学术投稿

变形链球菌表面蛋白PAc功能区基因重组质粒的亚克隆构建

彭志翔;樊明文;边专

关键词:pac基因, 克隆, 重组质粒
摘要:将变形链球菌pac基因待表达部分克隆人哺乳动物表达质粒中构建成将用作DNA免疫防龋研究的重组质粒.用PCR扩增出pac基因的2个高度保守区域,扩增产物以pGEM-T为载体进行亚克隆后,再克隆至高效哺乳动物表达质粒pCI构建成重组体,重组质粒pCIA-P经限制性酶切分析及DNA测序分析证实克隆构建正确.对含pac基因重要抗原决定簇区域的成功克隆为DNA免疫防龋研究完成了重要准备.
华中科技大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 泪小管断裂吻合术

    探讨寻找泪小管断端方法,提高吻合泪小管成功率.从上泪小点注入带有8/0尼龙线的粘弹剂,在显微镜下辨认粘弹剂的出口及找到尼龙线,再用尼龙线引套较粗丝线,硅胶管使泪小管断端紧密结合愈合.11例下泪小管断裂患者

    作者:张虹 刊期: 2001年第05期

  • 5-氟尿嘧啶白及微球家兔肾动脉栓塞后体内药代动力学研究

    以常规5-氟尿嘧啶(5-Fu)注射液为对照品,研究了5-Fu白及微球家兔肾动脉栓塞后体内药代动力学过程.血药5-Fu浓度采用反相高效液相色谱法,所得血药浓度数据用3P87药代动力学程序处理.实验结果:5-Fu白及微球体内过程符合二室模型,t1/2a(6.27±6.10)min,t1/2β(203.6±97.5)min,Cmax(4.8±1.9)μg/ml.t1/2a,t1/2β均比注射剂明显延长(P<0.01).表明微球剂型具有靶向制剂长效、高效、低毒的特点.

    作者:黎维勇;冯敢生;郑传胜;曾莹 刊期: 2001年第05期

  • CA72-4放射免疫检测对胃癌诊断价值的初步分析

    随着单克隆抗体制备技术的进步,肿瘤标志物的研究亦得到了很大发展,特别是糖链抗原和组织多肽抗原的检测提高了肿瘤诊断的准确性.然而对胃癌抗原的检测,既往所采用的有关抗原如肿瘤特异性抗原(TSA)、肿瘤相关抗原(TAA)、癌胚抗原(CEA)的特异性较差.近年来国外报道一种新的肿瘤相关糖蛋白抗原CA72-4对胃癌诊断有较高的特异性和敏感性[1,2].本文报告同济医院19例胃癌患者血清CA72-4放免测定结果,并与CEA进行比较,来探讨其对鉴别胃内良、恶性病变的价值.

    作者:杨玉珍;王思元;赖世英 刊期: 2001年第05期

  • 日本血吸虫多价DNA疫苗pBK-Sj26(Sj32)-Sj23免疫效果的观察

    为了观察血吸虫病多价DNA疫苗的保护力,将小鼠分成5组:空白对照组、空质粒对照组、单价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj23组、多价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj26-Sj23和pBK-CMV-Sj32-Sj23组.大量提取各组质粒DNA后,各组于0、3、5周在BALB/c小鼠股四头肌注射相应质粒DNA,9周用血吸虫尾蚴攻击感染,15周剖杀小鼠计算减虫率及减卵率.结果显示:与对照组比较,实验组小鼠减虫率及减卵率有极显著性差异(P<0.01);与单价pBK-CMV-Sj23组比较,多价DNA疫苗组的减虫率及减卵率有显著性差异.提示血吸虫多价DNA疫苗诱导小鼠对血吸虫的保护力优于单价DNA疫苗.

