陈朝晖；赵军；肖亚军；杜茂信；肖传国
目的探讨胰腺癌组织中P53蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及其与临床病理学特征之间的关系.方法采用SP免疫组织化学方法,对46例胰腺癌组织中P53蛋白、VEGF及VEGF-C的表达进行检测.结果 P53、VEGF与VEGF-C阳性表达率分别为58.7%、65.2%和43.5%.P53表达与胰腺癌远处转移显著相关(P＜0.05),而与肿瘤大小,病理学分级及淋巴结转移无关,VEGF表达与胰腺癌淋巴结转移(P＜0.05)和远处转移(P＜0.01)显著相关,而与肿瘤大小,病理学分级无关,P53表达与VEGF表达呈明显正相关(P＜0.05).VEGF-C表达与胰腺癌淋巴结转移显著相关(P＜0.05),而与肿瘤大小,病理学分级及远处转移无关.结论在胰腺癌中,VEGF与P53表达呈正相关,在胰腺癌的淋巴结转移和远处转移中起重要作用.VEGF-C表达与胰腺癌淋巴结转移呈正相关,在胰腺癌的淋巴结转移中起重要作用.
作者：刘进；薛新波 刊期： 2004年第04期
目的以HLA-A小阵列检测芯片为平台,确定HLA-A寡核苷酸芯片检测中优化实验条件.方法观察了样品制备方法(传统酚-氯仿法、白细胞裂解液法、Fe2O3纳米磁珠)、不对称PCR制备ssDNA的参数、PCR产物纯化方法对杂交结果的影响.结果3种不同的基因组提取方法均获得良好的特异性PCR扩增结果,纳米磁珠应用于样品提取和PCR扩增获得成功,实验条件需进一步完善;在不对称PCR佳实验条件为反向引物与正向引物浓度比25:1,正向引物浓度为0.04 μmol/L,PCR灵敏度可达ng(纳克)模板DNA,Qiagen纯化试剂盒效果略强于其它两种,但差异无显著性.结论本研究初步探讨HLA-A生物芯片样品制备条件,并取得理想结果,为寡核苷酸生物芯片的实际操作提供一定的参考和指导.
作者：陈慧；高华方；马雪梅；杨渝珍 刊期： 2004年第04期
目的观察6%羟乙基淀粉(HAES)等容血液稀释和川芎嗪注射液在兔心肌缺血再灌注损伤时对心肌过氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及心肌细胞超微结构的影响.方法32只家兔随机分为4组,每组8只:Ⅰ组为对照组;Ⅱ组为血液稀释组;Ⅲ组为川芎嗪组;Ⅳ组为稀释+川芎嗪组.观察在急性心肌缺血45 min及再灌注180 min后,心肌组织中SOD活性、MDA含量的变化及心肌超微结构改变.结果与非缺血区比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组缺血区心肌SOD活性明显降低(均为P＜0.05),但Ⅱ、Ⅲ组降低程度轻于Ⅰ组(均为P＜0.05);4组缺血区心肌MDA含量均较非缺血区明显升高(均为P＜0.05),但Ⅲ、Ⅳ组升高程度较Ⅰ、Ⅱ组轻(P＜0.05).缺血区心肌细胞超微结构可见Ⅰ组结构破坏严重,Ⅱ、Ⅲ组结构破坏均较Ⅰ组轻,Ⅳ组结构基本接近正常.结论 6%HAES等容血液稀释和川芎嗪能减轻心肌缺血再灌注损伤的程度,二者合用效果更佳.
作者：王鹏；张燕；田玉科；吴震 刊期： 2004年第04期
目的建立头孢他啶血药浓度的高效液相色谱(HPLC)测定方法.方法采用HPLC-UV方法,内标为丙酮,色谱柱为μbondaparC18(7.8 mm×300 mm),流动相:甲醇:0.01 mol/L磷酸二氢钾(20:80,V/V),检测波长:254 nm,柱温:室温,流速:1.0 ml/min.结果头孢他啶的血药浓度在10～120μg/ml范围内与峰面积比有良好的线性关系,低检测浓度为0.1 μg/ml,方法的平均回收率为(98.0±6.2)%,日内变异系数≤6.8%.结论该方法简单,快速,准确,为头孢他啶的血药浓度监测提供了分析方法.
