张昌伟;水志刚;孙宗全;刘金平;夏家红;师智勇
目的 比较Pinl抑制剂(Juglone)和环磷酰胺(CTX)对4株宫颈癌细胞生长的影响,以探讨Juglone的抗肿瘤作用.方法 体外培养人宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C33a以及Caski,用细胞生长曲线和MTT试验观察细胞生长状况,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot和比色法检测Caspase 3蛋白表达及活性.结果 细胞生长曲线和MTT试验均表明,Juglone对4株宫颈癌细胞生长有明显的抑制作用,且抑制作用随作用浓度和作用时间增加而增强.流式细胞仪检测表明,Juglone(50 μmol/L)培养24 h后,G2/M期细胞比例数较CTX组明显增加.而G0/G1期细胞比例数却较CTX组降低.Western blot和比色法显示Juglone各浓度组中Caspase 3活性明显高于CTX组.结论 Juglone可能通过体外抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡等途径抑制肿瘤的发展.
作者:钱颖;董卫红;贺晓琪;王泽华 刊期: 2008年第06期
目的 探讨建立紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛模型的可行性.方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,各组均在第1、3、5、7天腹腔注射紫杉醇,剂量分别为0、0.5,1.0、2.0 mg/(kg·d).分别于用药前和用药后第3、5、7、12、16、20和25天测定大鼠的机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL),用药后第20天采用透射电镜观察坐骨神经超微结构.结果 腹腔注射紫杉醇1.0 mg/kg组大鼠早在用药的第5天出现机械痛敏和热痛敏,机械痛阈在用药的第12天达到小.而热痛阈在用药的第16天达到小.腹腔注射紫杉醇1.0 mg/kg组大鼠的坐骨神经纤维髓鞘板层结构松散、肿胀变形、排列紊乱、厚薄不均.结论 使用SD大鼠重复腹腔注射1.0 mg/kg紫杉醇的方法 可以成功建立紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛模型.
作者:陈治军;田玉科;罗放;曹菲;王平 刊期: 2008年第06期
目的 研究大鼠体神经-内脏神经吻合以及体神经-体神经吻合术后生长相关蛋白(GAP-43)与微管相关蛋白(TAU)在脊髓前角运动神经元中的表达变化规律与差异,进一步探讨影响异类神经元再生的相关因子.方法 建立大鼠人工体神经-内脏神经吻合动物模型(模型组)和体神经-体神经吻合动物模型(模型对照组),用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别观察正常组和模型对照组、模型组术后3、7、14、28、60和90 d时脊髓腰4(L4)运动神经元的GAP-43与TAU的mRNA表达水平变化.结果 模型组和模型对照组大鼠L4运动神经元中GAP-43和TAU mRNA表达水平术后第3天时开始均较正常动物增高.7 d时模型组GAP-43 mRNA达高峰,持续高表达状态至28 d后逐渐降低,至90 d降至正常水平,而模型对照组在14 d时达高峰.持续高表达,90 d降至正常水平.TAU在正常动物Lt运动神经元中表达较少,在模型组14 d时表达达高峰,模型对照组在28 d达高峰,90 d时降至正常水平.结论 大鼠人工体神经-内脏神经反射弧建立后脊髓L4前角运动神经元GAP-43及TAU持续高表达状态,提示异类神经元再生和突触重建过程的进行,其表达变化过程与异类神经元成功再生的过程极为吻合.而大鼠人工体神经-内脏神经及体神经-体神经吻合后GAP-43和TAU表达趋势上的差异可能与神经再生过程中的微环境差异和支配靶器官的改变有关.
