唐晓琼；赵智刚；王红祥；黎纬明；邹萍
目的探讨汉坦病毒H8205株G1-人源IL-2融合基因疫苗(pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1)的免疫效应.方法将pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次;酶联免疫法(ELISA)检测抗汉坦病毒(HTNV)抗体;空斑减少中和试验检测免疫血清中和抗体效价;淋巴细胞增殖试验(MTT法)检测免疫小鼠的细胞免疫反应;动物保护试验以BALB/c小鼠为感染动物模型,在第3次免疫后2周,腹腔内注射100 TCID50(半数感染量)HTNV,然后以免疫荧光法观察鼠肾切片,评价其保护力.结果pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗免疫后可刺激机体产生特异性抗体和中和抗体,中和效价为1:20～1:80.MTT法结果表明,免疫小鼠的脾淋巴细胞有特异性增殖反应.动物试验表明pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗能保护小鼠免受HTNV感染.结论pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗可诱导特异性体液免疫应答和较强的细胞免疫应答.
作者：贾珉；张泽华；胡洪波；黄汉菊；任刚 刊期： 2005年第04期
目的探讨葡聚糖氧化铁磁性纳米颗粒(DMN)的制备对其有效粒径和比饱和磁化强度的影响.方法采用化学共沉淀法制作DMN,通过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR色谱和离心法分离DMN,用透射电镜、粒度分析仪和磁化强度分析仪检测DMN,研究制备过程中葡聚糖用量、铁盐含量、氨水浓度、搅拌速度、离心速度、Fe3+/Fe2+摩尔比、反应温度等条件对DMN的有效粒径、比饱和磁化强度的影响.结果不同制备条件影响着DMN有效粒径和比饱和磁化强度的大小.DMN直径小为3 nm,有效粒径介于42.7～189.1 nm,比饱和磁化强度介于0.16～0.38emu/g.结论制备反应条件对DMN有效粒径和比饱和磁化强度的影响符合化学共沉淀反应的一般规律,可以用沉淀反应的理论指导DMN的制备,为DMN作为基因和药物纳米载体的研究提供了实验数据.
作者：曹正国；周四维；刘继红；宋晓东；罗刚；鲁雄兵；孙凯 刊期： 2005年第04期
目的探讨褪黑素(Mel)在甘油诱导的急性肾功能衰竭(ARF)大鼠模型中的作用及对肾组织局部肝细胞生长因子(HGF)及其受体(C-met)表达的影响.方法将SD雄性大鼠随机分为3组:对照组(CTL组)双侧后腿肌肉注射生理盐水;模型组(ARF组)双侧后腿肌肉注射甘油;褪黑素组(Mel组)腹腔注射Mel后30 min,双侧后腿肌肉注射甘油.分别在1、6、12、24、36、48、72、120 h检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肾组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平.观察肾组织形态学改变,并用免疫组织化学法检测HGF及C-met蛋白在肾脏的表达.结果与ARF组相比,Mel组肾功能(BUN、Cr)明显改善,肾组织匀浆SOD活性升高、MDA下降,肾小管上皮细胞HGF/C-met表达增强,差异均有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01).结论褪黑素对ARF大鼠肾脏有保护作用,能够增强HGF及其受体C-met蛋白的表达,促进损伤的肾小管恢复.
作者：沈延春；朱忠华；邓安国；祝高红 刊期： 2005年第04期
目的测定肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及血浆中凝血、纤溶指标的活性.方法36只SD大鼠随机分为博来霉素A5(BLMA5)组和对照组,每组各18只.大鼠气管内分别滴入BLMA5(5 mg/kg)和生理盐水建立肺纤维化和对照组模型,于造模后7、14、28 d分别测定BALF及血浆复钙时间以了解促凝活性(PCA)、血管性血友病因子(vWF)含量、纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)的活性和D-二聚体(D-Dimer)的水平.结果①BLMA5组BALF复钙时间缩短,第7、14天复钙时间与对照组比较差异有极显著性意义(均P＜0.01);BLMA5组血浆复钙时间与对照组比较差异无显著性意义(均P＞0.05).②BLMA5组BALF和血浆vWF含量与对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).③BLMA5组BALF PAI-1活性较对照组明显增强(均P＜0.01);BLMA5组血浆PAI-1活性与对照组比较增强不明显(P＞0.05).④BLMA5组BALF D-Dimer水平升高,第7、14天D-Dimer水平与对照组比较,差异均有极显著性意义(均P＜0.01);第7天BLMA5组血浆nDimer水平与对照组比较,差异有极显著性意义(P＜0.01).结论肺纤维化存在凝血和纤溶活性的异常,凝血、纤溶活性的异常变化主要表现在BALF中.
