朱建锋;卢勤红
目的 观察聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎过程中肝功能、病毒复制及肝纤维化指标的改变情况.方法 检测67例慢性丙型肝炎患者在干扰素联合利巴韦林治疗开始(0周)、结束(48周)和停药12周(60周)时血清丙氨酸转氨酶(ALT)、丙肝病毒核糖核酸(HCV RNA)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)和层粘连蛋白(LN)水平.结果 治疗后完全应答组(CR-S,43/67) ALT、HCV RNA及血清4项纤维化指标均显著下降(P <0.05或P<0.01),部分应答组(CR-R,13/67)和无应答组(NR,11/67) ALT、HCV RNA及血清4项纤维化指标变化不明显,反跳甚至更高.结论 聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎约65%患者完全应答,随着肝细胞炎症的改善,病毒RNA滴度、肝纤维化指标水平明显下降,表明干扰素联合利巴韦林能抑制HCV RNA复制,调节机体免疫功能,减轻肝脏炎症反应,改善肝功能,减少肝纤维化.
作者:方玉才;王秋英;潘统桧;杨燕飞;高晓磊 刊期: 2014年第06期
随着近年来分子生物学技术的高速发展,以核酸杂交、核酸扩增和核酸序列分析为代表的分子诊断和检测技术在诸多领域中日益凸显出至关重要的作用.新型的分子生物学检测技术包括聚合酶链反应(PCR)、微芯片、高通量测序等,然而,所有现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从复杂多样的生物样本中迅速有效地分离和提取所需要的基因组核酸,而且抽提后的核酸质量及其完整性都会直接影响到随后的实验结果.目前,全世界的研究者在核酸分离提取的技术方法上也取得了许多突破性的进展,本文将就新型的核酸分离提取方法作一综述.
作者:王淼;马学军 刊期: 2014年第06期
目的 建立化学发光检测抗HEV IgG方法,用于HEV感染的实验室诊断及流行病学调查,为试剂盒研制打下基础.方法 以HEV重组抗原包被微孑孔板,辣根过氧化物酶标记的单克隆抗人IgG抗体为第二抗体,建立抗HEV IgG的化学发光检测方法,评价其灵敏度、特异性、精密性等指标.检测患者血清中抗HEV IgG抗体并与第三方试剂比较.结果 建立了检测抗HEV IgG的化学发光方法,检测500例临床患者标本并与对照试剂盒对比,阳性符合率为99.32%,阴性符合率为98.58%,总符合率98.80%,其灵敏度、特异性、重复性均达到设计要求.结论 建立了化学发光检测血清中抗-HEV IgG的方法,具有敏感性高、特异性强、操作简便等特点,适用于戊型肝炎的临床诊断和流行病学调查.
作者:张敏娜;胡燕;侯俊;高蓉;史素娟;王保君;欧卫军;杨永平;貌盼勇 刊期: 2014年第06期
目的 探讨舟山海岛地区严重发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)患者临床血常规及凝血功能特征.方法 采用血细胞分析仪及全自动凝血仪分别检测2011年5月至2013年10月舟山医院收治的27例SFTS患者治疗前及治疗10 d后血常规、凝血功能.x2检验、t检验或相关性分析血常规、凝血功能检测值的变化.结果 SFTS患者治疗前白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、血小板均明显低于正常体检者,差异有统计学意义(P<0.05);SFTS治疗痊愈者血小板明显高于死亡者,差异有统计学意义(P<0.05).SFTS患者治疗前PT、APTT、TT均较正常体检者长,FIB较正常体检者低,差异有统计学意义(P<0.05).Pearson相关性分析结果显示治疗前SFTS患者APTT与血小板数量有明显负相关性(P<0.05),治疗10 d后SFTS患者PT、APTT、TT与血小板数量亦有明显负相关性(P<0.05).结论 密切关注血常规及凝血功能状态对诊断及监测SFTS患者疾病进展情况具有非常显著的临床意义,并且特别需关注血小板及APTT的动态变化.
