魏恒阳；李淑娟；胡文立
目的 建立化学发光检测抗HEV IgG方法,用于HEV感染的实验室诊断及流行病学调查,为试剂盒研制打下基础.方法 以HEV重组抗原包被微孑孔板,辣根过氧化物酶标记的单克隆抗人IgG抗体为第二抗体,建立抗HEV IgG的化学发光检测方法,评价其灵敏度、特异性、精密性等指标.检测患者血清中抗HEV IgG抗体并与第三方试剂比较.结果 建立了检测抗HEV IgG的化学发光方法,检测500例临床患者标本并与对照试剂盒对比,阳性符合率为99.32％,阴性符合率为98.58％,总符合率98.80％,其灵敏度、特异性、重复性均达到设计要求.结论 建立了化学发光检测血清中抗-HEV IgG的方法,具有敏感性高、特异性强、操作简便等特点,适用于戊型肝炎的临床诊断和流行病学调查.
作者：张敏娜；胡燕；侯俊；高蓉；史素娟；王保君；欧卫军；杨永平；貌盼勇 刊期： 2014年第06期
慢性乙型肝类患者口服核苷(酸)类抗病毒药只能抑制乙型肝类病毒复制来实现阻止和延缓疾病的进展,减少肝硬化、肝癌及其并发症的发生,从而改善生活质理和延长存活时间.需长期用药,对于乙型肝类肝硬化患者则需终生抗病毒冶疗.随着病例数量不断增多和用药时间的延长,常见的和少见的不良反应时有报道,在个体上表现不一,有的不良事件比较严重.现就批准上市的拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替诺福韦酯5种核苷(酸)类抗乙型肝类病毒药物的不良反应作一综述.
作者：陈红；肖绍树 刊期： 2014年第06期
目的 了解湖州地区无偿献血人群丙肝患病率和流行特征.方法 对无偿献血中ELISA检测抗-HCV阳性标本再进行RIBA和PCR确认以及基因分型检测,收集确认阳性献血者人口特征资料进行统计分析.结果 湖州地区无偿献血人群HCV患病率为0.84±0.04‰,流行的亚型主要为1b型,患病率和亚型的分布与献血者年龄、性别、学历以及献血次数密切相关(P＜001).结论 湖州地区无偿献血人群HCV感染率较低,在不同献血人群中感染率和亚型分布差异明显.
作者：汪峰；费静娴；潘菲 刊期： 2014年第06期
目的 探讨黏液瘤病毒对裸鼠皮下移植子宫内膜癌的抑瘤作用及其可能机制.方法 采用皮下注射子宫内膜癌HEC-IB细胞的方法建立裸鼠子宫内膜癌模型.瘤内注射黏液瘤病毒后,观察肿瘤生长变化,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中PI3K、Akt、GSK表达水平及活性的变化.同时通过瘤内注射灭活病毒和生理盐水作为对照组.结果 黏液瘤病毒对正常裸鼠不存在毒性及致病能力.黏液瘤处理组肿瘤大小较对照组缩小,差异具有统计学意义.经黏液瘤病毒处理的肿瘤组织中PI3K、Akt的表达水平较对照组显著降低.结论 黏液瘤病毒对裸鼠子宫内膜癌移植瘤具有抑瘤作用,其可能机制是通过调节PI3K/AKT(磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸激酶)信号通路调控细胞凋亡.
作者：周芸；许可可；郭蓉；黄敏；孙红杰 刊期： 2014年第06期
目的 探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)在原发性肝癌预后判断中的价值.方法 用酶联免疫吸附试验定量检测血清GP73,分别测定63例原发性肝癌患者术前、术后(2周、4周)以及术后3 ～12个月复发的21例重新入院患者的GP73的浓度.结果 原发性肝癌患者术前GP73平均水平为240.5±81.4 ng/ml,手术治疗后2周GP73平均浓度为114.4±34.1 ng/ml,治疗后4周平均浓度为57.6±23.3 ng/ml,治疗前浓度显著高于治疗后浓度(P＜0.05).肝癌复发的患者重入院后GP73浓度(181.2±72.4 ng/ml)明显高于GP73.术后的浓度(P＜0.05).结论 GP73作为一个新型肝癌血清标记物在判断肝癌预后中具有较好的应用价值.
