王光伟;杨清;刘晓菲;王玉
以浆法,采用高效液相色谱检测,建立奥替溴铵片体外溶出度的测定方法,对溶出结果进行t检验,并采用相似因子法评价试验药品和进口对照品溶出度的相似程度.3批试验药品的溶出度无显著性姜异(P>0.05),与国外制剂相似.本方法测定简便,结果准确可靠.
作者:赵铁;李忠;菅凌燕;何仲贵 刊期: 2007年第02期
目的:观察兔放射性肺纤维化形成过程中一氧化氮(NO)含量变化及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达.方法:实验兔20只,采用6 mV X线对左全肺进行照射,25 Gy,1次.分别于照射前、照射后1,3,6个月各处死5只动物,处死前进行左肺肺泡灌洗.采用铜-镉还原法检测灌洗液中的NO含量,免疫组化法检测肺组织中iNOS的表达.结果:NO含量在照射后1个月明显升高,照射后3~6个月显著降低;在照射前及照射后3~6个月,肺间质细胞内几乎未见iNOS阳性表达;在照射后1个月,肺间质中iNOS表达阳性细胞明显增多.结论:NO可能是放射性肺纤维化形成过程中的一个独立影响因素,其含量的变化可能与iNOS蛋白活性改变有关.
作者:党军;周朝晖;缪宏宇 刊期: 2007年第02期
目的:研究斑螯素(CTD)对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用和机制.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测CTD对Hela细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析Hela细胞周期及CTD对细胞周期的影响.结果:CTD对Hela细胞24、48和72h的IC50值分别为3.2、2.5和1.4 μg/ml.CTD浓度为3.2 μg/ml时,细胞周期滞留在G2期.结论:CTD对Hela细胞的增殖有抑制作用;流式细胞仪显示细胞周期出现明显的G2/M期阻滞.
作者:王晓华;马萍;尹元琴;张卫东;姜又红 刊期: 2007年第02期
目的:探讨失血性休克对下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的影响.方法:大鼠分别于失血后0、15、30、60、120 min断头;RIA法测血中激素水平;应用[35S]标识的RNA探针进行原位杂交实验,分析失血后PVN内CRH和AVP基因转录的动力学变化.结果:血中促肾上腺皮质激素(ACTH)及AVP于失血后15 min达高峰(P<0.01),失血后60 min时基本恢复到基础水平;PVN内CRH hnRNA在失血前几乎无表达,于失血后15 min表达量已显著升高(P<0.01),30 min达峰值(P<0.01),120 min内基本恢复,失血前CRH mRNA在PVN就有大量表达,于失血后15min及120 min两次有意义升高(P<0.01);失血前AVPhnRNA在PVN的小细胞领域基本没有表达,于失血后15 min开始有意义增加(P<0.01),30min达峰值(P<0.01)后一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很少,失血后60min时其表达量有意义增加(P<0.01),并持续到失血后120 min;失血前AVPhnRNA在PVN的大细胞领域就有大量表达,于失血后15 min开始显著升高(P<0.01),并一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很多,失血后其表达量没有明显变化.结论:在失血性休克时共存于小细胞领域的CRH和AVP的基因转录的动态变化不同,分别存在于大小细胞两领域的AVP的基因转录的动态变化不同.
作者:姜雅秋;姜蕾;孙茵;单忠艳;滕卫平 刊期: 2007年第02期
目的:研究经颈内动脉注射pLXSN-bcl-2对大鼠脑缺血再灌注损伤后的影响.方法:51只健康成年Wistar大鼠随机分对照组、空质粒组、bcl-2组,每组分缺血再灌注9,24 h两小组.采用线栓法制作大脑中动脉梗死模型,2 h后实现再灌注.3 h后经颈内动脉注射质粒pLXSN,pLXSN-bcl-2.检测缺血再灌注24 h后大鼠脑梗死体积,及各组大鼠脑内bcl-2、caspase-3的表达情况和神经细胞凋亡情况.结果:bcl-2组缺血再灌注24 h的脑梗死体积小;bcl-2组在缺血再灌注9,24 h后bcl-2阳性表达明显升高;缺血再灌注24 h caspase-3蛋白表达及凋亡细胞数明显降低,缺血再灌注9 h后与其他组之间无差异.结论:脑缺血再灌注3 h后经颈内动脉注射pLXSN-bcl-2可以增加bcl-2在脑内的表达,并在缺血再灌注24 h后通过抑制caspase-3的表达,抑制神经细胞凋亡,减少脑梗死体积.而在缺血再灌注9 h尚未表现出明显的神经保护作用.
