细胞和大鼠骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧诱导细胞损伤的影响.结果 ①新生大鼠心肌细胞在培养24 h后开始贴壁生长,培养6d内细胞数量未见明显变化,培养2d后倒置显微镜下见散在的具有搏动能力的心肌细胞,第3天可见散在的心肌细胞相互间连接成合胞且可见细胞搏动,4～5d呈同一节律的搏动.②100、500、1 000 nmol/L S1P均可减少共培养心肌细胞和骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧损伤后LDH活性和MDA含量,即可减轻复氧所诱导的细胞损伤.③S1P可抑制共培养心肌细胞和骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧损伤后的细胞凋亡.结论 S1P可减少因复氧所诱导的共同培养细胞损伤,抑制细胞凋亡.
作者：于欢；谷翔；张普华；徐良贤；陈培良；秦仲君；赵勇 刊期： 2013年第06期
目的 比较来氟米特(LEF)与霉酚酸酯(MMF)治疗糖尿病肾病大鼠的疗效.方法 健康雄性SD大鼠40只,随机分成4组:正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(D组)、糖尿病肾病十霉酚酸酯组(M组)、糖尿病肾病十来氟米特组(L组),后3组予以高糖高脂饮食喂养,4周后一次性腹腔注射STZ 40 mg/kg制模.M组、L组分别予以MMF 10mg/(kg·d)、LEF 5 mg/(kg·d)灌胃干预,共8周.0周、4周、8周分别检测大鼠血肌酐、尿肌酐、24 h尿蛋白定量,计算内生肌酐清除率(Ccr);于8周末取肾组织行病理检查并予病理学评分,免疫组化检测肾组织中血管细胞粘附分子-1(VCAM 1)的表达.结果 ①24 h尿蛋白:M组4周时无明显变化,8周时明显下降(P＜0.05);L组4周时即有明显减少(P＜0.05),8周时进一步下降(P＜0.05).②Ccr:M组和L组各时间点均无明显变化,组间比较差异亦无统计学意义(P＞0.05).③病理学评分:M组与D组相比差异无统计学意义;L组较M组、D组均有明显下降(均P＜0.05).④VCAM 1表达:与D组相比,M组明显减少(P＜0.05),L组无明显变化.结论 LEF在降低蛋白尿,改善肾脏病理学评分方面强于MMF,但对于微血管病变的控制上MMF则更具有优势.
作者：李广胜；曾艳；李秋月；周静；吕金雷 刊期： 2013年第06期
目的 探究Twist介导的衰老逃逸在宫颈癌侵袭转移过程中的作用.方法 免疫组织化学法检测70例宫颈鳞状细胞癌标本中Twist和衰老指标CBX3的表达;合成靶向Twist的小干扰RNA瞬时转染宫颈鳞癌细胞SiHa,免疫细胞化学及β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老变化.结果 Twist在早期宫颈鳞癌(Ⅰ a～Ⅱa期)及晚期宫颈鳞癌(Ⅱb～Ⅲb期)组织中表达强阳性率分别为6.7％和15.0％,CBX3表达强阳性率分别为10.0％和0％;而在发生或未发生淋巴结转移的宫颈鳞癌组织中,Twist表达强阳性率分剐为25.0％和2.4％,CBX3表达强阳性率分别为0％和7.2％.Twist在早、晚期宫颈鳞癌组织表达改变与CBX3相反.低表达Twist的SiHa中CBX3表达上调,并伴有β-半乳糖苷酶染色增强.结论 Twist在宫颈癌发展过程中表达逐渐升高,其介导的衰老逃逸贯穿宫颈癌侵袭转移的整个过程.
作者：王恬；陶涛；阿比丹·吐尔汗江；汪雯雯；栗妍；王世宣 刊期： 2013年第06期
目的 探讨松果体区肿瘤经Poppen入路的显微外科治疗方法及手术技巧.方法 回顾性分析深圳市第二人民医院神经外科2002年2月至2012年12月收治的35例经Poppen手术入路显微切除的松果体区肿瘤患者的临床资料.结果 全切除27例,次全切6例,部分切除2例.其中生殪细胞瘤9例,脑膜瘤9例,蛛网膜囊肿5例,成熟畸胎瘤5例,表皮样囊肿2例,胶质瘤2例,血管网织细胞瘤2例,转移瘤1例.术后无1例发生视野缺损,平均住院27 d,均恢复良好出院,所有患者出院时KPS评分平均(88.0±5.9)分,均较术前的(78.0±8.7)分明显提高.结论 Poppen入路显微外科手术治疗松果体区肿瘤路径短、损伤小、损伤深静脉可能性小、肿瘤切除满意,是治疗松果体区肿瘤的理想入路.
