刘萍；杨钰香；姚尚龙；武宙阳
目的观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素lβ(IL-1β)和高迁移率族蛋白-l(HMGBl)水平的时相变化,探讨HMGB1在SAP病程中的意义.方法采用胰管逆行灌注5%牛磺胆酸钠的方法复制大鼠SAP模型.随机分为正常对照组(N组,n=8)、假手术组(Shm组,n=8)和重症急性胰腺炎组(SAP组,n=80).用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组动物血清TNFα、IL-1β水平.用Western blot法检测血清HMGB1水平.结果SAP组大鼠血清TNF-α和IL-1β水平在建模后迅速升高,约在4～6 h达高峰,之后迅速下降,在建模12 h即降至接近正常水平,一直维持至24和48 h.SAP组大鼠血清HMGB1水平在建模后12 h开始有明显升高,至24和48 h仍维持在较高水平.结论 HMGB1可能作为晚期炎症因子参与了SAP的全身炎症反应.
作者：杨智勇；王春友；熊炯炘；陶京；许逸卿；刘涛 刊期： 2004年第04期
目的评价Root ZX根尖定位仪对侧向加压法根管充填质量的影响.方法选取拟行根管治疗术的86例患者,单根管牙104个,随机分成实验组和对照组.实验组的工作长度用Root ZX根尖定位仪测定,对照组工作长度用器械探测法测定.两组均用手动逐步后退法根管预备,侧方加压法根管充填.结果适充、超充和欠充在实验组中的比例分别为79%、15%和6%;在对照组中,分别为56%、31%和13%,经统计学处理两组差异有显著性意义(P＜0.05).结论 Root ZX根尖定位仪可以准确测定根管长度,从而明显提高侧向加压法根管充填质量.
作者：于晓霞；欧汝强；宋斌 刊期： 2004年第04期
目的在MRI图像上观测岛叶特征和近岛叶病变的三维坐标参数,进行精确体表定位.方法观测30例成人头颅外形,随机抽取100例无病变成人头颅MRI片,30例近岛叶病变,观测头颅外形和耳眦线平面以上100 mm内与其平行的前后正中线的中点以及中点与耳眦线平面中垂线的关系.观测岛叶的特征和近岛叶病变坐标参数.手术细致切除近岛叶病变.结果成人头颅近似标准球形.岛叶呈倒三角形,前后正中线旁31～40 mm显现.岛阈在外侧裂干的外侧耳眦线平面上(18±11)mm,过外耳道的耳眦线的垂线前(31±2)mm.岛前上点在耳眦线平面上(48±11)mm,过外耳道的耳眦线的垂线前(40±2)mm.上环岛沟后点在耳眦线平面上(55±11)mm,过外耳道的耳 眦线的垂线后(13±7)mm.30例近岛叶病变,体表定位准确率达98%,能安全切除病变.结论每个岛叶和近岛汉叶病变都能被精确定位于以耳眦线为基线的体表.
作者：韩东华；薛德麟；雷霆；陈劲草 刊期： 2004年第04期
目的探讨天然和氧化极低密度脂蛋白(n-VLDL,ox-VLDL)对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达血管细胞粘附分子1(VCAM-1)的影响.方法将n-VLDL和ox-VLDL作用于培养的HUVEC,用细胞酶联免疫吸附试验(cell ELISA)和单核细胞粘附试验检测VCAM-1蛋白在HUVEC的表达,用原位分子杂交检测VCAM-1mRNA的表达.结果正常培养的HUVEC表达VCAM-1,n-VLDL和ox-VLDL促进HUVEC表达VCAM-1,尤以ox-VLDL作用更强.单核细胞粘附试验显示,n-VLDL和ox-VLDL促进单核细胞向HUVEC粘附.结论天然和氧化极低密度脂蛋白可能通过增强血管内皮细胞表达VCAM-1而促进血液单核细胞粘附于血管壁,从而在动脉粥样硬化的早期病变中起重要作用.
作者：瞿智玲；杨全宝；阮秋蓉；朱大和 刊期： 2004年第04期
目的探讨老年2型糖尿病大血管病变与血管内皮依赖性舒张功能的关系.方法采用高分辨超声以肱动脉反应性充血前后血管内径变化百分比反映血管内皮依赖性舒张功能,对45例老年2型糖尿病患者(24例合并大血管病变,21例无大血管病变)及20例对照组进行血管内皮依赖性舒张功能测定,同时测定血糖、血脂及血压水平.结果老年2型糖尿病患者肱动脉内径变化率明显低于对照组[(1.97±1.75)%vs(7.18±1.61)%,P＜0.01],并与患者的年龄、血糖、低密度脂蛋白、收缩压水平负相关,且大血管病变组肱动脉内径变化率较无大血管病变组更低[(0.42±0.36)%vs(3.56±3.21)%,P＜0.01].结论老年2型糖尿病大血管病变的发生与血管内皮依赖性舒张功能紊乱密切相关.
