赵贵英；张树庸
目的 探讨探针长度对寡核苷酸(Oligo)基因芯片杂交信号的影响.方法 以大肠杆菌基因表达信息作为实验模型,根据已有大肠杆菌全基因组芯片数据选择覆盖高、中、低杂交信号强度的20个大肠杆菌基因,针对该20个基因分别设计59-mer和70-mer长度Oligo探针,并将2种探针点制在同一张芯片中,同时设阳性对照探针和阴性对照点样液.提取大肠杆菌RNA,经过反转录、扩增、荧光标记后与芯片进行杂交反应,采用激光共聚焦扫描仪扫描芯片,利用数据分析软件提取探针的杂交信号值并进行显著性分析.结果 大肠杆菌28S rRNA和18S rRNA条带清晰,无降解带出现,质量合格.芯片杂交结果显示59-mer和70-mer长度探针的杂交效率和杂交信号差异无统计学意义(P=0.9810),阳性对照探针出现阳性杂交信号,阴性对照点样液未检测到杂交信号,符合质控要求.结论 59-mer长度探针可用来制备Oligo基因芯片,这不仅降低了基因芯片制作成本,而且将推动基因芯片技术更为普及的应用.
作者：任永红；张科；孙清岚；王亚辉；庄远红；张亮 刊期： 2010年第01期
目的 长期观察并获得单纯牛骨形态发生蛋白(bovine bonemorphogenetic protein,bBMP)异位诱导成骨的组织学变化.方法 (20±2)g昆明小鼠21只,麻醉后于双侧股部肌肉中直接植入块状bBMP各2mg,分别于第1、2、4、6、8、10、12周各处死3只,切取诱导分化组织,5%戊二醛固定,标本用10%EDTA脱钙后制作5μm石蜡切片,分别行甲苯胺蓝染色,HE染色,丽春红三色染色观察组织学变化情况.结果 植入1周,大量分化良好的间充质细胞和幼稚软骨细胞形成一椭圆形分化组织块;植入2周,大量骨小梁生成,部分骨小梁边缘骨化;植入4周,骨小梁转化为成熟的骨质,骨质中有散在于骨细胞中的破骨细胞生成;植入6～12周,椭圆形骨组织块内部小梁骨逐渐吸收、断裂、不连接,但外周骨质逐渐塑形,局部成熟骨质周边仍伴有新生骨形成.结论 bBMP无需任何载体即可在肌肉中异位成骨,具有强大的异位骨诱导能力;血供在异位骨的形成和维持中可能起着重要作用.
作者：李丹；毕龙；刘民；金静；吕荣；王军；白建萍；吴拮；李静；刘崟；胡蕴玉 刊期： 2010年第01期
1953年Nelson发现人类红细胞可与特异调理过的梅毒螺旋体及肺炎双球菌结合,称为免疫黏附,并推测红细胞膜表面可能存在免疫黏附受体,免疫复合物与该受体结合可促进白细胞的吞噬作用,是宿主防御机制的一部分.后来证明此黏附受体即为C3b受体(CR1、CD35).
作者：郭峰 刊期： 2010年第01期
中国医药生物技术协会组织生物样本库分会于2009年6月4日经国家卫生部审核、民政部批准正式成立(社证字第3023-17号).成立大会于2009年11月27日-28日在上海张江高科技园区的生物芯片上海国家工程研究中心隆重召开.参加本次会议的三甲医院、院校及科研院所达百余家,医疗、生物医学领域专家200余人.
作者：张小燕 刊期： 2010年第01期
放射性粒子植入用于临床治疗始于1901年,Pirre特制镭管用于治疗肿瘤.1965年,人工同位素~(125)I作为~(222)Ra和~(198)Au的替代物治疗前列腺癌.1974～1978年美国斯坦福大学医学院首创应用组织间种植~(125)I放射粒子近距离放射治疗25例上皮恶性肿瘤,取得了良好的局部控制率[1].