    作者:李柳哲;石佑恩;江侃;宁长修;邓伟文 刊期: 2001年第05期

  • 氯沙坦对老年高血压病患者颈动脉结构及内皮功能的影响

    为观察氯沙坦(Losartan)对老年高血压病患者颈动脉的内径、内中膜复合体以及血流介导的血管内皮舒张功能的影响.对15例老年高血压病患者服用Losartan 50 mg/d3个月,治疗前后监测24 h动态血压,并采用高分辨超声技术和肱动脉充血反应法,检测患者颈动脉的内径、内中膜复合体厚度和充血前后肱动脉内径变化率.发现Losartan使患者24 h收缩压从(143.13±2.95)mmHg(1 kPa=7.5 mmHg)降至(134.87±1.64)mmHg,下降(8.62±0.80)mmHg(P

    作者:涂玲;李彩萍;邓又斌;刘晓晴 刊期: 2001年第05期

  • 克隆的丙型J肝炎病毒NS2基因中发现数个N端终止突变序列

    探讨丙型肝炎病毒(HCV)准种在NS2区的基因结构特征.利用逆转录-巢式PCR从一份HCV慢性携带者的阳性血清及一份急性丙肝患者的血清中获得HCV NS2全长cDNA,将其克隆于T载体,各随机挑取5个阳性克隆进行序列测定.结果显示在克隆到的HCV NS2全长基因中,慢性携带者该区序列有一个于HCV多聚蛋白第835位氨基酸的位置出现终止信号,丙肝患者该区序列有三个于第835位氨基酸的位置出现终止信号,一个小于第887位氨基酸的位置出现终止信号.在克隆到的HCV NS2基因中存在多个N端终止突变序列,提示NS2 N端跨膜区可能与包膜蛋白区有着密切的联系.

    作者:冷彦;陈秀珠;叶嗣颖;杜勇;杜桂鑫;王海涛 刊期: 2001年第05期

  • 支原体感染与慢性鼻窦炎及鼻息肉相关关系的初步研究

    运用单克隆抗体免疫荧光法分别检测54例鼻窦炎(其中38例鼻窦炎并鼻息肉、16例单纯性鼻窦炎)和20例单纯性鼻塞患者(对照组)鼻腔鼻窦支原体感染情况,旨在探讨支原体在慢性鼻窦炎和鼻息肉发病中的作用.结果发现鼻窦炎(S)组、鼻息肉(SP)组、单纯性鼻窦炎(SS)组和对照(CG)组支原体检出率分别为44%、57.9%、12.5%和5%.S与CG组、SP与SS组、SP与CG组间均有显著性差异.认为支原体感染可能是慢性鼻窦炎、鼻息肉发病、迁延和复发的又一重要因素.

    作者:华小阳;崔永华;高起学;刘秋润;李明刚;卢运萍 刊期: 2001年第05期

  • 抗同型磺基丙氨酸单克隆抗体的制备和定性

    用戊二醛将L-同型磺基丙氨酸(L-HCA)连接到牛血清白蛋白(BSA),形成L-HCA-BSA连接物.用L-HCA-BSA免疫小鼠后,收集脾淋巴细胞,并与骨髓瘤细胞融合.用含次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核甙(HAT)培养基保留杂交细胞.用ELISA法筛选能够分泌与L-HCA-BSA产生免疫反应的杂交细胞.通过ELISA抗体系列稀释试验和抗体吸收试验,确定抗体特异性.结果表明,抗L-HCA单克隆抗体(McAb)2D4能特异地与L-HCA-BSA产生免疫反应.用L-HCA-BSA吸收L-HCA McAb,可明显降低或取消L-HCA抗体与L-HCA-BSA的免疫反应.结果提示:L-HCAMcAb对L-HCA-BSA具有特异性,可用于免疫组织和细胞化学研究L-HCA在神经系统中的分布和定位.

    作者:刘长金;李爱;胡新武;张亮品 刊期: 2001年第05期

  • 人类白细胞抗原-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞的诱生及克隆

    为建立一种有效诱导及克隆人类白细胞抗原(HLA)-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞(CTL)的方法.用EB病毒转化的B淋巴母样细胞系细胞作为刺激细胞,采用长期混合淋巴细胞培养法诱导自身外周血T细胞库中抗原肽-HLA复合物特异性CTL增殖、分化,并用有限稀释法对之进行克隆.通过细胞毒实验证实获得的CD3+、CD8+T细胞克隆具有高度抗原特异性并受某些HLA型别的限制.

    作者:房崇芸;吴雄文;龚非力 刊期: 2001年第05期

  • 脑瘤术后并发远隔部位硬膜外血肿5例报告

    脑瘤术后继发远隔部位的颅内出血尤其是硬膜外血肿极为少见[1].本文报道笔者近来收治的5例患者,结合文献复习探讨其临床特征及可能的发生机制和临床意义.

