刘恩宇；王德楚；易继林；李兴睿；周旭；杨志芳；陈晚平；蒋进发
目的了解不同地区肠球菌的耐药性,为临床治疗提供依据.方法采集武汉市8所医院及周边地区6所医院临床分离的不重复的肠球菌,菌种鉴定用微生物检测常规方法或API、ATB系统,药敏试验用K-B法,资料用WHONET-5软件和x2检验进行统计学分析.结果武汉市临床分离的肠球菌中粪肠球菌、屎肠球菌分别占70.1%、20.8%,周边地区为80.8%、13.9%;武汉市标本来源构成前5位的为尿液37.8%、分泌物15.0%、引流液8.2%、痰液7.3%、伤口分泌物6.8%,周边地区为尿液32.8%、生殖道分泌物19.8%、分泌物19.4%、痰液11.8%、伤口分泌物4.6%;武汉市和周边地区粪肠球菌对万古霉素、呋喃妥因、氨苄西林、高浓度庆大霉素的耐药率分别为2.1%、7.2%、22.6%、41.4%和1.8%、6.9%、23.2%、40.3%;武汉市和周边地区屎肠球菌对以上4种抗生素的耐药率分别为1.3%、18.2%、76.3%、73.0%和1.9%、21.3%、64.6%、62.0%.结论武汉市临床分离的肠球菌耐药率比周边地区高,各地区应动态监测并及时公示肠球菌感染和耐药性资料,以指导临床用药.
作者：王洪波；王洪源；张碧玉 刊期： 2004年第05期
目的探讨过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)的激活对单核细胞处于正常状态或脂质过氧化损伤时表达巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)的影响.方法将培养的单核细胞分为:①对照组;②联胺组;③不同浓度的Wy14643组;④不同浓度的Wy14643+联胺组;⑤不同作用时间Wy14643组;⑥不同作用时间Wy14643+联胺组.免疫细胞化学法检测各组细胞MIP-1α蛋白的表达.结果暴露于联胺后,人单核细胞MIP-1α蛋白的表达增强(P＜0.01);PPARα的激动剂在有或无脂质过氧化损伤时均能明显诱导人单核细胞MIP-1α蛋白的表达(P＜0.01),但随着时间的延长可有下降.结论PPARα参与了MIP-1α蛋白在单核细胞中表达的调节从而参与了动脉粥样硬化的发生.
作者：田丹；朱大和；冯艳；瞿智玲 刊期： 2004年第05期
目的研究氟对人胎肝细胞(L-02细胞)细胞周期、凋亡及p53表达的影响.方法体外培养的人胎肝细胞接触40、80、160 μg/ml氟化钠24 h后,MTT法检测L-02细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率和周期构成比,Western blot检测P53蛋白的表达水平.结果高剂量氟染毒组细胞存活率显著低于对照组(P＜0.01);各染氟组S期细胞数与对照组相比均明显增多(P＜0.01),中、高剂量氟染毒组细胞凋亡率和p53蛋白表达量均显著高于对照组(P＜0.01).结论氟可使L-02细胞S期细胞数增多,诱导人胎肝细胞凋亡和p53表达,并呈剂量-效应关系.
作者：李晓燕；褚启龙；夏涛；刘俊玲；陈学敏；杨克敌；王爱国 刊期： 2004年第05期
目的在体外培养新生小鼠下丘核区NSCs的基础上,研究水杨酸钠对NSCs分化的影响.方法分离、收集新生昆明小鼠下丘核区脑组织,体外经EGF和bFGF刺激下培养;通过免疫细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向和水杨酸钠给药后分化为神经元的细胞的GABA和Glu蛋白表达.结果培养的部分细胞在特定生长因子的作用下可分裂、增殖,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并在撤除生长因子后向神经元和胶质细胞分化.干细胞分化的神经元中的GABA和Glu蛋白表达位于细胞质和细胞核.在无水杨酸钠组两类递质阳性着色细胞数没有明显差异;水杨酸钠给药后Glu阳性着色细胞数较GABA阳性着色细胞数明显增加,吸光度值比较有显著性差异(P＜0.01).结论①小鼠下丘核区存在着具有多向分化潜能的神经干细胞.②水杨酸钠具有促进NSCs分化为Glu阳性神经元的作用.