作者：刘爱霞；刘佳；戴亮；王卫东；赵静；陈霖；徐军；侯俊；李伯安 刊期： 2014年第06期
目的 探讨人类乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)基因分型检测在宫颈病变诊断中的临床应用价值.方法 选取2010年1月至2012年12月在北京大学第一医院妇产科就诊的1715例患者作为研究对象,所有患者均行宫颈脱落细胞学检查、HPV分型检测及阴道镜检查下行多点活检,并终经组织病理学检查诊断为宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN).分析HPV分型检查在宫颈癌筛查诊断中临床应用价值.结果 1715例CIN患者HPV检出率排名前五位的依次是HPV16、58、52、33、31;CIN2+(包括CIN2/CIN3/原位腺癌/宫颈癌,以下简称CIN2+)患者中前五位依次是HPVI6、58、33、52、31;其中CIN2+中细胞学未见上皮内病变细胞和恶性细胞(negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM)患者中,Logistic回归分析结果显示HPV16、33和18型阳性致CIN2+风险性较大,回归系数OR分别为5.031(P=0.000)、2.375 (P=0.000)和1.598(P =0.027).宫颈脱落细胞学为非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells of undetermined significance,ASCUS),伴随HPV16、58型阳性,发生CIN2+风险性较大,回归系数OR分别为5.139(P=0.000)和2.096(P=0.025).宫颈脱落细胞学为低度鳞状上皮内病变(low squamous intraepithelial lesion,LSIL),伴随HPV16、33、52型CIN2+风险性较大,回归系数OR分别为5.774(P =0.000)、3.368(P =0.000)和1.747(P=0.034).结论 HPV分型检测在宫颈癌筛查中具有重要作用,是指导细胞学阴性、ASCUS和LSIL患者临床处理时的重要参考指标,尤其是当HPV16型阳性时.
作者：陈锐；赵健；朱丽荣；尹玲；张岱；陶霞；温宏武 刊期： 2014年第06期
目的 运用蛋白质区块结构码技术对EV71病毒抑制剂进行筛选.方法 从-PDB数据库中提取EV71病毒的复合物晶体结构.通过使用蛋白质区块结构码技术和Discovery Studio Visualizer软件对PDB数据库中含有12种不同小分子化合物的EV71蛋白晶体结构的靶点区进行分析.分别采用不同EV71病毒蛋白的三类靶点片段所在的蛋白A链扫描晶体结构一维码数据库以期发现和EV71病毒蛋白靶点结构相似的新的靶蛋白.靶点结构相似的靶蛋白所作用的小分子可能成为EV71病毒的抑制剂.结果 POLG蛋白和EV71病毒蛋白靶点结构相似,两种POLG蛋白的抑制剂CHEMBL216000,CHEMBL222234可能成为EV71病毒的抑制剂.结论 从药物靶点结构角度阐述了小分子化合物和EV71病毒蛋白的作用机理.通过靶点结构序列的比对挖掘新的靶蛋白,进而为EV71病毒抑制剂的开发提供有益的线索.