作者:李迪;肖传国;李兵;陈朝辉;韩晓敏 刊期: 2008年第06期
目的 研究川芎嗪及苯那普利对慢性肾衰大鼠肾脏肾小管间质低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 建立5/6肾大部切除模型.随机分为A:川芎嗪治疗组[150 mg/(kg·d)],B:苯那普利治疗组[10 mg/(kg·d)],C:模型对照组,D:假手术组.在造模成功后第1、4、8、16周分别杀检,留取血、尿及肾组织标本送检.检测①24 h尿蛋白定量;②血肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)水平;③免疫组化法检测肾组织HIF-1α、VEGF及CD34表达,计数肾小管间质微血管密度(MVD),④RT-PCR法及Western blot法分别检测肾组织HIF-1α、VEGF的mRNA及蛋白质表达.结果 ①川芎嗪及苯那普利均可明显降低尿蛋白排泄量,但用药组尿蛋白排泄仍高于假手术组.②川芎嗪及苯那普利组BUN及Scr低于模型对照组.③从第1周起,苯那普利组HIF-1α mRNA及VEGF mRNA表达即高于其他3组;川芎嗪组HIF-1α mRNA表达略低于模型对照组.但是其VEGF mRNA的表达却高于模型对照组.④川芎嗪及苯那普利组第8周起MVD值大于模型对照组,但低于假手术组.结论 苯那普利可通过上调5/6肾切除大鼠肾组织HIF-1α的表达,刺激小管间质VEGF的表达,从而促进小管间质微血管的保留来保护肾脏.HIF-lαVEGF-血管内皮细胞途径在川芎嗪对慢性肾衰的早期治疗中可能起作用,在后期可能还有其他机制的参与.
作者:黄小妹;张介眉;张英;吴明富;郝建军;张玲;谢兰茜;郑妮军 刊期: 2008年第06期
毛细支气管炎是婴幼儿常见的下呼吸道感染,病情多较严重,其心肌钾水平的相关研究报道较少.
作者:黄小力;文红霞;陆小霞 刊期: 2008年第06期
目的 通过体外实验,研究猪睾丸支持细胞Sertoli细胞对猪-人异种移植模型中人外周血单个核细胞(PBMCs)功能的影响,以探讨Sertoli细胞在诱导异种移植免疫耐受中的潜在作用.方法 采用改良酶消化法获取新生猪睾丸Sertoli细胞,纯化后培养,检测分离的原代猪Sertoli细胞纯度.并在光学显微镜和电子显微镜下对猪Sertoli细胞进行形态学测定.采集新鲜人血液,分离外周血单个核细胞(PBMCs),将原代猪Sertoli细胞与人PBMCs共同孵育,观察Sertoli细胞对人PBMCs凋亡率的影响,并与人PBMCs自身凋亡率进行比较.在体外,用3H-TdR摄入法检测人PBMCs的增殖,对照组用刀豆蛋白A(ConA)刺激活化人PBMCs,实验组则将猪原代Sertoli细胞与ConA活化的人PBMCs共同培养,连续4 d检测人PBMCs的增殖变化.结果 采用该实验改良法分离的新生猪Sertoli细胞,经检测纯度超过93%.光学显微镜及电子显微镜下均可见Sertoli细胞胞体多突起、胞核内多核仁、胞质内多脂滴等典型特征.经Annexin-V/PI染色.流式细胞仪检测,猪Sertoli细胞可诱导人PBMCs凋亡率升高(8.92±1.75)%.高于人PBMCs的自身凋亡率(3.09士0.75)%(P<0.01).并且猪Sertoli细胞能够延迟ConA刺激的人PBMCs体外增殖峰的出现(对照组增殖峰在第2天出现,实验组增殖峰在第3天出现),但是两组增殖峰峰值间的差异没有统计学意义.结论 采用该法可以获得高纯度的猪Sertoli细胞.在猪-人异种移植体外实验中,新生猪Sertoli细胞能够诱导人PBMCs凋亡,并且能够延迟ConA活化的人PBMCs增殖反应,对人PBMCs的活化增殖有一定程度的抑制作用.
作者:谢林;尹注增;胡枫;王璐;朱珉;向莹;陈刚;陈实 刊期: 2008年第06期
目的 探讨脂氧素A4[5(S),6(R)-Lipoxin A4,LXA4,]对同种异体心脏移植物存活的影响.方法 通过Heron法建立小鼠颈部同种异体心脏移植模型.移植鼠30只随机分为两组:生理盐水对照组(对照组)和LXA4用药组(LXA4组),检测术后第5天移植心肌细胞凋亡指数和血清中IL-12含量,观察移植心存活时间和病理变化.结果 与对照组相比,LXA4组显著降低了移植心急性排斥期心肌细胞凋亡和IL-12的含量.延长了移植物的存活时间,减轻了移植物炎症细胞的浸润.结论 LXA4可以减轻移植心心肌细胞凋亡,延长移植心的存活时间.
