蔡立；薛兴欣；唐筛娣；许可；王佳佳；喻荣彬；苏静；张云；王洁
目的 探讨人类乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)基因分型检测在宫颈病变诊断中的临床应用价值.方法 选取2010年1月至2012年12月在北京大学第一医院妇产科就诊的1715例患者作为研究对象,所有患者均行宫颈脱落细胞学检查、HPV分型检测及阴道镜检查下行多点活检,并终经组织病理学检查诊断为宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN).分析HPV分型检查在宫颈癌筛查诊断中临床应用价值.结果 1715例CIN患者HPV检出率排名前五位的依次是HPV16、58、52、33、31;CIN2+(包括CIN2/CIN3/原位腺癌/宫颈癌,以下简称CIN2+)患者中前五位依次是HPVI6、58、33、52、31;其中CIN2+中细胞学未见上皮内病变细胞和恶性细胞(negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM)患者中,Logistic回归分析结果显示HPV16、33和18型阳性致CIN2+风险性较大,回归系数OR分别为5.031(P=0.000)、2.375 (P=0.000)和1.598(P =0.027).宫颈脱落细胞学为非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells of undetermined significance,ASCUS),伴随HPV16、58型阳性,发生CIN2+风险性较大,回归系数OR分别为5.139(P=0.000)和2.096(P=0.025).宫颈脱落细胞学为低度鳞状上皮内病变(low squamous intraepithelial lesion,LSIL),伴随HPV16、33、52型CIN2+风险性较大,回归系数OR分别为5.774(P =0.000)、3.368(P =0.000)和1.747(P=0.034).结论 HPV分型检测在宫颈癌筛查中具有重要作用,是指导细胞学阴性、ASCUS和LSIL患者临床处理时的重要参考指标,尤其是当HPV16型阳性时.
作者：陈锐；赵健；朱丽荣；尹玲；张岱；陶霞；温宏武 刊期： 2014年第06期
目的 观察聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎过程中肝功能、病毒复制及肝纤维化指标的改变情况.方法 检测67例慢性丙型肝炎患者在干扰素联合利巴韦林治疗开始(0周)、结束(48周)和停药12周(60周)时血清丙氨酸转氨酶(ALT)、丙肝病毒核糖核酸(HCV RNA)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)和层粘连蛋白(LN)水平.结果 治疗后完全应答组(CR-S,43/67) ALT、HCV RNA及血清4项纤维化指标均显著下降(P ＜0.05或P＜0.01),部分应答组(CR-R,13/67)和无应答组(NR,11/67) ALT、HCV RNA及血清4项纤维化指标变化不明显,反跳甚至更高.结论 聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎约65％患者完全应答,随着肝细胞炎症的改善,病毒RNA滴度、肝纤维化指标水平明显下降,表明干扰素联合利巴韦林能抑制HCV RNA复制,调节机体免疫功能,减轻肝脏炎症反应,改善肝功能,减少肝纤维化.
作者：方玉才；王秋英；潘统桧；杨燕飞；高晓磊 刊期： 2014年第06期
目的 运用蛋白质区块结构码技术对EV71病毒抑制剂进行筛选.方法 从-PDB数据库中提取EV71病毒的复合物晶体结构.通过使用蛋白质区块结构码技术和Discovery Studio Visualizer软件对PDB数据库中含有12种不同小分子化合物的EV71蛋白晶体结构的靶点区进行分析.分别采用不同EV71病毒蛋白的三类靶点片段所在的蛋白A链扫描晶体结构一维码数据库以期发现和EV71病毒蛋白靶点结构相似的新的靶蛋白.靶点结构相似的靶蛋白所作用的小分子可能成为EV71病毒的抑制剂.结果 POLG蛋白和EV71病毒蛋白靶点结构相似,两种POLG蛋白的抑制剂CHEMBL216000,CHEMBL222234可能成为EV71病毒的抑制剂.结论 从药物靶点结构角度阐述了小分子化合物和EV71病毒蛋白的作用机理.通过靶点结构序列的比对挖掘新的靶蛋白,进而为EV71病毒抑制剂的开发提供有益的线索.
