学术投稿

高效液相色谱法提纯和分离酵母苯丙氨酸tRNAphe ASL

叶文鹏;李柏林;刘桂华;Guenther R

关键词:修饰核苷, 核酸自动合成, 核苷组分分析
摘要:通过用特殊树脂Nucleogen-DEAE 阴离子交换柱可有效地提纯和分离酵母苯丙氨酸tRNAphe ASL不同核苷酸的聚核苷酸 .经反相高效液相色谱进行定量核苷组分分析, 确认是否掺入了修饰的核苷, 用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度检查.
中国医科大学学报杂志相关文献
  • 芦荟提取物C诱生小鼠多重集落刺激因子的作用

    目的:研究芦荟提取物C(aloe extract C, AE-C)在BALB/C鼠体内诱生多重集落刺激因子的作用.方法:经腹腔连续5 d给BALB/C鼠注射AE-C,第6 d取骨髓细胞,在半固体甲基纤维素培养基中培养观察集落形成数量和AE-C在小鼠体内的持续作用时间及AE-C注射剂量与集落形成的关系.结果:AE-C能诱生BALB/C鼠骨髓细胞形成集落,且与对照组比较有明显差异(P<0.01).集落形成高峰为停药后前6 d,第8 d呈下降趋势.而注射AE-C剂量与集落形成数量在25~100 μg/只范围内有剂量依赖关系.结论:AE-C有诱生BALB/C鼠多重集落刺激因子的作用.

    作者:谢光麟;赫甡;赫明昌 刊期: 2003年第01期

  • 地龙肽对小鼠免疫功能的影响

    目的:探讨地龙肽(LP)对小鼠特异性和非特异性免疫功能的影响.方法:LP不同剂量给正常或免疫抑制小鼠灌胃7 d,观察LP对小鼠淋巴细胞增殖反应,巨噬细胞细胞毒效应以及巨噬细胞和脾细胞产生NO的影响.结果:LP 0.1,0.5 mg/ml组明显提高淋巴细胞增殖率,增强巨噬细胞细胞毒效应,提高巨噬细胞和脾细胞分泌NO的水平(P<0.01),0.5 mg/ml明显提高免疫抑制小鼠的免疫功能(P<0.01).结论:在一定剂量下,LP具有调节免疫功能、拮抗环磷酰胺引起的免疫抑制的作用.

    作者:唐小云;梁再赋;杨丽群;贾秀坤;纪晓莉 刊期: 2003年第01期

  • 退变腰椎间盘组织中细胞凋亡及相关基因Fas和Fas-L表达的研究

    目的: 探讨细胞凋亡和凋亡相关基因Fas,Fas-L在腰椎间盘退变中的作用.方法:采用原位DNA片段末端标记和免疫组织化学方法,检测40例退变腰椎间盘组织及10例正常腰椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因Fas和Fas-L蛋白的表达. 结果:40例退变腰椎间盘组织凋亡指数(AI)均值为70.51,Fas蛋白阳性细胞百分比为60.69%,Fas-L蛋白阳性细胞百分比为56.13%;10例正常腰椎间盘组织AI均值为20.02%,Fas蛋白阳性细胞百分比为10.02%,Fas-L蛋白阳性细胞百分比为10.45%.两组间AI均值、Fas蛋白表达及Fas-L蛋白表达差异均有显著性意义(P<0.05).Fas和Fas-L表达越强,凋亡细胞数越多.结论:Fas,Fas-L蛋白均参与了腰椎间盘组织中细胞凋亡的调节,可能在腰椎间盘退行性变发生和发展中发挥重要作用.

    作者:李小川;西中海;吕刚;金明熙;谢林;金哲;张澍澄 刊期: 2003年第01期

  • 肝硬化患者血浆降钙素基因相关肽及内皮素水平的初步研究

    目的:探讨肝硬化患者血浆降钙素基因相关肽(CGRP)和血浆内皮素(ET)水平的变化.方法:采用放免法检测40例肝硬化和15例正常人血浆CGRP和ET水平.结果:肝硬化组血浆CGRP数值明显高于正常组(P﹤0.01),肝硬化组血浆ET数值明显低于正常组(P﹤0.01).结论:肝硬化时,CGRP水平升高,ET水平下降,提示二者可能是肝硬化门脉高压血液动力学紊乱的重要因素.

