学术投稿

白细胞滤除对机采血小板质量的影响研究

于洋;冯倩;张婷;马春娅;张晓娟;葛国峰;林子林;潘纪春;汪德清;骆群;田亚平

关键词:机采血小板, 白细胞过滤, 残留白细胞, 血小板损失
摘要:本研究旨在评价白细胞滤除对机采血小板整体质量的影响.随机选取20单位单供者机采血小板在(22±2)℃条件下振荡保存24-96小时后使用血小板型白细胞过滤器进行过滤,分别检测机采血小板过滤前后的血小板浓度、平均血小板体积(MPV)、血小板单位容量、白细胞量、pH值、乳酸脱氢酶(LDH)浓度、K+浓度、血小板膜表面CD62p表达率、血小板凝血指数MA值,并计算白细胞去除率和血小板损失率.结果表明:机采血小板经白细胞过滤器过滤后,残留白细胞计数明显低于滤前白细胞计数(P<0.001),白细胞去除率达到了99.97%;血小板损失率为(8.1±4.2)%,明显低于20%的国家标准规定(P<0.001);与过滤前相比,过滤后MVP、机采血小板保存介质中的LDH浓度、K+浓度和pH值无明显变化(P>0.05),过滤后的血小板膜表面CD62p表达率出现轻度下降(P>0.05),但滤盘灌注液内血小板膜表面CD62p表达率却明显高于滤前(P<0.05);过滤后血小板MA值出现轻度下降,但无明显统计学差异(P>0.05).结论:使用白细胞过滤器可以有效去除机采血小板中混杂的白细胞及部分活化血小板,使血小板损失率控制在较低水平,且对于血小板凝血活性没有产生明显影响.过滤后的机采血小板达到预防巨细胞病毒感染及HIA同种免疫的质量要求.
中国实验血液学杂志相关文献
  • 噬血细胞现象在诊断噬血细胞性淋巴组织细胞增多症中意义的探讨

    本研究探讨噬血细胞现象在诊断噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)中的意义.收集2005年6月至2008年10月继发性HLH疑似病例61例,根据HLH-2004诊断标准分为确诊组及排除组,比较各组骨髓、脾或淋巴结活检中噬血细胞现象的发生率.结果表明,61例疑似患者中有43例确诊为继发性HLH,18例排除HLH;确诊组中有33例发生噬血细胞现象,排除HLH组中有4例出现噬血细胞现象;噬血细胞现象在诊断HLH时的敏感性为76.7%,特异性为77.8%.结论:噬血细胞现象在诊断大部分继发性HLH的中具有重要的意义,但没有噬血细胞现象并不能排除HLH的诊断.

    作者:王昭;陈皙;吴林;田莉萍;王晶石 刊期: 2009年第04期

  • 抗原致敏、GM-CSF基因修饰的树突状细胞诱导免疫杀伤多发性骨髓瘤细胞U266的研究

    本研究探讨负载有多发性骨髓瘤细胞U266可溶性抗原并携带外源基因粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的树突状细胞(DC),在体外激活自身T淋巴细胞形成细胞毒T淋巴细胞(CTLs)对U266细胞的杀伤作用.用U266可溶性抗原致敏DC,再用含有外源基因GM-CSF的腺病毒感染DC,将所得的DC与T细胞混合培养以形成对U266具有特异杀伤作用的CTL,后通过测定乳酸脱氢酶(LDH)以计算CTL对U266的杀伤率.结果表明:负载抗原及外源基因组、负载抗原组和对照组之间的杀伤率存在显著差异(n=3,F:10.939,P<0.05);两两比较表明,负载抗原及外源基因组的杀伤率高于其它两组(P<0.001),且负载抗原组高于对照组(P<0.001).结论:以U266可溶性抗原致敏的DC可诱导出对U266具有特异杀伤作用的CTL,当所致敏的DC通过腺病毒感染而带有外源基因GM-CSF时,所诱导的细胞毒杀伤反应则进一步增强.