作者：涂玲；李彩萍；刘晓晴；李仁立；黄葵 刊期： 2004年第04期
目的应用实时荧光PCR技术,检测癌基因MDM2在急性粒细胞白血病(AML)中的表达并分析其与AML发生、分型及疗效的关系.方法以Sybr GreenI为荧光指示剂,β-actm作内参照,建立检测MDM2 mRNA表达的实时荧光PCR反应体系.PCR反应完毕作熔解曲线分析.分析MDM2 mRNA的表达与AML的发病、FAB分型及疗效的关系.结果①通过对实验参数的优化,适宜的反应条件为退火温度51℃,Mg2+浓度3 mmol/L,牛血清白蛋白(BSA)浓度0.1 mg/ml,循环次数45次.批内、批间变异系数分别为8.81%和15.39%.②AML组MDM2mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.01);AML各亚型M1、M2与M3组MDM2mRNA表达量组间差异无显著性意义(P＞0.05);完全缓解组、部分缓解组、未缓解组3组之间MDM2mRNA表达差异有显著性意义(P＜0.01),且呈逐渐上升趋势.结论采用Sybr GreenI的Lightcycler实时荧光PCR方法检测MDM2 mRNA快速、简便、稳定性好.MDM2 mRNA的表达与AML的发生及临床疗效有重要关系.
作者：付康；吴蒙；吴健民；周志明；夏淑贞；吕文利 刊期： 2004年第04期
目的观察中药半边旗二萜类化合物5F对瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibrolast,KFB)凋亡及对Fas蛋白表达的影响.方法体外培养KFB,①收集以浓度为32μg/ml的5F作用12、24、36、48 h后的细胞;②收集分别用浓度为8、32、64、128 μg/ml 5F作用48 h后的细胞,应用流式细胞仪(FCM)检测成纤维细胞的凋亡率及Fas蛋白的表达.结果①5F作用12～48 h成纤维细胞出现明显的凋亡(P＜0.01),对照组成纤维细胞未见明显凋亡;②随着药物浓度的增大Fas蛋白表达也增高(P＜0.01).结论 5F可以诱导KFB细胞凋亡,促进Fas蛋白的表达.
作者：蔡康荣；蔡春；唐旭东；周克元 刊期： 2004年第04期
目的以HLA-A小阵列检测芯片为平台,确定HLA-A寡核苷酸芯片检测中优化实验条件.方法观察了样品制备方法(传统酚-氯仿法、白细胞裂解液法、Fe2O3纳米磁珠)、不对称PCR制备ssDNA的参数、PCR产物纯化方法对杂交结果的影响.结果3种不同的基因组提取方法均获得良好的特异性PCR扩增结果,纳米磁珠应用于样品提取和PCR扩增获得成功,实验条件需进一步完善;在不对称PCR佳实验条件为反向引物与正向引物浓度比25:1,正向引物浓度为0.04 μmol/L,PCR灵敏度可达ng(纳克)模板DNA,Qiagen纯化试剂盒效果略强于其它两种,但差异无显著性.结论本研究初步探讨HLA-A生物芯片样品制备条件,并取得理想结果,为寡核苷酸生物芯片的实际操作提供一定的参考和指导.
作者：陈慧；高华方；马雪梅；杨渝珍 刊期： 2004年第04期
目的观察自体骨髓间充质干细胞在神经再生室中的作用,探讨其作为组织工程的种子细胞修复周围神经缺损的可行性.方法成年Wistar大鼠24只,随机分成3组,每组8只,硅胶导管桥接右侧13 mm的坐骨神经缺损,A组在神经再生室内植入骨髓间充质干细胞+ECM(extracellular matrix,ECM)凝胶;B组植入ECM凝胶;C组注入生理盐水.术后12周,进行大体观察及坐骨神经功能指数测定、电生理检测、神经组织学等观察.结果 A、B两组均有再生神经生成,但A组各项检测指标均优于B组(P＜0.05或0.01).结论自体骨髓间充质干细胞能够促进周围神经再生,可以作为种子细胞应用于外周神经组织工程.