作者：陈光兰；张晔；汪望月；陈成龙；刘晓芬；徐磊；徐芳；杨宁敏；屠苗颖 刊期： 2014年第06期
目的 探讨并比较用不同原理的尿液有形成分全自动分析仪进行尿液定量检测与非离心镜检计数的关系.方法 采用UF-500i全自动尿液有形成分分析仪、AVE-764全自动尿有形成分镜检分析仪和人工显微镜检查分别测定我院522份住院患者的尿液中的有形成分,比较尿液有形成分定量分析方法之间的差异.结果 以标准显微镜检查法为标准,UF-500i全自动尿液有形成分分析仪和AVE-764全自动尿有形成分镜检分析仪对尿液中有形成分的测定结果与显微镜法的测定结果间差异无统计学意义(P＞0.05).以红细胞超过25个/μl、白细胞超过30个/μl,管型超过1个/μl和上皮细胞超过15个/μl为阳性界值,3种方法检测红细胞的完全符合率为68.8％,白细胞为80.4％,管型为75.3％,上皮细胞为56.1％.AVE-764测红细胞的特异性和敏感性为92.9％、84.1％,白细胞为88.2％、83.1％,管型为91.6％、75.4％,上皮细胞为48.4％、76.8％.UF-500i测红细胞的特异性和敏感性为74.1％、75.3％,白细胞为89.9％、82.5％,管型为85.4％、61％,上皮细胞为90％、87.6％.结论 UF-500i和AVE-764全自动尿有形成分分析仪对尿液中有形成分的定量计数与标准的人工显微镜检查的符合率高,比较能够满足临床的需求.
作者：王刚；张延京；李世亮 刊期： 2014年第06期
随着近年来分子生物学技术的高速发展,以核酸杂交、核酸扩增和核酸序列分析为代表的分子诊断和检测技术在诸多领域中日益凸显出至关重要的作用.新型的分子生物学检测技术包括聚合酶链反应(PCR)、微芯片、高通量测序等,然而,所有现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从复杂多样的生物样本中迅速有效地分离和提取所需要的基因组核酸,而且抽提后的核酸质量及其完整性都会直接影响到随后的实验结果.目前,全世界的研究者在核酸分离提取的技术方法上也取得了许多突破性的进展,本文将就新型的核酸分离提取方法作一综述.
作者：王淼；马学军 刊期： 2014年第06期
目的 建立基于扩增阻碍突变系统和实时荧光定量PCR相结合的IL28B基因多SNP位点联合检测方法,为进一步研究丙型肝炎患者抗病毒治疗效果提供技术平台.方法 分别构建包含IL28B基因的rs12979860和rs8099917两个SNP位点的野生型和突变型质粒标准品;采用ARMS技术,结合Taqman探针技术,建立能够同时检测上述两个SNP位点的实时荧光ARMS-PCR方法.然后采用本方法检测60例丙型肝炎住院患者血清标本并以基因测序结果为金标准进行方法学评价.结果 实时荧光ARMS-PCR能够有效的鉴别rs 12979860位点的CC、CT、TT基因型和rs8099917位点的TT、TG和GG基因型,通过和测序结果进行比对,二者符合率为100％ (P ＜0.05).结论 本研究建立的双重实时荧光ARMS-PCR能够快速可靠的对IL28B的rs12979860和rs8099917位点进行基因型多态性的联合检测,为慢性丙型肝炎患者实现个体化治疗奠定基础.
作者：陈霖；刘佳；刘爱霞；刘立明；赵静；徐军；张岚；戴亮；王卫东 刊期： 2014年第06期
目的 回顾性研究HBV rtA181位点突变模式与临床核苷(酸)类似物耐药的关系及挽救治疗效果.方法 核苷(酸)类似物治疗过程中发现HBV rtA181位点突变的45例慢性乙型肝炎或肝硬化患者,检测其血清HBV DNA水平,PCR产物直接测序检测HBV变异模式及基因型,收集突变前用药史及突变后的挽救治疗方案及疗效相关资料.结果 HBV rtA181位点共发现三种突变形式,其突变率分别为rtA181T 66.67％ (30/45),rtA181V 31.11％ (14/45),rtA181S 2.22％ (1/45),rtA181T多见于HBV C基因型患者(P＜0.05);涉及rtA181的HBV突变模式共发现13种,多位点联合突变率为57.78％ (26/45),其中rtA181与rt236位点联合突变率为40.00％ (18/45),与rt204位点联合突变率为22.2％ (10/45),多位点突变患者较单位点突变患者有病毒载量分布更高的趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05),多位点突变与基因型及突变形式无关(P＞0.05);发生rtA181突变的患者97.78％ (44/45)有拉米夫定(LAM)和(或)阿德福韦酯(ADV)治疗史,另外1例有替比夫定(LdT)治疗史.其后的挽救治疗采用加用或换用恩替卡韦(ETV)、LAM联合ADV以及LdT联合ADV均能在一个月内将HBV DNA降低2个lg值,继续随访效果显著的方法为加用或换用ETV.结论 HBVrtA181位点突变模式多样,与LAM、ADV或LdT长期单药或序贯治疗有关,加用或换用ETV可取得显著的挽救治疗效果.