    作者:李纯团;朱雄鹏;许文前;肖慧芳;董志高 刊期: 2009年第04期

  • 血浆(1,3)-β-D葡聚糖检测对血液病患者侵袭性真菌感染的诊断价值

    免疫功能低下患者的侵袭性真菌感染(IFI)具有病死率高,诊断困难等特点.针对真菌病原的血清学方法如(1,3)-β-D葡聚糖(BG)检测(G试验)、曲霉半乳甘露聚糖检测(GM试验)具有操作简单、快速、敏感性相对高等特点,可做为IFI诊断的辅助手段.较GM试验比,G试验可用于诊断除曲霉菌外更多的真菌感染.本研究旨在探讨G试验在血液病患者IFI早期诊断中的价值.血浆标本来源于2007年5月-2008年5月来自北京道培医院162例疑为IFI的血液病患者,其中化疗后患者85例,造血干细胞移植后患者77例.应用MB-80微生物动态快速检测系统定量检测患者血浆中BG的含量,将检测结果及临床特征进行回顾性分析.按照欧洲癌症研究治疗组织及真菌研究组(EORTC/MSG)诊断标准,所有病例中有确定诊断2例,临床诊断18例,拟诊75例,排除诊断67例.结果表明:以20 ng/ml为诊断界值,G试验的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)分别为75%、91%、72.4%和92.4%.在75例拟诊病例中,其中有51例G试验阳性,且对广谱抗生素无效而经过抗真菌治疗有效,经过临床回顾性分析符合IFI,表明G试验使IFI诊断率提高31.4%.结论:G试验是早期诊断血液病患者IFI的简单、快速的方法.

    作者:刘芳;吴彤;蔡鹏;刘颖;卢岳;周葭蕤;杨帆;刘强;高雁群;罗荣牡;张建平;孙媛;曹星玉;殷宇明;赵艳丽;王静波;童春容;陆道培 刊期: 2009年第04期

  • 双色双融合荧光原位杂交方法检测bcr/abl融合基因

    本研究总结分析1295份双色双融合荧光原位杂交方法(DC-DF-FISH)检测的bcr/abl融合基因结果并与常规细胞遗传学结果对比,进一步证实双色双融合荧光原位杂交方法检测bcr/abl融合基因的敏感性及临床应用价值.应用bcr/abl双色双融合DNA探针对骨髓间期细胞行荧光原位杂交,回顾分析FISH和核型检测结果.结果表明:在所检测的539例患者的1 295份骨髓标本中FISH阳性结果456份,涉及患者310例,核型正常的18例,核型分析失败的5例.310例FISH阳性病例中典型的DC-DF-FISH信号(2Y1G1R)234例,占75.5%(234/310).非典型信号患者76例,其中变异信号66例,占FISH阳性病例的21.3%(66/310).典型变异信号(1Y2G2R)16例,abl/和/或bcr缺失50例.213例多次DC-DF-FISH结果中,治疗后总转阴率为60%(128/213),治疗过程中阴性阳性多次反复的达12例.结论:双色双融合FISH技术可以检测隐匿核型、变异核型、基因序列缺失、微小残留病(MRD),是一个敏感、精确的白血病的诊断和治疗监测工具,有必要同细胞遗传学检查一样作为常规项目,尤其对于治疗后的病例,它在监测微小残留病及监测复发方面更优于常规细胞遗传学.

