学术投稿

PCR-RFLP和PCR-SSCP技术在肠杆菌科食源性感染致病菌鉴定中的应用

胡玉山;王鸣;杜琳;莫自耀;洪帮兴;江丽芳

关键词:23S rRNA, 限制性酶切片段长度多态性分析, 单链构象多态性分析
摘要:目的探讨运用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术建立肠杆菌科食源性感染常见致病菌快速鉴定方法的可行性.方法选取肠杆菌科食源性感染14种常见致病菌的23 S rRNA基因作为鉴别靶基因,采用通用引物PCR(UP-PCR)进行扩增,并对PCR产物的酶切片段进行限制性酶切片段长度多态性分析(RFLP)和单链构象多态性分析(SSCP).结果针对23S rRNA基因片段的Hpa Ⅱ酶切产物的RFLP分析表明,不同种属的致病菌表现出相似的RFLP图谱.SSCP分析显示,14种肠杆菌科常见致病菌SSCP图谱变异性很大,有利于进行细菌鉴定.结论运用PCR-SSCP技术可进行肠杆菌科食源性感染致病菌的快速鉴定.
实用预防医学杂志相关文献
  • 老年脑梗塞患者IMT测定的临床意义

    目的探讨老年脑梗塞患者颈动脉内中膜厚度(IMT)的变化及相互关系.方法对67例老年脑梗塞患者及30例老年健康人,采用颈动脉超声检测IMT并进行分析比较.结果老年脑梗塞组IMT明显厚于对照组(P<0.01)且多发性脑梗塞组高于腔隙性及单发性脑梗塞组(P<0.01).结论老年脑梗塞患者IMT明显增厚,且与脑梗塞程度密切相关,IMT可作为预测老年脑梗塞的危险因素.

    作者:白翠兰;董育卿 刊期: 2005年第06期

  • 白假丝酵母菌对唑类药物耐药机制的研究进展

    近年来,白假丝酵母菌对唑类药物耐药问题备受人们关注.随着耐药菌株的不断出现,耐药机制的研究也取得了一定的进展.白假丝酵母菌对唑类药物耐药机制主要与Erg11基因、CDR1和CDR2基因、MDR1基因的过度表达及突变有关.本文就这方面研究新进展进行综述.

    作者:周辉;夏忠弟 刊期: 2005年第06期

  • 变形杆菌引起一学校集体食物中毒调查分析

    目的调查中毒特征,了解中毒的病原,探讨控制中毒因素.方法利用流行病学调查结合实验室检测按WS/T9-1996和GB/T4789-2003进行.结果就餐人数约120人,确定中毒病人为20人,罹患率为16.67%.病原为奇异变形杆菌.结论这次学校集体食物中毒是由奇异变形杆菌引起.

    作者:邱静;李罗少;刘宏江;陆广智;林波 刊期: 2005年第06期

  • 西安市居室装修污染的调查报告

    为研究居室装修污染状况及其对人体健康的危害,提出相应的预防措施,我们对西安市居室装修污染情况进行了调查.采用问卷调查并对室内空气质量进行了检测.调查结果显示:装修一年后超标家庭达52.2%,超标率排序为氨>甲醛>二甲苯>苯>甲苯,其中以甲醛、苯的检测含量较高,高超标近10倍,而装修3个月内的甲醛超标达100%.提示西安市居室装修污染情况比较严重,应充分引起广大群众的注意.建议居室装修要正规、简约、控制污染源,并加强装修后的居室通风和空气净化,以减少装修污染对人们健康带来的危害.

    作者:陈萍;李西军;常锋;王林江 刊期: 2005年第06期

  • 应用时间序列方法分析菌痢季节性分布特性

    目的分析菌痢是否存在季节性周期分布特征,为研究致病因素、考核防治措施提供科学依据.方法对构成双向有序列联表时间序列数据的深圳市宝安区1993 2004年菌痢逐月发病资料,利用游程检验和有序对数比检验两种不同统计方法进行季节性分布分析.结果游程检验示P<0.05,有序对数比检验示P>0.05.结论两种方法所得结果具有一致性,菌痢发病具有季节性升高的特征.

    作者:林启辉 刊期: 2005年第06期

  • 霉甘蔗毒素致食物中毒25例报告分析与回顾

    1982年2月,黑山、北镇两县发生一起因食用霉甘蔗引起毒素中毒25人,死亡2人.现将调查结果分析回顾如下.

