学术投稿

抗同型磺基丙氨酸单克隆抗体的制备和定性

刘长金;李爱;胡新武;张亮品

关键词:L-同型磺基丙氨酸, 抗体, 单克隆, 酶联免疫吸附测定
摘要:用戊二醛将L-同型磺基丙氨酸(L-HCA)连接到牛血清白蛋白(BSA),形成L-HCA-BSA连接物.用L-HCA-BSA免疫小鼠后,收集脾淋巴细胞,并与骨髓瘤细胞融合.用含次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核甙(HAT)培养基保留杂交细胞.用ELISA法筛选能够分泌与L-HCA-BSA产生免疫反应的杂交细胞.通过ELISA抗体系列稀释试验和抗体吸收试验,确定抗体特异性.结果表明,抗L-HCA单克隆抗体(McAb)2D4能特异地与L-HCA-BSA产生免疫反应.用L-HCA-BSA吸收L-HCA McAb,可明显降低或取消L-HCA抗体与L-HCA-BSA的免疫反应.结果提示:L-HCAMcAb对L-HCA-BSA具有特异性,可用于免疫组织和细胞化学研究L-HCA在神经系统中的分布和定位.
华中科技大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 脑瘤术后并发远隔部位硬膜外血肿5例报告

    脑瘤术后继发远隔部位的颅内出血尤其是硬膜外血肿极为少见[1].本文报道笔者近来收治的5例患者,结合文献复习探讨其临床特征及可能的发生机制和临床意义.

    作者:刘绍明;李龄 刊期: 2001年第05期

  • 经直肠超声波引导下前列腺穿刺活检技术的临床评价

    为达到前列腺癌的早期诊断和治疗,对21例患者进行了经直肠超声波引导下的前列腺穿刺活检术,穿刺全部获得成功,无1例产生严重的术后并发症.共检出前列腺癌11例、良性前列腺增生(BPH)9例、前列腺结核1例.认为尽管CT、B超、血清前列腺特异性抗原(PSA)检测等方法都可作为临床判断前列腺癌的辅助诊断,但较为切实可靠的是对可疑患者进行前列腺的穿刺活检加病理学检查,还对穿刺活检的技术要点和注意事项及其优缺点进行了讨论.

    作者:杨为民;杜广辉;张旭;刘继红;马扬之;叶章群 刊期: 2001年第05期

  • 端粒酶反义寡核苷酸对MCF-7细胞端粒酶活性及细胞生长的影响

    为探讨端粒酶反义寡核苷酸对人乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞生长的影响,应用与人端粒酶RNA组分(hTR)模板区互补的硫代反义寡核苷酸处理MCF-7细胞.发现经反义hTR寡核苷酸作用后,细胞端粒酶活性明显受到抑制,至作用后72 h,端粒酶活性较对照组降低61.0%(P<0.05);细胞生长明显受到抑制;细胞周期发生显著变化,G0/G1期细胞数增多,S期及G2/M期细胞数则减少;细胞增殖指数由0.46降低至0.29;并可观察到凋亡细胞的出现,凋亡发生率为10.7%;而无义寡核苷酸处理组及空白对照组以上各指标均无明显变化.提示:端粒酶反义寡核苷酸可明显抑制乳腺癌细胞端粒酶活性,抑制细胞生长和增殖,诱导细胞凋亡;表明应用反义技术抑制端粒酶活性治疗乳腺癌可能具有广阔的前景.

    作者:高金波;陈道达;蔡开琳;张锦辉;田元 刊期: 2001年第05期

  • 肠神经元发育异常临床分析

    为探讨肠神经元发育异常(INDB)的临床特点、诊断和治疗.同济医院自1997年1月至1999年6月共收治15例INDB患者,其中单纯INDB9例,合并先天性巨结肠(HD)6例;诊断依据:①临床症状便秘;②钡灌肠;③测压;④组化;⑤病检.治疗:根治术13例,回肠造瘘1例,直肠内括约肌部分切除1例.对12例进行随访,时间6个月至2年6个月,平均1年6个月,11例效果好(占91%).表明INDB临床症状和HD相似,而病理与之截然不同,因此正确认识此病极为重要.

    作者:翁一珍;李娜萍;周学锋 刊期: 2001年第05期

  • 日本血吸虫多价DNA疫苗pBK-Sj26(Sj32)-Sj23免疫效果的观察

    为了观察血吸虫病多价DNA疫苗的保护力,将小鼠分成5组:空白对照组、空质粒对照组、单价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj23组、多价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj26-Sj23和pBK-CMV-Sj32-Sj23组.大量提取各组质粒DNA后,各组于0、3、5周在BALB/c小鼠股四头肌注射相应质粒DNA,9周用血吸虫尾蚴攻击感染,15周剖杀小鼠计算减虫率及减卵率.结果显示:与对照组比较,实验组小鼠减虫率及减卵率有极显著性差异(P<0.01);与单价pBK-CMV-Sj23组比较,多价DNA疫苗组的减虫率及减卵率有显著性差异.提示血吸虫多价DNA疫苗诱导小鼠对血吸虫的保护力优于单价DNA疫苗.

