李胜军;吕昌龙;李成;曹妍;闫建中
目的:构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体γ1(hPPARγ1)的真核表达载体,为hPPARγ1受体功能和基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选提供分子研究平台.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPARγ1全长基因,与经XhoⅠ、SmaⅠ相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARγ1-IRES2-EGFP,经酶切及测序鉴定重组质粒中hPPARγ1基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARγ1的表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测.结果:经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARγ1的高效表达.结论:成功构建phPPARγ1-IRES2-EGFP重组质粒,为基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选平台的建立及受体功能研究提供了高效表达载体.
作者:章涛;李苌清;杨俊卿;万敬员;蒋建新;周岐新 刊期: 2007年第02期
探讨脑干听觉诱发电位(BAEP)检测在评价中枢神经系统感染患儿听神经及脑干功能中的应用价值.
作者:陈芊;潘晓丽;马秀娟 刊期: 2007年第02期
目的:探讨失血性休克对下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的影响.方法:大鼠分别于失血后0、15、30、60、120 min断头;RIA法测血中激素水平;应用[35S]标识的RNA探针进行原位杂交实验,分析失血后PVN内CRH和AVP基因转录的动力学变化.结果:血中促肾上腺皮质激素(ACTH)及AVP于失血后15 min达高峰(P<0.01),失血后60 min时基本恢复到基础水平;PVN内CRH hnRNA在失血前几乎无表达,于失血后15 min表达量已显著升高(P<0.01),30 min达峰值(P<0.01),120 min内基本恢复,失血前CRH mRNA在PVN就有大量表达,于失血后15min及120 min两次有意义升高(P<0.01);失血前AVPhnRNA在PVN的小细胞领域基本没有表达,于失血后15 min开始有意义增加(P<0.01),30min达峰值(P<0.01)后一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很少,失血后60min时其表达量有意义增加(P<0.01),并持续到失血后120 min;失血前AVPhnRNA在PVN的大细胞领域就有大量表达,于失血后15 min开始显著升高(P<0.01),并一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很多,失血后其表达量没有明显变化.结论:在失血性休克时共存于小细胞领域的CRH和AVP的基因转录的动态变化不同,分别存在于大小细胞两领域的AVP的基因转录的动态变化不同.
作者:姜雅秋;姜蕾;孙茵;单忠艳;滕卫平 刊期: 2007年第02期
目的:检测舌鳞癌组织中生存素(survivin)mRNA及其蛋白的表达,探讨舌鳞癌发生、发展过程中survivin的作用.方法:应用原位杂交及免疫组织化学方法检测10例正常舌黏膜,13例高分化舌鳞状细胞癌,20例中分化舌鳞状细胞癌,12例低分化舌鳞状细胞癌标本中survivin mRNA及其蛋白的表达情况.结果:舌鳞癌标本中survivin mRNA及蛋白阳性表达率显著高于正常舌黏膜标本(P<0.01),高、低分化的舌鳞癌标本之间survivin mRNA及蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05).结论:survivin mRNA及其蛋白在舌鳞癌不同阶段中明显增加,与舌鳞癌的发生、发展密切相关.
作者:王智明;刘芳;张力平 刊期: 2007年第02期
目的:分析东北汉族人群中7p14-15区域内9个短串联重复序列(STR)位点的遗传多态性.方法:采用荧光标记PCR扩增技术和毛细管电泳方法,对7p14-15区域内9个STR多态位点在100名随机选取的无血缘关系的东北汉族人群中的遗传多态性进行分析.结果:在东北汉族人群中,7p14-15区域的D7S526、D7S690、D7S2252、D7S817、D7S683、D7S656、D7S484、D7S2250、D7S2251位点分别检测出6、6、8、6、4、6、7、8和7个等位基因,17、19、29、17、10、17、24、27和22种基因型,杂合度分别为84%、85%、79%、82%、79%、85%、89%、88%和83%.结论:7p14-15区域的9个STR位点的基因频率和基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡,并在东北汉族人群中呈现较好的遗传多态性.