作者：尹时华；龚树生；鄢开胜；李穗 刊期： 2004年第05期
目的探讨肝癌组织及癌旁肝组织中10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶(PTEN)蛋白的表达与人端粒酶逆转录酶(hTERT)的相关性.方法采用免疫组织化学法检测76例肝细胞癌(HCC)及癌旁肝组织中PTEN蛋白和hTERT的表达.结果①HCC中PTEN蛋白的阳性率(38.2%)和阳性强度明显低于癌旁肝组织(96.1%)(P＜0.01),且阳性信号强度与HCC分化程度相关(P＜0.01),即HCC分化愈差,PTEN蛋白表达愈弱.②HCC中hTERT的阳性率(89.5%)和表达强度明显高于癌旁肝组织(7.9%)(P＜0.01),且阳性信号强度与HCC分化程度有关(P＜0.01).③相关性分析表明,HCC及癌旁肝组织中PTEN蛋白表达强度和hTERT呈明显负相关(P＜0.01).结论提示在HCC发生中,可能由于PTEN蛋白表达降低或缺失,不能有效地抑制由致癌因子异常激活的hTERT,从而使肝细胞异常增殖和发生恶性转化.
作者：刘恩宇；王德楚；易继林；李兴睿；周旭；杨志芳；陈晚平；蒋进发 刊期： 2004年第05期
目的研究湖北人群Toll样受体4(TLR4)Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性分布特征.方法采用等位基因特异性聚合酶链反应(ASPCR)-限制酶片断长度多态性(RFLP)检测TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性.结果在所有的253例中国湖北人群样本中,没有检测到TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性存在.结论TLR4基因多态性在不同地区和人群发生的频率是不同的,与白种人相比,中国湖北人群的TLR4Asp299Gly和Thr399Ile的基因多态性非常罕见.
作者：谢志强；吕斌；邹立君；尚学兰；周宜开 刊期： 2004年第05期
目的观察血管抑素对体外培养的兔视网膜微血管内皮细胞生长的抑制作用及对细胞外信号调节蛋白激酶1(ERK-1)活化的影响.方法利用L-Lysine耦联的Sepharose 4B亲和层析柱从血浆中分离和纯化血管抑素.原代培养兔视网膜微血管内皮细胞,MTT法检测不同浓度的血管抑素对其生长的抑制作用,Western blot检测血管抑素对血管内皮细胞生长因子刺激的视网膜微血管内皮细胞ERK-1水平的影响.结果血管抑素在体外能显著抑制视网膜微血管内皮细胞增生,其ED50约为160 μg/ml.VEGF刺激兔视网膜微血管内皮细胞后,ERK-1被迅速激活,而血管抑素能使其表达量降低35.6%.结论血管抑素有望成为极有临床价值的防治视网膜新生血管形成的新药.
作者：孙旭芳；曾水清；王宇哲；李晓青；胡燕华 刊期： 2004年第05期
目的研究一氧化氮对胃粘膜的保护作用及其对胃粘膜保护因子的影响,探讨其胃粘膜保护机制.方法雄性Wistar大鼠80只,随机分为4组进行4项指标的检测,每组又分为4个亚组,即对照组、L-arg组、L-NAME组、L-NAME+L-arg组,各组经不同药物处理后,检测:①无水乙醇所致胃粘膜糜烂面积和深度;②通过Grees-reaction方法检测胃粘膜一氧化氮含量;③中性红分泌法及胃粘膜池模型方法检测胃粘膜血流;④血气分析检测胃粘膜中HCO3-分泌.结果L-arg组大鼠给予无水乙醇灌胃后,其胃粘膜溃疡面积和深度显著低于对照组,L-NAME组则显著高于对照组(P＜0.01),L-NAME+L-arg组胃粘膜溃疡面积和深度与对照组间差异无显著性意义.L-arg可显著增加胃粘膜一氧化氮浓度、胃粘膜血流及胃粘膜HCO3-分泌,给予L-NAME后该促进作用消失,而单独给予L-NAME可显著减低胃粘膜一氧化氮浓度、胃粘膜血流及胃粘膜HCO3-分泌.结论一氧化氮对胃粘膜有保护作用,其机制与增加胃粘膜血流和促进HCO3-分泌有关.