作者：蒋太鹏；高永中；丁建军；陈保东；左大辉 刊期： 2013年第06期
目的 观察GAD65基因修饰的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在癫痫大鼠脑内的表达及对癫痫发作的影响.方法 原代培养大鼠MSCs,流式细胞仪鉴定第3代细胞纯度;用LV5 GFP-GAD65病毒液转染MSCs,并鉴定蛋白表达;将GAD65基因修饰的MSCs移植至戊四氮癫痫大鼠模型侧脑室后,观察其对癫痫大鼠行为学、脑电图的影响;Western blot检测细胞移植后大鼠海马组织内GAD65的表达.结果 流式细胞仪检测第3代MSCs可以达到较高纯度;LV5-GFP-GAD65转染细胞后,MSCs中能够正确过表达GAD65;细胞移植后GAD65-MSCs组大鼠癫痫的发作次数减少,发作级别减低;脑电图结果表明癫痫发作痫波减少;Western blot检测结果显示GAD65-MSCs组大鼠海马组织中GAD65含量增高.结论 脑内移植GAD65基因修饰的MSCs能明显抑制大鼠的癫痫发作.
作者：赵元淑；罗淼珊；邓镇；谢柳；余涵；陈丽；胡景鑫；朱晓琴；雷水生 刊期： 2013年第06期
高钙血症是指血清离子钙浓度的异常升高(＞2.60 mmol/L).高钙血症是恶性肿瘤患者常见的并发症之一,称为恶性肿瘤性高钙血症(MAH).不同肿瘤发生MAH的概率有很大差异,恶性实体肿瘤如肺癌、乳腺癌是高钙血症的常见原因之一.MAH也见于某些恶性血液病,如多发性骨髓瘤、成人T细胞白血病/淋巴瘤等.但急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)发生高钙血症的概率很低[1-2],尤其是成人B-ALL.我们成功治疗了1例成人B-ALL合并的重度高钙血症,现报道如下.
作者：段铱；王迪；熊晶；李登举 刊期： 2013年第06期
目的 观察原发性肝癌不经手术,直接在超声引导下经皮微波消融治疗的临床疗效.方法 32例原发性肝癌患者,共34个病灶(大直径均＜5 cm),未经手术治疗,在局麻下使用超声引导直接经皮穿刺进入肝癌瘤体内对其进行微波消融.微波消融后1个月行超声造影、磁共振(MR)或增强CT(CECT)检查,判定病灶的完全消融率.经过后期的随访判定原发性肝癌微波消融后的局部复发率、再发率及患者生存率.结果 超声引导下微波消融治疗1个月后,34个病灶的完全消融率为97.1％,随访3～24个月,32例患者的再发率21.9％.患者1年、2年生存率分别为89.7％、82.0％.结论 微波消融是治疗原发性肝癌的有效方法,尤其对于体积较小、单发的癌肿、微波消融可以一次彻底消融,疗效满意.
作者：张丽英；李开艳；张婷婷；高孟 刊期： 2013年第06期
近年来,随着组织工程的深入研究,骨组织工程受到学者越来越多的重视.目前,骨组织工程的研究重点集中在支架材料、种子细胞、骨构建的相关生长因子等三个方面.纳米羟基磷灰石(nanohydroxyaptite,nHAP)属于陶瓷类材料,有利于人体骨组织的修复、整合及改善植入组织的力学性能,因其优良的生物性能而备受关注,nHAP已作为骨移植生物材料广泛用于研究和临床[1].尤其是nHAP复合材料,在骨组织工程的研究应用中取得了较大进展[2].