    作者:李柳哲;石佑恩;江侃;宁长修;邓伟文 刊期: 2001年第05期

  • 氯化饮水有机提取物和MX对大鼠脂质过氧化作用影响的研究

    采用Wistar大鼠灌胃染毒方法,观察氯化饮水有机提取物和氯化副产物3-氯-4-(二氯甲基)-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮(简称Mx)对大鼠组织脂质过氧化作用(LPO)及谷胱甘肽(GSH)含量的影响.结果表明,不同浓度的氯化饮水有机提取物均可使大鼠肝脏、肾脏和睾丸中脂质过氧化产物--丙二醛(MDA)含量明显增加,肝脏丙二醛的含量随浓度的增高而增高,GSH随浓度的增高而下降.Mx对染毒大鼠组织中丙二醛和GSH含量无明显影响.

    作者:李晓燕;陈丹;谢虹;陈秀娜 刊期: 2001年第05期

  • 电解法处理化纤浆粕黑液的研究

    采用电解法对化纤浆粕黑液的处理进行了研究,发现进水pH值的佳范围为8~10,佳电解时间为10min,脉冲频率为7000~9000 Hz,电流密度为395.2 A/m2,极距为15 mm,极板厚度为3 mm.当进水化学需氧量(CODcr)为2000~4000 mg/L时,CODcr去除率平均为45%,脱色率平均为68%.结果表明:电解法作为化纤浆粕黑液处理的前段工艺,可降低CODcr负荷,是化纤浆粕黑液脱色的有效方法.

    作者:赵金辉;赵志耀 刊期: 2001年第05期

  • 意外跌落伤住院儿童转归的影响因素分析

    为探讨影响意外跌落伤住院儿童转归的有关因素,提高患儿的住院治疗质量,促进医院建立有效的院内医疗系统,利用多项有序分类反应变量的逐步Logistic回归对3035例0~14岁意外跌落伤住院患儿的转归进行影响因素分析.发现影响转归的因素有:住院时间、确诊时间、院前时间、病情程度、受伤部位、并发症、生活环境、手术及术前住院天数、住院费用.结果表明:医院要正确处理缩短住院时间与提高治疗效果之间的关系,并通过缩短院前时间、及时确诊、降低并发症、控制病情、降低住院费用、尽量减少术前住院天数,强化和贯彻整体医疗观念等综合措施即可有效地提高意外跌落伤住院儿童的治疗效果.

    作者:尹平;刘筱娴 刊期: 2001年第05期

  • 单态氧猝灭剂叠氮钠治疗角膜碱烧伤实验研究

    为研究叠氮钠对角膜碱烧伤的治疗作用,在家兔的角膜碱烧伤模型中,用1 g/L NaN3及10 g/L NaN3+100g/L枸橼酸钠滴眼剂治疗.同时用硫代巴比妥酸(TBA)反应法检测过氧化脂质(LPO),用组织培养人角膜上皮细胞检测NaN3毒性,发现角膜烧伤后LPO逐渐减少.治疗组病情较轻,且NaN3毒性低,认为角膜碱烧伤后,用NaN3治疗有一定效果.

    作者:邱良秀;张泺;沈远平 刊期: 2001年第05期

  • 大剂量抑肽酶在体外循环中减少术后出血的作用

    观察在体外循环中应用大剂量抑肽酶对术后出血的影响.20例成人体外循环心脏直视手术患者,随机分为2组:抑肽酶组和对照组.结果显示,抑肽酶组术后6 h和24 h引流量较对照组显著降低(P<0.05).认为在体外循环中大剂量抑肽酶应用通过对血小板功能的保护和抗纤溶作用从而大大减少了术后患者渗血量.

    作者:王辉;黄飞 刊期: 2001年第05期

  • I型和Ⅱ型TGF-β受体在人增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中表达的研究

    运用免疫组化技术检测增生性瘢痕(HTS)和瘢痕疙瘩(KS)中I型(R I)和Ⅱ型(RⅡ)TGF-β受体的表达和分布情况,了解TGF-β受体在人HTS和KS形成中的作用.结果发现,HTS成纤维细胞(Fb)表面R I和RⅡ有阳性表达,而且随着病程的延长,受体表达逐渐减弱,直至消失;KS浸润部Fb表面R I和RⅡ呈强阳性表达,中央部未见受体表达阳性的Fb;正常皮肤Fb表面受体表达阴性.提示在HTS形成过程中,不仅TGF-β增高,Fb表面I型和Ⅱ型TGF-β受体也增高,使TGF-β作用放大;TGF-β及其受体可能与KS的浸润性生长有关.