    作者:王颖;周卓;周东晖 刊期: 2003年第01期

  • 白花前胡及前胡甲素对心肌缺血再灌注大鼠IL-6水平及Fas、bax、bcl-2蛋白表达的影响

    目的:研究中药白花前胡及其有效成分对缺血再灌注心肌IL-6水平及凋亡相关蛋白表达的影响.方法:开胸麻醉大鼠左冠状动脉前降枝经30 min缺血及120 min再灌注;放射免疫法测定血清IL-6水平;免疫组化法和计算机图像分析系统检测心肌Fas, bax及bcl-2蛋白表达;苏木精-依红染色法于光镜下观察嗜中性白细胞浸润.结果:白花前胡粗提物及前胡甲素(Pd-Ia)在降压和不影响心率的情况下,减少IL-6水平及Fas, bax,bcl-2蛋白的表达,增加bcl-2/bax的比率.IL-6水平与Fas, bax,bcl-2蛋白表达之间呈密切的线性正相关,而嗜中性白细胞只有轻微浸润.结论:白花前胡及Pd-Ia在防治缺血后心肌细胞死亡上显现新靶位,原因可能与心肌缺血再灌注期间机体自身调控即早基因IL-6,Fas, bax,bcl-2的表达有关.

    作者:常天辉;刘晓阳;章新华;邢军;王怀良 刊期: 2003年第01期

  • 小儿急性白血病外周血中单个核细胞IL-8及受体mRNA表达的研究

    目的:单个核细胞白细胞介素-8(IL-8)及其受体(IL-8R)基因mRNA在小儿急性白血病(CAL)的表达.方法:应用RT-PCR技术对CAL的外周血做IL-8及IL-8R mRNA检测.结果:CAL IL-8及IL-8R水平均显著高于正常人.初发CAL IL-8 mRNA 78.13%;化疗后CAL mRNA 31.58%表达.初发CAL IL-8R mRNA 84.36%表达;化疗后mRNA36.84%表达.结论:IL-8及IL-8R基因mRNA在CAL的初发中有明显表达,在化疗后表达不明显.

    作者:高红;何莉;王纯燕 刊期: 2003年第01期

  • p15蛋白在骨肉瘤中表达的研究

    目的: 研究p15蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其表达与骨肉瘤的相关性.方法:采用S-P免疫组化方法,检测22例骨肉瘤中p15的表达; 结果:p15蛋白在22例骨肉瘤中表达的阳性率为54.5%,而20例骨软骨瘤中阳性率为15.0%.骨肉瘤p15蛋白表达与骨软骨瘤相比差异具有统计学意义(χ2=7.13,P<0.01).结论:p15蛋白的表达与肿瘤的恶性度相关,与骨肉瘤的发生、发展具有相关性.

    作者:韩壮;西中海;华凯;何忠野;吕刚;陈铁 刊期: 2003年第01期

  • 显微切割取材方法在子宫内膜异位症分子生物学研究中的应用

    目的: 探讨显微切割取材方法在子宫内膜异位症分子生物学研究的价值.方法:选择46例子宫及病灶切除的子宫内膜异位症患者,术中取异位病灶,蜡块包埋,常规病理切片,HE染色,寻找并标记异位内膜组织,再连续切片,收集相应部位的异位内膜待用.另取同一患者在位新鲜子宫内膜做对照.实验组与对照组酚/氯仿抽提法提取DNA,PCR扩增,2%琼脂糖凝胶电泳.结果:实验病例46例中存在异位内膜者22例,占47.83%,Ⅰ~Ⅱ期为63.64%,Ⅲ~Ⅳ期为42.86%.实验组与对照组PCR电泳带清晰一致.结论:子宫内膜异位症采用显微切割取材方法进行分子生物学研究,可克服其病灶残存内膜少、位置不确定的特点.