    作者:刘旭平;李承文;代芸;秦爽;肖继刚;徐方运;贡金英;王四平;于成龙;范婧;王建祥 刊期: 2009年第04期

  • 携带人Gfi1基因重组慢病毒载体稳定转染32D细胞株的建立

    本研究建立真核细胞表达的Gfi1基因重组慢病毒载体包装系统,并实现Gfi1在32D细胞中长期、稳定的表达,为进一步研究Gfi1基因在恶性血液病中的发生发展建立一个有效的平台.制备完整的重组慢病毒载体三质粒系统:转移质粒(pLOX-Gfi1/pLOX)、包装质粒(pCMV△AR8.2)及包膜蛋白质粒(pMD.G).用脂质体法将三质粒共转染包装细胞293T,48小时后收集病毒上清,并转染靶细胞32D;用Western-blot法检测293T及32D细胞中Gfi1的整合及表达.结果表明:慢病毒的3种质粒可以高效转染293T细胞,并成功包装出慢病毒.目的基因Gfi1能被重组慢病毒高效导入靶细胞32D,并稳定表达,在荧光显微镜下可直接观察到GFP.Western-blot能检测到Gfi1蛋白在包装细胞293T及32D细胞中的表达.结论:慢病毒介导的Gfi1基因可以高效稳定转染32D细胞并持续表达,证明本研究建立了一种有效的基因转移系统.

    作者:黄敏;欧东梅;吴江;赵霞;徐金环;张晓梅;张义成 刊期: 2009年第04期

  • STR-PCR和FISH在监测异性别异基因造血干细胞移植后嵌合状态中意义的比较

    本研究比较短串联重复序列PCR(STR-PCR)和荧光原位杂交(FISH)两种方法在异基因造血干细胞移植后血细胞嵌合状态监测中的意义.对38例修回异性别异基因造血干细胞移植的患者,采用STR-PCR和FISH定量测定移植后14、28天和3个月的骨髓或外周血细胞嵌合状态.结果表明,14天时STR-PCR和FISH同时检测的30例中分别有14例和8例达到完全嵌合(CC,P>0.05).28天时两者同时检测的31例中分别有26例和15例达到CC(P<0.01).3个月时两种方法共同监测的24例中分别有22例和17例达到CC(p>0.05).连续监测3个月以上的28例患者中14例发生移植物被排斥或复发,其中9例由FISH首先检出(P<0.05).结论:FISH检测比STR-PCR更为准确地反映移植早期造血细胞嵌合状态,有助于监测移植物被排斥和疾病复发.

    作者:秦尤文;蒋瑛;王小蕊;万理萍;颜式可;王椿 刊期: 2009年第04期

  • 环孢素A选择性治疗10例全血细胞减少患者的临床研究

    本研究探讨环孢素A(CsA)选择性治疗网织红细胞(Ret)不低且伴乳酸脱氢酶(LDH)升高的全血细胞减少患者的疗效及不良反应.设定入选标准,用CsA对10例入组患者进行治疗,随访6-116月,评价疗效及不良反应.列举典型病例演示CsA在再生障碍性贫血(AA)伴LDH显著升高患者中的维持治疗作用.结果表明:10例患者诊断不同,但具有相似的临床及实验室特征,其中9例患者对CsA治疗有较好的反应,1例因肺结核终止治疗.结论:Ret不低伴LDH升高可能是CsA治疗全血细胞减少有反应的预测标记物.CsA选择性治疗可获得较高的反应性.CsA维持治疗是减少复发的重要因素.

    作者:仇红霞;李建勇;许戟;吕鑫;徐卫;张苏江;吴汉新;邵景章 刊期: 2009年第04期

  • 流式细胞术联合共聚焦显微镜对G2和M期作用位点的鉴别意义

    本研究探讨抗癌药物在细胞周期G2期和M期作用位点的鉴别方法.用G2期和M期细胞阻滞剂的甲安吖啶(m-AMSA)和长春花碱(VBL),分别诱导MOLT-4细胞产生细胞G2期和M期阻滞,用流式细胞术分析DNA直方图含量变化.共聚焦显微镜观察阻滞后细胞形态,并寻找上述两种药物诱导阻滞成功后的差异.结果表明:流式细胞术有检测显示,诱导阻滞成功的MOLT-4细胞均表现为G2/M峰增高,但仅凭流式细胞术单独检测无法判别两者差异.共聚焦显微镜观察显示甲安吖啶诱导G2期阻滞的细胞呈现G2期形态特征,VBL诱导M期阻滞的细胞呈现M期形态特征,共聚焦显微镜时细胞形态学的观察有助于区分两者的差异.因此,在流式细胞术验证诱导成功的基础上进一步经共聚焦显微镜观察有助于鉴别G2和M期的阻滞剂.结论:流式细胞术与共聚焦显微镜技术结合是判别抗癌药物的G2期和M期细胞阻滞剂类型的有效方法之一.

