张劲丰；吴英；苏荣；杨烨建；庄健海；何娴；谢小梅
目的 通过检测C35蛋白在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达,揭示C35蛋白在乳腺癌发生、发展、侵袭转移过程中的作用和意义. 方法 收集68例女性乳腺癌组织及20例乳腺正常组织,应用免疫组化技术检测分析C35蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的关系；分析乳腺癌组织C35蛋白表达与ER、PR、HER-2蛋白表达的相关性及与肿瘤不同分子亚型的关系. 结果 1)乳腺癌组织中C35蛋白的表达显著高于正常乳腺组织(P＜0.05),而在正常乳腺组织C35蛋白呈现低表达或不表达.C35蛋白表达与乳腺癌组织临床病理学特点存在相关性,随着乳腺癌组织的临床TNM分期、病理组织学分级的增加,C35蛋白阳性率显著升高(P＜0.05)；2)乳腺癌组织C35蛋白表达与ER与PR的表达呈负相关(r分别为-0.035和-0.083),与HER-2蛋白的表达呈正相关(r=0.207);3) C35在乳腺癌不同分子亚型中的阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),有无淋巴结转移者C35蛋白阳性率差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 C35蛋白在乳腺癌细胞中广泛存在,并与乳腺癌的发生、发展及预后有关,因而可作为乳腺癌诊断和治疗的标志物或新靶点.
作者：巴再华；朱嵩；徐超；尹昆；闫歌 刊期： 2013年第06期
弓形虫是一种专性细胞内寄生的寄生虫,人感染后多呈隐性感染,临床检测及诊断困难.巢式PCR是利用2套引物,对靶细胞基因2次识别并进行2轮扩增的方法,它可从极少量的模板中获得较高浓度和纯度的靶片段,在弓形虫的检测和基因研究中具有敏感性高、特异性强、稳定性好的优点.本文对巢式PCR在弓形虫中的应用进行了综述.
作者：陈凌娟；贾玉玺；申丽洁 刊期： 2013年第06期
弓形虫可以感染多种动物和人导致人兽共患弓形虫病.山羊和绵羊感染后不仅影响其发育、繁衍,对畜牧业发展造成一定的经济损失.若以感染动物来源的奶和肉制品为食物,还可能威胁到人类的健康.本文对国外的山羊、绵羊弓形虫感染情况及影响因素的研究进展进行了综述.
作者：郑斌；尹志奎；韩丁丁；亢彩彩 刊期： 2013年第06期
医学免疫学是一门涉及基础医学、临床医学和生物学等多种学科的重要基础学科,特别与临床各学科联系紧密.本研究通过介绍医学免疫学知识点在临床各学科的分布情况,探讨加强医学免疫学与临床各学科之间联系的方式方法,为了改进医学免疫学和临床学科的教学方法,提升教学质量提供参考.
作者：宋巧丽；马微；殷晓宁 刊期： 2013年第06期
目的 对妇科阴道毛滴虫感染情况和感染因素进行分析,为预防工作的开展提供依据. 方法 通过阴道窥镜以棉签拭子自患者阴道后穹窿部分泌物标本,显微镜下检测阴道毛滴虫,并对患者进行问卷调查. 结果 2011年3月～2012年3月医院妇科门诊就诊者1 235例,检出阴道毛滴虫阳性108例,感染率为8.74％；年龄30～岁、农民、从事服务业、共用浴巾浴衣等不良卫生习惯的人群感染率较高,与各类其他组感染率差异均有统计学意义(P均＜0.05)；不同季节感染率差异无统计学意义(P＞0.05)；使用避孕套避孕感染率较低,为4.59％,显著低于避孕药避孕组和无避孕组. 结论 阴道毛滴虫感染以中青年女性居多,加强健康知识宣讲,促成良好个人卫生习惯有利于减少阴道毛滴虫感染.
作者：赵瑰丽 刊期： 2013年第06期
非折叠蛋白反应(UPR)是维持细胞内质网稳态的一种适应性反应.内质网通过激活未折叠蛋白反应对细胞起到适应性保护作用.UPR对外界刺激和细胞生长信号做出的反应,称为内质网应激(ERs).目前认为,UPR通过三种不同的信号转导途径既增加ER的容量,提高其折叠蛋白的能力,又显著降低折叠错误的蛋白质,并减少进入ER蛋白质的数量,发挥缓解ERs的作用.大量的资料显示,UPR和癌症、感染、代谢性疾病等多种人类疾病的发生和发展密切相关.