作者:吴晓黎;何志义;赵彬;刘晓梅 刊期: 2007年第02期
通过对比108名患者冠脉造影结果与应用超声心动图所测得反映心脏收缩、舒张功能及整体功能等超声指标,分析不同冠脉病变支数冠心病患者心脏左室功能的变化.结果正常组与病变组间左室射血分数(LVEF)与短轴缩短分数(FS)无明显差异,但3支冠脉病变组与正常组间有非常显著差异.等容舒张时间(IRT)与E/A比值及Tei指数两组间均有显著差异,且呈现随病变支数的增加而加重的趋势.
作者:王赫;齐国先 刊期: 2007年第02期
目的:通过研究基质金属蛋白酶7(MMP-7)与其组织抑制因子2(TIMP-2)在子宫内膜癌中的表达,探讨MMP-7、TIMP-2与子宫内膜癌临床病理特征之间的关系.方法:应用免疫组化方法(S-P法)对40例子宫内膜癌、12例子宫内膜不典型增生、12例正常子宫内膜中的MMP-7、TIMP-2进行检测,并进行比较研究.结果:MMP-7在子宫内膜癌、子宫内膜非典型增生中的阳性表达率高于对照组(P<0.05);TIMP-2在子宫内膜癌中的阳性表达率高于对照组(P<0.05).随着子宫内膜癌病理分级增高及肌层浸润深度增加,MMP-7/TIMP-2比值亦增加,相互之间差异显著(P<0.05).结论:MMP-7与TIMP-2的表达与子宫内膜癌的发生、发展密切相关,MMP-7/TIMP-2比值随着子宫内膜癌病理分级的升高、肌层浸润深度的增加而增高.
作者:阎进;生秀杰 刊期: 2007年第02期
目的:观察丹参对pαMHC-EGFP小鼠转基因胚胎干细胞向心肌细胞分化的诱导作用.方法:采用悬浮法,从拟胚体形成的第4、5、6、7 d起在培养液中加入不同浓度的丹参诱导pαMHC-EGFP小鼠转基因胚胎干细胞向心肌细胞分化,计数第8、9、10、11、12 d心肌细胞的分化率.用RT-PCR方法检测分化的心肌细胞αMHC、Anf、MLC2v基因的表达.结果:10、30、50、70 mg/ml丹参在拟胚体形成的第10、11、12 d均可明显提高心肌细胞的分化率(P<0.01).RT-PCR结果αMHC、Anf、MLC2v基因在分化的心肌细胞中表达.结论:丹参可以体外提高pαMHC-EGFP小鼠转基因胚胎干细胞向心肌细胞的分化率.
作者:于艳秋;李昆;卢晓梅;金玉楠;云伟;杜莉莉 刊期: 2007年第02期
目的:研究高糖和脂多糖(LPS)对腹膜间皮细胞(PMC)己糖激酶(HK)活性的调节作用.方法:行PMC的原代培养及鉴定.首先将不同浓度的葡萄糖(0.10,1.50,2.50,4.25%)分别和不同剂量的LPS(0,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0 mg/L)加入培养基;其次用含4.25%葡萄糖和10.0 mg/L LPS的培养基孵育细胞不同时间(0,1,3,6,12,24 h);6磷酸葡萄糖脱氢酶耦联比色法测定HK活性.后用含10.0 mg/L LPS的培养基孵育细胞不同时间(0,1,3,6,12,24 h);测定HK活性和细胞葡萄糖的摄入量,分析HK活性与葡萄糖摄入量的相关性.结果:高糖和LPS对HK的活性具有交互作用(F=423.55,P<0.01).高糖和LPS以剂量(P<0.01)和时间依赖的方式诱导HK活性(P<0.01);LPS以时间依赖的方式促进PMC葡萄糖净利用(P<0.01).结论:高糖和LPS对PMC己糖激酶活性的调节作用在腹膜透析失超滤的过程中发挥了重要的作用.
作者:李志明;马健飞;赵钢 刊期: 2007年第02期
目的:观察p27kip1基因在静脉移植模型中的动态表达及与内膜增生的关系.方法:建立大鼠自体静脉移植动物模型,分别于术后1,2,3,7,14,28 d取材.Verhoeff染色观察各时间点内膜厚度及管壁厚度;RT-PCR、原位杂交、Western blot检测p27kip1mRNA及蛋白的变化,免疫组化(SABC)法检测p27kip1、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:术后7 d内膜明显增厚,14 d内膜增厚达到高峰(P<0.01).p27kip1蛋白在正常对照血管可见表达,术后3 d内无表达,术后7 d开始表达,14 d明显增高,28 d达到高峰(P<0.01).mRNA的表达于术后7 d出现增高,持续表达至28 d,其间各时间点之间表达无明显差异.PCNA的表达于术后7~14 d达到高峰.结论:p27kip1基因的表达可能是抑制移植静脉内膜增生的环节之一,其可能成为治疗移植血管狭窄、闭塞的目的基因.