作者：陈光兰；张晔；汪望月；陈成龙；刘晓芬；徐磊；徐芳；杨宁敏；屠苗颖 刊期： 2014年第06期
目的 了解深圳市儿童秋冬季腹泻中诺如病毒(Nov)的感染状况,并对阳性株进行基因型分析.方法 收集深圳地区多家医院2009年9月至2010年1月腹泻患儿粪便标本307份,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行诺如病毒核酸扩增,部分阳性标本的PCR产物经纯化、测序,结合GenBank参考株相应核酸序列构建系统进化树并进行基因型分析,采用SimPlot3.5.1对重组株进行分析和鉴定.结果 307份粪便标本中诺如病毒核酸阳性38例,阳性率为12.4％,以6～24个月龄婴幼儿感染为主,占全部病例数的81.6％(31 /38),感染的发病高峰为10、11月份,占全部病例数的73.7％ (28/38);26份测序标本中25株属于GⅡ.4型2006b变异体,1株为GⅡ.12/GⅡ.3型重组株.结论 诺如病毒是深圳市儿童秋冬季腹泻的重要病原体,优势流行株为GⅡ.4型2006b变异体,深圳首次检出的诺如病毒重组株为GⅡ.12/GⅡ.3型.
作者：王琼；张银辉；杨来智；黄烈；何涛君；吴润香；凌利芬；陆学东 刊期： 2014年第06期
随着近年来分子生物学技术的高速发展,以核酸杂交、核酸扩增和核酸序列分析为代表的分子诊断和检测技术在诸多领域中日益凸显出至关重要的作用.新型的分子生物学检测技术包括聚合酶链反应(PCR)、微芯片、高通量测序等,然而,所有现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从复杂多样的生物样本中迅速有效地分离和提取所需要的基因组核酸,而且抽提后的核酸质量及其完整性都会直接影响到随后的实验结果.目前,全世界的研究者在核酸分离提取的技术方法上也取得了许多突破性的进展,本文将就新型的核酸分离提取方法作一综述.
作者：王淼；马学军 刊期： 2014年第06期
目的 探索柯萨奇病毒A16型(CVA16) YY157株在非洲绿猴肾(Vero)细胞中培养与增殖的合适条件.方法 把CVA16 YY157株接种于Vero细胞适应性传代,挑斑纯化后,在不同条件下培养并比较其对病毒滴度的影响.结果 CVA16 YY157株在Vero细胞中培养能导致细胞病变(CPE),可形成蚀斑.将此CVA16病毒以0.01 ～0.1MOI接种于Vero细胞,并在低于2％牛血清浓度的培养基,35℃培养60 h,CPE可达90％以上;此条件下收获培养液上清,可得到较高滴度的病毒.结论 初步建立了CVA16 YY157株在Vero细胞中培养与增殖的方法,为其下一步的大规模培养及疫苗制备奠定了基础.
作者：张锋；朱莲；陈军；高孟；唐彩华；周康凤；高丽美；罗永能 刊期： 2014年第06期
目的 探讨舟山海岛地区严重发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)患者临床血常规及凝血功能特征.方法 采用血细胞分析仪及全自动凝血仪分别检测2011年5月至2013年10月舟山医院收治的27例SFTS患者治疗前及治疗10 d后血常规、凝血功能.x2检验、t检验或相关性分析血常规、凝血功能检测值的变化.结果 SFTS患者治疗前白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、血小板均明显低于正常体检者,差异有统计学意义(P＜0.05);SFTS治疗痊愈者血小板明显高于死亡者,差异有统计学意义(P＜0.05).SFTS患者治疗前PT、APTT、TT均较正常体检者长,FIB较正常体检者低,差异有统计学意义(P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示治疗前SFTS患者APTT与血小板数量有明显负相关性(P＜0.05),治疗10 d后SFTS患者PT、APTT、TT与血小板数量亦有明显负相关性(P＜0.05).结论 密切关注血常规及凝血功能状态对诊断及监测SFTS患者疾病进展情况具有非常显著的临床意义,并且特别需关注血小板及APTT的动态变化.
作者：鲍舟君；陈冬冬；徐岳军；姚燕珍；张晓帮；李世波 刊期： 2014年第06期
目的 探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)在原发性肝癌预后判断中的价值.方法 用酶联免疫吸附试验定量检测血清GP73,分别测定63例原发性肝癌患者术前、术后(2周、4周)以及术后3 ～12个月复发的21例重新入院患者的GP73的浓度.结果 原发性肝癌患者术前GP73平均水平为240.5±81.4 ng/ml,手术治疗后2周GP73平均浓度为114.4±34.1 ng/ml,治疗后4周平均浓度为57.6±23.3 ng/ml,治疗前浓度显著高于治疗后浓度(P＜0.05).肝癌复发的患者重入院后GP73浓度(181.2±72.4 ng/ml)明显高于GP73.术后的浓度(P＜0.05).结论 GP73作为一个新型肝癌血清标记物在判断肝癌预后中具有较好的应用价值.