作者：张彦萍；王立芹 刊期： 2005年第04期
目的探讨吸入大剂量二丙酸倍氯米松治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)的疗效.方法42例持续吸入1 600μg/d二丙酸倍氯米松的稳定期COPD患者口服强的松30 mg/d 3周,利用随机分组、双盲、安慰剂对照及交叉设计的方法研究其疗效.观察指标包括支气管扩张剂吸入前后的一秒钟用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、呼气峰流速(PEFR)、症状评分及生活质量(HRQL).结果口服强的松在改善FEV1、FVC、PEFR、症状及HRQL等方面均没有显著性意义.结论吸入1 600μg/d二丙酸倍氯米松的稳定期COPD患者已经获得了糖皮质激素治疗的大疗效.
作者：张敏；刘琰；高虹；余益民；沈观乐；王健；袁本通 刊期： 2005年第04期
目的研究白细胞介素-5(IL-5)对人嗜酸性粒细胞(Eos)中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的调控作用.方法采用改良的密度梯度离心法分离并体外培养人外周血Eos,实验组加入相同浓度的白细胞介素-4(IL-4)、IL-5和干扰素γ(IFNγ)以及不同浓度的IL-5共同培养,ELISA和RT-PCR法检测细胞培养上清液TGF-β1蛋白和mRNA的表达.结果与对照组相比,浓度均为10-9mol/L的IL-4、IL-5在蛋白水平和转录水平对TGF-β1的表达均有上调作用,而IFNγ则表现为抑制;10-11、10-9、10-7mol/L IL-5均能显著增强体外培养的Eos中TGF-β1蛋白的表达.结论Th2型细胞因子IL-5可以上调人嗜酸性粒细胞中TGF-β1的表达.
作者：黄亚冰；刘斌；朱珉；甄忠广；曾志贵；王璐；陈实 刊期： 2005年第04期
目的探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与2型糖尿病肾病的关系.方法采用双抗体夹心酶联免疫法和放射免疫分析法测定单纯糖尿病、早期糖尿病肾病、临床糖尿病肾病患者(各30例)空腹TGF-β1、TNF-α水平,30例健康献血者作正常对照.结果早期糖尿病肾病及临床糖尿病肾病患者TGF-β1、TNF-α水平明显高于单纯糖尿病患者和正常对照(P＜0.05或P＜0.01),且随病情进展逐渐升高;单纯糖尿病患者与正常对照比较差异无显著性意义(P＞0.05).相关及回归分析显示TGF-β1、TNF-α与尿白蛋白排泄率(UAER)呈正相关.多元线性逐步回归分析显示:TGF-β1、TNF-α是影响糖尿病肾病的主要危险因素.结论TGF-β1、TNF-α在糖尿病肾病的发生、发展中起重要作用.
作者：周燕；冼苏；苏珂；龙艳；林枫；胡永玲 刊期： 2005年第04期
目的探讨建立慢性应激抑郁大鼠模型的实验方法及此模型的有效性.方法利用慢性不可预见的中等强度应激制作抑郁模型,观察动物的体重和摄食量的变化,用敞箱试验及液体消耗实验测定动物行为.结果大鼠抑郁模型在第28天建立成功.抑郁组大鼠体重增加量、摄食量、敞箱试验得分、液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比均明显下降,纯水消耗显著提高.结论慢性不可预见的中等强度应激可以成功建立大鼠抑郁模型.