作者：高旭；周正；景晓娟；任利彬；王仙斌 刊期： 2010年第01期
目的 NiTi记忆合金表面分别进行不涂层、Ti涂层和TLNb涂层表面修饰后,对Ni~2+的释放安全性及生物相容性进行分析.方法 将NiTi记忆合金制备成10 mm×10 mm×10 mm立方体,一组采用等离子喷涂技术分别进行Ti涂层和TiNb涂层,另一组仅表面抛光清洗,不进行涂层.经X射线光电子能谱(XPS)测定植入体的表面成分,扫描电镜(SEM)和X射线荧光分析显微镜(XFAM)测定涂层厚度和形态.成年杂种犬18只,随机分为4组,NiTi合金组(无表面喷涂)、Ti涂层组、TiNb涂层组各5只,空白对照组3只.实验组分别于骶棘肌内埋入合金,每只犬每侧植入5枚,共10枚.空白对照组术式相同,只是不植入任何物体即缝合.12个月后处死取材,采用石墨炉原子吸收仪(GFAAS)分别检测心、肝、脾、肺、肾、脑、骨、鼻咽黏膜、血液、肌肉组织中Ni~2+>含量.对植入体周围纤维囊厚度进行显微镜下测量和结构分析,并进行统计学分析.结果 ①涂层表面光滑、平整、均匀,厚度约3.25 μm;②Ti和TiNb涂层可成功屏蔽合金表面Ni元素.NiTi合金组肝、肾组织中Ni~(2+)含量分别是空白组的1.6和2.4倍;Ti涂层组、TiNb涂层组、空白组之间Ni~(2+)含量无显著差异;③组织学观察三组植入体周围肌肉组织发现无明显巨噬细胞和炎性细胞浸润,具有良好的肌肉组织生物相容性;④植入体周围纤维囊厚度定量分析NiTi合金组、Ti涂层组和TiNb涂层组厚度分别为38.8、25.8和26.1 μm,NiTi组对Ti组和TiNb组差异极显著(P<0.01),而Ti组和TiNb组间无显著差异.结论 经Ti或TiNb涂层后的NiTi记忆合金可有效防止金属表面Ni~(2+)释放,提高NiTi合金的生物相容性和安全性.
作者：汪爱媛；李永滨；许文静；彭江；郭全义；赵斌；张莉；卢世璧 刊期： 2010年第01期
目的 观察混合热休克蛋白,肽(mHSP/P)疫苗、环磷酰胺(Cy)及重组人IL-2(rhIL-2)联合免疫治疗小鼠肉瘤的效果.方法 取小鼠S180细胞肉瘤组织,经层析分离获得混合mHSP/P疫苗,进行常规蛋白质印迹鉴定.S180细胞接种至小鼠皮下后第2天开始实验,将小鼠按mHSP/P、Cy、rhIL-2药物组合、疗程和剂量的不同依次分为B～I组,以及给予生理盐水的A组(对照组).自肿瘤移植后至第45天,观察计算肿瘤体积;以肿瘤移植后3个月仍无瘤生长或肿瘤逐渐缩小至消失为标准,观察各组小鼠的无瘤生存情况,并进行平均生存期比较;以对照组的肿瘤体积为参照,计算第35天各组小鼠肿瘤的生长抑制率.结果 蛋白质印迹分析结果显示所获目的 蛋白为含有HSP110、HSP70、HSP60、Gp96的混合mHSP疫苗.3种药物联合应用的治疗效果明显优于单用mHSP/P疫苗,且多疗程较单一疗程疗效好,其中rhIL-2的佳治疗剂量为5×10~4～1×10~5IU/只,并可使30%的小鼠肿瘤消退而长期生存(治愈),平均生存期延长22～26 d,肿瘤生长抑制率为65%～76%.结论 mHSP疫苗与适量rhIL-2以及小剂量Cy联合应用为临床肉瘤治疗新的免疫治疗方案提供了实验基础.