    作者:王丹波;欧阳玲;陆景明 刊期: 2003年第01期

  • 残胃贲门癌和复发癌的外科治疗

    残胃贲门癌15例,其中手术切除10例.总结残胃贲门癌及复发癌的手术可行性及方法,认为残胃贲门癌如无手术禁忌症应积极手术治疗,术式应首选全胃切除,P袢空肠代胃Roux-Y吻合重建消化道,而复发癌的手术治疗应采取慎重态度.

    作者:张澍澄;张苏宁 刊期: 2003年第01期

  • 肺癌血管构型对支气管动脉灌注疗效影响初探

    目的: 探讨肺癌血管结构对支气管动脉灌注(BAI)疗效的影响.方法:对42例肺癌行84次支气管动脉灌注治疗,按TNM分期,并按肿瘤染色程度分级.结果:经BAI治疗总有效率61.9%.按支气管动脉造影(BAG)表现分度,其中Ⅰ度有效率33.3%,Ⅱ度有效率73.3%.肿瘤TNM分期Ⅱb期有效率52.9%,Ⅲa期有效率80%,Ⅲb期有效率69.2%,Ⅳ期2例,均为稳定.结论:肺癌的血管构型是影响BAI疗效的重要因素.

    作者:林楠;王晓明;丁长伟;郭启勇 刊期: 2003年第01期

  • 高效液相色谱法提纯和分离酵母苯丙氨酸tRNAphe ASL

    通过用特殊树脂Nucleogen-DEAE 阴离子交换柱可有效地提纯和分离酵母苯丙氨酸tRNAphe ASL不同核苷酸的聚核苷酸 .经反相高效液相色谱进行定量核苷组分分析, 确认是否掺入了修饰的核苷, 用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度检查.

    作者:叶文鹏;李柏林;刘桂华;Guenther R 刊期: 2003年第01期

  • 局部低温深度对大鼠脊髓缺血损伤保护程度的相关性研究

    目的:研究局部低温的深度与大鼠脊髓缺血损伤保护程度的相关性.方法:通过向大鼠胸腰椎蛛网膜下腔灌注不同温度的生理盐水,将4组动物脊髓核心温度分别控制在38℃、34℃、30℃、18℃4个水平.阻断胸主动脉控制脊髓近端动脉压.观察动物截瘫数及截瘫指数并作组织学检查.结果:实验动物的截瘫数及截瘫指数随着低温温度的降低而降低.组织学检查显示随着低温温度降低,脊髓缺血损伤逐渐减轻.结论:与轻、中度低温相比,深度低温对脊髓缺血损伤的保护作用更显著,局部低温的深度与大鼠脊髓缺血损伤保护程度呈正相关.

    作者:路磊;段志泉;张强;张涛 刊期: 2003年第01期

  • 双侧鳃裂囊肿1例报告

    鳃裂囊肿常见于面颈部侧方,双侧鳃裂囊肿临床上较少见.本病例并经CT检查及病理检查证实.

    作者:朱伟;孙长伏 刊期: 2003年第01期

  • 蟾蜍毒素粗提物对白血病K562细胞的杀伤作用

    目的:观察蟾蜍毒素提取物对白血病K562细胞杀伤作用及对细胞周期的影响.方法:用无水乙醇、二甲基亚砜(DMSO)、PBS缓冲液浸溶中华大蟾蜍的耳后腺及皮下腺分泌物,采用台盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测对细胞周期的影响.结果: 3种浸液均能抑制K562细胞的增殖,其抑制强度依次为乙醇浸液>DMSO浸液>PBS浸液.5 ng/ml的乙醇浸液、50 ng/ml的DMSO浸液、500 ng/ml的PBS浸液均能使K562细胞发生G2/M期阻滞.结论:蟾蜍毒素粗提物对白血病K562细胞增殖具有明显的抑制作用,并伴有G2/M期阻滞.