作者：夏军；叶慧；周义成；张景峰；夏黎明；王承缘 刊期： 2005年第04期
目的观察周围神经刺激器(PNS)定位用于连续臂丛神经阻滞(CBPB)的可行性和效果.方法选择60例拟行择期上肢手术患者,用神经刺激器定位方法行腋路或肌间沟径路臂丛神经鞘内置入导管和经导管注入局麻药,记录感觉和运动阻滞情况及其并发症.结果上肢五大神经感觉阻滞发生率为91.7%～98.3%,上肢运动阻滞发生率为98.3%,麻醉满意率为83.3%.结论PNS定位于CBPB有助于提高阻滞成功率.
作者：罗超军；张传汉；万里；田玉科 刊期： 2005年第04期
目的探讨不同饲养层细胞对小鼠胚胎干细胞(ESC)和兔囊胚内细胞团(ICM)的影响.方法分别用成系小鼠胚胎成纤维细胞(SNL)、兔胚胎成纤维细胞(REF)、兔肾脏成纤维细胞(RRF)作为饲养层饲养小鼠ESC和兔囊胚,观察它们的生长状态,并分别检测其碱性磷酸酶活性.结果生长在REF上的小鼠ESC具有显著的未分化形态,保持未分化时间长,碱性磷酸酶活性强.在REF上呈聚集生长的兔囊胚ICM的比例高.结论REF能维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态及促进兔囊胚ICM聚集生长,可以作为ESC的饲养层细胞.
作者：邹亚芬；郑瑞珍；张苏明 刊期： 2005年第04期
目的通过体外同种异体脱钙骨基质(DBM)和骨髓基质细胞(BMSC)的复合培养及体内异位成骨实验,研究DBM作为骨组织工程载体的生物相容性及成骨活性.方法参考Urist操作方法大量制备兔同种异体DBM.骨穿取兔骨髓单细胞悬液进行培养,将BMSC与同种异体DBM体外复合培养3～7 d,相差显微镜、扫描电镜(SEM)和苏木精-伊红染色后光镜下观察结果.将DBM和BMSC复合培养3 d的复合物植入家兔一侧骶棘肌肌袋内,分别在1、2、4周活体取材,扫描电镜和苏木精-伊红染色后光镜观察,对侧单纯植入DBM作为对照.结果体外培养发现BMSC在DBM中贴壁生长、增殖并有分泌活动.体内实验发现BMSC在DBM孔隙内均匀成骨,对照组则从DBM骨块的边缘到中心逐步成骨,成骨所需的时间长,而且成骨量要小于前者.结论DBM作为组织工程载体具有良好的生物相容性和成骨活性.
作者：李进；郑东；杨述华 刊期： 2005年第04期
目的探讨宫颈妊娠治疗策略.方法对27例宫颈妊娠病例临床特点、诊断和治疗进行回顾性分析.结果17例采用氨甲喋呤(MTX)化学治疗(简称化疗),其中3例失败改手术治疗;5例直接行全子宫切除术;5例经导管行双侧子宫动脉栓塞并局部加MTX化疗.27例均达到预期疗效.结论若阴道出血多,对勿需保留生育功能的年长者,直接行全宫切除,迅速有效;对需保留生育功能者,可采用介入治疗行子宫动脉栓塞并局部加MTX化疗;若出血不多,可单纯采用MTX化疗,化疗的成功率取决于血β-HCG值、孕囊大小及有无胎心搏动.
