曹玉玺；付士红；田兆丰；何英；王焕琴；王环宇；杨红梅；涛波；梁国栋
目的 探讨宫颈透明细胞癌中高危型HPV感染情况.方法 提取1例37岁宫颈透明细胞癌患者手术切除组织蜡块中的DNA,通过巢式PCR方法检测其中HPV感染情况.结果 该患者肿瘤切除组织高危型HPV18型阳性.结论 利用巢式PCR方法分型检测宫颈透明细胞癌中的高危型HPV型别,其准确性及敏感性均较高.
作者：郭一帆；刘爱军；王晓莉；吴晓舟；宋磊；刘宏图 刊期： 2009年第02期
目的 制备人微管相关蛋白tau N端的外显子2和外显子3特异性多克隆抗体.方法 从人外周血DNA中获得tau蛋白外显子2及外显子3序列并连接至原核表达载体pGEX-2T,表达纯化重组融合蛋白GST-E2、GST-E3;以此融合蛋白免疫家兔及小鼠制备抗血清,通过ProteinG/A、偶联GST蛋白的溴化氰(CNBr)活化柱对抗血清进行亲和纯化;用Western Blot及ELISA方法确定所制备抗体的特异性和敏感性.结果 在大肠埃希菌中表达纯化出人tau外显子2和外显子3重组融合蛋白GST-E2和GST-E3,相对分子质量为29×103.免疫实验动物后获得抗血清,经系列纯化后Western Blot和ELISA检测显示,制备的抗人tau蛋白外显子2和外显子3抗体具有良好的特异性和免疫反应效价.结论 成功制备了4种人tau外显子2和外显子3特异性抗体,为进行tau蛋白在神经退行性疾病中的作用研究提供了基础.
作者：陈操；王桂荣；石琦；张宝云；梅国勇；李媛；王新；周瑞敏；韩俊；赵玉军；董小平 刊期： 2009年第02期
本研究用胶体金法、酶免疫吸附试验两种方法检测A组轮状病毒,并对其结果进行分析与比较.现报道如下.
作者：严寒秋；章青；崔淑娴；段招军 刊期： 2009年第02期
关于登革病毒及其感染的研究迄今还有很多尚未解决的问题,利用反向遗传学技术(reverse genetic8 approache8)对登革病毒进行研究是目前的热点.本文将就近年来反向遗传技术在登革病毒研究中的研究进展进行综述.
作者：韦艳；李德新 刊期： 2009年第02期
过去的2008年是很不平常的一年.年度的诺贝尔生理/医学奖颁发给了两个病毒领域,它们是人乳头瘤病毒(HPV)和人体免疫缺陷病毒(HIV).这一举动显示出,人们已经更加深刻认识到病毒在某些疾病致病机制中的重大意义.在诺奖的历史上,虽然上世纪60～70年代有多次诺奖与病毒有关,然而与某种具体病毒直接相关的诺奖只有2次3个病毒,即1997年的朊病毒和此次2008年的HPV和HIV.
作者：刘宏图 刊期： 2009年第02期
目的 探讨慢性丙型肝炎(慢丙肝)患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与病变程度、病毒学指标、抗病毒治疗应答效果之间的相关性.方法 102例慢丙肝和30例健康对照检测血清TNF-α水平,慢丙肝按肝功实验室检查异常程度分为轻度44例、中度34例、重度24例,慢丙肝进行血肝功能检测、HCV RNA载量、HCV基因型的检测.结果 血清TNF-α水平慢丙肝患者高于健康对照;肝功能异常轻度者低于中度和重度;与CHE呈正相关;与DBIL呈负相关;与HCV RNA载量无相关性;在不同HCV基因型感染者间差异无统计学意义;与干扰素-α治疗疗效无关.结论 慢丙肝患者血清TNF-α水平高于健康对照组,并与病变程度相关,与干扰素-α治疗疗效无关.
作者：任翊；段忠辉；孟庆华；李卓；李娟 刊期： 2009年第02期
人类乳头状瘤病毒(Human papilomavirus,HPV)是一种致瘤性DNA病毒,具有显著的嗜上皮细胞特性,主要存在于会阴部、尿道、皮肤、喉部、气管及支气管和口腔黏膜.目前已知的HPV型别有100多种,研究发现大约有25型HPV与头颈部肿瘤有关.HPV被公认为一种肿瘤相关病毒,但过往的研究重点放在了HPV与宫颈癌的关系上.近年来,HPV感染与头颈部肿瘤的相关性引起了各国研究者的关注,尤其是与头颈部恶性肿瘤的相关性,但两者相关程度尚未确定.