作者：刘爱霞；刘佳；戴亮；王卫东；赵静；陈霖；徐军；侯俊；李伯安 刊期： 2014年第06期
目的 了解湖州地区无偿献血人群丙肝患病率和流行特征.方法 对无偿献血中ELISA检测抗-HCV阳性标本再进行RIBA和PCR确认以及基因分型检测,收集确认阳性献血者人口特征资料进行统计分析.结果 湖州地区无偿献血人群HCV患病率为0.84±0.04‰,流行的亚型主要为1b型,患病率和亚型的分布与献血者年龄、性别、学历以及献血次数密切相关(P＜001).结论 湖州地区无偿献血人群HCV感染率较低,在不同献血人群中感染率和亚型分布差异明显.
作者：汪峰；费静娴；潘菲 刊期： 2014年第06期
目的 通过检测乙肝病毒前S1抗原、乙肝病毒DNA以及乙肝两对半(HRV M),探讨乙肝病毒前S1抗原用于临床诊断乙型肝炎的意义.方法 共检测276例乙肝患者血清标本,乙肝病毒前S1抗原和乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBVDNA.结果 血清中HBeAg、前S1抗原和HBV DNA的阳性率分别为56.5％、73.9％和76.0％;HBeAg阳性的156份标本中,HBV DNA的阳性率(94.8％)与前S1的阳性率(92.3％)之间差异没有统计学意义,HBeAg阴性的120份标本中前S1的阳性率与HBV DNA差异无统计学意义;HBV DNA高拷贝组[1.0×(105～108)、1.0×(103～105)]前S1抗原的阳性率明显高于低拷贝组(＜1.0×103)结论 前S1抗原、HBeAg与HBV DNA符合率较高,对无条件检测HBV DNA而HBe Ag阴性的血清,检测前S1抗原可起到提示病毒是否复制的补充作用.
作者：毛佳；王锦秀；王艳；刘霞 刊期： 2014年第06期
目的 探讨肾移植围手术期检测CMV-PP65抗原的临床意义.方法 选取我院肾移植患者100例,调查统计全部患者围手术期CMV-PP65抗原及抗CMV-IgM抗体检测结果,比较两项检测指标的敏感性及特异性.结果 CMV-PP65抗原检测的敏感性明显高于抗CMV-IgM抗体检测,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05);两种检测方法的特异性无统计学意义(P＞0.05),但是CMV-PP65抗原检测出现阳性结果的平均时间明显小于抗CMV-IgM抗体检测出现阳性结果的平均时间,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肾移植患者围手术期检测CMV-PP65抗原对于早期诊断CMV病具有较高的敏感性,对肾移植术后CMV病的诊断和早期抗病毒治疗具有重要的临床意义,值得推广应用.
作者：朱建锋；卢勤红 刊期： 2014年第06期
目的 观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肝组织固醇调节元件结合蛋白(SREBP1c)的表达变化,探讨其在NAFLD病理变化形成中的作用.方法 研究对象为NAFLD患者20例,20例年龄性别匹配的同期住院行肝活检无活动肝病组织学证据且肝脂肪变＜5％的慢性HBV携带者(ASC)设为对照组.免疫组织化学染色检测两组患者肝组织SREBP1c的表达,并比较血脂(TG、CHO)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)和血清肝脏酶谱(AST、ALT、GGT)等的组间差异.结果 与对照组患者比较,NAFLD组肝组织呈不同程度的弥漫性肝细胞脂肪变性,肝组织SREBP1c表达明显升高(P＜0.05),与此一致,血清ALT、AST、TG、CHO、FBG、FINS水平升高(P均＜0.05).结论 NAFLD患者肝组织SREBP1 c表达增高,在人NAFLD脂肪变形成过程中起重要作用.