作者：闵洁；王泽华 刊期： 2005年第04期
目的探讨归芪口服液对放射损伤小鼠骨髓组织中CD54表达的影响及其促进早期骨髓造血恢复的可能机制.方法将42只清洁级近交系健康昆明小鼠随机分为3组.正常组不做任何处理;归芪组和对照组于6.0 Gy60Coy射线一次性全身均匀照射后,分别被胃饲归芪口服液(200 mg/次,2次/d)和相同剂量的生理盐水.照射后第4、8和14天计数小鼠骨髓单个核细胞和骨髓组织中巨核细胞数,测量骨髓造血组织面积,并用免疫组织化学法检测骨髓组织中黏附分子CD54的表达水平.照射后第8天计数小鼠的脾集落形成单位(CFU-S)数.结果照射后第4、8、14天归芪组骨髓单个核细胞、骨髓组织中巨核细胞计数和骨髓造血组织面积均显著高于对照组(P＜0.01或P＜0.05);第4、8天归芪组骨髓组织中CD54的表达水平显著高于对照组(P＜0.01),第14天归芪组CD54表达水平下降,明显低于对照组(P＜0.01).照射后第8天归芪组CFU-S计数显著高于对照组(P＜0.01).结论归芪口服液能够促进放射损伤小鼠早期骨髓造血功能的恢复,其机制之一可能是通过调节骨髓组织中黏附分子CD54的表达.
作者：郑邈；刘文励；孙汉英；周剑锋 刊期： 2005年第04期
目的用微量热法研究银对大肠埃希菌生长代谢的影响及其抗菌性能.方法采用微量热法得出AgNO3对大肠埃希菌作用的热功率输出曲线,通过计算机线性拟合,计算出大肠埃希菌在不同浓度的AgNO3作用下生长速率常数k、抑制率I等参数.结果随着AgNO3浓度的增加,大肠埃希菌的生长代谢速率常数减小,生长峰后移.当AgNO3的浓度为0.7μg/ml时,抑制率达到100%.结论微量热法的定量结果显示AgNO3具有优良的抗菌作用.
作者：徐瑛；石立红 刊期： 2005年第04期
目的观察中药粉防己碱对高脂饮食兔脂质代谢和主动脉壁血管细胞清道夫受体A(SR-A)表达的影响,进一步探讨粉防己碱抗动脉粥样硬化的机制.方法将18只雄性日本大耳白兔随机分为正常对照组(C组)、高脂模型组(CH组)和粉防己碱组(Tet组).喂养12周后处死动物,常规生化检测血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C);取胸主动脉连续切片,常规苏木精-伊红染色,脂质苏丹Ⅳ染色,对血管壁形态和脂质沉积定性观察;采用逆转录聚合酶链式反应对血管壁细胞SR-A mRNA表达定量分析.结果CH和Tet组血脂水平显著高于C组(P＜0.01),而CH组与Tet组比较差异无显著性意义(P＞0.05);CH组血管壁脂质沉积明显高于C组和Tet组,C组和Tet组间无明显差别;各组均有SR-A mRNA表达,CH组显著高于C组和Tet组(P＜0.01),而C组与Tet组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论粉防己碱抗兔胸主动脉粥样硬化作用可能与其抑制SR-A表达,减少血管壁脂质沉积有关,而与降脂作用无关.
作者：王毅；孙宝贵；温沁竹；冯义柏；黄波 刊期： 2005年第04期
目的研究慢性粒细胞性白血病(CML)骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、纯化、扩增以及在体外向神经元样细胞定向分化的能力.方法获取CML患者的骨髓MSCs,采用低血清培养液培养,瑞士染色观察其形态;流式细胞仪检测其免疫表型和细胞周期;逆转录-聚合酶链反应(R-PCR)检测CML特异性表达的bcr/abl基因;分析骨髓MSCs染色体核型.全反式维甲酸(ATRA)诱导MSCs在体外分化为神经元样细胞,倒置相差显微镜观察神经元样细胞的形态,免疫组织化学染色法和Western blot法检测神经丝蛋白(NF)和神经元烯醇化酶(NSE)的表达.结果CML来源的骨髓MSCs呈纤维样贴壁生长,体外培养易扩增;表达相关抗原CD29、CD44、CD105,不表达CD31、CD13、CD34、CD45、HLA-DR;不表达bcr/abl融合基因,且具有正常的核型;不同扩增代数的MSCs在诱导剂的作用下呈现典型的神经元样细胞形态,NF、NSE呈阳性反应.结论CML患者骨髓中可以分离培养MSCs,它具有体外大量扩增并保持低分化状态的特性和定向分化为神经元样细胞的能力,是一种可用于神经系统疾病治疗的种子细胞.