作者:郎晓讴;刘明辉;杨德华;冀慎泉;段志泉 刊期: 2007年第02期
目的:构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体γ1(hPPARγ1)的真核表达载体,为hPPARγ1受体功能和基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选提供分子研究平台.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPARγ1全长基因,与经XhoⅠ、SmaⅠ相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARγ1-IRES2-EGFP,经酶切及测序鉴定重组质粒中hPPARγ1基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARγ1的表达进行荧光定量PCR及免疫细胞化学检测.结果:经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPARγ1的高效表达.结论:成功构建phPPARγ1-IRES2-EGFP重组质粒,为基于hPPARγ1受体靶点的药物筛选平台的建立及受体功能研究提供了高效表达载体.
作者:章涛;李苌清;杨俊卿;万敬员;蒋建新;周岐新 刊期: 2007年第02期
目的:探讨塞来昔布与吲哚美辛比较对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾脏的保护作用及可能机制.方法:将塞来昔布和吲哚美辛应用于UUO大鼠,4周后测定血清肌酐及尿素氮水平,放射免疫法测定大鼠尿液血栓烷素B2(TXB2)浓度,免疫组化法检测肾脏核因子κB(NF-κB)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达.结果:塞来昔布及吲哚美辛均降低尿TXB2浓度,塞来昔布组更为显著;与对照组相比,其余3组NF-κB及TGF-β1的蛋白表达水平均显著上升,肾间质纤维化严重;塞来昔布治疗后,上述蛋白表达水平显著下调,肾间质纤维化程度明显减轻.结论:塞来昔布能减轻UUO大鼠肾间质纤维化,下调NF-κB的表达,减少肾间质单核巨噬细胞浸润可能是其机制之一.
作者:何平;杨旭;李德天 刊期: 2007年第02期
目的:研究肾癌组织中p27kip1和cyclin D1蛋白的表达,探讨其与肾癌生物学特征的内在联系.方法:应用免疫组化S-P法,对53例肾癌及6例正常肾组织中p27kip1和cyclin D1蛋白进行检测.结果:在正常肾组织中p27kip1均呈阳性表达,p27kip1阳性表达率在肾癌不同临床分期,不同病理分级中差异显著(G1~G2:70.00%,G3~G4:27.27%,P<0.05;T1~T2:70.83%,T3~T4:20.69%,P<0.05).cyclinD1在正常肾组织呈阴性表达,cyclin D1阳性表达率在肾癌不同临床分期,不同病理分级中差异显著(G1~G2:51.35%,G3~G,4:27.27%,P<0.05;T1~T2:58.33%,T3~T4:20.69%,P<0.05).结论:p27kip1和cyclin D1蛋白在肾癌中的表达与肿瘤生物学行为密切相关,p27kip1和cyclin D1在肾癌的发生、发展中起重要作用.
作者:刘学锋;吴斌 刊期: 2007年第02期
回顾性分析接受腹腔镜手术(n=78)和剖腹手术(n=78)治疗的临床Ⅱb期前子宫恶性肿瘤临床资料,比较两组术中和术后恢复等情况.腹腔镜组术中出血量、术后病率、肛门排气时间和术后住院时间明显少于剖腹组(P<0.01).腹腔镜下广泛性子宫切除和盆腔淋巴结清扫术,可作为早期子宫恶性肿瘤手术治疗的方法之一,具有手术损伤小、恢复快的优点.
作者:陈颖;史玉林 刊期: 2007年第02期
目的:评价补碘并实施全民食盐加碘后农村原不同程度碘缺乏(ID)病区学龄儿童智商、精神运动状况及亚临床损伤的流行程度,观察全民食盐加碘对病区儿童智商(IQ)、精神运动的改善效果.方法:用中国联合型瑞文测检图册(CRT-RC2)和农村儿童智商常模(CRT-C2)测验判定儿童智商,用天津医学院精神运动成套测验(JPB)、测听仪、X线片、标准度衡器具判定学龄儿童精神运动、听力障碍和骨龄、体格发育落后.结果:将男女儿童合计,重、中、轻病区儿童IQ分别为103.16±16.64、99.70±16.19、107.82±11.83,重、中病区儿童IQ均值显著低于轻病区.病区原缺碘程度越重,儿童IQ越低;儿童年龄越小,IQ越高,且每降低1岁,IQ平均升高2.07分.重、中病区精神运动的JPB测验总T分为316.17±42.26、330.46±47.66,显著低于轻病区(341.75±48.11).原病区缺碘程度越重,儿童JPB测验总T分越低;儿童年龄越小,JPB测验总T分越高,且每降低1岁,总T分平均升高4.88分.重、中、轻病区出生儿童亚临床损伤率分别为29.96%、32.88%、20.31%,中病区显著高于轻病区(P<0.05).结论:沈阳市重、中病区出生儿童人群智商和精神运动水平比轻病区低,重、中病区更须加强补碘.全民食盐加碘对恢复碘缺乏地区儿童智力和精神运动状况起一定的作用.