作者：殷丽华；韩雨芝；余红豆；余占海 刊期： 2013年第06期
大多数情况下,儿童尿失禁是由逼尿肌/括约肌功能性协调障碍所致,治疗效果不确定.单侧肾发育不良伴输尿管异位开口的经典症状是既有正常排尿又有持续滴尿现象,与假性尿失禁症状相似.单侧肾发育不良伴输尿管异位开口虽然少见,据中国新生儿缺陷监测调查,其发生率约为29/100万[1],但是一旦确诊,手术治疗可以彻底治愈.我院2008年至2012年期间采用后腹腔镜肾切除术治疗11例小儿肾发育不良伴输尿管异位开口,本文对其临床症状、诊断方法以及治疗方式进行了回顾性分析,现报道如下.
作者：朱梁；朱斌；赵晓昆；杨罗艳；钟朝辉 刊期： 2013年第06期
目的 探讨野生型(wt)-p53与JunB融合基因抑制裸鼠肝细胞肝癌(肝癌)移植瘤的作用.方法 将18只BALB/c裸鼠按随机数字表法随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,每组6只,分别接种wt-p53与JunB融合基因质粒、携带GFP的空质粒及单纯肝癌细胞HepG2,于注射后的28 d处死荷瘤裸鼠,测量肿瘤体积、肿瘤重量,计算肿瘤抑制率.结果 3组裸鼠移植瘤位于背侧皮下,实验组裸鼠移植瘤较小,阴性对照组与空白对照组裸鼠移植瘤均明显隆起于裸鼠背部皮下.实验组移植瘤的体积、重量明显小于阴性对照组,差异均有统计学意义(LSD-t=4.63,P=0.006;LSD-t=19.56,P＜0.01);实验组移植瘤的体积、重量也明显小于空白对照组,差异均有统计学意义(LSD-t=5.74,P=0.002;LSD-t =27,22,P＜0.01);阴性对照组与空白对照组间移植瘤的体积、重量差异无统计学意义(LSD-t=1.59,P=0.171;LSDt=2.00,P=0.101).实验组平均肿瘤抑制率为84％.结论 wt-p53和JunB融合基因可明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长.
作者：郭成；段建峰；刘青光；张雷；杨雪；宋涛；姚英民 刊期： 2013年第06期
目的 探讨羟乙基淀粉部分代替血浆在人工肝支持系统中治疗肝衰竭的应用方法及安全性.方法 45名肝衰竭患者应用全血浆、低比例(≤25％)或高比例(＞25％)羟乙基淀粉代替血浆进行血浆置换或血浆置换联合吸附人工肝治疗,共124人次,比较各种方法治疗前后生化指标变化及副反应发生情况.结果 用羟乙基淀粉部分代替血浆进行人工肝治疗后,患者的肝功能指标可显著改善,其中经血浆置换联合吸附人工肝治疗对部分肝功能指标的改善强于单纯血浆置换方法,并且羟乙基淀粉应用比例≤25％总置换量时对胆红素等的清除效果更显著,对机体的不良影响更小.结论 在人工肝治疗肝衰竭过程中可低比例应用羟乙基淀粉代替血浆,以在一定程度上缓解临床用血的压力.
作者：孙潺；彭程；揭盛华；曾甫珍；杨东亮 刊期： 2013年第06期
目的 探讨低氧对小鼠前列腺癌细胞化疗抵抗的影响及其可能的机制.方法 将小鼠前列腺癌细胞RM-1分别在常氧(20％O2)和低氧(1％O2)条件下与化疗药物Cisplatin、Docetaxel共同培养,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Real-time PCR检测凋亡相关因子的表达;将自噬标志性分子LC3的质粒(GFP-LC3)转染至RM-1细胞,荧光显微镜下观察细胞自噬的情况.结果 低氧条件可显著诱导RM-1细胞化疗抗性增加,与常氧条件相比,低氧条件下以化疗药物处理的细胞,其增殖显著升高(P＜0.05),细胞凋亡率显著降低(P＜0.05),促凋亡基因Bax表达降低,而凋亡抑制基因Bcl-2表达升高;RM-1细胞转染GFP-LC3后发现,低氧可显著诱导RM-1细胞发生自噬;在低氧条件下,以化疗药物处理RM-1细胞时加入自噬抑制剂,可显著增加细胞对化疗的敏感性.结论 低氧可显著增强前列腺癌细胞的化疗抗性,其机制可能是通过诱导前列腺癌细胞发生自噬所介导.