作者：孙振江；石伟珍；王宇芳；施军平；过建春 刊期： 2014年第06期
2014年12月6日在上海召开了本次会议.会议由袁正宏主任委员主持.副主任委员:阮强、徐志凯、貌盼勇等,常务委员:杨占秋、李明远、潘卫、严延生、黄平等5人参会.中华医学会:胡俊.工作秘书:陈培莉、刘剑.本次会议共分四个部分,上午进行学术交流活动,下午进行青年委员会选举和成立会议,晚上进行常委会议和青年委员会学术交流活动.上午的学术会议特别邀请了中国工程院院士闻玉梅教授为青年委员们作了“病毒学面临的挑战与机遇”的精彩报告.主委袁正宏教授、常委潘卫、杨占秋教授和复旦大学姜世勃教授分别作了“乙肝病毒与干扰素相互作用新机制”、“NEIBM及其在病毒感染血清学诊断中的应用”、“汉坦病毒进化的分子流行病学”和“重大新发病毒性传染病防治策略的研究”的学术报告,大家进行了热烈讨论,受到了一致好评.
作者：潘卫；胡芸文 刊期： 2014年第06期
目的 研究广东地区慢性丙型肝炎患者(CHC)白细胞介素28B(IL28B)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的分布特点及其与抗病毒疗效之间的关系,为合理选择经济有效的个体化抗病毒治疗方案提供依据,提高CHC的治疗应答率.方法 对74例CHC患者给予聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)联合利巴韦林(RBV)抗病毒治疗,疗程48周或72周,停药后随访24周.通过PCR测序,检测所有患者的IL28B(rs8099917、rs12979860、rs12980275)位点SNP,以快速病毒学应答率(RVR)及持续病毒学应答率(SVR)作为疗效的主要评价指标,比较IL28B不同基因型与抗病毒疗效的关系,评估IL28 BSNP在CHC患者治疗应答中的作用.结果 74例患者中,rs8099917位点基因型为TT、TG、GG各63(85.1％)、11(14.9％)、0(0％)例,rs12979860位点基因型为CC、CT、TT各60(81.1％)、14(18.9％)、0(0％)例,rs12980275位点基因型为AA、AG、GG各57 (77.0％)、17(23.0％)、0(0％)例.对HCV 1型患者,上述三个位点中仅rs12979860 CC型与SVR有关,结果有统计学差异(SVR组vs NonSVR组,88.4％ vs 58.3％,P＜0.05);对非HCV1型患者,rs8099917、rs12979860、rs12980275三个位点与RVR和SVR无关,结果无统计学差异(P＞0.05).结论 广东地区CHC患者IL28B基因rs8099917、rs12979860、rs12980275位点分别以TT、CC、AA为主;对于HCV 1型CHC患者,rs12979860位点的基因型可以作为治疗前SVR的一个重要预测因子.
作者：郭凤霞；张霞意；兰芸；李剑萍；陈彬彬；关玉娟 刊期： 2014年第06期
慢性乙型肝类患者口服核苷(酸)类抗病毒药只能抑制乙型肝类病毒复制来实现阻止和延缓疾病的进展,减少肝硬化、肝癌及其并发症的发生,从而改善生活质理和延长存活时间.需长期用药,对于乙型肝类肝硬化患者则需终生抗病毒冶疗.随着病例数量不断增多和用药时间的延长,常见的和少见的不良反应时有报道,在个体上表现不一,有的不良事件比较严重.现就批准上市的拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替诺福韦酯5种核苷(酸)类抗乙型肝类病毒药物的不良反应作一综述.
作者：陈红；肖绍树 刊期： 2014年第06期
目的 探讨黏液瘤病毒对裸鼠皮下移植子宫内膜癌的抑瘤作用及其可能机制.方法 采用皮下注射子宫内膜癌HEC-IB细胞的方法建立裸鼠子宫内膜癌模型.瘤内注射黏液瘤病毒后,观察肿瘤生长变化,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中PI3K、Akt、GSK表达水平及活性的变化.同时通过瘤内注射灭活病毒和生理盐水作为对照组.结果 黏液瘤病毒对正常裸鼠不存在毒性及致病能力.黏液瘤处理组肿瘤大小较对照组缩小,差异具有统计学意义.经黏液瘤病毒处理的肿瘤组织中PI3K、Akt的表达水平较对照组显著降低.结论 黏液瘤病毒对裸鼠子宫内膜癌移植瘤具有抑瘤作用,其可能机制是通过调节PI3K/AKT(磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸激酶)信号通路调控细胞凋亡.