    作者:郭能强;张一鸣;辛时林 刊期: 2001年第05期

  • 二硫化碳对大鼠和接触工人生殖效应的研究

    探讨二硫化碳(CS2)对大鼠和接触工人的生殖效应.将交配成功的雌鼠在妊娠第7~14 d每天吸入150、50、10 mg/m3的CS2,按常规观察其F1代生长发育和F2代的致畸作用;以CS2接触工人为对象,了解其对月经、妊娠结局的影响.研究表明,CS2可使F1代出生后的大鼠生长发育明显减慢;F1代孕鼠肝脏器系数150、50 mg/m3组与对照组比较有显著差异(P<0.05),血清微量元素铜、锌含量明显降低;CS2对F 2代有明显的致畸作用,主要引起骨骼系统和中枢神经系统畸形.CS2接触女工月经异常率比对照组高2.32倍,且工龄越长其异常率越高.单纯女工接触和女工及其配偶均接触CS2组早产率和自然流产率都比对照组高.故应加强对接触女工的生殖健康保健.

    作者:陈国元;杨克敌;鲁翠荣;刘卫东;蒋芸;张招弟 刊期: 2001年第05期

  • 血管紧张素Ⅱ诱导人内皮细胞凋亡

    为探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)能否诱导人内皮细胞凋亡,将健康胎儿脐静脉内皮细胞培养至第3代,用不同浓度AngⅡ培养不同时间,用TUNEL和ELISA检测细胞凋亡,并检验Caspase-3酶活性变化.用RT-PCR检测AngⅡ受体AT1和AT2的mRNA表达.发现AngⅡ可以诱导出典型的凋亡,凋亡细胞阳性率极显著高于对照组,凋亡强度与AngⅡ呈现剂量依赖关系.Caspase-3酶活性在AngⅡ作用后有极显著的增加.内皮细胞同时表达AT1和AT2的mR-NA.结果表明:AngⅡ经AT1或(和)AT2可以诱导人内皮细胞凋亡,并且是Caspase-3依赖性的.这一结果有助于阐明AngⅡ的致病机制.

    作者:熊先智;胡志伟;刘纬;杨卫兵;陶晓南;张建初 刊期: 2001年第05期

  • 低pH病毒灭活工艺对抗人淋巴细胞免疫球蛋白质量的影响

    对抗人淋巴细胞免疫球蛋白进行病毒灭活后的质量进行研究.抗人淋巴细胞免疫球蛋白通过低pH孵化24 d后(pH 4.1±0.3),其花环抑制免疫效价仍不小于l:4000;与灭活前相比,灭活后制品的纯度及IgG各组分含量没有显著差异(P>0.05),并且其它各项指标均符合中国生物制品规程暂行规程的要求,从而表明抗人淋巴细胞免疫球蛋白通过酸孵育进行病毒灭活后的稳定性良好.

    作者:康光明;王前喜;艾智武;邹莉;陶柳宏;俞霖;李萍;吴克 刊期: 2001年第05期

  • 机械瓣替换术后抗凝与凝血状态的观察

    为探讨心脏机械瓣膜替换术后口服华法令抗凝治疗期间,凝血因子的变化及μFPA与INR的相关关系,随机选取102例机械瓣替换术后口服华法令抗凝治疗患者,稳定抗凝治疗1个月以上.42例健康志愿者为对照组,一期法测定INR、纤维蛋白原(Fg)及凝血因子Ⅱ、x的活性Ⅱ:C、x:C;高效液相色谱法(HPLC)测定尿液纤维蛋白肽A的尿肌酐校正浓度(μFPA).结果表明:口服华法令抗凝治疗者Ⅱ:C、x:C显著降低,分别为(48.5±20.2)%、(39.4±16.7)%;μFPA均值(6.7±4.3)ng/mgcr,显著低于正常值;INR在2.0~3.0时,Ⅱ:C、x:C适度抑制;INR>3.0时,呈过度抑制;INR在2.0~2.5时,μFPA与INR呈负相关(r=-0.5194,P<0.001);Fg在抗凝早期(3个月内)显著增高[(4.23+0.27)g/L,P<0.001],抗凝晚期(3个月以后)逐渐降至正常范围.小剂量口服华法令抗凝显著抑制Ⅱ:C、x:C,抗凝效果良好;国人抗凝适当范围INR2.0~3.0;μFPA小剂量抗凝时与INR呈负相关,与Ⅱ:C、x:C呈弱的正相关.用μFPA指导抗凝有一定价值.