    作者:钟以胜;潘长穿;金昌男;林建军;熊共鹏;张建溪;龚建平 刊期: 2009年第04期

  • B7-H1在人骨髓间充质干细胞上的表达及其对T淋巴细胞增殖的影响

    目前关于人骨髓间充质干细胞(hBMMSC)的免疫调节机制尚不完全清楚.为探讨B7-H1在hBMSC上的表达水平及hBMMSC的免疫调节机制是否与B7-H1介导的信号通路(B7-H1/PD-1)有关,首先分离、培养、鉴定hBMMSC,采用流式细胞术、RT-PCR、Western-blot检测B7-H1在hBMMSC上的表达水平.进一步采用混合淋巴细胞培养法(MLC)观察hBMMSC对T淋巴细胞增殖的抑制作用,然后使用功能级的抗B7-H1单克隆抗体阻断B7-H1,用CCK-8试剂盒检测阻断前后T淋巴细胞增殖活性.结果表明:hBMMSC高表达B7-H1分子;表达B7-H1的hBMMSC能有效地抑制T淋巴细胞的增殖,其抑制作用与hBMMSC数量呈剂量依赖性;使用抗B7-H1单克隆抗体阻断B7-H1后hBMMSC对T淋巴细胞增殖的抑制作用显著降低,抑制率由64.1%降低至38.75%.结论:B7-H1在hBMMSC上高表达,B7-H1介导的信号通路(B7-H1/PD-1)参与了hBMMSC的免疫调节作用.

    作者:倪勋;贾永前;孟文彤;钟凌;曾彦 刊期: 2009年第04期

  • 抗CD20单克隆抗体诱导B淋巴瘤细胞株凋亡的实验研究

    本研究探讨抗CD20单克隆抗体体外诱导B淋巴细胞株凋亡情况及其可能的作用机制.体外培养Daudi、Ramos、Namalwa和Raji细胞,采用XTT法测定细胞增殖抑制率;用流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot测定Daudi、Ramos、Raji和Namalwa细胞经Rituximab 20μg/ml作用24小时后Bcl-2的表达情况.结果表明:抗CD20单克隆抗体对Daudi、Raji和Namalwa淋巴瘤细胞有轻度的抗增殖作用,对Ramos细胞无抗增殖作用,抗增殖作用与单克隆抗体作用浓度无关.抗CD20单克隆抗体对4株细胞无明显诱导凋亡作用,抑制率在3%-10%之间波动.Na-malwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后,Bcl-2蛋白表达下调.结论:单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa和Raji细胞株有轻度抗细胞增殖作用,但与作用浓度和作用时间无明显相关.单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa、Raji和Ramos细胞株有微弱的诱导凋亡作用.Namalwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后Bcl-2表达下调,这可能是抗CD20单克隆抗体增敏细胞毒药物作用的机制之一.