    作者:孟庆云;马立夫;牛征 刊期: 2005年第06期

  • 学龄女童个性影响因素研究

    目的分析影响学龄女童个性的有关因素,为培养其健康个性提供依据.方法对西安市所属的七个区各随机抽取1所学校,每个学校抽取四、五、六年级各两个班,采用龚耀先修订的艾森克个性问卷(Eysenck Personality Questionnaire,EPQ)(儿童用)和自编的个人一般情况调查表对1 100名女童进行调查.将调查所得数据进行多元逐步回归分析.结果影响女童精神性(P)的因素有分数;影响小学生内外向(E)的因素有是否班干部、自我成绩评定、父亲文化程度、父母关系;影响情绪稳定性(N)的因素有分数、父母关系;影响掩饰性(L)的因素有父母关系.结论女童个性受家庭、学校环境等的多重影响.家长、教师应创造良好的家庭、社会环境,情绪保持乐观向上的积极倾向,避免对子女儿童的负面影响,以利于其个性向积极方向发展.

    作者:何宏灵;张西萍;杨玉凤 刊期: 2005年第06期

  • 湖南省职业病危害企业使用农民工情况调查分析

    目的了解全省职业病危害企业使用农民工情况,为开展农民工的职业病防治工作提供依据.方法2004年由省卫生厅发文在全省统一开展职业病危害企业的摸底调查,并将其使用农民工情况纳入调查内容.结果有农民工企业的比例和农民工占接触职业病危害人数的比例均高,并在不同的地区、不同的经济类型企业、不同的国民经济行业分布不一.结论农民工职业病危害严重,应高度重视其职业病防治工作.

    作者:周汇;肖云龙;李金保;蒋然子 刊期: 2005年第06期

  • 过氧化氢等离子低温灭菌过程中所遇问题分析及改进

    目的通过对过氧化氢等离子低温灭菌过程中灭菌失败的原因分析,探讨相应的改进措施,以便更好地掌握医疗器械灭菌的方法.方法对使用强生(中国)医疗器械有限公司生产的过氧化氢等离子灭菌机灭菌120次,成功110次,失败10次.对灭菌过程中失败原因进行分析并采取相应的改进措施后,继续使用灭菌机,灭菌机灭菌120次,成功119次,失败1次.结果灭菌成功率由原来的91.7%上升至99.1%.结论只要掌握过氧化氢等离子低温灭菌对医疗物品灭菌正确的操作流程就能达到灭菌安全、快速、方便的目的.

    作者:谢敏;石丹岳 刊期: 2005年第06期

  • 气相色谱法测定工作场所空气中苯乙烯

    目的提出空气中微量苯乙烯测定的新方法.方法空气中苯乙烯用活性炭管采集,二硫化碳解吸,OV351柱分离.结果方法灵敏度高,检出下限3×10-3μg/ml,在0.05~5μg/ml范围内线性关系良好,相关系数r>0.999,精密度高,变异系数CV%<5%,平均回收率达79.7%.结论本法简便、快速、灵敏度高,结果准确可靠,适用于空气中苯乙烯的测定.

    作者:朱晓超;陈桂贻 刊期: 2005年第06期

  • 宁夏青铜峡市897名中小学生HBsAg携带情况调查分析

    目的为摸清青铜峡市中小学生HBsAg携带状况.方法采用反向间接血凝法(RPHA)对本市897名中、小学生取静脉空腹血2ml进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测.结果检测897人HBsAg阳性人数为67人,阳性率为7.46%,低于全国HBsAg携带者阳性率平均水平.其中阳性率低的是1~7岁年龄组,阳性2.75%,高为13~18岁年龄组,阳性率8.84%,经统计学处理两组HBsAg阳性率有显著性差异(χ2=4.62,P<0.05),且随年龄的增长HBsAg阳性率且呈增高趋势.男性HBsAg阳性率为7.96%高于女性HBsAg阳性率6.94%.城市学生检测HBsAg阳性率为6.66%,农村学生检测HBsAg阳性率为8.04%,农村高于城市.结论HBsAg携带者是重要的传染源,加强HBsAg在中小学生中的检测工作,早期形成有效的免疫屏障是预防乙肝流行和传播的重要环节.