作者：廖文；刘淑红；张玉富；刘慧哲；李章华；赵永歧；范文红；夏仁云；罗永湘；范明 刊期： 2004年第04期
目的应用外源基因缝线行周围神经吻合,探讨神经吻合口直接转基因并使外源基因在吻合口得以表达的可行性.方法构建含有大肠杆菌(Escherichia coli,E coli)β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-Gal)的结构基因(lacZ基因)及人类巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)启动子的PCMV β质粒.应用通过浸泡处理的8-0医用尼龙无创缝线行兔坐骨神经外膜缝合.对照组应用浸泡过蔗糖PBS溶液的缝线,实验组应用浸泡过PCMV β质粒溶液的缝线进行神经缝合.分期取出神经吻合部,进行β-半乳糖苷酶组织化学染色及β-半乳糖苷酶活性检测.结果组织化学染色显示对照组术后各期的所有吻合部神经组织均无蓝染阳性细胞,而实验组术后各期的所有吻合部神经组织均有蓝染的阳性细胞;对照组术后各期吻合部神经组织中均未检测到β-半乳糖苷酶活性,实验组吻合部神经组织从术后2d到30 d都可检测到β-半乳糖苷酶活性.结论应用外源基因缝线可使外源基因转移至周围神经吻合口中并表达出具有生物活性的外源基因表达产物,为应用基因治疗促进神经功能的恢复提供了可行途径.
作者：张世强；刘玲；张经歧；张英泽；李衡；潘进社；赵昌平 刊期： 2004年第04期
目的观察促酰化蛋白(ASP)对3T3-L1前脂肪细胞的分化过程中克隆增殖的影响,以进一步探讨ASP诱导前脂肪细胞分化的可能机制.方法采用3H胸腺嘧啶掺入法和MTT法分别检测ASP诱导3T3-L1前脂肪细胞分化过程中DNA合成量及细胞增殖的情况,并采用流式细胞术检测诱导分化后细胞周期构成的变化.结果①ASP组在诱导分化24 h时,DNA合成量明显增加,与对照组相比差异有极显著性意义(P＜0.01),在48 h和72 h时DNA合成量降低,与对照组相比差异无显著性意义(P＞0.05).②诱导分化24 h时,ASP组细胞增殖明显,与对照组相比差异有显著性意义(P＜0.05);诱导分化48 h、72 h时,ASP组细胞增殖不明显.③ASP组可促进处于生长停滞期的前脂肪细胞重新进入细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期的细胞明显增多,细胞处于分裂增殖状态.结论圹诱导分化过程中,ASP可促进3T3-Ll前脂肪细胞发生克隆增殖.ASP促进细胞克隆增殖的作用,可能是其诱导前脂肪细胞分化的分子机制之一.
作者：卢慧玲；王宏伟；林汉华；温宇；胡秀芬 刊期： 2004年第04期
目的研究内皮素-1(ET-1)、重组人表皮生长因子(rhEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对培养的兔角膜内皮细胞增殖能力的影响及其相互作用.方法在体外培养的兔角膜内皮细胞中单独使用或联合应用ETl、rhEGF、bFGF,采用MTT方法观察对细胞增殖的影响,免疫组化染色法和计算机图像分析系统检测对细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.结果一定浓度ET-1促进培养的兔角膜内皮细胞的增殖,且呈剂量相关性.10pmol/L时起作用,200 pmol/L时发挥大作用.10 ng/ml rhEGF、2 ng/ml bFGF也促进培养的兔角膜内皮细胞的增殖.联合应用ET-1+rhEGF、ET-1+bFGF、ET-1+rhEGF+bFGF,细胞吸光度(A)值明显高于单独使用相应药物时A值之和.ET-1、rhEGF、bFGF单独使用可促进培养的兔角膜内皮细胞PCNA表达,联合应用时PCNA表达平均吸光度A值明显强于单独使用相应药物时表达强度之和.结论 ET-1可作为一种生长因子,它和rhEGF、bFGF单独使用可促进培养的兔角膜内皮细胞增殖能力,联合应用时具有协同作用.