作者：刘劲松；侯晓华 刊期： 2004年第05期
目的观察载阿仑膦酸钠骨水泥对骨水泥微粒诱导的骨吸收的抑制作用.方法将制作的载阿仑膦酸钠骨水泥微粒和骨水泥微粒分别加入鼠骨髓单核细胞培养体系中,经10-8mol/L 1α,25(OH)2D3和10-7 mol/L地塞米松诱导培养,于培养9、12 d时观察多核、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性的破骨样细胞和形成的骨吸收陷窝数量.结果鼠骨髓单核细胞培养体系中,加入载阿仑膦酸钠骨水泥微粒后,形成的破骨样细胞以及骨吸收陷窝数量明显少于不加或仅加入骨水泥微粒组(P＜0.01).结论载阿仑膦酸钠骨水泥能够释放出阿仑膦酸钠,抑制骨水泥微粒诱导的破骨样细胞的形成和骨吸收作用.
作者：廖晖；李锋；陈安民 刊期： 2004年第05期
目的探讨前列腺特异性抗原(PSA)系列在前列腺癌(PCa)筛选诊断中的价值.方法用酶联免疫吸附法测定69例PCa和259例良性前列腺增生(BPH)患者的血清PSA、游离PSA/总PSA(fPSA/t PSA)、PSA速度(PSAV)、PSA密度(PSAD)和前列腺移行带PSA密度(PSAT)值.结果PCa组血清PSAV、PSAD和PSAT的检测值较BPH组明显升高(P＜0.01),而PSA和fPSA/tPSA两组间无明显差异(P＞0.05).PSA切变值越高,诊断准确性、特异性和阳性预测值越大,其中以PSA＞10μg/L时准确性高.在PCa和BPH鉴别诊断意义上,表现为PSAT＞PSAD＞PSAV＞fPSA/tPSA＞PSA.结论检测PSA系列,特别是检测PSAT和PSAD,较单纯检测PSA在PCa筛选诊断中有较高的准确性和特异性.
作者：杨国胜；陈昭典；刘卫平；彭弋峰 刊期： 2004年第05期
目的探讨低氧预适应(8%O2,3 h)对大鼠大脑中动脉缺血3 h再灌注后不同时间脑梗死体积、神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax mRNA及其蛋白表达的影响.方法低氧预适应后12 h制作脑缺血再灌注模型.在大鼠大脑中动脉缺血3 h再灌注后不同时间进行脑梗死体积测定(TTC)和原位细胞凋亡检测(TUNEL),通过Northern blot检测脑组织中Bcl-2、Bax mRNA的表达以及免疫组化检测Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果低氧预适应组的脑梗死体积、神经细胞凋亡、Bax的表达较缺血再灌注组明显减少;Bcl-2的表达明显增高.结论低氧预适应可减少大脑中动脉缺血3 h再灌注后梗死体积,增强Bcl-2及减少Bax的表达,抑制神经细胞的凋亡可能是其脑保护机制之一.
