王洁;钟鸣;刘敬东;李乐;张波;侯琳
目的:构建人热休克蛋白70(HSP70)的原核表达载体,诱导其表达并纯化.方法:应用PCR技术从人胆管癌组织中扩增出HSP 70基因片段,经T-A克隆连接到末端经平滑处理后的pMD18-T Simple质粒并测序.利用双酶切技术构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-HSP 70,并转化大肠杆菌JM 109,经IPTG诱导后表达得到HSP70融合蛋白.应用Glutathione-Sepharose4B亲和层析柱提纯融合蛋白,用生物素化凝血酶分离并纯化目的蛋白,后行Wsetern blot鉴定.结果:PCR扩增结果与预计目的基因大小一致;序列分析与GeneBank中收录完全一致;重组表达载体pGEX-4T-1-HSP 70构建成功;Western blot结果显示目的蛋白可以与兔抗人的HSP70单克隆抗体特异性结合.结论:HSP 70编码序列已经成功克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,并在大肠杆菌JM 109中获得表达.
作者:李航宇;傅庆国;孔凡民;隋春阳;翟振华;孙宏治;刘金钢;郭仁宣 刊期: 2005年第06期
目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血中白细胞介素18(IL-18)的变化及临床意义.方法:采用双抗体夹心(ELISA)法对SLE患者及正常对照者血中IL-18进行测定.结果:活动期SLE血中IL-18明显增高,SLE伴尿常规明显异常者IL-18增高明显,IL-18水平与尿蛋白的增加呈正相关,与SLE活动指标中抗ds-DNA呈正相关,与C3、C4变化呈负相关.结论:IL-18通过直接或间接影响某些免疫过程参与SLE的病理损伤过程.
作者:蒋莉;刘海娜;王晓非;吴春玲;张晓莉 刊期: 2005年第06期
目的:研究哮喘豚鼠气道内神经激肽1受体(NK-1R)mRNA的分布及相对含量.方法:用卵蛋白超声雾化法制作哮喘豚鼠模型;原位杂交技术检测NK-1R mRNA,光镜观察其在气道内表达的部位.图像分析测定NK-1R mRNA的相对含量.结果:哮喘组NK-1R mRNA表达程度明显高于正常组;NK-1RmRNA分布于气管上皮细胞上层细胞表面、黏膜下层、血管周围上皮细胞、炎性细胞的表面和平滑肌细胞、腺体细胞表面.结论:NK-1R参与了卵蛋白诱导的哮喘豚鼠发病机制.
作者:李淼;尚云晓 刊期: 2005年第06期
目的:探讨室外空气污染对儿童呼吸系统健康的危害,对盘锦市不同污染区儿童健康状况及室外环境进行调查.方法:按整群抽样方法,于2002年4月在轻、中、重污染区随机抽取小学和幼儿园各1所,所有儿童作为调查对象.结果:盘锦市儿童持续咳嗽、持续咳痰、哮喘、哮喘现患、喘鸣及喘鸣样症状的发生率分别为4.87%、2.22%、0.95%、0.71%、6.76%、5.82%.幼儿发生率高于学龄儿童;重、中污染区儿童的发生率高于轻污染区.沿街居住、住房与交通干线距离的接近使儿童呼吸系统症状的发生率增高.具有家族哮喘史、家族过敏史或个体过敏体质的儿童呼吸症状发生率较高.易感因素与室外空气污染的联合作用较强,呼吸系统疾病症状的发生率均以受其他因素影响的易感儿童为高.结论:室外空气污染是儿童呼吸系统健康的影响因素.
作者:王烈;董光辉;刘红梅;潘国伟;张淑娟;董千泽 刊期: 2005年第06期
对患儿进行刺激前庭、本体感和触觉的运动项目40~60次.教家长标准行为技巧.提高家长对孩子的关注质量.观察感觉统合训练及父母培训对52例感觉统合失调儿童的治疗效果.结果实验组感觉统合能力失调状况及行为问题与治疗前比较明显改善(P<0.01).干预对治疗小儿感觉统合失调及改善行为问题有效.
作者:金净;刘盈;赵昕 刊期: 2005年第06期
目的:探讨一氧化氮(NO)在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的变化及作用.方法:雄性Wistar大鼠随机分成3组:A、B组胰腺缺血30 min后,再灌注2,4,6,12,24h.B组再灌注前使用诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂,A组仅给与生理盐水.C组仅行假手术.进行大鼠血清中NO水平和淀粉酶活性检测,胰腺组织形态学观察和免疫组化分析.结果:再灌注4 h后,A组iNOS表达于胰腺组织,B组无表达.此时A组NO水平达到高峰,淀粉酶活性开始升高,均高于B组(P<0.01).再灌注6 h后,A组显微镜下观察到胰腺损伤的表现,B组未见.C组无iNOS表达,血清NO水平和淀粉酶活性均在正常范围.结论:随着再灌注时间的延长,iNOS表达于胰腺组织,NO在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的有害作用占主导地位.