作者:娄毅;邱广蓉;辛娜;刘红波;孙桂凤;孙开来 刊期: 2007年第02期
目的:探讨livin蛋白在良性及恶性子宫内膜组织中的表达情况.方法:选取子宫内膜腺癌组织44例,子宫内膜不典型增生组织11例,子宫内膜单纯性增生组织9例、增生期内膜10例、分泌期内膜8例,利用免疫组化S-P法染色及显微图像分析系统检测其中livin蛋白的表达.结果:livin在子宫内膜癌中的表达强度明显高于子宫内膜不典型增生及良性子宫内膜(P<0.05),livin的表达在子宫内膜癌不同组织学分级中有显著性差异(P<0.05),在不同分期中无明显差异,且与淋巴转移情况无关.结论:livin可能与肿瘤的的分化有关,可作为反映子宫内膜癌生物学行为的指标,有望成为子宫内膜癌的肿瘤标记物.
作者:王光伟;杨清;刘晓菲;王玉 刊期: 2007年第02期
通过对比108名患者冠脉造影结果与应用超声心动图所测得反映心脏收缩、舒张功能及整体功能等超声指标,分析不同冠脉病变支数冠心病患者心脏左室功能的变化.结果正常组与病变组间左室射血分数(LVEF)与短轴缩短分数(FS)无明显差异,但3支冠脉病变组与正常组间有非常显著差异.等容舒张时间(IRT)与E/A比值及Tei指数两组间均有显著差异,且呈现随病变支数的增加而加重的趋势.
作者:王赫;齐国先 刊期: 2007年第02期
对结缔组织病患者抗心磷脂抗体(ACA)进行检测,证实ACA在结缔组织病中升高,对临床诊断有指导意义.
作者:李强;孔艳萍;刘显红 刊期: 2007年第02期
目的:了解辽宁省城乡不同年龄组人群口腔健康现状,探讨口腔疾病患病特点和规律.方法:采用多阶段分层等容量随机抽样的方法,按照WHO《口腔健康调查基本方法》(第四版)的要求,对全省5、12、35~44岁、65~74岁4个年龄组的人群进行抽样调查.结果:5岁组乳牙患龋率为73.86%,龋均为4.38,农村明显高于城市.12岁组:患龋率为30.05%,龋均为0.51.35~44岁组:患龋率为63.13%,龋均为1.93.65~74岁组:患龋率为65.28%,龋均为2.34.城市的中老年人患龋率和龋均远高于农村.牙周健康者仅占12岁组的29.79%,35~44岁组3.03%,65~74岁组2.65%.6.69%的老年人为无牙颌.结论:辽宁省儿童和成人的患龋率与十年前相比,有了明显下降,但患龋情况仍很严重,口腔卫生状况较差.加强口腔健康教育,提高全人群的口腔保健意识,推广适宜的牙防技术十分必要.
作者:路振富;张颖;程睿波;刘懿卿;李卫平 刊期: 2007年第02期
探讨心脏内栓子的性质、部位以及与脑栓塞的关系.
作者:窦文波;曲方;陈达;宋福林 刊期: 2007年第02期
目的:观察磷酸二酯酶(PDE)抑制剂对白细胞介素1β(IL-1β)诱导损伤的离体雄性Wistar大鼠胰岛细胞的防护作用及其机制.方法:采用离体培养的雄性Wistar大鼠胰岛细胞,分别检测IL-1β(30 U/ml)及IL-1β与不同剂量特异性Ⅳ型PDE抑制剂咯利普兰(ROL)对胰岛细胞亚硝酸盐合成、胰岛素(Ins)分泌、环磷酸腺苷(cAMP)水平及细胞活性(MTT)的影响.结果:以IL-1β诱导,离体雄性Wistar大鼠胰岛细胞亚硝酸盐合成显著增加,cAMP水平、Ins分泌及MTT值显著降低(P<0.01),而ROL能阻断这些作用(P<0.01),且具有显著剂量依赖性(r2=0.56,P<0.01).结论:ROL能够保护IL-1β诱导的鼠离体胰岛细胞损伤.