    作者:张红雨;陈红涛;管忠震;黄岩;张星;林桐榆 刊期: 2009年第04期

  • 异基因NK细胞在白血病小鼠单倍体相合骨髓移植中的作用

    本研究观察异基因NK细胞在白血病小鼠单倍体相合骨髓移植中的作用.建立荷EL9611(H-2d)红白血病细胞的CB6F1H-2b/d小鼠动物模型,5天后将其随机分为7组,每组10只.CB6F1H-2b/d受鼠为移植组,9 Gy(60Co)照射后以C57BL/6H-2b/d为供鼠,进行骨髓移植.对照组分为5组:对照1组为未治疗组;对照2组为单纯照射组;对照3组为阿糖胞苷治疗组:小鼠腹腔注射阿糖胞苷50 mg/kg×6d;对照4组为单纯骨髓细胞移植组:小鼠照射后4小时移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞;对照5组为GVHD对照组:小鼠照射后4小时移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞和脾细胞.实验组分为2组:实验A组,照射后输注C57BL/6H-2b小鼠NK细胞1×106/只,4小时后移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞;实验B组:照射后同实验1组,4小时后移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞和脾细胞.以血象、体重、生存Supported by Guangdong Natural Doctor Initial Funding, research project number: 06301119 Fundation of State Key Laboratory of Oneology in Southern China期和病理组织学变化为观察指标并作组间比较.结果表明,对照1、2、3、5组小鼠生存期分别为(10.10±0.88)天、(9.80±0.92)天、(22.70±3.23)天、(20.10±1.73)天,对照4组生存期为(30.10±15.95)天,其中2只小鼠超过30天;实验A、B组小鼠生存期分别为(39.10±18.11)天、(49.30±17.24)天,实验1组4只小鼠生存期超过30天,实验2组7只生存期超过30天,其中实验1组与对照1、2、3、5组比较均有显著性差异(p<0.01),实验2组同其他组比较均有显著性差异(p<0.05).因白血病死亡的小鼠,可见肝脾明显肿大,结构破坏,有大量白血痛细胞浸润.实验组长期存活的小鼠出现Y染色体(嵌合率80%-90%).结论:在荷EL9611(H-2d)红白血病细胞CB6F1H-2b/d小鼠模型的单倍体相合骨髓移植中供者NK细胞具有杀灭白血病细胞并降低GVHD的双重作用.

    作者:王春燕;谭获;郭坤元 刊期: 2009年第04期

  • Lrp16基因在白血病细胞系及白血病患者骨髓中的表达及其临床意义

    本研究分析lrp16基因在白血病细胞系及白血病患者骨髓中的表达,探讨lrp16基因与白血病发生、发展的关系.采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测lrp16基因mRNA在4种白血病细胞系及115例白血病患者骨髓中的表达水平,并结合患者临床特征分析lrp16基因在白血病发生、发展中的作用.4种白血病细胞系包括慢性髓系白血病细胞系K562、急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60、急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT4及具有单核细胞特征的白血病细胞系U937.结果表明:lrp16基因在K562、HL-60、MOLT4及U937 4种细胞系中均表达.lrp16基因在急性髓系白血病患者表达阳性率为38%(16/42),其中完全缓解者表达阳性率为13%(4/30),朱缓解者为100%(12/12);在急性淋巴细胞白血病患者表达阳性率为38%(10/26),其中完全缓解者阳性率为16%(3/18),未缓解者为87%(7/8);在慢性髓系白血病患者表达阳性率为36%(9/25),其中完全缓解者阳性率为20%(4/20),未缓解者为100%(5/5);在慢性淋巴细胞白血病患者表达阳性率为31%(7/22),其中完全缓解者阳性率为11%(2/17),未缓解者为100%(5/5).lrp16基因表达在各种白血病亚型之间无差异,但各亚型中完全缓解者与未缓解者之间存在显著差异(p<0.001).结论:lrp16基因是一个白血病癌基因,与白血病的发生、发展密切相关,有可能作为临床白血病治疗疗效的评价指标.

    作者:杨波;迟小华;卢学春;韩为东;于力;楼方定 刊期: 2009年第04期

  • 一例2A型血管性血友病的基因突变分析

    为了时1例2A型血管性血友病(vWD)患者进行基因分析,鉴定导致vWD的基因突变位点,采集患者外周静脉血,应用BT、vWF:Ag、FⅧ:C、瑞斯托霉素诱导血小板聚集(RIPA)和多聚体分析等方法对患者进行表型诊断,PCR法扩增患者vWF基因全部52个外显子,并进行测序.结果表明:该患者BT延长,vWF:Ag、FⅧ:C、RIPA均降低,多聚体分析显示血浆中缺乏大、中分子vWF多聚体.基因分析发现,患者vWF基因28号外显子存在一杂合性错义突变CA738G(L1580V).结论:患者存在杂合性错义突变(CA738G),而错义突变影响了vWF多聚体的形成,因而错义突变是患者发病的分子机制.