    作者:张敏娟;宁玉梅 刊期: 2005年第06期

  • 湖南省某县1990~2001年出生儿童先天性心脏病发病状况分析

    目的了解安仁县1990~2001年出生儿童先天性心脏病的发生情况,探讨降低其发病率的措施,为卫生行政部门制定预防和健康干预提供参考依据.方法对1990~2001年出生的围产儿进行监测登记,资料用Visual Foxpro建立数据库,并用SPSS10.0统计软件包对先心病的发病情况进行x2检验等统计学分析.结果监测安仁县1990~2001年出生儿童共47 965名,其中先心病患儿53例,年平均发病率为1.10‰,不同年份的先心病发病率之间差异有显著性(χ2=9.44,P<0.01);男性发病率为1.55‰,女性发病率为0.53‰,两者差异有显著性(χ2=11.30,P<0.01).结论安仁县先天性心脏病的发病率较低,但呈上升趋势,男女发病率差异有显著性.

    作者:谭梅娟;黄民主;李登清;周价;易霞云;武昆;谭徽;李成华;陈伟;刘薇 刊期: 2005年第06期

  • 长沙市工业企业职业病危害现状调查分析

    通过对长沙市存在职业病危害的1 736家工业企业,开展全面的职业病危害现状调查,结果表明:全市职业病危害接触人数达64 797人,职业健康检查率只有29.8%,存在职业病危害因素的作业点19 398个,进行了检测的有3 395个,检测率仅17.5%,检测合格率为70 9%,长沙市工业企业存在的主要职业危害有粉尘、有机溶剂、铅及其化合物、锰及其化合物、砷及其化合物、噪声等.

    作者:皮嵩云;张建中;何丽萍 刊期: 2005年第06期

  • 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)融合EGFP真核表达载体的构建及表达

    目的构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并鉴定其在小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞能否正确表达.方法PCR扩增M-CSF基因,定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体,构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,脂质体介导将pEGFP-M-CSF转染入NIH3T3细胞,以一步法RT-PCR检测其在NIH3T3细胞中的表达情况.结果双酶切及测序鉴定证明成功构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并在NIH3T3细胞中成功地表达了融合荧光蛋白,RT-PCR检测结果显示RT-PCR扩增产物与M-CSF目的基因片段大小相符,确实源于重组质粒转录后的mRNA.结论真核表达重组体pEGFP-M-CSF的成功构建及在体外真核细胞中有效表达,为进一步研究M-CSF在真核细胞中的信号调控奠定了一定的实验基础.

    作者:张晓红;唐圣松;李剑敏;龙治锋 刊期: 2005年第06期

  • 血清肌酸的测定及临床意义

    肌酸是由甘氨酸、精氨酸和甲硫氨酸在肝脏内合成的一种生物活性物质,是机体能量储存、利用的物质基础.血清肌酸的测定方法有化学法、酶法、高效液相色谱法和毛细管电泳法等,其在心肌梗死、运动员身体机能评价和肌肉损伤等疾病中有重要临床意义.

    作者:莫喜明;唐爱国 刊期: 2005年第06期

  • 甲状腺乳头状癌VEGF-C、VEGFR-3的表达及意义

    目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)VEGF-C、VEGFR-3的表达及意义.方法采用免疫组化SP法检测72例PTC的VEGF-C、VEGFR-3表达,应用图像分析系统定量分析VEGF-C,计算出阳性指数(PI值,Positive index),以VEGFR-3标记淋巴管,在显微镜下计数淋巴管密度(LVD).结果PTC淋巴结转移组VEGF-C-PI(23.15±3.75)显著高于无转移组(14.54±2.93)(P<0.01);PTC微癌、腺内型、腺外型LVD分别为6.00±0.81、13.80±1.81、19.17±2.96,随癌侵袭程度增加而递增(P<0.05,P<0.05,P<0.05);淋巴结转移组的LVD(19.56±2.45)显著高于无转移组(12.48±2.84)(P<0.05);VEGF-C表达与LVD计数呈正相关(r=0.90)(P<0.01).结论VEGF-C、LVD与PTC的淋巴结转移有关;LVD与PTC侵袭有关;VEGF-C与淋巴管生成密切相关.