作者：眭翔；郭全义；袁玫；崔雪梅；卢世璧 刊期： 2010年第01期
目的 得到一株产人乙醛脱氢酶2(acetaldehydedehydrogenase-2,ALDH2)的重组毕赤酵母菌株,优化其发酵条件以满足生产和科研需求.方法 将ALDH2基因整合到质粒pPIC9K,构建重组表达载体pPIC9K-ALDH2,将重组表达质粒pPIC9K-ALDH2经电转化到毕赤酵母SMD1168中,转化子经MD平板筛选后,用G418筛选多拷贝重组子,测序鉴定.通过改变诱导温度、pH、初始OD值、甲醇浓度等诱导条件,对SMD1168(pPIC9K-ALDH2)发酵的条件进行优化.结果 ALDH2 cDNA整合到毕赤酵母基因组中,得到SMD1168(pPIC9K-ALDH2);获得佳的诱导表达优化条件:在28℃、pH=7.0、诱导初始OD_(600)=12、每隔24h添加1.5%甲醇、转速为300r/min,发酵所产生的人ALDH2酶活可达到0.115 U/ml,相对较高.结论 以蛋白酶缺陷型毕赤酵母SMD1168为宿主,分泌表达质粒pPIC9K为载体,能够成功构建重组子SMD1168(pPIC9K-ALDH2).
作者：黄锟；赵玉凤；赵锦；雷明科；林宏楠；王存文；吴元欣 刊期： 2010年第01期
目的 评价猪来源关节软骨脱细胞支架的生物安全性.方法 取猪四肢关节软骨,分别制备脱细胞和未脱细胞软骨支架.在人软骨细胞中分别加入浓度为100%、50%、25%的脱细胞软骨支架浸提液[无血清DMEM培养液与支架表面积按1 ml:(3～6)cm~2比例混合,37℃静置72h],计算相对增殖率,判定其体外细胞毒性.0.9%NaCl与支架表面积按1 ml:(3～6)cm~2比例混合,37℃静置72 h制备脱细胞软骨支架浸提液,分别用于全身急性毒性实验(小白鼠)、溶血实验、热原检测实验、皮内刺激实验(大白兔),分别观察其体内毒性、溶血程度、热原和刺激情况.在大白兔体内分别埋植脱细胞软骨支架与未脱细胞软骨支架,观察炎症反应和细胞免疫情况.结果 猪脱细胞软骨支架浸提液对细胞生长无抑制作用,无细胞毒性.注射支架浸提液后小白鼠一般情况良好,无全身急性毒性反应.支架浸提液溶血程度为1.3%,无溶血作用.支架浸提液无热原存在且原发刺激指数为0分,皮内刺激实验阴性.脱细胞软骨支架与未脱细胞软骨支架相比免疫原性小,无炎症反应和淋巴细胞浸润.结论 猪来源关节软骨脱细胞支架具有良好的生物相容性,将有可能成为理想的天然生物材料,具有良好的应用前景.
作者：鹿亮；郭全义；杨启友；袁玫；张莉；黄靖香；赵斌；彭江；许丈静；卢世璧 刊期： 2010年第01期
2009年生命科学与生物技术研究在世界范围内的新进展、新技术、新成果层出不穷,本文就国内外相关研究进展简况以信息传递形式加以总结.
作者：赵贵英；张树庸 刊期： 2010年第01期
系统免疫学是新的免疫学研究领域,指在系统生物学更广阔的范围,从复杂系统工程的角度,对免疫系统的不同子系统与组成之间,研究在对免疫原的系统免疫反应中各自如何发挥免疫功能以及相关的网络调控机制的一门学科,可用多种相应的数学公式与相关软件进行深入探讨~([1-3]).
作者：郭峰 刊期： 2010年第01期
卵巢恶性肿瘤的发病率近40年来增加了2～3倍并有逐步上升的趋势,根据美国癌症协会2007年的报道,22 430例新诊断的卵巢癌病例中约有15 280例死亡.
作者：刘婵桢；昌晓红；崔恒 刊期： 2010年第01期
血液循环的血液固有免疫系统由血浆补体固有免疫子系统、红细胞固有免疫子系统、血小板固有免疫子系统和白细胞固有免疫子系统构成~([1]).若采用系统生物学的复杂理论和数学公式计算探讨这些子系统之间的网络关系,则必须通过在体外建立系统模式进行系统免疫学实验研究~([2]).
作者：郭峰；钱宝华；花美仙 刊期： 2010年第01期
中国医药生物技术杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中国医药生物技术协会