作者:柯有力;肖诗亮;刘成硅;肖雅琼;杨超;彭岚刚 刊期: 2008年第06期
目的 探讨阻断缝隙连接对大鼠局灶性脑缺血后海马迟发性神经元死亡(DND)及神经行为学的影响.方法 术前2 h左侧脑室注射缝隙连接阻断剂甘珀酸(CBX),对照组左侧脑室注射生理盐水.颈内动脉插线法制备大鼠大脑中动脉缺血-再灌注模型,术后72 h采用尼氏染色检测海马迟发性神经元死亡.术后24 h和72 h进行神经行为学评分,数据进行统计学分析,观察阻断缝隙连接对大鼠局灶性脑缺血72 h后海马迟发性神经元死亡及神经行为学的影响.结果 不用CBX预处理,大脑中动脉缺血模型72 h后有45%的动物出现海马DND,用CBX预处理后,DND发生率降到30%,较对照组明显降低(P<0.01).CBX干预组的行为学评分明显比对照组低(P<0.01).结论 阻断缝隙连接可以减少局灶性脑缺血后海马迟发性神经元死亡的发生率,改善局灶性脑缺血术后动物行为学表现.
作者:易陈菊;徐沙贝;唐颖馨;张强;骆翔;王伟 刊期: 2008年第06期
近年来先天性心脏病的介入治疗发展迅速,特别是继发孔型房间隔缺损(ASD)介入封堵术已经成为行之有效的治疗方法[1].我院自2004年8月至2008年3月共施行继发孔型ASD介入治疗35例,现总结如下.
作者:马可忠;严晓娟;刘娟;朱锐;沈青山 刊期: 2008年第06期
目的 探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)小干扰RNA对缺氧/复氧诱发的大鼠心肌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 分离的大鼠心肌细胞在PTP-1B小干扰RNA转染后培养24 h.然后缺氧处理4 h,再复氧6 h(4H/6R).心肌细胞的凋亡用TUNEL染色法测定;Western blot检测心肌细胞PTP-1B和磷酸化Akt的表达水平;比色法衡量凋亡酶Caspase 3和Caspase 8的活性;共免疫沉降法检测与Fas受体结合的PTP-1B的数量.结果 缺氧/复氧的处理不仅严重损伤了培养的大鼠心肌细胞,同时也上调了心肌细胞PT-lB蛋白的表达水平;PTP-1B小干扰RNA显著地减少了缺氧/复氧诱发的心肌细胞凋亡,PTP-1B小干扰RNA组与阴性对照组的凋亡指数分别为:(12.1±1.4)%和(23.2±1.6)%,P<0.05;与阴性对照组比较,PTP-1B小干扰RNA显著增加了Akt的磷酸化水平.抑制了Caspase 3和Caspase 8的酶活性,同时降低了PTP-1B与Fas受体的结合.结论 PTP-1B是一个缺氧/复氧(4H/6R)诱发的心肌细胞凋亡的关键调节因子,针对PTP-1B的小干扰RNA可有效地抑制心肌细胞的损伤.其机制可能与增加的Akt磷酸化水平,凋亡酶Caspase 3和Caspase 8的酶活性被抑制,以及PTP-1B与Fas受体结合的减少相关联.