作者：唐礼功；谢森；潘铁军；李志雄；陈欢欢；井莹 刊期： 2013年第06期
目的 研究多层螺旋CT(MSCT)肺气肿指数在预测慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重风险中的应用价值.方法 COPD患者共264例(全部符合GOLD 2011年修订版诊断标准)纳入该研究,所有患者行肺功能检查,并采用MSCT在大呼气末扫描全肺,用Pulmo肺定量软件测定肺气肿指数(LAA％,即以-910 HU为阈值,测定肺低衰减区占全肺体积的百分比). COPD急性加重次数通过EXACT问卷获得.将患者上1年COPD急性加重次数与肺功能及肺气肿指数进行统计学分析.结果 多变量Logistic回归分析发现,对于深呼气末LAA％≥15％的COPD患者,在校正CAT评分和FEV1后,LAA％每增加1％,相应COPD急性加重风险增加1.12倍(P＜0.01).结论 肺气肿加重与COPD急性加重有关,是独立于FEV1的指标,MSCT定量测量肺气肿指数有助于发现可能发生COPD急性加重的患者,并早期给予积极干预.
作者：杨士芳；高兴林；吴健；张金娥；刘春玲 刊期： 2013年第06期
由美国癌症学会进行的一项新调查显示,2009年美国结直肠癌的年发病人数和死亡人数分别为146 970例和49 920例,在所有肿瘤中排第3位[1].目前,在结直肠癌的影像学诊断,复发转移及治疗反应监测中,传统影像学技术如计算机断层显像(computed tomography,CT)、磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、结直肠镜、直肠内超声(endorectal ultrasonography,EUS)、胸片等仍占主导地位.正电子发射断层/计算机断层显像(positron emission tomography/computed tomography,PET/CT)是一种集功能代谢影像与解剖影像于一体的融合显像模式,其通过应用不同种类的显像剂从分子水平反映肿瘤的代谢、增殖等情况,因此在肿瘤发生或复发转移早期就可进行诊断.
作者：李崇佼；兰晓莉；张永学 刊期： 2013年第06期
目的 研究miR-218对卵巢癌细胞A2780转移侵袭的影响及可能机制.方法 miR-218 mimics转染A2780细胞,实时定量PCR检测转染效率;对转染前后细胞进行划痕及Transwell实验,并采用Western blot分析Wnt2B蛋白表达的改变.采用双萤光素酶报告基因检测系统验证Wnt2B是否为miR-218靶基因.结果 A2780细胞转染miR-218 mimics后,细胞运动侵袭功能受到明显抑制,Wnt2B蛋白表达明显下降,其为miR-218直接作用的靶基因.结论 miR-218可能通过靶向Wnt2B抑制卵巢癌细胞A2780的转移侵袭功能.
作者：饶玉梅；纪妹；史惠蓉；陈彩虹 刊期： 2013年第06期
目的 比较2种复合阳离子聚合物/pDNA的基因活化基质转染骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的效果.方法 以壳聚糖/胶原复合支架为基质材料,以壳聚糖/pDNA复合物或PEI/pDNA复合物为基因传递系统,合成了2种不同的基因活化基质(gene-activated matrix,GAM).以含有裸DNA的GAM作为对照,将BMSCs种植于各组GAM中共培养7d,采用MTT法通过检测细胞的吸光度值测定细胞的增殖能力,检测各种GAM的细胞相容性;各组GAM采用共培养转染和直接转染2种方式体外转染BMSCs,通过检测萤光素酶表达水平比较各种GAM体外转染BM-SCs的能力.结果 与对照组相比,含有壳聚糖/pDNA复合物的GAM并未影响BMSCs的增殖(P＞0.05),具有良好的细胞相容性;而与含有PEI/pDNA复合物的GAM共培养的BMSCs增殖能力明显低于对照组(P＜0.05),对BMSCs具有一定的细胞毒性.采用共培养转染方式,壳聚糖/pDNA与PEI/pDNA复合物组均获得比对照组高的转染结果(1.28×10 5,1.62×105 vs.2.14×104 RLU/mg protein),但两复合物组相比差异无统计学意义(P＞0.05);采用直接转染方式,壳聚糖/pDNA组的萤光素酶表达水平与对照组相比差异无统计学意义(4.51×104vs.3.23× 104 RLU/mg protein,P＞0.05),而PEI/pDNA组的表达水平(2.50×105 RLU/mg protein)高于对照组(P＜0.05).结论 含有壳聚糖/pDNA复合物的GAM,体外共培养转染BMSCs具有较好的生物相容性及一定的转染能力,具有用于体内基因治疗的潜力.