作者：武静；黄潇潇；刘寿荣 刊期： 2014年第06期
目的 通过检测乙肝病毒前S1抗原、乙肝病毒DNA以及乙肝两对半(HRV M),探讨乙肝病毒前S1抗原用于临床诊断乙型肝炎的意义.方法 共检测276例乙肝患者血清标本,乙肝病毒前S1抗原和乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBVDNA.结果 血清中HBeAg、前S1抗原和HBV DNA的阳性率分别为56.5％、73.9％和76.0％;HBeAg阳性的156份标本中,HBV DNA的阳性率(94.8％)与前S1的阳性率(92.3％)之间差异没有统计学意义,HBeAg阴性的120份标本中前S1的阳性率与HBV DNA差异无统计学意义;HBV DNA高拷贝组[1.0×(105～108)、1.0×(103～105)]前S1抗原的阳性率明显高于低拷贝组(＜1.0×103)结论 前S1抗原、HBeAg与HBV DNA符合率较高,对无条件检测HBV DNA而HBe Ag阴性的血清,检测前S1抗原可起到提示病毒是否复制的补充作用.
作者：毛佳；王锦秀；王艳；刘霞 刊期： 2014年第06期
目的 探讨10 μg和20 μg乙肝疫苗与HBIG联合免疫阻断HBV母婴传播的效果.方法 124例HBsAg阳性孕妇所生的婴儿随机分为两组,即10 μg乙肝疫苗组和20 μg乙肝疫苗组.婴儿于出生6h内及30 d分别注射200 IU HBIG,同时分别于出生24 h内、1个月及6个月注射3次10 μg或20 μg重组酵母乙肝疫苗.检测婴儿出生时以及1岁时血清HBV标志物.结果 两组新生儿血清HBsAg、HBeAg及抗-HBe阳性率与滴度之间差别均无统计学意义(P＞0.05).所有新生儿血清HBV DNA水平均小于检测下限(500 U/ml).出生12个月时,所有124例婴儿血清HBsAg和HBeAg检测结果均为阴性;血清HBV DNA水平均在检测下限以下;10 μg和20 μg乙肝疫苗组血清抗-HBs阳性率分别为90.3％和96.8％,差异无统计学意义(P＞0.05);抗-HBs水平分别为325.5±342.2 mIU/ml和463.7±353.3 mIU/ml,后者显著高于前者(P=0.01).而且,20 μg乙肝疫苗组产生高应答抗-HBs(＞ 100 mIU/ml)的比例显著高于10μg乙肝疫苗组(P =0.035).结论 20 μg乙肝疫苗联合HBIG方案阻断HBV母婴传播的效果优于10 μg乙肝疫苗联合HBIG方案.
作者：朱宝申；黄卫平；李素文；孙丽娟；尹华春；陈煜；邹怀宾；张华；戴二黑 刊期： 2014年第06期
目的 了解本地区孕妇α地中海贫血基因携带情况及其血液学特点,为预防地中海贫血出生缺陷提供科学数据.方法 采用荧光定量PCR技术,对1000例孕妇进行α地中海贫血基因筛查与诊断,阳性标本用传统地中海贫血基因诊断方法进行验证;并同时用血红蛋白电泳技术对该1000例孕妇样本进行α地中海贫血筛查.结果 1000例孕妇中α地中海贫血基因携带16例,携带率为1.6％,基因型分别是:缺失型16例,突变型0例;传统α地中海贫血基因诊断方法验证:基因型分别是:缺失型16例,突变型0例,结果全部吻合;血红蛋白毛细管电泳筛查提示有α地中海贫血者5例.结论 本地区α地中海贫血基因携带率为1.6％,采用合理的方法进行育龄孕妇普遍筛查对预防出生缺陷的发生有积极意义.