作者：艾又生；徐楚鸿；陈华庭；王霞 刊期： 2004年第04期
目的从临床流行病学的角度,对新的人微小病毒B19非结构蛋白DNA巢式聚合酶链式反应(PCR)检测方法的效度及信度进行评价,探索其运用于临床筛查B19病毒感染的可行性.方法以国内目前常用的结构蛋白DNA巢式PCR检测结果,并结合孕妇的典型临床表现作为诊断标准,将30例孕妇分为B19病毒感染组及非感染组,对非结构蛋白DNA巢式PCR的检测结果进行效度及信度评价.结果新的检测方法血清标本的灵敏度可达100%,组织标本的特异度及阳性预测值高于血清标本,联合试验有助于提高检测的灵敏度或特异度.结论非结构蛋白DNA巢式PCR检测方法是一种特异、敏感、简便、快速诊断B19病毒感染的新方法.在临床筛查中,血清标本的检测优于组织标本.
作者：李增庆；黄咏梅；乔福元；李武 刊期： 2004年第04期
目的探讨咪达唑仑靶控输注(TCI)系统用于臂丛神经阻滞患者清醒镇静的可行性及中国人咪达唑仑清醒镇静靶控血药浓度.方法对40例ASA Ⅰ～Ⅱ级择期在臂丛神经阻滞下行上肢手术的患者,运用警觉/镇静(OAA/S)评分和脑电双频指数(BIS)评估镇静深度.采用咪达唑仑TCI行清醒镇静,以血浆室为靶控目标,确定相应靶控血药浓度及其与BIS相关性.结果深度清醒镇静(OAA/S评分3分)时所需靶控血药浓度为(118.0±l0.8)ng/ml.BIS与TCI血药浓度(Cp)具有良好的相关性,BIS=-3.03Cp+352.27(r=-0.8854,P＜0.01).结论咪达唑仑靶控输注系统用于臂丛神经阻滞患者清醒镇静可控性良好,镇静深度适宜,对血流动力学和呼吸功能无明显影响,适宜临床推广应用.
作者：刘萍；杨钰香；姚尚龙；武宙阳 刊期： 2004年第04期
目的研究小鼠胚胎心房肌和心室肌细胞自律性水平随胚胎发育不同时期而改变的发育依赖性特点.方法采用全细胞膜片钳技术,在电流钳条件下,记录了不同胚胎发育阶段小鼠单个心室肌细胞和心房肌细胞的跨膜动作电位.结果心室肌细胞早期(9.5～10.5 d,early development stage,EDS)、中期(11～14 d,intermediate development stage,IDS)、晚期(14～18.5 d,late development stage,LDS)动作电位周期分别为(172.86±26.15)ms、(247.73±1 5.84)ms、(326.67±30.10)ms(P＜0.05);中、晚期心房肌细胞动作电位周期分别为(204.15±24.14)ms,(226.53±20.28)ms.结论随着胚胎发育成熟,小鼠胚胎心房肌和心室肌细胞的自律性活动逐渐降低.
作者：韩林；张树军；杜皓；唐明；刘长金；宋元龙；Jürgen HESCHELER 刊期： 2004年第04期
目的探讨内源性和外源性纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及整合素β1(β1mtegrm)在人脑胶质瘤侵袭行为和恶性进展中的作用及相互关系.方法用细胞粘附实验和细胞迁移实验检测外源性FN和整合素β1对U251人恶性胶质瘤细胞株粘附及迁移能力的影响.用原位杂交法检测18例中低度恶性胶质瘤、15例高度恶性胶质瘤及7例正常脑组织中内源性FN和整合素β1mRNA的表达情况.结果①U251细胞在外源性FN上的粘附能力呈浓度依赖性,尤其在中低浓度时(＜5μg/m/)差异显著(P＜0.01);抗FN抗体及抗整合素β1抗体均能完全阻断U251细胞在FN上的粘附.②随外源性FN浓度升高,U251细胞在所观察的不同时间段的迁移距离均显著增加(P＜0.01);抗FN抗体几乎完全阻断FN对细胞迁移的促进作用,抗整合素β1抗体只能部分阻断FN对细胞迁移的促进作用.③细胞内FN和整合素β1mRNA在正常脑组织不表达或仅少量表达,而在胶质瘤中两者阳性表达率均随肿瘤恶性程度增加而增高(P＜0.05),且FN和整合素β1mRNA表达呈明显正相关(r=0.855,P＜0.01).结论①胶质瘤细胞通过其表面整合素β1受体与外源性FN成分相互作用,促进其在颅内的浸润侵袭.②整合素β1诱导的内源性FN合成增加与胶质瘤的恶性程度有关,并可能对其恶性进展起促进作用.