作者:李柏峰;刘永锋;程颖;成东华;王晓东;李铁民 刊期: 2005年第06期
采用间断性磨除大鼠右侧上,下颌磨牙的方法,分别观察其磨牙2,4,6,8周后咀嚼方式的变化.磨牙后大鼠下颌运动轨迹更多的偏向一侧,表明可以通过间断性磨除牙齿来建立偏侧咀嚼的动物模型.
作者:李波;王建华 刊期: 2005年第06期
建立用高效液相色谱法同时测定复方环丙沙星栓中环丙沙星和替硝唑含量的方法.环丙沙星和替硝唑分别在20~120mg/L和4~24 mg/L浓度范围内线性良好.平均回收率环丙沙星为100.36%,相对标准差(RSD)为1.36%;替硝唑为98.70%,RSD为1.48%.此法可作为复方环丙沙星栓的质量控制标准.
作者:邢俊家;徐亚杰 刊期: 2005年第06期
回顾分析迷走血管压迫引起小儿肾积水12例,探讨迷走血管压迫所致输尿管肾孟连接部梗阻引起的小儿肾积水的病因、发病机制、临床特点、治疗手段等,提高临床诊治水平.
作者:蔡炜嵩;侯英;王常林 刊期: 2005年第06期
目的:检测Ti-Nb-Zr-Sn系超低模量合金的组织相容性.方法:用浸浴Ti-Nb-Zr-Sn系合金后的细胞培养液培养大鼠牙龈成纤维细胞(FB),MTT法观察细胞生长率;大鼠牙龈FB分别接种在Ti-Nb-Zr-Sn系合金和纯钛表面,荧光显微镜下观察细胞在金属表面附着情况,计数贴壁细胞数.结果:Ti-Nb-Zr-Sn系合金对大鼠牙龈FB无不良影响;Ti-Nb-Zr-Sn系合金与纯钛对FB初期黏附和增殖的影响没有差异.结论:Ti-Nb-Zr-Sn系合金具有优良的组织相容性.
作者:赵永康;姚阳;张力;李述军;郑彩云;艾红军 刊期: 2005年第06期
目的:探讨细胞外信号调解激酶(ERK)对蟾蜍灵诱导白血病细胞凋亡的影响.方法:形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:0.5μmol/L蟾蜍灵作用K562细胞24h诱导典型的细胞凋亡,预先用ERK抑制剂PD98059处理细胞1 h,明显增加蟾蜍灵诱导的细胞凋亡率(P<0.05);而用佛波酯预先处理后,明显拮抗蟾蜍灵的作用(P<0.05).结论:ERK负向调节蟾蜍灵诱导的K562细胞凋亡过程.
作者:王甦;张晓晶;刘云鹏;侯科佐;罗颖;刘世洲;王妍 刊期: 2005年第06期
对103例脊髓型颈椎病患者行后路单开门扩大成形术临床结果进行Odom's法评定分析.临床疗效优良率达80%,其中术后3 d内自觉症状不同程度改善者达90%以上.颈椎后路单开门扩大成形术能有效地解除脊髓的压迫,改善神经功能.
作者:白伦浩;李雷;王欢;付勤;王海义 刊期: 2005年第06期
目的:体外转录合成survivin siRNA,观察其在骨肉瘤细胞株U2-OS中抑制survivin的表达情况.方法:体外转录合成survivin序列特异性双链RNA(dsRNA),转染U2-OS细胞株中,用RT-PCR和Western blot法检测转染前后survivin基因的mRNA和蛋白的表达,MTF法检测细胞增殖,观察U2-OS细胞生物学特性的改变.结果:转染特异性siRNA的细胞其survivin mRNA及蛋白表达均下调,干涉后细胞的增殖受到抑制.结论:体外转录合成特异性survivin siRNA能有效抑制骨肉瘤细胞株U2-OS中survivin的表达,抑制细胞的增殖,RNA干扰技术为骨肉瘤的治疗提供了一种新策略.
作者:王佳;吕刚 刊期: 2005年第06期
目的:通过对骨质疏松腰椎椎体的影像学形态变化的观察,探讨形态变化规律.方法:选取骨质疏松患者35例,骨密度正常患者35例,分别拍摄腰椎X线片(L1~L4),测量椎体前、中、后高度及平均矢状径.计算椎体前、中高与后高的比值及变形指数.结果:与正常组相比,骨质疏松组椎体高度明显下降(P<0.05).前高/后高两组差异显著(P<0.05);中高/后高L1,L2差异不显著,L3,L4差异显著(P<0.05).结论:腰椎骨质疏松时椎体生物力学强度下降,导致椎体压缩变形,常见为楔形变.
作者:刘欣;王全平;柏树令 刊期: 2005年第06期
目的:探讨部分变性高效液相色谱(DHPLC)在检测胃癌组织、血浆中基因突变中的应用.方法:应用DHPLC对39例胃癌组织及血清中p53基因突变进行检测,并测序验证.结果:本研究中p53基因的突变率为21%(8/39);其中肠型胃癌突变率40%(6/15)明显高于弥漫型胃癌8.33%(2/24)(P<0.01);发现既往未见报道突变3例.血清标本中50%(4/8)可扩增出目的片段,但均未检出突变.结论:DHPLC是一项较好的检测胃癌组织中基因突变的筛查方法,在血清中的应用仍需探讨.