作者：彭琳；高原 刊期： 2013年第06期
目的 探讨胃癌根治术中完整网膜囊切除对术后局部复发及生存率的影响.方法 检索Pubmed(1966年1月至2012年10月)、Embase(1974年1月至2012年10月)、中国知网(1994年1月至2012年10月)等数据库并交叉核对文献,初筛纳入英文文献359篇、中文文献101篇.再依纳入标准“胃癌行D1-D2根治术、对术中行网膜囊完整切除与不完整切除进行分组、术后3年行局部复发率及总生存率的统计”筛选,共入选6篇文献.采用RevMan 5.2软件进行Meta分析.结果 纳入6篇文献,共1 869例D1-D2胃癌根治术患者的临床资料.其中完整网膜囊切除组1 370例,非完整网膜囊切除组499例,两组局部复发率差异无统计学意义[OR=0.92,95％CI(0.62,1.37)],3年总生存率间差异无统计学意义[OR=0.78,95％ CI(0.53,1.16)].其中进展期胃癌,完整网膜囊切除组237例,非完整网膜囊切除组225例,两组间局部复发率差异无统计学意义[OR=0.84,95％CI(0.54,1.31)],3年总生存率差异无统计学意义[OR=0.76,95％CI(0.48,1.20)].结论 D1-D2胃癌根治术中进行完整网膜囊切除对降低局部复发率和提高患者生存率方面没有明显优势.
作者：左东；王钢；陆艺；龚建平 刊期： 2013年第06期
目的 改进小鼠胰岛的分离、纯化及移植方法.方法 基于传统小鼠胰岛移植模型,优化胶原酶消化液配方,标准化胰腺组织的消化过程,改用Histopaque 1077作为纯化胰岛的离心介质,改进胰岛制备物输送至肾包膜下的方法;相差显微镜下观察所获胰岛的形态,用双硫腙(DTZ)对胰岛进行特异性染色并计算胰岛产量及纯度;采用吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法观察胰岛活性;制备糖尿病小鼠模型,设计胰岛移植组(10只)及假手术对照组(10只),检验胰岛移植物治疗糖尿病的效果.结果 健康胰岛有完整包膜,DTZ染色后呈猩红色,平均每只小鼠可收获(200±30)个胰岛团,终纯度(90±5)％;荧光显微镜下,AO-PI染色后,正常胰岛显示绿色,死亡胰岛显示红色,胰岛存活率为(93±3)％;糖尿病小鼠接受同系胰岛移植后,90％的小鼠逆转糖尿病,对照组小鼠的血糖无改善.结论 成功改进胰岛移植模型,简化和标准化小鼠胰岛的分离、纯化及移植过程,有助于该模型成为胰岛移植研究的常规方法.
作者：马俊磊；曾怡；张冬梅；姜松；李幸；戴晓敏；汪晶；宫念樵 刊期： 2013年第06期
目的 探讨新辅助化疗对宫颈鳞状细胞癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤细胞增殖指数Ki-67表达的影响,并分析其表达变化与临床疗效的关系.方法 用免疫组化SP法分别检测58例Ⅰ B2～ⅡB期宫颈鳞癌患者新辅助化疗前后uPA、VEGF、Ki-67的表达.结果 新辅助化疗后,uPA、VEGF及Ki-67的表达均明显下降(均P＜0.05);化疗前uPA、VEGF阴性患者的化疗效果优于uPA、VEGF阳性者(均P＜0.05),化疗前Ki-67阳性表达的患者新辅助化疗效果明显好于阴性表达者(P＜0.01).结论 uPA、VEGF、Ki-67的表达变化与宫颈癌新辅助化疗疗效显著相关,有可能作为预测宫颈癌新辅助化疗效果的参考指标.
作者：刘嵘；李天；何泓；濮德敏 刊期： 2013年第06期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