作者：樊慧峰；谢正德；申昆玲 刊期： 2009年第02期
目的 探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与我国河北省保定地区食管癌发生的相关性.方法 应用HPV LI通用引物GP5+,6+、HPV16 E6和HPV18 E6型特异性引物多聚酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR),检测保定地区食管癌组织中HPV存在状况.结果 42例食管癌组织中,37例检测到HPV阳性,阳性率为88.1%;其中19例检测到HPV16 E6基因,阳性率为45.2%,8例为HPV18 E6基因阳性,阳性率为19.0%,5例HPV16 E6和18 E6基因均阳性,为混合感染.结论 我国河北省保定地区食管癌组织中有HPV存在,并且HPV感染可能是食管癌发生的重要影响因子.
作者：赵晓瑜；李淑英；李颖；王晓莉；李玉兰；吴晓舟；周玲；刘宏图；曾毅 刊期： 2009年第02期
目的 鉴定内蒙古通辽市分离的虫媒病毒.方法 使用血清学及分子生物学方法鉴定内蒙古蚊虫标本分离的病毒,对毒株的部分核苷酸序列进行测定,应用Clustal X软件做碱基配对分析,MEGA软件完成病毒进化分析,DNAStar软件包中的MegAlign完成核苷酸和氨基酸同源性分析.结果 在内蒙古通辽市采集凶小库蚊标本分离的病毒经过血清学和分子生物学实验鉴定为版纳病毒(Banna virus,BAV),与版纳病毒部分中国分离株位于同一进化分支中,病毒第12片段核苷酸同源性为89.6%～98.4%,氨基酸同源性为90.4%～98.6%.结论 在内蒙古凶小库蚊标本中分离到版纳病毒.
作者：曹玉玺；付士红；田兆丰；何英；王焕琴；王环宇；杨红梅；涛波；梁国栋 刊期： 2009年第02期
目的 构建包含H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗并探讨其免疫效果.方法 用Admax系统构建包含H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗,并用PCR、Western-Blot等方法对重组病毒疫苗进行鉴定;疫苗免疫小鼠后,通过HI实验和ELISPOT实验检测其体液免疫和细胞免疫反应,评价其免疫效果.结果 成功得到了含有H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗;基因表达鉴定表明,HA基因能够在细胞中进行表达;血凝抑制实验结果显示小鼠产生的针对HA抗体滴度在1:320和1:640之间;ELISPOT结果显示实验组和对照组(PBS)相比斑点数量差异有统计学意义(P<0.05),以上免疫结果表明重组腺病毒载体疫苗可以诱导小鼠产生良好的特异性体液和细胞免疫反应.结论 含H5NA-HA的重组腺病毒疫苗可以诱导小鼠产生良好的免疫反应,为研制人禽流感疫苗打下基础.
作者：张晓光；李魁彪；马晶；王乃福；张晓梅；桑云虎；董婕；徐红；曾毅 刊期： 2009年第02期
目的 对北京15例宫颈癌病变组织中的人乳头瘤病毒(HPV)16型E6和E7基因进行扩增及序列测定,分析E6和E7基因突变特征,并探讨宫颈癌病变中HPV16的感染情况.方法 自行设计HPVl6型E6和E7基因扩增引物,采用PCR法扩增15例宫颈癌组织中HPV16 E6和E7片段,将PCR产物克隆到TA载体,进行序列测定.通过Sequencer、Bioedit、Mega等生物学软件对E6和E7基因进行核苷酸和氨基酸序列分析.结果 15例宫颈癌中8例鳞癌检出E6和E7基因,检出率为8/15.2例腺癌、1例腺鳞癌和其他4例鳞癌中均未检出HPV16 E6E7 DNA.8例鳞癌中的4例检出的HPVl6为亚洲类似株,在E6基因178位(T→G,D25E)和E7基因647位(A→G,N29S)发生突变;另外4例为欧洲类似株,其中1例(BJ16)的HPV16在E6基因335位点发生突变(C→T,H78Y).结论 HPV16是致宫颈癌的重要因素;宫颈鳞状细胞癌HPV16感染的发生频率较腺癌和腺鳞癌高;E6基因178位点可能是区分亚洲株和欧洲株的重要位点;E6基因178位点和E7基因647位点是突变频率较高的位点,可能导致HPV16致癌能力发生改变.
作者：任茁；吴宏伟；宋杰 刊期： 2009年第02期
目的 了解广州市体检人群脂肪肝的患病率,探讨脂肪肝与HBV感染、高指血症及ALT导常的关系.方法 回顾性对在中山大学附属第三医院健康体检的4365名人员的临床资料进行分析.结果 4365名体栓者中,共检出脂肪肝793例,脂肪肝患病率18.2%脂肪肝组,男性440例,患病率19.2%,女性353例,患病率17.1%男女患病率差别无统计学意义(P=0.07).乙型肝炎病毒感染人群的脂肪遥远患病率为16.7%,低于非感染人群的18.3%,两者差民无统计学意义,P=0.45. 高脂血症组的脂肪肝患病率为42.1%,显著高于血脂政党组的11.6%,P<0.05.脂肪肝组的ALT异常率为32.5%,显著高于非脂肪肝组的8.6%,P<0.05.结论 广州地区人群中男女的脂肪肝患病率无显著差异.脂肪肝与乙型肝炎病素感染无关,但与年龄、高脂血症密切相关,容易引起ALT升高.