作者：白慧君；金奇 刊期： 2013年第06期
研究生科研能力的培养是研究生教育的关键和核心内容.然而,由于研究生招生规模扩大等因素,研究生培养受到很大的制约.本研究以病原生物学专业研究生为研究对象,通过从文献阅读、实践能力等方面,探索提高病原生物学专业研究生的科研能力,以培养适合社会需求和学科需求的高级专业人才.
作者：朱丹丹；段义农；陈金铃 刊期： 2013年第06期
目的 制备重组日本血吸虫过氧化物氧化还原酶1 (rSj Prx1)蛋白,研究其生物学功能. 方法 采用RT-PCR方法,从日本血吸虫成虫cDNA中扩增编码Sj Prx1蛋白的基因片段,并亚克隆入表达载体pET28a(+),构建重组表达质粒Sj Prx1-pET28a,转化E.coli BL21,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达rSj Prx1蛋白,通过镍柱亲和层析纯化rSj Prx1蛋白.采用生物化学方法分析rSj Prx1对底物H2O2进行还原的酶活性.用纯化的rSj Prx1蛋白免疫小鼠,酶联免疫法检测小鼠血清抗体水平,观察其免疫原性.通过Western blot观察rSj Prx1蛋白对血吸虫感染血清的免疫反应性.以纯化rSj Prx-1蛋白刺激巨噬细胞RAW264.7,通过流式分析观察RAW264.7细胞表面标志物CD16/32、CD206表达水平的变化,通过RT-PCR检测RAW264.7细胞内诱导型一氧化氮合酶与精氨酸酶表达水平的变化,采用细胞因子检测试剂盒分析巨噬细胞培养上清液中IL-12及IL-10水平的变化,以评价rSj Prx1蛋白的免疫调节功能. 结果 通过RT-PCR获得编码Sj Prx1蛋白的基因片段,并成功构建了重组表达质粒Sj Prx1-pET28a.含重组质粒Sj Prx1-pET28a的转化子细菌经IPTG诱导表达可溶性Sj Prx1蛋白.纯化的rSj Prx1蛋白具有氧化还原活性,可还原底物H2O2.rSj Prx1蛋白免疫小鼠可产生高效价的血清抗体,该蛋白能被日本血吸虫感染者血清、病兔及病鼠血清识别,而免疫血清同样可能识别来源于血吸虫成虫及虫卵的天然SjPrx1蛋白.制备的rSj Prx1可诱导巨噬细胞高水平表达与M2型转化相关的IL-10、精氨酸及CD206. 结论 制备的rSj Prx1蛋白具有天然的酶学特性、抗原性和Th2型免疫调节功能,为进一步发展新的血吸虫病治疗药物和免疫调节方法奠定了基础.
作者：金一；柯雪丹；余传信；宋丽君；王玠；殷旭仁；沈双；陶永辉；张英 刊期： 2013年第06期
目的 探讨HBVcccDNA含量检测对慢性乙型肝炎(CHB)患者的诊断及临床意义. 方法 选择本院2007年1～2012年4月收治的80例CHB患者,采用荧光定量PCR检测肝组织HBVcccDNA,同时定量检测患者肝组织HBV-DNA及血清HBV-DNA. 结果 80例患者肝组织中均检测到HBVcccDNA,其定量值为(4.57±1.29)×103拷贝/mg；肝组织HBV-NDA为(4.91±1.31)×104拷贝/mg,血清HBV-DNA定量为(5.14±1.54)×104/ml.肝组织HBVcccDNA与肝组织HBV-DNA及血清HBV-DNA呈正相关.有34例患者HBeAg阳性,药物治疗后肝组织HBVcccDNA较治疗前显著下降(P＜0.05),但仍维持在一定水平. 结论 CHB患者肝组织HBVcccDNA高表达.肝组织HBVcccDNA水平检测可作为CHB患者持续感染及抗HBV治疗效果的评价指标.