作者:鲍舟君;陈冬冬;徐岳军;姚燕珍;张晓帮;李世波 刊期: 2014年第06期
本研究调查了2008年该地大学生性行为及相关行为、对待艾滋病病毒(HIV)感染者态度.1 对象与方法2008年对徐州市四所大学学生进行整群随机抽样.采用中国青少年健康相关行为调查问卷(大学),被调查者匿名填写.内容包括年级、年龄、性别、是否有异性朋友及亲密行为、性行为及相关行为、对待HIV感染者态度、了解性知识渠道等.应用Epidata 3.0数据库进行数据双录入,使用SPSS 17.0软件统计分析.x2检验比较率的差别,Logistic回归分析影响因素.
作者:张峰 刊期: 2014年第06期
目的 了解新的GⅡ.4变异株相对于旧变异株在遗传和结构上的选择优势,研究近几年湖州市GⅡ.4型诺如病毒的进化替换规律.方法 收集从2008年到2014年湖州市GⅡ.4型诺如病毒13株,进行全长VP1区的序列测定,通过序列比对分析找到关键的变异位点.结果 湖州地区的GⅡ.4型诺如病毒在七年中经历了3次变异,2008年和2009年的诺如病毒与2006b variant聚成一个分支;2010和2011年检测到的病毒与2010 variant聚成一个分支;近从2012年底一起暴发疫情中检测到的诺如病毒和2013年、2014年检测到的与国际上新的2012 variant聚成一个分支.在氨基酸水平,我们找到77个信息位点(540个氨基酸中的14.3%).其中39个位于P2区,N端4个,S区18个,P1区16个.结论 GⅡ.4型诺如病毒是全球范围内严重的病毒性肠胃炎首要原因.在过去的十几年时间里,诺如病毒GⅡ.4型已经引起了四次世界范围的急性胃肠炎流行暴发.新出现的变异株迅速并完全的替换已经正在流行的变异株.
作者:陈莉萍;韩建康;纪蕾;吴晓芳;徐德顺 刊期: 2014年第06期
目的 分析引起吉林省2009-2012年手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)流行的肠道病毒71型的传播链.方法 选择70株2009-2012年分离于吉林省HFMD病例的EV-A71分离株,对VP1编码区基因进行逆转录-聚合酶链反应扩增及RT-PCR产物的序列测定,使用Bioedit软件和MEGA 4.0软件对VP1基因编码区进行同源性、基因亲缘关系分析.结果 吉林省2009-2012年的70株EV-A71分离株均属于C4a基因亚型,91.4%的EV-A71分离株形成1个大的优势传播链,吉林省9个市、州均发现C4a基因亚型的EV-A71优势传播链.结论 2009-2012年一条C4a基因亚型的EV-A71优势传播链在吉林省持续传播,引起吉林省HFMD的暴发流行.
作者:田鑫;魏雷雷;张勇;王爽;程涛;曹凤瑞;单元春;吕淑梅;李大强 刊期: 2014年第06期
目的 探讨10 μg和20 μg乙肝疫苗与HBIG联合免疫阻断HBV母婴传播的效果.方法 124例HBsAg阳性孕妇所生的婴儿随机分为两组,即10 μg乙肝疫苗组和20 μg乙肝疫苗组.婴儿于出生6h内及30 d分别注射200 IU HBIG,同时分别于出生24 h内、1个月及6个月注射3次10 μg或20 μg重组酵母乙肝疫苗.检测婴儿出生时以及1岁时血清HBV标志物.结果 两组新生儿血清HBsAg、HBeAg及抗-HBe阳性率与滴度之间差别均无统计学意义(P>0.05).所有新生儿血清HBV DNA水平均小于检测下限(500 U/ml).出生12个月时,所有124例婴儿血清HBsAg和HBeAg检测结果均为阴性;血清HBV DNA水平均在检测下限以下;10 μg和20 μg乙肝疫苗组血清抗-HBs阳性率分别为90.3%和96.8%,差异无统计学意义(P>0.05);抗-HBs水平分别为325.5±342.2 mIU/ml和463.7±353.3 mIU/ml,后者显著高于前者(P=0.01).而且,20 μg乙肝疫苗组产生高应答抗-HBs(> 100 mIU/ml)的比例显著高于10μg乙肝疫苗组(P =0.035).结论 20 μg乙肝疫苗联合HBIG方案阻断HBV母婴传播的效果优于10 μg乙肝疫苗联合HBIG方案.