作者：周芸；许可可；郭蓉；黄敏；孙红杰 刊期： 2014年第06期
目的 探讨10 μg和20 μg乙肝疫苗与HBIG联合免疫阻断HBV母婴传播的效果.方法 124例HBsAg阳性孕妇所生的婴儿随机分为两组,即10 μg乙肝疫苗组和20 μg乙肝疫苗组.婴儿于出生6h内及30 d分别注射200 IU HBIG,同时分别于出生24 h内、1个月及6个月注射3次10 μg或20 μg重组酵母乙肝疫苗.检测婴儿出生时以及1岁时血清HBV标志物.结果 两组新生儿血清HBsAg、HBeAg及抗-HBe阳性率与滴度之间差别均无统计学意义(P＞0.05).所有新生儿血清HBV DNA水平均小于检测下限(500 U/ml).出生12个月时,所有124例婴儿血清HBsAg和HBeAg检测结果均为阴性;血清HBV DNA水平均在检测下限以下;10 μg和20 μg乙肝疫苗组血清抗-HBs阳性率分别为90.3％和96.8％,差异无统计学意义(P＞0.05);抗-HBs水平分别为325.5±342.2 mIU/ml和463.7±353.3 mIU/ml,后者显著高于前者(P=0.01).而且,20 μg乙肝疫苗组产生高应答抗-HBs(＞ 100 mIU/ml)的比例显著高于10μg乙肝疫苗组(P =0.035).结论 20 μg乙肝疫苗联合HBIG方案阻断HBV母婴传播的效果优于10 μg乙肝疫苗联合HBIG方案.
作者：朱宝申；黄卫平；李素文；孙丽娟；尹华春；陈煜；邹怀宾；张华；戴二黑 刊期： 2014年第06期
本研究调查了2008年该地大学生性行为及相关行为、对待艾滋病病毒(HIV)感染者态度.1 对象与方法2008年对徐州市四所大学学生进行整群随机抽样.采用中国青少年健康相关行为调查问卷(大学),被调查者匿名填写.内容包括年级、年龄、性别、是否有异性朋友及亲密行为、性行为及相关行为、对待HIV感染者态度、了解性知识渠道等.应用Epidata 3.0数据库进行数据双录入,使用SPSS 17.0软件统计分析.x2检验比较率的差别,Logistic回归分析影响因素.
作者：张峰 刊期： 2014年第06期
目的 了解本地区孕妇α地中海贫血基因携带情况及其血液学特点,为预防地中海贫血出生缺陷提供科学数据.方法 采用荧光定量PCR技术,对1000例孕妇进行α地中海贫血基因筛查与诊断,阳性标本用传统地中海贫血基因诊断方法进行验证;并同时用血红蛋白电泳技术对该1000例孕妇样本进行α地中海贫血筛查.结果 1000例孕妇中α地中海贫血基因携带16例,携带率为1.6％,基因型分别是:缺失型16例,突变型0例;传统α地中海贫血基因诊断方法验证:基因型分别是:缺失型16例,突变型0例,结果全部吻合;血红蛋白毛细管电泳筛查提示有α地中海贫血者5例.结论 本地区α地中海贫血基因携带率为1.6％,采用合理的方法进行育龄孕妇普遍筛查对预防出生缺陷的发生有积极意义.
作者：何平亚；丁忠英；张鑫丽；沈国松 刊期： 2014年第06期
目的 探讨磁珠法提取核酸检测丙肝病毒RNA载量的方法学评价及其临床应用.方法 采用精密度、检测下限、线性分析和干扰实验对磁珠法提取核酸进行方法学评价,采用磁珠法和柱抽提法对283份标本进行检测,进行相关性分析.结果 磁珠法的高值质控血清的批内精密度为6.64±0.11,CV为1.65％,批间精密度为6.68±0.14,CV为2.09％;低值质控血清的批内精密度为4.60±0.12,CV为2.66％,批间精密度为4.56±0.19,CV为4.10％;检测下限为用磁珠法检测20份500IU/L HCV血清标本,20份标本均扩增出曲线,阳性率为100％(20/20).磁珠法线性评估结果呈明显线性,相关系数r=0.999,P＜0.05,回归方程y=0.982x+ 0.092.磁珠法和柱抽提法提取核酸检测HCV-RNA载量的比较,磁珠法与柱抽提法的相关系数r=0.990,P＜0.05,回归方程y=0.965x +0.247.结论 磁珠法提取核酸检测丙肝病毒RNA载量的方法具有较高的特异性和灵敏度,较强的抗干扰能力,且方法简便易于自动化操作,是理想的实验室核酸提取方法.
作者：刘萍；张坚磊；刘晔华；王欣；穆红 刊期： 2014年第06期
中华实验和临床病毒学杂志
主管:实验和临床病毒学杂志
主办：中国科学技术协会