作者:鲁翀;徐惠绵;任群;王振宁;敖阳;姜莉;罗阳;张学 刊期: 2005年第06期
目的:比较肿瘤来源的热休克蛋白70(HSP 70)与白细胞介素2(IL-2)对荷瘤小鼠肿瘤切除术后的治疗作用.方法:液相色谱法纯化小鼠肿瘤细胞株中的HSP70,用SDS PAGE及Western blot对纯化产物进行定性分析,毛细管电泳鉴定其纯度.动物实验观察HSP 70与IL-2对荷瘤小鼠肿瘤切除术后的治疗作用.结果:单纯手术能延长小鼠的生存期限,HSP70 10μg组40%小鼠肿瘤终全部消退,获长期生存(>90d),平均生存(59.2±29.6)d,与对照组比较差异显著(P<0.05).手术与HSP70 10μg联合应用组80%肿瘤完全消退,平均生存(82.0±17.9)d,与对照组、单纯手术组、手术联合应用IL-2 10万u组比较差异显著(P<0.05,P<0.01,P<0.05).结论:手术能切除局部肿物,但术后易复发、转移,影响长期生存率.HSP 70具有明显全身治疗作用,适当剂量的HSP 70能提高肿物切除后的荷瘤小鼠生存率,比术后应用IL-2治疗效果明显.
作者:沈晓东;郭仁宣;傅庆国 刊期: 2005年第06期
目的:通过对吗啡的术后镇痛使用量和副作用的比较,评价右旋酮洛酚在围术期的有效性和镇痛效果.方法:选择50例ASA I~Ⅱ级人工髋关节置换术的病人,随机分为右旋酮洛酚组(D组)和安慰剂组(P组).应用脊椎-硬膜外联合麻醉,蛛网膜下腔注入0.5%重比重布比卡因和吗啡0.6 mg,硬膜外腔置管后用2%利多卡因维持,吗啡病人自控镇痛法术后镇痛.结果:D组术后疼痛程度比P组减轻(P<0.05),D组吗啡的用量比P组明显减少(P<0.01或0.05).D组术后18 h内发生恶心、呕吐明显比P组少(P<0.01),D组术后15 h内镇静效果比P组好(P<0.01).结论:人工髋关节置换术病人于术前1 d和术后2 d口服右旋酮洛酚可以明显增强吗啡的镇痛作用,减少吗啡的用量和减少相关的副作用.
作者:张恒文;王衍敏 刊期: 2005年第06期
回顾性分析接受2次及2次以上化疗栓塞的原发性肝癌245例,评价其复发转移规律及危险因素.肝内复发及门脉转移是肝癌肝动脉化疗栓塞后复发转移的主要形式;病人合并乙肝表面抗原阳性、甲胎蛋白升高、脾大、肝功差、病灶多血供等在栓塞后易发生复发转移.
作者:戴旭;韩铭钧;苏洪英;赵钟春;冯博;张曦彤;徐克 刊期: 2005年第06期
目的:探讨人参多糖在复方氟脲嘧啶多相脂质体中的保护作用.方法:通过急性毒性实验半数致死量(LD50)的检测,验证人参多糖是否降低氟脲嘧啶多相脂质体的毒性.结果:含人参多糖的复方氟脲嘧啶多相脂质体LD50为149.6375 mg/kg;不含人参多糖的复方氟脲嘧啶多相脂质体LD50为114.3642 mg/kg,差别显著(P<0.05).结论:人参多糖可降低复方氟脲嘧啶多相脂质体的毒副作用.
作者:赵明芳;刘云鹏;朱志图;侯科佐 刊期: 2005年第06期
目的:研究妊娠18 d孕鼠腹腔注射脂多糖(LPS)致胎鼠损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)作用及新生鼠脑髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的变化.方法:孕18 d大鼠随机分为盐水对照组、LPS组,观察孕鼠腹腔注射LPS(0.1,0.2,0.3,0.4 mg/kg)后胎盘病理变化,免疫组化技术检测胎盘TNF-α表达并统计胎鼠死亡率;免疫组化技术检测孕鼠注射LPS0.2 mg/kg后两组新生鼠生后1,3,7,14 d脑组织MBP表达的变化.结果:LPS组胎盘组织炎性病理改变及TNF-α表达明显增强.LPS组药物剂量越大,胎鼠死亡率越高.新生鼠生后7 d有MBP表达,14 dMBP表达增多.LPS组脑组织内MBP表达与同日龄对照组比较减弱,灰度值明显高于对照组(P<0.01).结论:TNF-α可能是致胎鼠损伤的关键细胞因子;母体注射LPS可对新生鼠髓鞘发育产生重要影晌,导致新生鼠脑损伤.
作者:王欣煜;毛健;刘素英 刊期: 2005年第06期