作者:唐智峰;刘万洋;董静;陈杰 刊期: 2007年第02期
目的:在胃癌BGC-823细胞中,经bFGF诱导后观察COX-2和NF-κB蛋白表达,探讨bFGF通过Akt途径抑制凋亡促进细胞增殖的信号转导机制.方法:胃癌BGC-823细胞传代培养.MTT方法检测bFGF对胃癌BGC-823细胞的促增殖的作用.Western blotting检测Akt酶的活性和不同处理BGC-823中COX-2和NF-κB的表达.结果:25 ng/ml bFGF能够激活BGC-823细胞中Akt磷酸化,p-Akt在10 min表达多,进而促进COX-2和NF-κB蛋白的表达,这种表达具有时间依赖性,能够促进BGC-823细胞的增殖.Akt抑制剂wortmannin可抑制bFGF的这些作用.结论:bFGF经Akt细胞信号转导通路能够诱导BGC-823细胞中COX-2和NF-κB的表达.Akt信号转导通路、COX-2和NF-κB与BGC-823细胞的增殖密切相关.
作者:聂海祺;孙黎光;叶丽平 刊期: 2007年第02期
目的:检测肾癌原发灶和转移灶中KISS-1基因的表达并在体外实验中验证其缺失对细胞侵袭能力的影响.方法:选择30例肾癌患者,应用荧光定量PCR检测肾癌原发灶和转移灶中KISS-1基因mRNA的表达,应用RNA干扰技术获得KISS-1基因表达缺失的肾癌细胞株,检测干扰前后细胞的侵袭能力变化.结果:转移灶中的KISS-1 mRNA表达较原发灶中明显下调,KISS-1表达与肿瘤远处转移呈显著相关.干涉前后都有细胞穿透滤膜,干涉后细胞数明显高于干涉前,细胞数分别为31±6和78±8,两组有显著差异(P<0.05).KISS-1基因表达缺失的肾癌细胞侵袭能力明显增强.结论:KISS-1基因在肾癌中具有转移抑制作用,可能在肾癌转移治疗中发挥作用.
作者:张辉;赵丹懿;宋永胜 刊期: 2007年第02期
目的:观察磷酸二酯酶(PDE)抑制剂对白细胞介素1β(IL-1β)诱导损伤的离体雄性Wistar大鼠胰岛细胞的防护作用及其机制.方法:采用离体培养的雄性Wistar大鼠胰岛细胞,分别检测IL-1β(30 U/ml)及IL-1β与不同剂量特异性Ⅳ型PDE抑制剂咯利普兰(ROL)对胰岛细胞亚硝酸盐合成、胰岛素(Ins)分泌、环磷酸腺苷(cAMP)水平及细胞活性(MTT)的影响.结果:以IL-1β诱导,离体雄性Wistar大鼠胰岛细胞亚硝酸盐合成显著增加,cAMP水平、Ins分泌及MTT值显著降低(P<0.01),而ROL能阻断这些作用(P<0.01),且具有显著剂量依赖性(r2=0.56,P<0.01).结论:ROL能够保护IL-1β诱导的鼠离体胰岛细胞损伤.
作者:张秀彬;王秋月;旷劲松 刊期: 2007年第02期
研究人黄素化颗粒细中表皮生长因子(EGF)受体家族成员的表达.收集体外受精-胚胎移植过程中的人黄素化颗粒细胞进行体外培养,应用RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测EGF受体家族的mRNA和蛋白表达.人黄素化颗粒细胞中EGF受体家族的4个成员HER1~HER4均有mRNA表达.但HER4的mRNA表达量较低,而且位于细胞核.
作者:潘伯臣;叶莹心;王秀霞;张淑兰 刊期: 2007年第02期
目的:观察复方甘草酸苷(美能)注射液治疗小儿过敏性紫癜的疗效.方法:选择48例小儿过敏性紫癜患者随机分为治疗组和对照组各24例,给予治疗组美能注射液1~2 mg·kg-1·d-1(大剂量2 mg/kg·d-1);疗程10~14 d.结果:与对照组相比;治疗组有效率显著增高;差异具有显著性意义(P<0.05).结论:美能注射液可有效治疗小儿过敏性紫癜.
作者:许静;郭英军;狄正鸿;崔乐;畅晓元;张悦;程岩峰;韩秀萍 刊期: 2007年第02期