作者：高晓群；段东晓；邢莹；常成；茹立强 刊期： 2004年第05期
目的研究甲氨蝶呤(MTX)对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞增殖及细胞周期的影响,揭示MTX治疗RA的机制.方法应用克隆形成实验和流式细胞术分别测定RA患者滑膜细胞的增殖水平和细胞周期.结果加入不同浓度MTX(0.2～2μmol/L)的实验组,RA患者滑膜细胞克隆形成率均显著低于未加MTX的空白对照组(P＜0.05);细胞周期分析显示加入不同浓度MTX后第5、8天,细胞停留在G1期的比例比空白对照组明显增加(P＜0.05),而S、G2期的细胞比例则明显减少(P＜0.05);MTX能明显抑制滑膜细胞的增殖水平,并呈剂量依赖性.结论MTX治疗RA,主要作用于RA患者滑膜细胞的增殖及增殖相关的病理过程.
作者：刘巧红；王慧；滕云；沈凌汛；吴清敏；陈燕；杨真荣 刊期： 2004年第05期
目的构建高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因的反义真核表达载体,寻找胰腺癌基因治疗新途径.方法应用分子克隆技术构建HMGB1基因反义真核表达载体pcDNA3.1/antisense-HMGB1,转染胰腺癌细胞株PANC-1,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)、噻唑蓝(MTT)比色法检测转染48 h后胰腺癌细胞HMGB1基因表达和体外增殖活性的变化.结果成功构建pcDNA3.1/antisense-HMGB1反义真核表达载体.所获反义表达载体pcDNA3.1/antisense-HMGB1转染可使PANC-1细胞HMGB1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).反义pcDNA3.1/antisense-HMGB1的导入能有效抑制PANC-1增殖活性(P＜0.01).结论应用反义RNA技术阻断HMGB1基因的表达,能有效抑制癌细胞的体外增殖活性,为基因治疗提供了新思路.
作者：黄庆先；孙念峰；王国斌；王春友 刊期： 2004年第05期
目的了解角蛋白-19(CK-19)抗体在检测肺癌淋巴结微转移中的作用.方法应用免疫组化的方法对50例肺癌患者的106个常规病检阴性的淋巴结进行检测,分析相关影响因素,结合术前血浆肿瘤标志物浓度,计算出微转移危险因子(MRF)计分.结果CK-19抗体检测的阳性率为11.3%(12/106),阳性病例的比例高达24%(12/50).单因素分析显示年龄、肿瘤解剖定位(左/右肺)、大小与淋巴结微转移有关;多因素分析结果显示,淋巴结微转移的危险因子包括肿瘤解剖定位(左/右肺)、大小,OR值分别为1.75、2.31.当MRF≥3时,62.5%(5/8)发生微转移,而MRF＜3时,仅8.3%(1/12)发生微转移,P＜0.05.结论CK-19抗体是检测肺癌淋巴结微转移的有效指标,当MRF≥3时应注意阴性淋巴结的微转移情况.
作者：郑智；潘铁成；李军；陈涛；宋定伟；易军；周涛 刊期： 2004年第05期
目的探讨颗粒细胞线粒体DNA突变在女性生殖老化中的可能机制,并为颗粒细胞线粒体移植提供理论基础.方法分离70例临床行常规体外受精(IVF)和胞质内单精子注射(ICSI)患者的颗粒细胞,抽提DNA,PCR检测颗粒细胞线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)4977 bp缺失情况.结果所有颗粒细胞均未检测到mtDNA 4977 bp缺失.结论人颗粒细胞mtDNA并不发生4977 bp缺失,这可能与其不是有丝分裂后细胞,仍具有增殖能力,受到的氧化损伤较少有关.颗粒细胞参与生殖老化的机制可能与其mtDNA突变无关.
作者：黄睿；方丛；李涛；庄广伦 刊期： 2004年第05期
目的分离和纯化母婴血型不合母体的特异性高效价的IgG抗体.方法采用半饱和硫酸铵低温沉淀法分离IgG抗体,Sephedex A50层析柱纯化,然后用B型红细胞(RBC)吸收放散IgG,用聚乙二醇(PEG)沉淀,真空泵脱水回收IgG.结果200 ml血浆经半饱和硫酸铵低温沉淀后得IgG粗制品2.26 g,Sephedex A50层析柱纯化后得纯制品1.84 g,经B型RBC吸收放散后得特异性IgG 0.55 g,回收率达29.89%(0.55/1.84).结论采用半饱和硫酸铵低温沉淀法分离高效价IgG抗体,可以获得高纯度的IgG.