作者:朱宝申;黄卫平;李素文;孙丽娟;尹华春;陈煜;邹怀宾;张华;戴二黑 刊期: 2014年第06期
2014年12月6日在上海召开了本次会议.会议由袁正宏主任委员主持.副主任委员:阮强、徐志凯、貌盼勇等,常务委员:杨占秋、李明远、潘卫、严延生、黄平等5人参会.中华医学会:胡俊.工作秘书:陈培莉、刘剑.本次会议共分四个部分,上午进行学术交流活动,下午进行青年委员会选举和成立会议,晚上进行常委会议和青年委员会学术交流活动.上午的学术会议特别邀请了中国工程院院士闻玉梅教授为青年委员们作了“病毒学面临的挑战与机遇”的精彩报告.主委袁正宏教授、常委潘卫、杨占秋教授和复旦大学姜世勃教授分别作了“乙肝病毒与干扰素相互作用新机制”、“NEIBM及其在病毒感染血清学诊断中的应用”、“汉坦病毒进化的分子流行病学”和“重大新发病毒性传染病防治策略的研究”的学术报告,大家进行了热烈讨论,受到了一致好评.
作者:潘卫;胡芸文 刊期: 2014年第06期
目的 探讨宫颈细胞DNA倍体、高危型HPV、支原体和衣原体检测结果与宫颈上皮内瘤变的相关性,以期结合宫颈感染情况,预测宫颈筛查结果阳性妇女真正罹患宫颈癌前病变的风险,避免宫颈过度治疗.方法 将参加筛查的285名育龄妇女分别采用宫颈细胞图像DNA倍体分析(DNA-ICM)、高危型HPV检查(PCR法)、支原体(UU/Mh)以及衣原体(CT)检查.以阴道镜下宫颈活检的病理学诊断为金标准,分别计算了各种检查方式,对宫颈病变诊断的敏感性、特异性、预测值等.结果 在285个病例的活检结果中,共有慢性炎症179例,CIN Ⅰ级60例,CIN Ⅱ级20例,CINⅢ级25例;癌1例.Logistic回归分析显示,细胞DNA倍体异常与宫颈癌及癌前病变相关性为显著,其次为高危型HPV感染.UU/Mh和CT感染均无明显相关性.所有存在微生物感染患者中,CINⅠ罹患者中32.43%为双因素感染,而CIN Ⅲ患者为56%.而在CIN Ⅱ中单独出现HR HPV感染的占50.00%,而CIN Ⅲ中占40%.结论 宫颈细胞DNA倍体阳性合并高危型HPV感染者应高度警惕为癌变高危人群,若同时出现UU/Mh感染,将有助于提高诊断的准确性.
作者:张立冬;张慧敏;刘美玲;江庆萍;聂琨 刊期: 2014年第06期
目的 建立基于扩增阻碍突变系统和实时荧光定量PCR相结合的IL28B基因多SNP位点联合检测方法,为进一步研究丙型肝炎患者抗病毒治疗效果提供技术平台.方法 分别构建包含IL28B基因的rs12979860和rs8099917两个SNP位点的野生型和突变型质粒标准品;采用ARMS技术,结合Taqman探针技术,建立能够同时检测上述两个SNP位点的实时荧光ARMS-PCR方法.然后采用本方法检测60例丙型肝炎住院患者血清标本并以基因测序结果为金标准进行方法学评价.结果 实时荧光ARMS-PCR能够有效的鉴别rs 12979860位点的CC、CT、TT基因型和rs8099917位点的TT、TG和GG基因型,通过和测序结果进行比对,二者符合率为100% (P <0.05).结论 本研究建立的双重实时荧光ARMS-PCR能够快速可靠的对IL28B的rs12979860和rs8099917位点进行基因型多态性的联合检测,为慢性丙型肝炎患者实现个体化治疗奠定基础.