作者：胡维琨；张虹；李贵刚；王毓琴；李鹏程 刊期： 2004年第04期
目的探讨全反式维甲酸诱导分化的HL60细胞周期变化,进一步揭示细胞分化在细胞周期中的时相特异性.方法以分化诱导剂全反式维甲酸(终浓度为10μmol/L)影响下不同时间点的HL60细胞为检测对象,应用流式细胞术分析细胞的大小及细胞表面的分化标志;碘化丙啶(PI)染色后用激光共聚焦显微镜观察细胞形态从而对已分化细胞进行确认;应用流式细胞术分析药物诱导的细胞周期变化,检测G1期的Ki67表达水平;再应用流式分选术结合激光共聚焦显微镜观察各期细胞形态.结果①随着药物诱导时间的延长,细胞的体积逐渐增大,被诱导的细胞出现髓系细胞表面的分化标志物CD11b.②全反式维甲酸导致HL60细胞周期的G0/G1峰升高,S期水平下降.③随着药物诱导时间的延长,G1期的Ki67的表达水平逐渐下降.④只在G1期细胞中可见到已分化细胞.结论全反式维甲酸可以诱导HL60细胞周期的G1早期→G1晚期阻滞,并诱导HL60沿着粒系方向分化,细胞分化完成于细胞周期中的G1早期.
作者：许培权；龚建平 刊期： 2004年第04期
目的探讨胰腺癌组织中P53蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达及其与临床病理学特征之间的关系.方法采用SP免疫组织化学方法,对46例胰腺癌组织中P53蛋白、VEGF及VEGF-C的表达进行检测.结果 P53、VEGF与VEGF-C阳性表达率分别为58.7%、65.2%和43.5%.P53表达与胰腺癌远处转移显著相关(P＜0.05),而与肿瘤大小,病理学分级及淋巴结转移无关,VEGF表达与胰腺癌淋巴结转移(P＜0.05)和远处转移(P＜0.01)显著相关,而与肿瘤大小,病理学分级无关,P53表达与VEGF表达呈明显正相关(P＜0.05).VEGF-C表达与胰腺癌淋巴结转移显著相关(P＜0.05),而与肿瘤大小,病理学分级及远处转移无关.结论在胰腺癌中,VEGF与P53表达呈正相关,在胰腺癌的淋巴结转移和远处转移中起重要作用.VEGF-C表达与胰腺癌淋巴结转移呈正相关,在胰腺癌的淋巴结转移中起重要作用.
作者：刘进；薛新波 刊期： 2004年第04期
目的从临床流行病学的角度,对新的人微小病毒B19非结构蛋白DNA巢式聚合酶链式反应(PCR)检测方法的效度及信度进行评价,探索其运用于临床筛查B19病毒感染的可行性.方法以国内目前常用的结构蛋白DNA巢式PCR检测结果,并结合孕妇的典型临床表现作为诊断标准,将30例孕妇分为B19病毒感染组及非感染组,对非结构蛋白DNA巢式PCR的检测结果进行效度及信度评价.结果新的检测方法血清标本的灵敏度可达100%,组织标本的特异度及阳性预测值高于血清标本,联合试验有助于提高检测的灵敏度或特异度.结论非结构蛋白DNA巢式PCR检测方法是一种特异、敏感、简便、快速诊断B19病毒感染的新方法.在临床筛查中,血清标本的检测优于组织标本.
作者：李增庆；黄咏梅；乔福元；李武 刊期： 2004年第04期
目的为进一步探讨星形胶质细胞在癫痫发病中的作用.方法选用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激及TNF-α反义寡核苷酸阻断后马桑内酯(coriaria 1actone,CL)刺激纯化培养的海马星形胶质细咆,将上述两种条件培养基提取液(astrocytic conditioned medium,ACM)10 μ1分别注入正常Sprague-Dawley(SD)大鼠侧脑室,观察动物行为与脑电图的变化;用免疫细胞化学方法检测大脑皮质与海马中γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyricacid,GABA)表达水平的改变,并做显微图像分析.结果①侧脑室注射TNF-α刺激后的条件培养基提取液可引起大鼠Ⅲ级癫痫样发作及典型的尖波、棘波、棘-慢波癫痫样脑电图表现,大鼠大脑前梨状皮质和海马齿状回GABA免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值均明显低于对照组;②侧脑室注射TNF-α反义寡核苷酸阻断后由马桑内酯刺激的条件培养基提取液,大鼠无癫痫样行为发生,大鼠大脑前梨状皮质和海马齿状回GABA免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值与对照组无显著性差异.结论①激活的星形胶质细胞分泌的TNF α可诱导大鼠癫痫发作.②GABA表达的变化可能与癫痫发作有关.