作者：李曼辉；王凤学；幸建英；刘雁 刊期： 2013年第06期
目的 鉴定家兔感染隐孢子虫种类,收集兔隐孢子虫卵囊. 方法 采用饱和蔗糖溶液漂浮法检查郑州市郊区某兔场兔新鲜粪便标本中的隐孢子虫卵囊；基于18S rRNA基因位点对隐孢子虫阳性标本进行序列分析. 结果 87份标本中10份隐孢子虫阳性.经序列比对分析,10个分离株均为兔隐孢子虫.用隐孢子虫卵囊接种4只30 d龄无球虫仔兔(1×104个卵囊/只),潜隐期为3d,显露期为10 d,于感染后第6d和第9d出现两个排卵囊高峰期. 结论 家兔分离株隐孢子虫为兔隐孢子虫(Cryptosporidium cuniculus),感染仔兔后获得到大量纯卵囊.
作者：齐萌；吴国泉；李俊强；刘振伟；菅复春；张龙现 刊期： 2013年第06期
目的 对分离自呼吸道感染患者痰液的1株革兰阴性杆状细菌进行鉴定,探讨其种系发生及分类学特征.方法 分别从形态、生理、生化特性等表型性状对分离菌做出初步鉴定,并通过细菌16S rRNA基因测序及序列比对明确其种系来源. 结果 分离菌株为革兰阴性小杆菌,生化反应极不活泼,对多数常用抗生素和化学疗剂不敏感；Blast序列比对显示该分离菌和海洋类香菌的相似度为96.2％. 结论 根据表型性状和种系分析发生结果证实该菌株为类香菌属的一个新菌种.
作者：管福来；严书林；苏芬；尤敏；赵乃昕；徐焕洲；岳启安 刊期： 2013年第06期
目的 克隆粉尘螨变应原Der f Mal f 6(简称Mal f 6)编码基因并构建其原核表达体系. 方法 提取粉尘螨总RNA,根据GenBank中的(AY283280.1)序列设计并合成引物,RT-PCR扩增Der f Mal f 6全长基因,克隆至pColdTF DNA载体,转化至E.coli JMI09,取阳性克隆测序；将pCold TF-Mal f 6质粒转化至BL21,IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE验证表达产物,采用生物信息学软件预测Mal f 6的理化特性、结构和功能. 结果 RT-PCR获得全长为495 bp的Mal f 6基因.原核表达后经SDS-PAGE电泳显示其全细胞、上清及沉淀物均有蛋白表达,以上清表达量较高.生物信息学分析该蛋白由164个氨基酸组成,分子质量单位为17.7 ku,二级结构由α螺旋(4.88％)、延伸主链(37.8％)和无规则卷曲(57.32％)组成,是亲水性细胞质蛋白,具有肽酰-脯氨酰反式异构酶活性. 结论 粉尘螨变应原Mal f 6原核表达获得成功,为该变应原的进一步研究及规模生产和应用奠定了基础.
作者：孙金霞；周鹰；杨李；俞黎黎；王运刚；卞勇华；崔玉宝 刊期： 2013年第06期
目的 探讨医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌感染临床分布情况及其耐药情况,为临床合理用药提供依据. 方法 收集2010～2011年院住院并发大肠埃希菌感染患者,分离大肠埃希菌,采用双纸片协同试验(表型确证试验)检测ESBLs,药敏纸片法进行药敏试验. 结果 297株大肠埃希菌,2010年135株,2011年162株；常见部位主要为呼吸道和泌尿道,分别为118和64株,分别占39.73％和21.55％；手术伤口及其他伤口、引流液、血液及其他标本分别占13.80％、9.09％、6.40％和9.43％.大肠埃希菌对阿莫西林、氨苄西林耐药率较高,均＞70％,对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星耐药率较低,分别为0、7 i1％和15.49％.2011年大肠埃希菌对阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星、环丙沙星、氨曲南和复方新诺明的耐药率高于2010年,大肠埃希菌耐药率逐年升高.297株大肠埃希菌共检出产ESBLs菌株71例,检出率为23.91％,产ESBLs菌株耐药性显著高于不产ESBLs菌株. 结论 大肠埃希菌及产ESBLs大肠埃希菌耐药严重,临床应根据药敏结果合理应用抗菌药物.