作者:陈霖;刘佳;刘爱霞;刘立明;赵静;徐军;张岚;戴亮;王卫东 刊期: 2014年第06期
目的 了解有偿献血人群血浆雌二醇(estradiol,E2)及白细胞介素12(interleukin 12,IL-12)水平及其与丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV)感染转归的关系.方法 将199例既往有偿献血人群分为健康对照组、自限清除组、持续感染组,检测其血浆E2、IL-12浓度及肝功能指标.结果 多因素Logistic回归分析显示献全血史(P=0.040)和单采血浆史(P <0.001)是HCV感染的危险因素.未发现血浆E2、IL-12浓度在三组间的差异存在统计学意义(P均>0.05).血浆E2和IL-12水平存在正相关关系(r =0.672,P<0.001).结论 有偿献血是丙型肝炎传播的一个重要危险因素;E2可能正向调节IL-12的表达,但其对IL-12及HCV感染转归的影响还有待进一步研究.
作者:蔡立;薛兴欣;唐筛娣;许可;王佳佳;喻荣彬;苏静;张云;王洁 刊期: 2014年第06期
目的 观察新活素在重症病毒性心肌炎心力衰竭中的疗效及安全性.方法 选取2010年1月至2013年12月在我科诊断的重症病毒性心肌炎患者27例,分为新活素组和对照组,新活素组在强心、利尿、扩血管基础上加用新活素治疗,观察两组患者脑利钠肽(BNP)、肌钙蛋白(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心脏彩超改变情况并比较两组的疗效.结果 新活素组能明显降低BNP [(203.1±39.8)vs.(1185.5±48.3) pg/ml]、cTnT [(13.5±9.8)vs.(24.8±13.2) μg/L]、CK-MB [(32.9±10.7)vs.(195.3 ±48.2) U/L],改善左室射血分数[(59.2±9.2)%vs.(38.1±8.8)%],并且疗效优于对照组(P<0.05),没有出现明显不良反应.结论 新活素对重症病毒性心肌炎心力衰竭是一个有效安全的治疗措施.
作者:郑振达;成彩联;董睿敏;赵长林;陈璘;钱孝贤 刊期: 2014年第06期
目的 通过检测乙肝病毒前S1抗原、乙肝病毒DNA以及乙肝两对半(HRV M),探讨乙肝病毒前S1抗原用于临床诊断乙型肝炎的意义.方法 共检测276例乙肝患者血清标本,乙肝病毒前S1抗原和乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBVDNA.结果 血清中HBeAg、前S1抗原和HBV DNA的阳性率分别为56.5%、73.9%和76.0%;HBeAg阳性的156份标本中,HBV DNA的阳性率(94.8%)与前S1的阳性率(92.3%)之间差异没有统计学意义,HBeAg阴性的120份标本中前S1的阳性率与HBV DNA差异无统计学意义;HBV DNA高拷贝组[1.0×(105~108)、1.0×(103~105)]前S1抗原的阳性率明显高于低拷贝组(<1.0×103)结论 前S1抗原、HBeAg与HBV DNA符合率较高,对无条件检测HBV DNA而HBe Ag阴性的血清,检测前S1抗原可起到提示病毒是否复制的补充作用.