作者：郭滟；任大宏；杨静；熊密 刊期： 2004年第04期
目的构建抗转铁蛋白受体(TfR)单链抗体原核表达载体,为进一步研究其效应奠定基础.方法从抗TfR单克隆抗体重链和轻链可变区基因的克隆载体pGEM-T-VHVH和pGEM-T-VL中扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,用重叠延伸PCR的方法,在VH和VL基因间引入连接短肽(Linker),构建VH-Linker-VL的单链抗体(single chain Fv,scFv)基因.经NcoⅠ和Not Ⅰ酶切后亚克隆到原核分泌型表达载体pUC19/119上,转化和筛选后,阳性细菌经IPTG诱导表达.间接免疫荧光法(IFA)及抗体封闭试验鉴定其抗体活性.结果凝胶电泳可见重叠延伸PCR扩增产物约700 bp条带,SDS-PAGE鉴定表达产物的分子量为27 kD左右,与scFv的理论值一致,IFA及抗体封闭试验证明表达产物有抗人TfR的活性.结论本研究成功地构建并表达了抗人TfRscFv,为抗人TfR scFv的应用奠定了基础.
作者：朱慧芬；杨道锋；沈关心；周春 刊期： 2004年第04期
目的检测医用纳米级Fe3O4磁流体的急性毒性,为进一步研究其长期毒性以及载附药物的临床试验打下基础.方法按不同浓度不同容积分别通过口服法、静脉注射法及腹腔注射法给予小鼠医用纳米级Fe3O4磁流体,观察小鼠的急性毒性反应和主要脏器的病理学改变.结果小鼠口服半数致死剂量LD50＞2104.8 mg/kg,大无毒性剂量ED0为320.10 mg/kg;静脉注射LD50＞438.50 mg/kg,ED0为160.05 mg/kg;腹腔注射LD50＞1578.6 mg/kg,ED0为320.10 mg/kg.主要脏器未见明显病理改变.结论医用纳米级Fe3O4磁流体在动物体内的急性毒性很低,可以考虑作为药物载体.
作者：王国斌；夏泽锋；陶凯雄；周立国；刘敬伟；肖勇；李剑星 刊期： 2004年第04期
目的评价Root ZX根尖定位仪对侧向加压法根管充填质量的影响.方法选取拟行根管治疗术的86例患者,单根管牙104个,随机分成实验组和对照组.实验组的工作长度用Root ZX根尖定位仪测定,对照组工作长度用器械探测法测定.两组均用手动逐步后退法根管预备,侧方加压法根管充填.结果适充、超充和欠充在实验组中的比例分别为79%、15%和6%;在对照组中,分别为56%、31%和13%,经统计学处理两组差异有显著性意义(P＜0.05).结论 Root ZX根尖定位仪可以准确测定根管长度,从而明显提高侧向加压法根管充填质量.
作者：于晓霞；欧汝强；宋斌 刊期： 2004年第04期
目的在MRI图像上观测岛叶特征和近岛叶病变的三维坐标参数,进行精确体表定位.方法观测30例成人头颅外形,随机抽取100例无病变成人头颅MRI片,30例近岛叶病变,观测头颅外形和耳眦线平面以上100 mm内与其平行的前后正中线的中点以及中点与耳眦线平面中垂线的关系.观测岛叶的特征和近岛叶病变坐标参数.手术细致切除近岛叶病变.结果成人头颅近似标准球形.岛叶呈倒三角形,前后正中线旁31～40 mm显现.岛阈在外侧裂干的外侧耳眦线平面上(18±11)mm,过外耳道的耳眦线的垂线前(31±2)mm.岛前上点在耳眦线平面上(48±11)mm,过外耳道的耳眦线的垂线前(40±2)mm.上环岛沟后点在耳眦线平面上(55±11)mm,过外耳道的耳 眦线的垂线后(13±7)mm.30例近岛叶病变,体表定位准确率达98%,能安全切除病变.结论每个岛叶和近岛汉叶病变都能被精确定位于以耳眦线为基线的体表.