作者:张秀彬;王秋月;旷劲松 刊期: 2007年第02期
目的:研制复方苯甲酸凝胶,建立高效液相色谱(HPLC)测定制剂中苯甲酸和水杨酸含量的方法.方法:以卡波姆-940为基质,用常规方法制备.以Ultrasphere-ODS柱(5μm,4.6mm×250mm)为固定相;以甲醇-水(40∶60v/v)为流动相;检测波长227 nm.结果:制剂稳定性好,平均回收率分别为苯甲酸100.31%,相对标准偏差(RSD)1.10%;水杨酸99.75%,RSD1.53%.苯甲酸和水杨酸的线性范围分别为:16~75 mg·L-1(r=0.999 2),7.5~40 mg·L-1(r=0.999 0).结论:本制剂工艺简单、质量稳定,含量测定方法准确、快捷、适用.
作者:邢俊家;周晖 刊期: 2007年第02期
目的:研究高糖和脂多糖(LPS)对腹膜间皮细胞(PMC)己糖激酶(HK)活性的调节作用.方法:行PMC的原代培养及鉴定.首先将不同浓度的葡萄糖(0.10,1.50,2.50,4.25%)分别和不同剂量的LPS(0,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0 mg/L)加入培养基;其次用含4.25%葡萄糖和10.0 mg/L LPS的培养基孵育细胞不同时间(0,1,3,6,12,24 h);6磷酸葡萄糖脱氢酶耦联比色法测定HK活性.后用含10.0 mg/L LPS的培养基孵育细胞不同时间(0,1,3,6,12,24 h);测定HK活性和细胞葡萄糖的摄入量,分析HK活性与葡萄糖摄入量的相关性.结果:高糖和LPS对HK的活性具有交互作用(F=423.55,P<0.01).高糖和LPS以剂量(P<0.01)和时间依赖的方式诱导HK活性(P<0.01);LPS以时间依赖的方式促进PMC葡萄糖净利用(P<0.01).结论:高糖和LPS对PMC己糖激酶活性的调节作用在腹膜透析失超滤的过程中发挥了重要的作用.
作者:李志明;马健飞;赵钢 刊期: 2007年第02期
目的:探讨运动对大鼠骨骼肌p38磷酸化、蛋白和基因表达的影响.方法:SD大鼠随机分为对照组和运动组.运动组分为1 h/d、1.5 h/d组,共7周,运动结束后24 h和48 h取材.测定葡萄糖和胰岛素浓度.采用Western blot法检测p38和phos-p38的表达,用RT-PCR法分析p38mRNA的表达.结果:与对照组比较,1 h/d运动24 h取材和1.5 h/d运动24 h与48 h取材p38磷酸化水平明显升高;1.5h/d运动24 h取材蛋白含量下降;p38mRNA升高发生于1 h/d和1.5 h/d运动24 h取材组.结论:运动改善p38磷酸化、蛋白和基因表达.
作者:曹师承;孙黎光;叶丽平;张莹;王玉 刊期: 2007年第02期
目的:分析以无机骨(Bio-oss)作为载体,血管内皮生长因子(VEGF)在骨引导再生(GBR)过程中的作用.方法:新西兰大白兔60只随机分成4组,在左右两侧股骨大转子区制备骨缺损,左侧用Bio-oss充填骨缺损,右侧不予充填;术后1、2、4、8周分别处死各组动物,取种植体周围骨作为样本离心,采用ELISA双抗体夹心法测不同时期生成骨中VEGF浓度.结果:骨引导再生生成骨中VEGF浓度值高于非骨引导再生生成骨,且术后第1周浓度值大.结论:VEGF是血管生成与骨再生协同作用的物质基础,对骨引导再生具有促进作用.
作者:张忠提;杨晓东;艾红军 刊期: 2007年第02期
目的:采用窒息致心跳骤停大鼠心肺复苏模型,通过观察应用大剂量肾上腺素和标准剂量肾上腺素复苏后脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化,评价大剂量肾上腺素对复苏后脑组织氧自由基的影响.方法:75只大鼠,随机分为3组,假手术组(C组)、大剂量肾上腺素组(H组)和标准剂量肾上腺素组(S组),每组25只.采用窒息致心跳骤停,心跳骤停10 min后,经主动脉注入复苏合剂.C组在动脉置管15 min后,H组、S组在自主循环恢复(ROSC)后30、60、120 min时点采集脑组织标本.检测脑组织SOD活性、MDA含量并进行统计分析.结果:ROSC后各个时点,S组、H组SOD活性均明显低于C组(P<0.05),且随时间延长进行性减低.两组MDA含量则随时间进行性增加,均高于C组(P<0.01).在ROSC后60及120min时点H组SOD活性低于S组(P<0.05),而MDA含量高于S组(P<0.05).结论:应用大剂量肾上腺素复苏后脑组织超氧化物歧化酶活性较低,丙二醛含量较高,氧自由基损伤更加严重,不利于神经功能恢复.