作者:宋慧文 刊期: 2008年第06期
目的 研究肝部分切除术后肠内营养对小肠糖异生的影响.并探讨肠内营养促进小肠糖异生.从而促进术后肝功能恢复的意义.方法 选择左叶肝癌病例48例并随机分为3组(A组、B组和空白组).检测各组病例在不同术后营养支持方式下的血糖、C肽水平,并绘制各组病例血糖、C肽变化曲线图,计算、比较曲线下面积(√AUC).结果 空白组经肠道输入生理盐水后,血糖、c肽水平维持在与空腹状态相似水平上下波动,故未计算其(√AUC).A组病例在改变碳水化合物输入途径(由肠外改为肠内方式)但维持其它成分(氨基酸)输入方式不变后,比较前后血糖、C肽(√AUC),差异无显著性意义;而B组病例改变氨基酸输入方式(由肠外改为肠内方式)且维持碳水化合物肠内输入方式不变后,血糖平均,(√AUC)提高了10.77%(P
作者:杨帆;蒙谦;周明忠 刊期: 2008年第06期
目的 观察维生素A酸(RA)对体外培养小鼠囊胚细胞毒性作用.方法 获取妊娠3.5 d小鼠囊胚,分别在含0、1和10 ttmol/L RA的M199培养液中培养24 h,用荧光染料Propidium(PI)和Bisbenzimide(Hoechst 33258)特异性染色,分别计数囊胚内细胞总数以及内细胞群(ICM)和滋养层(TE)细胞数.结果 RA可导致小鼠囊胚内细胞总数以及ICM和TE细胞数减少.结论 RA对小鼠早期胚胎的发育具有细胞毒性作用,从而影响早期胚胎的生长发育.
作者:熊彦娥;张端莲 刊期: 2008年第06期
目的 探讨人胃腺癌组织的光谱特性.方法 测定26个人胃腺癌标本的肿瘤及非肿瘤区域组织的吸收系数光谱和散射系数光谱.结果 人胃腺癌组织吸收系数在300~720 nm光谱范围内明显低于非肿瘤胃壁组织,散射系数在480 ~1100 nm光谱范围内也明显低于非肿瘤胃壁组织.结论 胃腺癌组织和非肿瘤胃壁组织的吸收系数光谱和散射系数光谱差异有统计学意义,为进一步研究提供有意义的参考数据.
作者:何博华;王娟;李力波;魏华江 刊期: 2008年第06期
目的 探讨颈椎骨龄定量分期常用的敏感参数.方法 从901位中小学生中挑选87位(女55,男32)正常(牙合)个体,每年定期拍摄头颅侧位片及手腕骨片,连续6年,组成8~18岁混合纵向资料.不参照Lamparski图谱,而是以当今国际上广泛公认的Fishman手腕骨龄分期法(SMI)为金标准,研究第2~5颈椎形态变化的特征.结果 通过对相关的颈椎参数进行非参数曲线拟合、相关系数比较和变量聚类,选择出具代表性的颈椎骨龄定量分期参数.结论 颈椎骨龄分期参数的选择,对临床定性定量评价颈椎骨龄提供了重要的参考.
作者:陈莉莉;林久祥;许天民 刊期: 2008年第06期
目的 研究标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治疗,对尘螨过敏变应性鼻炎患者的疗效及安全性.方法 73例尘螨过敏为主的变应性鼻炎患者,随机分为舌下含服免疫治疗(sublingual immunotherapy,SLIT)+药物组及单纯用药组.SLIT+药物组以标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治疗,辅以对症药物治疗;单纯用药组以糠酸莫米松鼻喷剂及氯雷他定片对症治疗.每月回访1次共随访半年.观察并记录治疗后症状得分、药物评分及不良反应情况.半年后综合评价患者主观症状、用药及治疗满意度情况.结果 SLlT+药物组与单纯用药组相比,其半年后症状得分、药物评分改善情况均明显高于单纯用药组.患者主观评价症状、用药及治疗满意度亦明显高于单纯用药组.同时,SLIT+药物组有部分患者出现了一定程度的不良事件.结论 标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治疗对尘螨过敏变应性鼻炎患者症状得分及药物评分改善极为显著,但对治疗中的不良反应应给予充分关注.SUT长期疗效及不良反应情况尚需进一步观察.
作者:陈建军;孔维佳;项济生;舒宏;施秋梅;檀慧芳;周月 刊期: 2008年第06期
目的 通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率.方法 取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-NaOH缓冲液体系配制溶液Ⅱ,依据文献提供的方法 ,小量提取制备质粒DNA,以凝胶电泳、紫外分光光度计及酶切验证提取效果.结果 在NaOH浓度为0.10 mol/L下,不可逆变性条带基本得到消除,超螺旋DNA的提取纯度和得率均得到明显提高.结论 改变溶液Ⅱ的碱性条件,可以制备高质量的质粒DNA.