    作者:张凯伦;曹建军;杜心灵;汪东仿 刊期: 2001年第05期

  • 酪氨酸激酶抑制剂对气道上皮细胞上皮钙粘附素表达的影响

    应用原位杂交、免疫细胞化学及免疫斑点法观测香烟烟雾提取物(CSE)和酪氨酸激酶抑制剂tyrphostin25作用后,培养的猪气道上皮细胞上皮钙粘附素(E-cd)mRNA和蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及培养上清液中可溶型E-cd(sE-cd)含量的变化.结果发现,加入CSE作用4 h后,C4组细胞内E-cd表达比对照N4组降低了36%(P<0.01),而24 h后,C24组E-cd表达为对照N24组的1.72倍(P<0.01).PCNA表达量C24组细胞为N24组的1.38倍(P<0.01),而加入tyrphostin 25和CSE作用24 h后,CT24组细胞比N24组降低了40%(P<0.01).培养上清液中sE-cd的含量C4组和CT24组分别为相应N组的1.34倍和2.02倍,C24组比N24组降低了14%.结果表明:酪氨酸激酶活化时,E-cd滞留在胞浆中,细胞增殖能力增强;酪氨酸激酶活性抑制时,E-cd稳定表达于膜上,细胞增殖能力减弱.培养上清液中sE-cd的含量可间接反映气道上皮细胞损伤修复的状态.

    作者:王曦;吴人亮;郝天玲;陈芳 刊期: 2001年第05期

  • 人类白细胞抗原-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞的诱生及克隆

    为建立一种有效诱导及克隆人类白细胞抗原(HLA)-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞(CTL)的方法.用EB病毒转化的B淋巴母样细胞系细胞作为刺激细胞,采用长期混合淋巴细胞培养法诱导自身外周血T细胞库中抗原肽-HLA复合物特异性CTL增殖、分化,并用有限稀释法对之进行克隆.通过细胞毒实验证实获得的CD3+、CD8+T细胞克隆具有高度抗原特异性并受某些HLA型别的限制.

    作者:房崇芸;吴雄文;龚非力 刊期: 2001年第05期

  • 鼻渊净颗粒的药效学研究

    采用3种抗炎动物模型和3种免疫动物模型,对鼻渊净颗粒的抗炎作用和免疫作用进行了实验研究.结果表明鼻渊净清膏3 g/kg、6 g/kg、12 g/kg 3种剂量对大鼠足趾肿胀、棉球肉芽肿、血管通透性均有影响;同时又能显著增强小鼠巨噬细胞吞噬功能(P<0.05)、胸腺指数(P<0.05)、血清溶血素的含量(HC50值分别为397.29±71.32、396.96±75.56、427.94±33.63)和迟发性变态反应(P<0.05)的作用.证明鼻渊净颗粒对炎症反应的多个环节都有作用,对非特异免疫及特异性免疫功能都有一定的促进作用.

    作者:吴健鸿;朱景申;万重建 刊期: 2001年第05期

  • 仰卧头偏侧体位在小脑桥脑角区病变显微手术中的应用

    为探讨仰卧头偏侧体位在CPA病变显微手术中的应用,采用仰卧头偏侧体位切除CPA肿瘤13例,术中病人仰卧,头偏向肿瘤对侧,患侧的枕后区向上,经枕下旁正中入路切除肿瘤.所有病变得到良好显露,其中12例全切,无1例发生严重并发症.结果表明:采用仰卧头偏侧体位切除CPA肿瘤能获得良好显露,对脑组织牵拉小,并发症少,手术医师不易疲劳.

    作者:舒凯;雷霆;胡文安;杨正明;薛德麟 刊期: 2001年第05期

  • 环磷酰胺对家兔动脉粥样硬化的影响

    将21只雄性大白兔随机等分成3组:环磷酰胺组(A组)、动脉粥样硬化对照组(B组)和正常对照组(C组),观察免疫抑制剂环磷酰胺对高脂血症动物的血脂、抗体、补体以及动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病变的影响.实验结束时发现:A、B两组的血脂、抗体、补体及循环免疫复合物(CIC)水平明显高于C组;A、B两组血脂水平相比无明显差异,但免疫指标相比有明显差异;A组的主动脉斑块面积和主动脉内膜厚度明显小于B组(P<0.01).本实验提示AS的发生与免疫反应有关,环磷酰胺可以减轻兔主动脉粥样斑块的形成,但不是通过降血脂途径.

    作者:杨晓云;王琳;汪培华 刊期: 2001年第05期

华中科技大学学报(医学版)杂志

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