作者：何平亚；丁忠英；张鑫丽；沈国松 刊期： 2014年第06期
目的 探讨宫颈细胞DNA倍体、高危型HPV、支原体和衣原体检测结果与宫颈上皮内瘤变的相关性,以期结合宫颈感染情况,预测宫颈筛查结果阳性妇女真正罹患宫颈癌前病变的风险,避免宫颈过度治疗.方法 将参加筛查的285名育龄妇女分别采用宫颈细胞图像DNA倍体分析(DNA-ICM)、高危型HPV检查(PCR法)、支原体(UU/Mh)以及衣原体(CT)检查.以阴道镜下宫颈活检的病理学诊断为金标准,分别计算了各种检查方式,对宫颈病变诊断的敏感性、特异性、预测值等.结果 在285个病例的活检结果中,共有慢性炎症179例,CIN Ⅰ级60例,CIN Ⅱ级20例,CINⅢ级25例;癌1例.Logistic回归分析显示,细胞DNA倍体异常与宫颈癌及癌前病变相关性为显著,其次为高危型HPV感染.UU/Mh和CT感染均无明显相关性.所有存在微生物感染患者中,CINⅠ罹患者中32.43％为双因素感染,而CIN Ⅲ患者为56％.而在CIN Ⅱ中单独出现HR HPV感染的占50.00％,而CIN Ⅲ中占40％.结论 宫颈细胞DNA倍体阳性合并高危型HPV感染者应高度警惕为癌变高危人群,若同时出现UU/Mh感染,将有助于提高诊断的准确性.
作者：张立冬；张慧敏；刘美玲；江庆萍；聂琨 刊期： 2014年第06期
目的 了解有偿献血人群血浆雌二醇(estradiol,E2)及白细胞介素12(interleukin 12,IL-12)水平及其与丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV)感染转归的关系.方法 将199例既往有偿献血人群分为健康对照组、自限清除组、持续感染组,检测其血浆E2、IL-12浓度及肝功能指标.结果 多因素Logistic回归分析显示献全血史(P=0.040)和单采血浆史(P ＜0.001)是HCV感染的危险因素.未发现血浆E2、IL-12浓度在三组间的差异存在统计学意义(P均＞0.05).血浆E2和IL-12水平存在正相关关系(r =0.672,P＜0.001).结论 有偿献血是丙型肝炎传播的一个重要危险因素;E2可能正向调节IL-12的表达,但其对IL-12及HCV感染转归的影响还有待进一步研究.
作者：蔡立；薛兴欣；唐筛娣；许可；王佳佳；喻荣彬；苏静；张云；王洁 刊期： 2014年第06期
目的 观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肝组织固醇调节元件结合蛋白(SREBP1c)的表达变化,探讨其在NAFLD病理变化形成中的作用.方法 研究对象为NAFLD患者20例,20例年龄性别匹配的同期住院行肝活检无活动肝病组织学证据且肝脂肪变＜5％的慢性HBV携带者(ASC)设为对照组.免疫组织化学染色检测两组患者肝组织SREBP1c的表达,并比较血脂(TG、CHO)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)和血清肝脏酶谱(AST、ALT、GGT)等的组间差异.结果 与对照组患者比较,NAFLD组肝组织呈不同程度的弥漫性肝细胞脂肪变性,肝组织SREBP1c表达明显升高(P＜0.05),与此一致,血清ALT、AST、TG、CHO、FBG、FINS水平升高(P均＜0.05).结论 NAFLD患者肝组织SREBP1 c表达增高,在人NAFLD脂肪变形成过程中起重要作用.