作者：韩东华；薛德麟；雷霆；陈劲草 刊期： 2004年第04期
目的为进一步探讨星形胶质细胞在癫痫发病中的作用.方法选用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激及TNF-α反义寡核苷酸阻断后马桑内酯(coriaria 1actone,CL)刺激纯化培养的海马星形胶质细咆,将上述两种条件培养基提取液(astrocytic conditioned medium,ACM)10 μ1分别注入正常Sprague-Dawley(SD)大鼠侧脑室,观察动物行为与脑电图的变化;用免疫细胞化学方法检测大脑皮质与海马中γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyricacid,GABA)表达水平的改变,并做显微图像分析.结果①侧脑室注射TNF-α刺激后的条件培养基提取液可引起大鼠Ⅲ级癫痫样发作及典型的尖波、棘波、棘-慢波癫痫样脑电图表现,大鼠大脑前梨状皮质和海马齿状回GABA免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值均明显低于对照组;②侧脑室注射TNF-α反义寡核苷酸阻断后由马桑内酯刺激的条件培养基提取液,大鼠无癫痫样行为发生,大鼠大脑前梨状皮质和海马齿状回GABA免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值与对照组无显著性差异.结论①激活的星形胶质细胞分泌的TNF α可诱导大鼠癫痫发作.②GABA表达的变化可能与癫痫发作有关.
作者：彭俊忠；朱家祥；朱长庚；刘庆莹；童逸龄；魏瑛 刊期： 2004年第04期
目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人单核细胞U937酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)mRNA表达和蛋白质翻译的影响.方法 U937细胞培养到足够数量后,细胞计数传代分组:①对照组:加等量的培养基;②TNF-α组:加入TNF-α,使其终浓度为10 ng/ml;③ox-LDL组:加入ox-LDL,终浓度为100μg/m1.应用RT-PCR检测ACAT1 mRNA表达,蛋白定量应用免疫印迹法.结果与对照组相比,TNF-α组ACAT1 mRNA表达显著增加(0.573±0.032 vs 0.990±0.022,P＜0.01),而ox-LDL组ACAT1 mRNA表达水平(0.554±0.026)无显著变化.3组之间ACAT1酶蛋白含量差异无显著性意义.结论TNF-α能促进ACAT1 mRNA表达,但未见TNF-α和ox-LDL对ACAT1酶蛋白表达有任何影响.
作者：成蓓；王毅；何平；吴剑萍；狄鸣；王洪星 刊期： 2004年第04期
目的观察葡萄糖转运体-1(GLUT-1)和一氧化氮合酶(NOS)阳性神经在Hirschsprung病(HD)肠壁中的变化并探讨二者与HD发病的关系.方法应用还原型辅酶Ⅱ-黄递酶组织化学和免疫组织化学染色观察9例HD及5例对照组患儿结肠.结果在正常结肠的肌层和粘膜下层内偶见细小的GLUT-1免疫反应性神经纤维,肠壁外的外源性神经纤维呈阳性染色;而在无神经节细胞肠段的相应区域内GLUT-1免疫反应性神经纤维数量明显增多、增粗.在正常结肠肠壁内有大量NOS阳性神经节细胞,环肌层内含有丰富的阳性神经纤维;而在无神经节细胞肠段的肠壁内缺乏NOS阳性神经元,肌层内阳性神经纤维明显减少.结论肠壁内GLUT-1阳性神经可能为外源性神经,GLUT-1免疫组织化学染色可能对HD具有诊断价值.NOS阳性神经在病变肠壁中的分布异常可能与HD的病理生理机制有关.
作者：杨小进；胡道松；林传友；殷光甫 刊期： 2004年第04期
目的了解凋亡素-2配体(又称肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,TRAIL)对人胰腺癌细胞株Pancl、PC3凋亡作用的影响.方法采用MTT法、琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞仪方法检测TRAIL对Pancl和PC3体外增殖的影响.结果 TRAIL可诱导胰腺癌细胞Pancl和PC3的凋亡,并呈时间和浓度依赖性,PC3的凋亡率明显高于Pancl.结论 TRAIL可以诱导胰腺癌细胞的凋亡,胰腺癌细胞系对TRAIL的敏感性有差异,TRAIL可能为胰腺癌的生物学治疗提供一种新途径.