作者:毛佳;王锦秀;王艳;刘霞 刊期: 2014年第06期
目的 探讨汉族儿童呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)毛细支气管炎肺表面活性蛋白D(surfactant protein D,SP-D)基因多态性与甲强龙治疗疗效的关系.方法 采用MGB测序法检测150例RSV毛细支气管炎和150例健康对照组SP-D-11位点、160位点基因多态性,并进行基因型、等位基因型频率分析,分析基因多态性和毛细支气管炎发病的关系,采用(x2)检验.150例患儿在常规治疗基础上加用甲强龙静脉滴注,连用3d.分析SP-D基因多态性对甲强龙治疗疗效的影响,采用方差(F)分析.结果 病例组SP-D Met11Thr位点TT、CT、CC三种基因型频率分别为7.3%、44.0%、48.7%,T、C等位基因频率分别为29.3%、70.7%.三种基因型及等位基因频率与对照组比较差异有统计学意义(x2 =6.751、5.823,P<0.05).SP-D Ala160Thr位点AA、GA、GG三种基因型频率分别为4.0%、29.3%、66.7%,A、G等位基因频率分别为18.7%、71.3%,两组基因型及等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(x2 =0.182、0.181,P>0.05).不同基因型在平均住院天数、临床症状改善差异均无统计学意义(P>0.05).结论 杭州地区汉族儿童存在SP-D基因多态性,SP-DMet1 1Thr位点与RSV毛细支气管炎疾病易感性存在关联,SP-D Met11Thr C等位基因可能易感基因;而SP-D Ala160Thr位点与RSV毛细支气管炎疾病易感性无关联.SP-DMet1 1Thr、SP-D Ala160Thr的多态性并不影响甲强龙治疗的疗效.
作者:朱亚非;方妍彤;梁振明;王立;王晓芳;王晓安;李珊;何宝琴 刊期: 2014年第06期
目的 探讨肾移植围手术期检测CMV-PP65抗原的临床意义.方法 选取我院肾移植患者100例,调查统计全部患者围手术期CMV-PP65抗原及抗CMV-IgM抗体检测结果,比较两项检测指标的敏感性及特异性.结果 CMV-PP65抗原检测的敏感性明显高于抗CMV-IgM抗体检测,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);两种检测方法的特异性无统计学意义(P>0.05),但是CMV-PP65抗原检测出现阳性结果的平均时间明显小于抗CMV-IgM抗体检测出现阳性结果的平均时间,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 肾移植患者围手术期检测CMV-PP65抗原对于早期诊断CMV病具有较高的敏感性,对肾移植术后CMV病的诊断和早期抗病毒治疗具有重要的临床意义,值得推广应用.
作者:朱建锋;卢勤红 刊期: 2014年第06期
目的 探讨并比较用不同原理的尿液有形成分全自动分析仪进行尿液定量检测与非离心镜检计数的关系.方法 采用UF-500i全自动尿液有形成分分析仪、AVE-764全自动尿有形成分镜检分析仪和人工显微镜检查分别测定我院522份住院患者的尿液中的有形成分,比较尿液有形成分定量分析方法之间的差异.结果 以标准显微镜检查法为标准,UF-500i全自动尿液有形成分分析仪和AVE-764全自动尿有形成分镜检分析仪对尿液中有形成分的测定结果与显微镜法的测定结果间差异无统计学意义(P>0.05).以红细胞超过25个/μl、白细胞超过30个/μl,管型超过1个/μl和上皮细胞超过15个/μl为阳性界值,3种方法检测红细胞的完全符合率为68.8%,白细胞为80.4%,管型为75.3%,上皮细胞为56.1%.AVE-764测红细胞的特异性和敏感性为92.9%、84.1%,白细胞为88.2%、83.1%,管型为91.6%、75.4%,上皮细胞为48.4%、76.8%.UF-500i测红细胞的特异性和敏感性为74.1%、75.3%,白细胞为89.9%、82.5%,管型为85.4%、61%,上皮细胞为90%、87.6%.结论 UF-500i和AVE-764全自动尿有形成分分析仪对尿液中有形成分的定量计数与标准的人工显微镜检查的符合率高,比较能够满足临床的需求.