作者：曲颖 刊期： 2013年第06期
目的 克隆与高效表达无乳链球菌细胞表面菌毛岛屿辅助蛋白AP1基因编码蛋白抗原优势区,并进行抗原性分析及鉴定.方法 根据GenBank上公布的牛乳腺炎无乳链球菌辅助蛋白APl(EU929387.1)基因序列,利用生物信息学学软件Primer5.0和DNA MAN,根据其辅助蛋白保守序列设计、合成1对克隆引物,以分离于内蒙古东部地区乳源性无乳链球菌临床菌株总DNA为模板,PCR扩增辅助蛋白AP1基因序列,经克隆与测序后构建重组表达载体APl-pET30,转化大肠埃希菌BL21,并进行高效表达,目的蛋白经亲和层析纯化后进行Western blot鉴定.结果 克隆的抗原表位序列片段大小为714 bp,编码238氨基酸残基,与GenBank公布的APl(EU929387.1)基因序列相似性为99.72％,氨基酸残基相似性为99.58％.构建的重组表达载体经诱导表达可溶性蛋白,纯化后重组蛋白的纯度＞95％,Western blot分析重组蛋白能被牛源无乳链球菌阳性血清识别.结论 成功构建了pET-30a-AP1重组表达载体,该载体能可溶性表达重组蛋白,表达产物具有良好抗原反应性,为进一步研究辅助蛋白AP1的结构、功能以及抗原表位的鉴定奠定了实验基础.
作者：锡林高娃；吴金花；布日额；刘洋；王学理；刘燕；郭闯 刊期： 2013年第06期
目的 研究临床常用8种抗菌药物对嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia,SMA)体外生物被膜(bacterial biofilm,BBF)的抗菌活性. 方法 通过微量接种针装置建立SMA生物被膜的体外模型,测定左氧氟沙星、环丙沙星、哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、磺胺甲基异噁唑、庆大霉素和红霉素对SMA生物被膜的抑制浓度(biofilm inhibitory concentration,BIC),并与相应低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)进行比较.结果 共有42株SMA利用微量接种针成功建立成熟生物被膜的体外模型,8种抗菌药物对形成物被膜SMA的BIC50分别为左氧氟沙星4 μg/ml、环丙沙星8 μg/ml、哌拉西林256μtg/ml、头孢哌酮/舒巴坦128 μg/ml、头孢他啶128 μg/ml、磺胺甲基异噁唑304 μg/ml、庆大霉素256 μg/ml、红霉素128 μg/ml,相应抗生素的MIC50分别为0.25、2、64、16、32、19、32和32μg/ml.相应的BIC90也均高于MIC90.扫描电镜观察细菌培养24 h可形成成熟的生物被膜形态结构. 结论 与浮游态细菌相比,形成生物被膜后SMA对抗菌药物的耐药程度增加.
作者：梁歌宏；孙二琳；宋诗铎；祁伟 刊期： 2013年第06期
目的 掌握新疆喀什黑热病高流行区的黑热病发病特征,为该病的防控工作提供参考和依据. 方法 在喀什地区伯什克拉姆乡选取近年来黑热病发病人数位居前3位的3个大队进行人户普查,统计分析黑热病累计发病人群特征. 结果 1990年以来该地区人源型黑热病的累积发病率为6.44％(310/4810).不同性别、文化程度和职业人群间发病差异无统计学意义；不同年龄人群发病差异有统计学意义(P＜0.01),随着年龄的增加,发病率逐渐下降. 结论 喀什地区为黑热病流行较为严重的地区,低年龄组人群仍是防治的重点人群.
作者：王立英；伍卫平；官亚宜；付青；童苏祥；侯岩岩；伊斯拉音·乌斯曼；凯赛尔；曾祥嫚 刊期： 2013年第06期
目的 了解下呼吸道感染(LRTI)病原菌的分布特点及耐药性的变化情况,为合理选择抗菌药物从而控制治疗感染提供依据. 方法 采用回顾性监测的方法,对本院2011年呼吸科临床送检标本中分离的菌株及药敏结果进行分析. 结果 共分离出174株病原菌,革兰阴性菌(80株)多,占45.98％,主要为铜绿假单胞菌(12.07％)、肺炎克雷伯菌(10.92％);真菌48株,占27.59％,主要为白假丝酵母菌(16.67％)；革兰阳性菌46株,占26.44％,主要为金黄葡萄球菌(7.47％).药敏结果显示,主要革兰阴性菌中,铜绿假单胞菌对美洛培南和阿米卡星的耐药率相对较低,均为14.29％;肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌对美洛培南、亚胺培南耐药率为0；复方新诺明对嗜麦芽窄食单胞菌耐药率为0.主要真菌对两性霉素B和伏立康唑耐药性较低.主要革兰阳性菌对万古霉素耐药性低. 结论 下呼吸道感染病原菌真菌比例增大,各病原菌耐药性有一定程度的增加,在临床中应根据药敏结果合理应用抗菌药物.