    作者:张新民;唐震;梁青春 刊期: 2005年第06期

  • 基因差异表达分析技术及其在糖尿病研究中的应用

    随着差异表达基因检测技术的不断发展,建立了很多新的检测方法,本文对差异显示反转录PCR技术(DDRT-PCR)、代表性差异分析技术(RDA)、抑制消减杂交技术(SSH)、获得全长基因的消减杂交法、基因表达系列分析(SAGE)、限制性显示技术(RD-PCR)和基因芯片技术的基本原理作了综述,介绍了它们的应用状况和优缺点,并对基因差异表达分析技术在糖尿病研究中的近期应用及其前景作了简要介绍.随着研究的进一步深入,基因差异表达分析技术和方法将在糖尿病及其他疾病的分子机制、临床诊断、治疗和预防等领域中具有广阔的应用前景.

    作者:罗洁;许辉 刊期: 2005年第06期

  • 湖南省贯彻《职业病防治法》控制职业病危害近期效果及其影响因素的研究

    目的探讨影响<职业病防治法>控制职业病危害近期效果的因素;为制定职业病防治工作规划提供参考.方法采用自制的调查表,以省卫生厅厅文形式向全省各市州卫生部门发送.所有调查数据用SPSS11.5进行统计分析.结果各行业干部职工职防法知晓率达72.9%~80.4%,但对职防法相关内容的知晓率仅35%左右;近50%知晓途径为媒体;职防法实施后,各行业职业性有害因素的监测率、合格率、职业健康受检率均有提高趋势,而疑似职业病检出率、急性中毒事故发生数等有下降趋势,但总体上较职防法实施前无显著差异;影响职防法贯彻实施及控制职业病危害近期效果的主要因素为职防法及相关内容知晓率,企业规模以及企业经济类型等.结论湖南省11个行业272家用人单位职防法知晓率较高,但对职防法及其相关内容的知晓率低;职业病防治管理制度及防护措施的实施状况较职防法实施前虽有改善,但变化辐度不大.职业病控制近期效果有随职防法的深入贯彻逐年提高的趋势.

    作者:杭一平;熊敏如;陈小春 刊期: 2005年第06期

  • 镇江市2001~2004年游泳池水微生物检测结果分析

    目的分析镇江市游泳池水微生物的污染现状,指导处理水质,为有效的预防控制介水传染病提供科学依据.方法抽取镇江市区游泳池水样,依照<公共场所卫生标准检验方法>、<公共场所卫生监测技术规范>和<化妆品卫生规范>规定检测.结果检测367份游泳池水,总合格率71.39%.深水区游泳池水合格率68.36%,浅水区游泳池水合格率71.23%.浅水区游泳池水细菌总数、大肠菌群合格率各年度之间差异有显著性(χ2=11.93,P<0.01;χ2=9.89,P<0.05).深水区游泳池水细菌总数、大肠菌群合格率各年度之间差异有显著性(χ2=15.23,P<0.01;χ2=11.59,P<0.05).深、浅水区游泳池水细菌总数、大肠菌群合格率比较差异无显著性(χ2=0.82、0.06,P>0.05).结论镇江市游泳池水微生物污染情况较严重,细菌总数超标较大肠菌群严重,深水区游泳池水微生物污染情况略好于浅水区.

    作者:徐岚;韩颖 刊期: 2005年第06期

  • 核酸对淋巴细胞DNA损伤修复的影响

    目的研究核酸对大鼠淋巴细胞DNA损伤的保护作用.方法纯种雄性健康Wistar大鼠,随机分为4组:空白组、模型组、核酸低剂量组、核酸高剂量组.空白组正常饮水,其余3组饮0.8%醋酸铅水溶液,核酸组灌胃核酸,空白组、模型组灌蒸馏水,5周后,采用单细胞凝胶电泳技术对外周血淋巴细胞DNA损伤进行分析.结果模型组大鼠淋巴细胞DNA的迁移率和尾长显著高于空白组,核酸组大鼠淋巴细胞DNA的迁移率和尾长显著低于模型组,在统计学上差异有显著性(P<0.05).结论慢性铅染毒可致大鼠淋巴细胞DNA损伤,饮食核酸对淋巴细胞DNA损伤具有一定的保护作用,可减轻铅中毒引起的氧化损伤.

    作者:潘洪志;陈文华;李辉;欧阳吉芳;李恕 刊期: 2005年第06期

实用预防医学杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中华预防医学会 湖南省预防医学会