作者:于铁英;董有静;孟凌新;崔健君 刊期: 2007年第02期
目的:探讨关节镜下经后中隔入路后交叉韧带重建术后康复治疗的临床效果和重要性.方法:对31例应用关节镜下经膝关节后中隔入路重建后交叉韧带的患者术后进行系统康复治疗,随访分析术前术后关节活动度、关节稳定性和Lysholm评分.结果:术后随访6~22个月,术前和术后6个月膝关节伸展受限角度分别是6.23°±3.25°和2.15°±2.18°(P<0.01);膝关节屈曲受限角度分别是34.16°±10.95°和15.03°±12.64°(P<0.01).关节稳定性检查,术后6月患膝后抽屉和后Lanchman试验检查均阴性;患者手术前后Lysholm膝关节评分分别为(43.65±12.21)分和(89.27±8.96)分(P<0.01).结论:关节镜下经后中隔入路后交叉韧带重建术后康复治疗是保证手术成功的重要环节,它与手术有机结合,效果良好,可促进膝关节功能的恢复.
作者:周凤华;白伦浩;张志强;张永强 刊期: 2007年第02期
目的:在胃癌BGC-823细胞中,经bFGF诱导后观察COX-2和NF-κB蛋白表达,探讨bFGF通过Akt途径抑制凋亡促进细胞增殖的信号转导机制.方法:胃癌BGC-823细胞传代培养.MTT方法检测bFGF对胃癌BGC-823细胞的促增殖的作用.Western blotting检测Akt酶的活性和不同处理BGC-823中COX-2和NF-κB的表达.结果:25 ng/ml bFGF能够激活BGC-823细胞中Akt磷酸化,p-Akt在10 min表达多,进而促进COX-2和NF-κB蛋白的表达,这种表达具有时间依赖性,能够促进BGC-823细胞的增殖.Akt抑制剂wortmannin可抑制bFGF的这些作用.结论:bFGF经Akt细胞信号转导通路能够诱导BGC-823细胞中COX-2和NF-κB的表达.Akt信号转导通路、COX-2和NF-κB与BGC-823细胞的增殖密切相关.
作者:聂海祺;孙黎光;叶丽平 刊期: 2007年第02期
探讨XE-2100全自动五分类血细胞分析仪白细胞分类散射图对Sézary综合征患者治疗疗效观察和预后评价的参考价值.
作者:石晶;郑军;赵敏 刊期: 2007年第02期
目的:探讨多西紫杉醇对MCF-7人乳腺癌细胞延迟外向钾电流(Ik)的作用.方法:采用全细胞膜片钳记录方式,设保持电位-90 mV,刺激电位为-60~+60 mV,步阶脉冲10 mV,波宽200 ms,刺激间隔3 s,刺激频率为2 Hz.结果:随着多西紫杉醇的浓度增加,MCF-7细胞Ik电流电压曲线斜率减少,多西紫杉醇对Ik通道具有关闭作用;在同一指令电压下,Ik随着多西紫杉醇浓度的增加而减少,具有剂量依赖性,当指令电压为+60 mv时,多西紫杉醇浓度从1×10-7 mol·L-1增加到1×10-5 mol·L-1时,Ik从(124.03±8.43)pa/pF,减少到(75.16±9.10)pA/pF,每个浓度的Ik与给药前相比,差异显著(P<0.01).结论:多西紫杉醇对MCF-7人乳腺癌细胞的延迟整流K+通道具有关闭作用,能够抑制乳腺癌细胞的增殖.
作者:孙涛;姜大庆;宋志国;李金鸣 刊期: 2007年第02期