    作者:侯丽虹;张媛;刘秀娥;杨林花 刊期: 2009年第04期

  • 血管内皮生长因子及其受体在急性髓系白血病动物模型中表达的动态分析

    本研究旨在探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)在急性髓系白血病(AML)发生和发展中的作用.建立急性髓系白血病(AML)SCID小鼠模型,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录PCR(RT-PCR)动态检测不同时间点正常小鼠和白血病小鼠外周血清VEGF及其受体VEGFR-2 mRNA表达水平的变化.结果表明:正常小鼠和白血病小鼠均表达VEGF及VEGFR-2 mRNA,白血病组外周血清VEGF浓度和VEGFR-2 mRNA的表达均显著高于正常组小鼠(p<0.05),而且随着病程的进展而逐渐升高.结论:VEGF及VEGFR-2在急性髓系白血病中存在有异常表达,对AML的发生和发展可能起一定的作用.

    作者:陈日玲;陈铭珍;叶泉英;田川;王欢 刊期: 2009年第04期

  • 人骨髓间充质干细胞经肝细胞生长因子基因修饰后的促进鸡胚血管新生

    本研究目的是评价人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenehymal stem cens,hBMMSC)经肝细胞生长因子基因(hepatoeyte growth factor,HGF)修饰后的促血管新生效应,并初步分析其机理.利用重组腺病毒HGF转染hBMMSC,将细胞接种于鸡胚绒毛膜尿囊膜,与α-MEM、同代hBMMSC及bFGF比较,3天后计算其血管教量.用RT-PCR检测hBMMSC表达bFGF、VEGF、血管生成素-1和血管生成素.2的水平.结果表明:4个组中hBMMSC/HGF促血管生成能力强,hBMMSC和bFGF组相近,α-MEM组低.RT-PCR检测显示,hBMMSC和hBMMSC/HGF均表达多种促血管生成相关细胞因子,而HGF转染后表达水平升高.结论:经HGF基因修饰的hBMMSC具有较强的促血管新生的功能,本研究为缺血性疾病的治疗提供了有益的信息.

    作者:刘滋康;靳继德;何梓铭;秦宜德;郭子宽 刊期: 2009年第04期

  • 酪氨酸激酶突变与t(8;21)急性髓系白血病

    本研究探讨c-KIT、FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)、Janus激酶2(JAK2)在伴t(8;21)的急性髓系白血病(AML)患者的突变情况,及其与患者临床表现和预后的相关性.采用普通PCR扩增技术、等位基因PCR技术、酶切及序列测定等方法,分别检测8例初发、6例复发t(8;21)AML患者FLT3、JAK2、c-KIT突变.结果表明:在2/14例(14.3%)伴t(8;21)的AML患者中检测到c-KIT突变,其中l例为c-KITD8 16V,另1例为c-KITD816Y突变;在1/14例(7.1%)患者中检测到FLT3-ITD突变.在14例标本中均未检测到JAK2突变.结论:酪氨酸激酶突变与t(8;21)AML具有相关性,可能提示有较高复发率及髓外浸润,预后不良.筛查c-KIT、FLT3突变等对t(8;21)AML预后判断和治疗指导可能具有重要意义.

    作者:韩阳利;张苏江;乔纯;戴丹;孙雪梅;徐燕丽;钱思轩;徐卫;王季石;李建勇 刊期: 2009年第04期

  • 间充质干细胞迁移特性的研究进展

    间充质干细胞是具有多向分化潜能的干细胞,除了具有造血支持、免疫调节、多向分化为骨、软骨、脂肪的特性外,还具有特异迁移到损伤和肿瘤部位的特性.然而,对于MSC迁移的具体机制还知之甚少,因此深入理解MSC迁移的机制,有望发展新的治疗肿瘤的策略,如利用MSC特异迁移到肿瘤部位的特性携带抗肿瘤蛋白以抑制肿瘤的生长等.本文主要从生长因子,趋化因子,黏附分子,Toll样受体等介导的MSC体外迁移等问题进行综述.