    作者:卢香兰;许崇安;王萍萍;金波;孙颖;朱志图;刘云鹏 刊期: 2003年第01期

  • 癫痫持续状态后GDNFRα和Ret在大鼠顶叶皮质的表达

    目的:研究大鼠癫痫持续状态(SE)后顶叶皮质区胶质细胞源性神经生长因子α受体(GDNFRα)及Ret的表达.方法:腹腔内注射锂-匹罗卡品制成SE模型,免疫组化方法观察GDNFRα及Ret在SE后顶叶皮质的表达情况.结果:神经生长因子受体α的表达主要位于顶叶皮质的第Ⅲ层,并在SE后2 h达高峰.Ret的表达分布在顶叶各层,在SE后8 h达高峰.结论:SE后顶叶皮质可见GDNFRα及Ret的表达,但二者表达的高峰期不同.

    作者:任艳;王军;高旭光 刊期: 2003年第01期

  • TNP-470对肺腺癌细胞诱导的血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及其与Flk-1表达的关系

    目的:探讨TNP-470对肿瘤细胞诱导的血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及其与血管内皮生长因子(VEGF)受体酪氨酸激酶受体(Flk-1)的关系.方法:培养肺腺癌AGZY-82A细胞株,并制备条件培养液,加入培养的血管内皮细胞,用免疫组化S-P法检测TNP-470对癌细胞诱导后内皮细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、p53和VEGF 受体Flk-1表达的影响.结果:TNP-470能抑制癌细胞诱导的内皮细胞表达PCNA,当TNP-470的浓度达102ng/ml,细胞增殖几乎停止;而凋亡相关基因蛋白p53的表达逐渐增加;并且TNP-470以剂量依赖方式抑制内皮细胞Flk-1的表达,当TNP-470浓度达104ng/ml时,Flk-1的表达几乎完全受到抑制.结论:TNP-470可以通过阻止肿瘤细胞诱导的内皮细胞表达VEGF受体,抑制内皮细胞的增殖,促进其凋亡,而达到体内抑制肿瘤生长和转移的作用.

    作者:马晓春;张玲;梁英健;朱然;于润江 刊期: 2003年第01期

  • AgNORs在胃粘膜活检中诊断价值的研究

    应用AgNORs染色技术对88例胃粘膜活检病例进行了颗粒的计数及形态观察,探讨核仁组成区相关蛋白(AgNORs)颗粒在胃粘膜活检中的诊断价值.正常胃粘膜与胃癌之间、重度不典型增生与胃癌之间颗粒均数有十分显著性差异(P<0.01),而且颗粒的分布及形态亦不相同,说明AgNORs染色对胃粘膜活检良恶性病变鉴别有重要价值.

    作者:高长利;张冰 刊期: 2003年第01期

  • 家兔超声乳化术后发性白内障形成过程中的细胞数分析

    选用白色家兔在显微镜下进行透明晶体超声乳化皮质吸出术,用增殖细胞核抗原(PCNA)作为观察晶体上皮细胞增殖的指标,并对其进行分析.

    作者:刘尚辉;张志常;宁宏 刊期: 2003年第01期

  • 支气管类癌15例临床病理分析

    回顾性分析15例支气管类癌的临床、病理和手术治疗结果,旨在探讨支气管类癌的合理手术方式.其中典型类癌11例,均未发生淋巴结转移;非典型类癌4例,淋巴结转移3例.提示典型类癌手术范围应相对保守,而非典型类癌宜采用与肺癌相同的术式标准.

    作者:王威;李军;李玉 刊期: 2003年第01期

  • 超声评价二尖瓣器结构改变与二尖瓣返流程度的关系

    目的:通过超声心动图评价二尖瓣器形态改变与二尖瓣返流程度之间的关系及其临床意义.方法:评价259例二尖瓣返流病人返流程度以及二尖瓣器的形态学改变.结果:导致返流的常见原因为二尖瓣叶改变,占55.5%,P<0.01.二尖瓣叶增厚与二尖瓣环钙化产生返流,程度以轻度为主.二尖瓣环扩张,腱索与乳头肌改变导致返流程度以中重度为主.结论:二尖瓣叶形态改变是二尖瓣返流的主要原因,二尖瓣器支持结构的改变所导致返流程度以中重度为主,对二尖瓣器功能影响大.

    作者:冯赫林;任卫东;唐力;杨军;张镇钟 刊期: 2003年第01期

中国医科大学学报杂志

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