作者：彭俊忠；朱家祥；朱长庚；刘庆莹；童逸龄；魏瑛 刊期： 2004年第04期
目的探讨内源性和外源性纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及整合素β1(β1mtegrm)在人脑胶质瘤侵袭行为和恶性进展中的作用及相互关系.方法用细胞粘附实验和细胞迁移实验检测外源性FN和整合素β1对U251人恶性胶质瘤细胞株粘附及迁移能力的影响.用原位杂交法检测18例中低度恶性胶质瘤、15例高度恶性胶质瘤及7例正常脑组织中内源性FN和整合素β1mRNA的表达情况.结果①U251细胞在外源性FN上的粘附能力呈浓度依赖性,尤其在中低浓度时(＜5μg/m/)差异显著(P＜0.01);抗FN抗体及抗整合素β1抗体均能完全阻断U251细胞在FN上的粘附.②随外源性FN浓度升高,U251细胞在所观察的不同时间段的迁移距离均显著增加(P＜0.01);抗FN抗体几乎完全阻断FN对细胞迁移的促进作用,抗整合素β1抗体只能部分阻断FN对细胞迁移的促进作用.③细胞内FN和整合素β1mRNA在正常脑组织不表达或仅少量表达,而在胶质瘤中两者阳性表达率均随肿瘤恶性程度增加而增高(P＜0.05),且FN和整合素β1mRNA表达呈明显正相关(r=0.855,P＜0.01).结论①胶质瘤细胞通过其表面整合素β1受体与外源性FN成分相互作用,促进其在颅内的浸润侵袭.②整合素β1诱导的内源性FN合成增加与胶质瘤的恶性程度有关,并可能对其恶性进展起促进作用.
作者：郭滟；任大宏；杨静；熊密 刊期： 2004年第04期
目的研究小鼠胚胎心房肌和心室肌细胞自律性水平随胚胎发育不同时期而改变的发育依赖性特点.方法采用全细胞膜片钳技术,在电流钳条件下,记录了不同胚胎发育阶段小鼠单个心室肌细胞和心房肌细胞的跨膜动作电位.结果心室肌细胞早期(9.5～10.5 d,early development stage,EDS)、中期(11～14 d,intermediate development stage,IDS)、晚期(14～18.5 d,late development stage,LDS)动作电位周期分别为(172.86±26.15)ms、(247.73±1 5.84)ms、(326.67±30.10)ms(P＜0.05);中、晚期心房肌细胞动作电位周期分别为(204.15±24.14)ms,(226.53±20.28)ms.结论随着胚胎发育成熟,小鼠胚胎心房肌和心室肌细胞的自律性活动逐渐降低.
作者：韩林；张树军；杜皓；唐明；刘长金；宋元龙；Jürgen HESCHELER 刊期： 2004年第04期
目的制备稳定高效表达血管生成素-1(Ang-1)的转基因工程骨髓基质干细胞.方法应用基因重组的方法构建Ang-1真核表达质粒pEGFP/Ang-1,利用脂质体将pEGFP/Ang-1转入骨髓基质干细胞,用流式细胞仪检测转染率,用荧光显微镜和免疫细胞化学方法检测蛋白质的表达.结果质粒酶切电泳显示重组质粒构建成功,转染pEGFP/Ang-1质粒的骨髓基质干细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光;流式细胞仪检测转染率约50%;免疫细胞化学检测可见转基因骨髓基质干细胞表达Ang-1蛋白.结论成功制备表达外源性基因Ang-1的骨髓基质干细胞,制备方法是可行的.
作者：余开湖；冯敢生；姜晓兵 刊期： 2004年第04期
目的探讨姜黄素对糖尿病大鼠肾脏病变的作用及对肾脏Smad7蛋白表达的影响.方法诱导大鼠糖尿病后,随机分为对照组及治疗组,比较各组的血生化、尿微量白蛋白排泄量、肾脏病理改变及Smad7的免疫组化.结果糖尿病大鼠内生肌酐清除率(Ccr)、尿微量白蛋白(mAlb)排泄量较正常鼠增多,系膜基质增生,Smad7表达明显下降;姜黄素治疗能明显降低Ccr(P＜0.05),减少Alb排泄量(P＜0.05),抑制系膜基质增生,上调Smad7的表达(P＜0.05).结论姜黄素对糖尿病肾病具有明显疗效,其机制至少部分是通过上调Smad7的表达,拮抗转化生长因子-β的作用,从而抑制肾脏纤维化.
作者：陈丽；刘晓城；宁勇 刊期： 2004年第04期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