    作者:刘绍明;李龄 刊期: 2001年第05期

  • 仰卧头偏侧体位在小脑桥脑角区病变显微手术中的应用

    为探讨仰卧头偏侧体位在CPA病变显微手术中的应用,采用仰卧头偏侧体位切除CPA肿瘤13例,术中病人仰卧,头偏向肿瘤对侧,患侧的枕后区向上,经枕下旁正中入路切除肿瘤.所有病变得到良好显露,其中12例全切,无1例发生严重并发症.结果表明:采用仰卧头偏侧体位切除CPA肿瘤能获得良好显露,对脑组织牵拉小,并发症少,手术医师不易疲劳.

    作者:舒凯;雷霆;胡文安;杨正明;薛德麟 刊期: 2001年第05期

  • 原位杂交技术检测增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸对BIU-87细胞体外增殖的影响

    运用原位杂交技术检测脂质体介导增殖细胞核抗原(PCNA)反义寡脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞BIU-87PCNA mRNA的表达水平.结果表明脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸处理组中BIU-87细胞PCNA mRNA的表达水平明显低于对照组.结果提示脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸可抑制人膀胱癌细胞BIU-87体外增殖活性,其抑制作用可通过阻断PCNA蛋白表达来实现.

    作者:袁敬东;曾甫清;鲁功成 刊期: 2001年第05期

  • 环磷酰胺对家兔动脉粥样硬化的影响

    将21只雄性大白兔随机等分成3组:环磷酰胺组(A组)、动脉粥样硬化对照组(B组)和正常对照组(C组),观察免疫抑制剂环磷酰胺对高脂血症动物的血脂、抗体、补体以及动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病变的影响.实验结束时发现:A、B两组的血脂、抗体、补体及循环免疫复合物(CIC)水平明显高于C组;A、B两组血脂水平相比无明显差异,但免疫指标相比有明显差异;A组的主动脉斑块面积和主动脉内膜厚度明显小于B组(P<0.01).本实验提示AS的发生与免疫反应有关,环磷酰胺可以减轻兔主动脉粥样斑块的形成,但不是通过降血脂途径.

    作者:杨晓云;王琳;汪培华 刊期: 2001年第05期

  • 二硫化碳对大鼠和接触工人生殖效应的研究

    探讨二硫化碳(CS2)对大鼠和接触工人的生殖效应.将交配成功的雌鼠在妊娠第7~14 d每天吸入150、50、10 mg/m3的CS2,按常规观察其F1代生长发育和F2代的致畸作用;以CS2接触工人为对象,了解其对月经、妊娠结局的影响.研究表明,CS2可使F1代出生后的大鼠生长发育明显减慢;F1代孕鼠肝脏器系数150、50 mg/m3组与对照组比较有显著差异(P<0.05),血清微量元素铜、锌含量明显降低;CS2对F 2代有明显的致畸作用,主要引起骨骼系统和中枢神经系统畸形.CS2接触女工月经异常率比对照组高2.32倍,且工龄越长其异常率越高.单纯女工接触和女工及其配偶均接触CS2组早产率和自然流产率都比对照组高.故应加强对接触女工的生殖健康保健.

    作者:陈国元;杨克敌;鲁翠荣;刘卫东;蒋芸;张招弟 刊期: 2001年第05期

  • 未手术成年腭裂患者颅面形态的X线头影测量研究

    应用X线头影测量方法对至成年将测量值与湖北地区正常人群资料进行比较结果表明:未手术成年腭裂患者面突度显著减小,上颌骨水平向发育不足,垂直向发育未受影响,下颌骨发育正常.

    作者:孙国洪;东耀峻;张国志 刊期: 2001年第05期

  • 巢式PCR检测WT1在白血病患者中的表达及其临床意义

    应用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定K562细胞株及75例白血病患者及10名正常人WT1基因的表达.并同时测定mdrl的表达.检测结果为K562细胞株高表达,急性髓性白血病(AML)30例中19例,急性淋巴细胞白血病(ALL)13例中10例,慢性粒细胞白血病(CML)共17例,其中加速及急变期3例,慢性期14例中8例,WT1表达为阳性,10名正常人及7例缓解期患者WT1表达均为阴性;且WT1阳性患者完全缓解率(CR)低于表达阴性者(分别为65%和88%,P<0.05).此结果说明WT1在白血病患者中高表达,可作为检测白血病微小残留病的标记基因,WT1的阳性表达者化疗后CR率低,且其与白血病的病程发展可能有关,WT1与mdrl无明显相关性.