作者：余忠清；胡丽华；刘峰 刊期： 2004年第05期
目的观察卡维地洛对家兔扩张型心肌病交感神经分布和室颤阈值的作用.方法将家兔随机分为扩张型心肌病组、卡维地洛组和正常对照组.阿霉素静脉注射8周造成扩张型心肌病模型,卡维地洛组给予口服卡维地洛8周进行干预.体内用非程序刺激方法测定室颤阈值,体外对3组家兔心脏进行病理分析并用免疫组化技术检测交感神经分布.结果扩张型心肌病组和卡维地洛组较正常对照组各心腔明显增大、室壁变薄、交感神经数量显著增多.扩张型心肌病组室颤阈值较卡维地洛组和正常对照组明显降低(P＜0.01),但卡维地洛组交感神经分布与扩张型心肌病组相比无明显差异.结论卡维地洛能提高扩张型心肌病室颤阈值,对交感神经分布无明显影响.
作者：易桂斌；邱兰；张存泰；刘念；卜军 刊期： 2004年第05期
目的探讨β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)多孔陶瓷与骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的生物相容性,为组织工程方法修复骨和软骨缺损提供依据.方法将骨髓间充质干细胞与β-磷酸三钙多孔陶瓷复合并体外培养,然后进行形态学、细胞增殖、DNA含量、蛋白质含量测定.结果骨髓间充质干细胞能够贴附在β-磷酸三钙多孔陶瓷孔隙内生长,其DNA复制和蛋白合成功能不受β-磷酸三钙的影响.结论β-磷酸三钙多孔陶瓷生物相容性良好,可作为组织工程的支架材料应用于骨和软骨缺损的修复.
作者：张玉富；王常勇；廖文；李章华；赵强；郭希民；段翠密；夏仁云 刊期： 2004年第05期
目的建立人类雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)Western blot检测方法,并对不同乳腺癌细胞株ER、PR表达情况进行测定.方法取不同乳腺癌细胞株对数生长期细胞提取总蛋白,分别用ERα单克隆抗体1D5和PR单克隆抗体PgR636以Western blot方法对ER、PR的表达情况进行检测,并与同期固定细胞的流式细胞术(FCM)检测结果进行比较.结果T-47d、MCF-7、ZR-75-1细胞ERα的Western blot检测可得到清晰且分子量正确的条带,T-47d、ZR-75-1细胞可见清晰且分子量正确的PR条带,同期固定细胞ER、PR阳性表达的FCM检测结果与Western blot检测结果一致.结论Western blot检测ER、PR的方法是可行的.
作者：陶德定；高纯；江敏；吴剑宏；冯永东；龚建平 刊期： 2004年第05期
目的建立一种简单、实用的小鼠膀胱肿瘤动物模型.方法将绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒导入膀胱癌细胞株BTT-T739,筛选出高表达GFP的细胞克隆并配置成细胞悬液.将一定浓度肿瘤细胞悬液经雌性同系小鼠尿道注入膀胱壁粘膜层.荧光显微镜观察肿瘤浸润生长及微转移,常规病理切片观察.与同时建立的经腹膀胱壁内注射肿瘤模型进行对比.结果经尿道种植膀胱肿瘤细胞(4×105个)1周后可见膀胱粘膜层肿瘤细胞生长,而经腹膀胱壁内注射产生的肿瘤多在膀胱浆膜层及肌层.随时间延长膀胱内肿瘤逐渐增大,并出现血尿及远处转移的表现.结论经尿道膀胱壁注射肿瘤细胞建立膀胱癌模型的方法简单、实用、迅速.用该方法建立的模型更符合人类膀胱肿瘤的病理过程,有望成为研究膀胱肿瘤更为有效的工具.
作者：周洁；曾甫清；郭晓云 刊期： 2004年第05期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