作者:黄南;程熠;连欢;张述;李卓娅 刊期: 2008年第06期
目的 观察顺铂作用下A549细胞的细胞周期变化规律和Chk1、Chk2(Chk1/2)反义寡核苷酸(AsODN)对顺铂(DDP)诱导的A549细胞生物学行为的影响.方法 流式细胞术SubG1法检测DDP作用下A549细胞周期和凋亡的动力学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测转染Chk1/2AsODN后Chk1/2蛋白的表达;流式细胞仪Amexin V-FITC法和SubG1法检测转染Chk1/2 AsODN后DDP作用下的细胞周期和凋亡变化.结果 10ümol/L DDP作用12 h后A549细胞出现明显的S期阻滞,Chk1/2 AsODN对A549细胞中Chk1/2蛋白表达有明显抑制作用.转染Chk1/2 AsODN可显著增加DDP诱导下A549细胞的凋亡率约200%~300%,而联合转染Chk1/2 AsODN与单转染相比,凋亡无明显增加(P>0.05).转染Chk1/2 AsODN引起化疗增敏的机制是通过解除S期阻滞这种肿瘤细胞的自我保护机制实现的.结论 Chk1/2可作为肺癌化疗药物增敏治疗的有效靶点,灭活Chk1/2基因可以显著增强肿瘤细胞化疗的敏感性.
作者:叶飞;高庆蕾;黄晓园;谢大兴;卢运萍;周剑锋 刊期: 2008年第06期
目的 观察Rhobtb2基因在人胃癌组织中的突变情况,探讨Rhobtb2基因突变与胃癌发生的关系.方法 采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法 对58例胃癌组织以及癌旁正常组织的Rhobtb2基因进行突变检测,采集1例正常人抗凝血作为正常对照.结果 58例胃癌组织中发现1例位于外显子5的错义突变.结论 胃癌组织中存在Rhobtb2基因突变,其突变可能与胃癌的发生有关.
作者:陈旭;陈剑英 刊期: 2008年第06期
目的 建立海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系,为评价海洛因成瘾者参加美沙酮维持治疗效果提供技术支持.方法 运用文献分析法和专家咨询法进行指标的筛选,应用层次分析法计算各级指标的权重.结果 构建了海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系并确立了各级指标的权重.结论 在海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系研究中,专家咨询法和层次分析法是科学和可行的方法 .
作者:彭佳林;李翠;徐娟;方鹏骞 刊期: 2008年第06期
目的 研究丹参酮对拟人类阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆(VD)2种模型大鼠学习、记忆功能障碍的改善作用.方法 ①实验动物随机分成5组:痴呆(AD/VD)模型组、丹参酮治疗组、假造模对照组和正常对照组,VD模型组:应用改良的大脑中动脉线栓塞(MCAO)法建模;AD模型组:应用D-半乳糖腹腔注射和海马内注射β-淀粉样肽蛋白片段1-40(Aβ1-40)复合造模方法 建模.丹参酮治疗组:VD大鼠造模完成后或AD大鼠造模24 h后给予丹参酮[50 mg/(kg·d)3,溶于5 ml玉米油中灌胃14 d.假造模对照组:与VD大鼠同法.但不做插线、结扎;与AD大鼠同法注射等量溶媒.正常对照组:大鼠不做任何处理.②采用水迷宫行为学实验,以单位时间逃避潜伏期及其频率为指标,测定大鼠空间学习、记忆功能.结果 ①AD/VD大鼠逃避潜伏期明显延长,逃生错误频率高,与两个对照组比较差异均有显著性意义.②丹参酮治疗组大鼠较痴呆模型组逃避潜伏期明显缩短,逃生错误频率减低,差异有统计学意义.结论 ①2种痴呆大鼠模型具有较好仿真人类AD/VD的特点.②丹参酮对AD/VD具有一定的治疗作用.
作者:李林;夏保芦;茹立强 刊期: 2008年第06期