作者：陈鑫；王春友；余康敏 刊期： 2004年第04期
目的制备稳定高效表达血管生成素-1(Ang-1)的转基因工程骨髓基质干细胞.方法应用基因重组的方法构建Ang-1真核表达质粒pEGFP/Ang-1,利用脂质体将pEGFP/Ang-1转入骨髓基质干细胞,用流式细胞仪检测转染率,用荧光显微镜和免疫细胞化学方法检测蛋白质的表达.结果质粒酶切电泳显示重组质粒构建成功,转染pEGFP/Ang-1质粒的骨髓基质干细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光;流式细胞仪检测转染率约50%;免疫细胞化学检测可见转基因骨髓基质干细胞表达Ang-1蛋白.结论成功制备表达外源性基因Ang-1的骨髓基质干细胞,制备方法是可行的.
作者：余开湖；冯敢生；姜晓兵 刊期： 2004年第04期
目的探讨全反式维甲酸诱导分化的HL60细胞周期变化,进一步揭示细胞分化在细胞周期中的时相特异性.方法以分化诱导剂全反式维甲酸(终浓度为10μmol/L)影响下不同时间点的HL60细胞为检测对象,应用流式细胞术分析细胞的大小及细胞表面的分化标志;碘化丙啶(PI)染色后用激光共聚焦显微镜观察细胞形态从而对已分化细胞进行确认;应用流式细胞术分析药物诱导的细胞周期变化,检测G1期的Ki67表达水平;再应用流式分选术结合激光共聚焦显微镜观察各期细胞形态.结果①随着药物诱导时间的延长,细胞的体积逐渐增大,被诱导的细胞出现髓系细胞表面的分化标志物CD11b.②全反式维甲酸导致HL60细胞周期的G0/G1峰升高,S期水平下降.③随着药物诱导时间的延长,G1期的Ki67的表达水平逐渐下降.④只在G1期细胞中可见到已分化细胞.结论全反式维甲酸可以诱导HL60细胞周期的G1早期→G1晚期阻滞,并诱导HL60沿着粒系方向分化,细胞分化完成于细胞周期中的G1早期.
作者：许培权；龚建平 刊期： 2004年第04期
目的探讨老年2型糖尿病大血管病变与血管内皮依赖性舒张功能的关系.方法采用高分辨超声以肱动脉反应性充血前后血管内径变化百分比反映血管内皮依赖性舒张功能,对45例老年2型糖尿病患者(24例合并大血管病变,21例无大血管病变)及20例对照组进行血管内皮依赖性舒张功能测定,同时测定血糖、血脂及血压水平.结果老年2型糖尿病患者肱动脉内径变化率明显低于对照组[(1.97±1.75)%vs(7.18±1.61)%,P＜0.01],并与患者的年龄、血糖、低密度脂蛋白、收缩压水平负相关,且大血管病变组肱动脉内径变化率较无大血管病变组更低[(0.42±0.36)%vs(3.56±3.21)%,P＜0.01].结论老年2型糖尿病大血管病变的发生与血管内皮依赖性舒张功能紊乱密切相关.
作者：涂玲；李彩萍；刘晓晴；李仁立；黄葵 刊期： 2004年第04期
目的评价神经内镜对脑积水的治疗作用.方法回顾性分析内镜下行不同治疗方式的32例不同类型脑积水患者的临床资料.结果随访3月～2年,9例梗阻性脑积水采用内镜下脑室造瘘术(7例行三脑室底造瘘术即ETV,2例行透明隔造瘘),8例治疗有效,1例ETV后脑积水无明显改善,改行脑室腹腔分流术(V-P分流);23例交通性脑积水采用内镜下引导V-P分流(10例)或内镜下引导V-P分流加内镜下脑室造瘘术(12例行ETV,1例行透明隔造瘘),脑积水均获得改善.结论梗阻性脑积水采用神经内镜脑室造瘘术,交通性脑积水采用内镜引导V-P分流或内镜引导V-P分流加脑室造瘘术,均可获得满意疗效.
作者：蒋太鹏；高永忠；邓志刚；廖宇钦；林恒洲；纪涛 刊期： 2004年第04期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