作者：唐晓琼；赵智刚；王红祥；黎纬明；邹萍 刊期： 2005年第04期
目的建立一种分析方法证实流式细胞术对细胞凋亡分析的准确性.方法在流式细胞仪上利用Sub-G1法、TdT法、Annexin-Ⅴ法和API法4种不同的凋亡细胞分析方法,对羟基喜树碱(CAM)诱导的急性T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)进行流式细胞术分析并同时分选出不同时相的凋亡和非凋亡细胞,再经激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)进行形态学分析.结果①流式细胞术分选后共聚焦显微镜分析技术(PSC)能同时、准确地鉴别不同细胞周期时相的凋亡细胞和非凋亡细胞.②PSC技术能对同一群细胞内的凋亡细胞和坏死细胞进行形态学鉴别.③PSC技术证实了流式细胞术在细胞凋亡研究中的准确性.结论PSC技术结合了流式细胞术和LSCM的优点,更客观、准确地分析凋亡细胞,同时对细胞周期特异性的细胞凋亡有独到的优势,发展了细胞凋亡的分析方法.
作者：高纯；吴剑宏；冯永东；申漫里；陶德定；龚建平 刊期： 2005年第04期
目的探讨日本血吸虫感染小鼠肝脏中白细胞介素-12(IL-12)的表达及其对肝纤维化的影响.方法在小鼠感染血吸虫后的不同时期(6、8、10、12周),分别采用免疫组织化学法观察肝脏IL-12的变化,VG染色及多媒体病理图文定量分析系统检测注射基因重组小鼠IL-12(rIL-12)前、后胶原纤维含量的改变.结果小鼠肝脏IL-12含量随感染时间延长而缓慢下降,胶原纤维含量随感染时间延长逐渐升高,经皮下注射rIL-12后小鼠肝脏IL-12含量随着相应因子补充而显著上升,胶原纤维含量则逐渐降低.结论IL-12能明显抑制血吸虫感染小鼠肝脏胶原纤维合成,延缓肝纤维化发生.
作者：朱华斌；贺永文；曾令兰 刊期： 2005年第04期
目的制备特异的能区分人跨膜型肿瘤坏死因子(TM-TNF-α)和分泌型肿瘤坏死因子(sTNF-α)的多克隆抗体.方法借助抗原肽预测软件对TM-TNF-α的抗原表位进行预测,合成TM-TNF-α特异的20个氨基酸的多肽,将之与匙孔碱血蓝蛋白(KLH)耦联,BALB/c小鼠皮背部多点注射,收集分离血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞术鉴定其特异性.结果成功免疫BALB/c小鼠,ELISA证实该抗血清与免疫多肽有良好的结合,而与sTNF-α、白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)无交叉反应,流式细胞术显示该抗血清可与细胞系U937表达的TM-TNF-α发生特异性结合.结论成功制备了TM-TNF-α特异性多克隆抗体,为制备TM-TNF-α特异性单克隆抗体奠定了基础,为区分TM-TNF-α和sTNF-α的生物学作用提供了有力的工具.
作者：柯杭君；李清芬；李卓娅；姜小丹；冯玮；徐勇；熊平 刊期： 2005年第04期
目的探讨肾上腺转移癌的临床特点与诊治方法.方法对1992年至2003年收治的18例肾上腺转移癌患者的病理、临床表现、治疗及预后进行回顾性研究.结果肾上腺转移癌原发肿瘤中肺癌7例,肝癌4例,乳腺癌3例,肾癌2例,胃癌和胆管癌各1例.临床表现为腰背部胀痛5例,乏力、消瘦3例.完整切除肾上腺转移癌的8例患者术后平均生存期(28个月)比非手术组(9.5个月)长(P＜0.05).结论肾上腺转移癌患者大多无特异性临床症状;B超和CT在肾上腺转移癌的诊断中具有重要作用;外科手术可延长患者生存期.
作者：李兵；曾甫清；何朝宏；张齐钧；肖传国 刊期： 2005年第04期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