    作者:汤屹;乔振华;刘文励 刊期: 2001年第05期

  • 慢性肝病患者TNF-α、IL-6、IL-8、HA、LN、PC Ⅲ水平测定的临床意义

    为探讨慢性肝病患者血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(PCⅢ)含量变化及其在肝纤维化中的临床意义.取空腹静脉血,采用放射免疫法(RlA)测定81例慢性肝病患者血清TNF-α、IL-6、IL-8、HA、LN、PCⅢ含量变化.发现慢性肝病患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平明显升高,与对照组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01).TNF-α、IL-6、IL-8含量与HA、LN、PCⅢ含量正相关.与不同临床类型的慢性肝病患者血清胆红素含量平行测定二者成正相关.结果表明:慢性肝病肝纤维化过程中,贮脂细胞的活化,胶原合成增加与TNF-α、IL-6、IL-8细胞因子有关,细胞因子活性与血清胆红素一样可反映肝细胞损伤程度.

    作者:黄加权;江必武;郭成;陈焰;张东绅 刊期: 2001年第05期

  • 酪氨酸激酶抑制剂对气道上皮细胞上皮钙粘附素表达的影响

    应用原位杂交、免疫细胞化学及免疫斑点法观测香烟烟雾提取物(CSE)和酪氨酸激酶抑制剂tyrphostin25作用后,培养的猪气道上皮细胞上皮钙粘附素(E-cd)mRNA和蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及培养上清液中可溶型E-cd(sE-cd)含量的变化.结果发现,加入CSE作用4 h后,C4组细胞内E-cd表达比对照N4组降低了36%(P<0.01),而24 h后,C24组E-cd表达为对照N24组的1.72倍(P<0.01).PCNA表达量C24组细胞为N24组的1.38倍(P<0.01),而加入tyrphostin 25和CSE作用24 h后,CT24组细胞比N24组降低了40%(P<0.01).培养上清液中sE-cd的含量C4组和CT24组分别为相应N组的1.34倍和2.02倍,C24组比N24组降低了14%.结果表明:酪氨酸激酶活化时,E-cd滞留在胞浆中,细胞增殖能力增强;酪氨酸激酶活性抑制时,E-cd稳定表达于膜上,细胞增殖能力减弱.培养上清液中sE-cd的含量可间接反映气道上皮细胞损伤修复的状态.

    作者:王曦;吴人亮;郝天玲;陈芳 刊期: 2001年第05期

  • 低pH病毒灭活工艺对抗人淋巴细胞免疫球蛋白质量的影响

    对抗人淋巴细胞免疫球蛋白进行病毒灭活后的质量进行研究.抗人淋巴细胞免疫球蛋白通过低pH孵化24 d后(pH 4.1±0.3),其花环抑制免疫效价仍不小于l:4000;与灭活前相比,灭活后制品的纯度及IgG各组分含量没有显著差异(P>0.05),并且其它各项指标均符合中国生物制品规程暂行规程的要求,从而表明抗人淋巴细胞免疫球蛋白通过酸孵育进行病毒灭活后的稳定性良好.

    作者:康光明;王前喜;艾智武;邹莉;陶柳宏;俞霖;李萍;吴克 刊期: 2001年第05期

  • 川芎嗪对骨髓移植小鼠造血细胞SDF-1表达水平的影响

    为探讨川芎嗪对骨髓移植(BMT)后造血重建过程中基质细胞来源因子(SDF-1)的作用,建立了典型同基因BMT小鼠模型,胃饲川芎嗪注射液每次2 mg,2次/d,分别于BMT后第7、14 d计数外周血细胞骨髓单核细胞(BMNC)并测定骨髓组织切片中SDF-1的表达.结果表明:川芎嗪组BMT后第7、14 d外周血细胞计数、BMNC计数及骨髓组织切片中SDF-1表达水平均高于BMT组.提示:川芎嗪能在骨髓移植造血重建早期促进骨髓基质细胞表达SDF-1,可能是促进BMT后造血干细胞(HSC)回髓、加速造血重建的机制之一.

    作者:孙汉英;戴琪琳;刘文励;任天华;孙岚;房明浩 刊期: 2001年第05期

华中科技大学学报(医学版)杂志

华中科技大学学报(医学版)杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:华中科技大学