    作者:阎新龙;刘兵;毛宁 刊期: 2009年第04期

  • 国际各类品种血小板膜糖蛋白单克隆抗体试剂对血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术的影响

    本研究按国际输血学会第14届国际血小板免疫学研讨会和合作研究项目的要求,分析比较国际常用血小板膜糖蛋白单克隆抗体(McAb)各类品种对血小板抗原McAb特异性免疫固定检测技术(MAIPA)检测血小板抗体结果的影响.向参加该研究的30个实验室发放10份含已知血小板抗体特异性的血清和1份阴性对照血清样本,以及9份不同类别(GPⅡ b/Ⅲa、GP Ⅰ a//Ⅱ a、GP Ⅰb/Ⅸ及GPⅣ)及克隆编号的血小板膜糖蛋白McAb和统一的实验研究技术方案,各参加实验室按方案进行检测并反馈结果数据,比较同一糖蛋白种类不同的McAb对MAIPA检测结果的影响.结果表明:GPⅡb/Ⅲa中AP2,Gi-5,PL2-73等几种McAb的平均S/CO值较高;GP Ⅰ a/Ⅱa的McAb中MBC202.2和143.1的平均S/CO值较高;GP Ⅰ b/Ⅸ的McAb中142.11和CLB-MB45(CD42b)的平均S/CO值较高;GPⅣ的McAb中131.4的平均S/CO值较高.结论不同的McAb品种对样本的检测结果存在差异,McAb对MAIPA的灵敏度有重要影响.用MAIPA法检测血小板抗体时应同时使用相同糖蛋白种类而不同克隆号的McAb,以防止血小板抗体的漏检.

    作者:唐秋民;申卫东;钟周琳;周燕;吴国光 刊期: 2009年第04期

  • 电子克隆结合RT-PCR获得两条eIF4E剪接变异体的全长cDNA

    本研究旨在克隆急性白血病复发相关的新EST片段全长eDNA并进行生物信息学分析.电子克隆结合RT-PCR克隆新EST片段的全长cDNA,利用生物信息学技术分析所获得的cDNA.结果获得全长序列为1 904 bp和3 393 bp的两条真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor4E,eIF4E)新的剪接变异体,命名为真核细胞翻译起始因子剪接变异体1(splicing variant 1 of eIF4E)和真核细胞翻译起始因子剪接变异体2(splicing variant 2of eIF4E).编码的蛋白产物分别为245和132个氨基酸.二者编码的蛋白产物与eIF4E蛋白有所不同.结论:获得了两条eIF4E剪接变异体的全长cDNA,这为进一步探讨与急性白血病复发的相关性提供基础.

    作者:陈鑫基;胡建达;林敏辉;陈步远 刊期: 2009年第04期

  • 利用显性阴性模型对整合素αⅡbβ3介导的信号转导的初步研究

    本研究目的是明确整合素β3亚单位胞浆段序列在整合素αⅡbβ3介导的信号转导中的重要作用,并进一步了解在无αⅡb亚单位存在的条件下其对信号转导及特异性的影响程度.运用由IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素B3胞浆段组成的融合蛋白(Tac/β3),使其在表达GPⅠbⅨ、整合素αⅡbβ3的CHO细胞株(ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO细胞株)中稳定表达(即得到ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762细胞),并进行多项试验,包括在固相纤维蛋白原的伸展、稳定黏附试验、细胞纤维蛋白凝块回缩功能试验以及游离纤维蛋白原结合试验(分别代表了外向内及内向外信号转导事件).结果表明,在稳定表达有Tac/133的ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762细胞中αⅡbβ3介导的双向信号转导严重受到抑制.结论:Tac/β3可以在ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762细胞中发挥显著有效的显性阴性作用,并且证实整合素B3亚单位胞浆段的单独存在即可影响由αⅡbβ3介导的双向信号转导.

    作者:吕媛婧;苏晓瑜;阮铮;奚晓东 刊期: 2009年第04期

中国实验血液学杂志

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