作者：孙振江；石伟珍；王宇芳；施军平；过建春 刊期： 2014年第06期
目的 了解新的GⅡ.4变异株相对于旧变异株在遗传和结构上的选择优势,研究近几年湖州市GⅡ.4型诺如病毒的进化替换规律.方法 收集从2008年到2014年湖州市GⅡ.4型诺如病毒13株,进行全长VP1区的序列测定,通过序列比对分析找到关键的变异位点.结果 湖州地区的GⅡ.4型诺如病毒在七年中经历了3次变异,2008年和2009年的诺如病毒与2006b variant聚成一个分支;2010和2011年检测到的病毒与2010 variant聚成一个分支;近从2012年底一起暴发疫情中检测到的诺如病毒和2013年、2014年检测到的与国际上新的2012 variant聚成一个分支.在氨基酸水平,我们找到77个信息位点(540个氨基酸中的14.3％).其中39个位于P2区,N端4个,S区18个,P1区16个.结论 GⅡ.4型诺如病毒是全球范围内严重的病毒性肠胃炎首要原因.在过去的十几年时间里,诺如病毒GⅡ.4型已经引起了四次世界范围的急性胃肠炎流行暴发.新出现的变异株迅速并完全的替换已经正在流行的变异株.
作者：陈莉萍；韩建康；纪蕾；吴晓芳；徐德顺 刊期： 2014年第06期
2014年12月6日在上海召开了本次会议.会议由袁正宏主任委员主持.副主任委员:阮强、徐志凯、貌盼勇等,常务委员:杨占秋、李明远、潘卫、严延生、黄平等5人参会.中华医学会:胡俊.工作秘书:陈培莉、刘剑.本次会议共分四个部分,上午进行学术交流活动,下午进行青年委员会选举和成立会议,晚上进行常委会议和青年委员会学术交流活动.上午的学术会议特别邀请了中国工程院院士闻玉梅教授为青年委员们作了“病毒学面临的挑战与机遇”的精彩报告.主委袁正宏教授、常委潘卫、杨占秋教授和复旦大学姜世勃教授分别作了“乙肝病毒与干扰素相互作用新机制”、“NEIBM及其在病毒感染血清学诊断中的应用”、“汉坦病毒进化的分子流行病学”和“重大新发病毒性传染病防治策略的研究”的学术报告,大家进行了热烈讨论,受到了一致好评.
作者：潘卫；胡芸文 刊期： 2014年第06期
目的 了解2013年11月北京市丰台区腹泻中轮状病毒和诺如病毒发病率升高的流行情况及其基因特征 方法 2013年11月在哨点医院门诊随机采集47份腹泻患者便标本、30份环境标本,使用real-time RT-PCR进行轮状病毒(rotavirus)和诺如病毒(norovirus)的筛查;并对轮状病毒阳性标本使用RT-PCR方法扩增VP4和VP7基因,扩增产物进行序列测定.使用Blast、BioEdit及Mega4.0等软件进行序列比对及基因进化分析.结果 47份粪便标本中,37份为轮状病毒检出率为78.7％(37/470,诺如病毒阳性率为14.9％(7/47),轮状病毒和诺如病毒混合感染率为10.6％ (5/47);30份环境标本中,轮状病毒检出率为23.3％ (7/30),未检出诺如病毒.核酸序列比对及进化分析表明此次流行的轮状病毒为G9P[8]a型,与2010-2012年北京地区感染儿童的G9株高度同源.结论 2013年11月北京市丰台区其他感染性腹泻标本中以轮状病毒检出为主,其基因型别为G9P[8]a型,检出率远高于北京市往年水平,提示应加强对轮状病毒进行监测.
作者：秦萌；董晓根；张东彦；杨军勇；肖贵勇；汤旭；陆翌禹；张虹；李洁 刊期： 2014年第06期
中华实验和临床病毒学杂志
主管:实验和临床病毒学杂志
主办：中国科学技术协会