作者：王峰；陈延军 刊期： 2013年第06期
目的 探讨乙型肝炎拉米夫定治疗耐药的发生与乙型肝炎病毒(HBV)基因型及P基因区变异的关系. 方法 选取37例乙型肝炎患者,利用MassARRAY Assay和PCR技术检测HBV基因型及P基因区变异. 结果 37例患者中感染HBV B基因型19例(51.35％),C基因型15例(40.54％),B、C混合基因型2例(5.41％),无D基因型,其他基因型1例(2.70％).37例患者中有34例患者对拉米夫定耐药,耐药患者HBV P基因区突变均为B和C基因型,B、C混合型和其他基因型无耐药.耐药患者HBV P基因区突变中,YIDD型21例(61.76％),YVDD型13例(38.24％),YIDD变异率与YVDD变异率比较差异有统计学意义(P＜0.05).基因型B中,7例(36.84％)发生YIDD变异,12例(63.16％)发生YVDD变异；基因型C中,14例(93.33％)发生YIDD变异,1例(6.67％)发生YVDD变异.基因型C与基因型B比较,YIDD和YVDD变异率差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 乙型肝炎拉米夫定治疗耐药时,HBV基因型C多发生YIDD基因变异,基因型B多发生YVDD基因变异.因此检测HBV基因型对拉米夫定耐药患者的临床诊治有指导意义.
作者：卢成；成志华；刘金禄；李采青；王浩 刊期： 2013年第06期
目的 了解南宁市城区人群人芽囊原虫感染情况及流行规律,为采取相应的防治措施提供科学依据. 方法 对2009～2011年到医院体检或就诊的4 263例南宁市城区人群进行粪便检查,对人芽囊原虫感染情况进行分析. 结果 检出入芽囊原虫感染者320例,感染率为7.51％,其中粘液脓血便者的感染率为27.33％(176/644),显著高于其他受检者(X2 =513.2％,P＜0.05)；单纯人芽囊原虫感染者289例(90.31％),合并华支睾吸虫感染者26例(8.13％)；男性感染率为7.72％,女性为7.25％,差异无统计学意义(x2=0.328,P＞0.05)；腹泻人群感染率为11.78％,显著高于健康人群感染率(3.56％)(x2=103.6,P＜0.05),但健康人群间感染率差异无统计学意义(X2=4.561,P＞0.05)；全年以秋季感染率高(11.26％),其次是夏季(9.72％);2009～2011年各年度感染率分别为3.86％、7.02％和10.77％,差异有统计学意义(x2=72.533,P＜0.05),感染率呈逐年上升趋势.感染者多有不良卫生、饮食习惯；有症状者229例(71.56％). 结论 南宁市城区人群人芽囊原虫感染普遍存在,应全面推进和落实健康教育工作,切断传播途径,以降低人群感染率.
作者：胡缨；黎学铭；张鸿满；石焕焕 刊期： 2013年第06期
目的 建立快速检测恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)的环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),以期用于基层医院及疫区恙虫病快速筛查. 方法 以恙虫病东方体56 ku外膜蛋白基因为检测靶序列,设计2组恒温扩增引物,筛选佳引物,优化反应条件,对多种培养物中的Ot标准株及地方株进行验证检测,以经典PCR检测为对照,评估LAMP检测方法的敏感性和特异性. 结果 建立的LAMP法可快速检测鸡胚培养物、动物脏器及病人血样中的Ot DNA,经63℃恒温扩增1h之后,即可肉眼或用浊度仪观察结果,其他5种立克次体DNA模板对照,均无特异性扩增.LAMP法测定Ot DNA的低限为5.3×101拷贝/反应,普通PCR法为5.3×104拷贝/反应,LAMP法比普通PCR提高约3个数量级. 结论 建立的LAMP法能快速检测多种样品中的Ot 56 ku基因,方法的灵敏度和特异性高,实现了检测的可视化,适用于基层医院及疫区恙虫病筛查.
作者：耿美玲；操敏；张锦海；吕恒；胡丹；郑峰；朱进；潘秀珍；王长军 刊期： 2013年第06期
中国病原生物学杂志
主管:中国寄生虫病防治杂志
主办：中华人民共和国卫生部