作者:王刚;张延京;李世亮 刊期: 2014年第06期
目的 探讨黏液瘤病毒对裸鼠皮下移植子宫内膜癌的抑瘤作用及其可能机制.方法 采用皮下注射子宫内膜癌HEC-IB细胞的方法建立裸鼠子宫内膜癌模型.瘤内注射黏液瘤病毒后,观察肿瘤生长变化,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中PI3K、Akt、GSK表达水平及活性的变化.同时通过瘤内注射灭活病毒和生理盐水作为对照组.结果 黏液瘤病毒对正常裸鼠不存在毒性及致病能力.黏液瘤处理组肿瘤大小较对照组缩小,差异具有统计学意义.经黏液瘤病毒处理的肿瘤组织中PI3K、Akt的表达水平较对照组显著降低.结论 黏液瘤病毒对裸鼠子宫内膜癌移植瘤具有抑瘤作用,其可能机制是通过调节PI3K/AKT(磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸激酶)信号通路调控细胞凋亡.
作者:周芸;许可可;郭蓉;黄敏;孙红杰 刊期: 2014年第06期
目的 研究广东地区慢性丙型肝炎患者(CHC)白细胞介素28B(IL28B)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的分布特点及其与抗病毒疗效之间的关系,为合理选择经济有效的个体化抗病毒治疗方案提供依据,提高CHC的治疗应答率.方法 对74例CHC患者给予聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)联合利巴韦林(RBV)抗病毒治疗,疗程48周或72周,停药后随访24周.通过PCR测序,检测所有患者的IL28B(rs8099917、rs12979860、rs12980275)位点SNP,以快速病毒学应答率(RVR)及持续病毒学应答率(SVR)作为疗效的主要评价指标,比较IL28B不同基因型与抗病毒疗效的关系,评估IL28 BSNP在CHC患者治疗应答中的作用.结果 74例患者中,rs8099917位点基因型为TT、TG、GG各63(85.1%)、11(14.9%)、0(0%)例,rs12979860位点基因型为CC、CT、TT各60(81.1%)、14(18.9%)、0(0%)例,rs12980275位点基因型为AA、AG、GG各57 (77.0%)、17(23.0%)、0(0%)例.对HCV 1型患者,上述三个位点中仅rs12979860 CC型与SVR有关,结果有统计学差异(SVR组vs NonSVR组,88.4% vs 58.3%,P<0.05);对非HCV1型患者,rs8099917、rs12979860、rs12980275三个位点与RVR和SVR无关,结果无统计学差异(P>0.05).结论 广东地区CHC患者IL28B基因rs8099917、rs12979860、rs12980275位点分别以TT、CC、AA为主;对于HCV 1型CHC患者,rs12979860位点的基因型可以作为治疗前SVR的一个重要预测因子.
作者:郭凤霞;张霞意;兰芸;李剑萍;陈彬彬;关玉娟 刊期: 2014年第06期
目的 探讨磁珠法提取核酸检测丙肝病毒RNA载量的方法学评价及其临床应用.方法 采用精密度、检测下限、线性分析和干扰实验对磁珠法提取核酸进行方法学评价,采用磁珠法和柱抽提法对283份标本进行检测,进行相关性分析.结果 磁珠法的高值质控血清的批内精密度为6.64±0.11,CV为1.65%,批间精密度为6.68±0.14,CV为2.09%;低值质控血清的批内精密度为4.60±0.12,CV为2.66%,批间精密度为4.56±0.19,CV为4.10%;检测下限为用磁珠法检测20份500IU/L HCV血清标本,20份标本均扩增出曲线,阳性率为100%(20/20).磁珠法线性评估结果呈明显线性,相关系数r=0.999,P<0.05,回归方程y=0.982x+ 0.092.磁珠法和柱抽提法提取核酸检测HCV-RNA载量的比较,磁珠法与柱抽提法的相关系数r=0.990,P<0.05,回归方程y=0.965x +0.247.结论 磁珠法提取核酸检测丙肝病毒RNA载量的方法具有较高的特异性和灵敏度,较强的抗干扰能力,且方法简便易于自动化操作,是理想的实验室核酸提取方法.
作者:刘萍;张坚磊;刘晔华;王欣;穆红 刊期: 2014年第06期