作者：徐启桓；揭育胜；舒欣；陈禄彪；曹红；李刚 刊期： 2009年第02期
目的 了解2005年中国广东、黑龙江、新疆和云南四省、区1～5岁年龄儿童中的柯萨奇病毒A组16型(CVA16)抗体水平,为防控CVA16引起的手足口病的流行提供科学依据.方法 随机挑取上述四省、区2005年1～5岁年龄儿童血清503份进行CVA16的微量中和实验.结果 CVA16抗体阳性率在广东、黑龙江、新疆和云南分别为41.90%、9.40%、40.00%和34.40%.平均抗体滴度(GMT)均较低(平均为1:6.1),广东、黑龙江和云南各省内各年龄组间GMT差异无统计学意义(F值分别为0.97、0.40、1.06,P均>0.05),而四省、区间比较,黑龙江与其他三个省、区GMT差异有统计学意义(F=10.61,P<0.00).结论 2005年或以前CVA16已经在四省、区存在局部流行,但是不同省、区间的CVA16流行传播范围和程度不相同;1～5岁年龄段儿童是CVA16的易感人群.
作者：杨朝辉；祝双利；朱晖；安洪秋；毛乃颖；姬奕昕；郭学斌；尹少甫；张宗久；许文波 刊期： 2009年第02期
目的 探讨浙江沿海脊髓小脑性共济失调的基因突变检测与临床表现.方法 对该家系18例患者的临床表现、头颅MRI等辅助检查资料分析,并与10名家系中未发病成员及12名非血缘的健康人进行SCA31MJD基因CAG三核苷酸重复数目比较.结果 家系18例患者均为SCA3/MJD型,同时检测出家系中未发病对照组有2例为SCA31MJD型基因携带者.产物测序结果家系对照组与健康对照组CAG重复数为14～27次;SCA患者CAG重复数为67～82次;SCA3/MJD携带者CAG重复数为28～45次.在现存三代18例患者中,每代均有患者,男女均受累,起病年龄平均38岁,以行走不稳、动作笨拙和言语含糊为突出表现,MRI检测结果小脑、脑干明显萎缩.结论 在我国沿海存在SCA3/MJD家系遗传.临床均以共济失调和构音障碍为突出,CAG重复数目检测可为基因诊断和症状前诊断提供依据.
作者：金友雨；曾爱平；蔡海波；吴锋；冯忠；洪庆；章立；江志开 刊期： 2009年第02期
目的 制备HIV-1 C亚型Gp120蛋白及其抗体.方法 用PCR技术从表达C亚型HIV-1全长gp16O基因的质粒上扩增gP120基因羧基末端部分片段,其长度为612个核苷酸,编码204个氨基酸.将测序鉴定正确的gp120基因片段克隆到原核表达载体pET-30a上,以包涵体的形式在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,Gp120蛋白C端融合6×His标签便于纯化.将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备C亚型Gp120特异性兔多克隆抗体,用间接ELISA法测定抗体滴度,并用Western Blot方法验证该抗体是否可识别在哺乳动物细胞内表达的C亚型Gp160蛋白.结果 成功地获得高纯度的C亚型Gp120融合蛋白,用其制备的多克隆抗体滴度可达1:204 800,该抗体可特异性识别在COS-1细胞中瞬时表达的C亚型Gp160蛋白.结论 获得了高纯度的C亚型Gp120融合蛋白及其高效价的抗体.
作者：杨海儒；冯霞；余双庆；张晓光；张晓梅；陈国敏；李泽琳；曾毅 刊期： 2009年第02期
目的 探讨血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)检测在HBeAg阴性慢性乙型肝炎中的诊断价值和临床意义.方法 分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和实时荧光定量PCR法检测306份慢性乙型肝炎患者血清中HBV.M、HBV-LP和HBV.DNA.结果 (1)在未经过抗病毒治疗的患者中,HBV-LP阳性率和HBV DNA无明显差异,而且HBV-LP的吸光度(A值)和HBV DNA拷贝数呈正相关性;(2)在经过抗病毒治疗的患者中HBV-LP的阳性率明显高于HBV DNA.结论 血清中乙型肝炎病毒大蛋白水平能反映HBV感染者体内HBV复制程度,对于判断HBeAg阴性患者体内复制具有重要的临床意义.
作者：施前锋；王叶萍 刊期： 2009年第02期
目的 探讨临床诊断为轻度慢性乙型肝炎患者的肝组织病理学特点及其肝穿刺活检的重要意义.方法 选择156例轻度慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺活检及肝组织病理学检查,对临床诊断与病理诊断的结果进行对比分析.结果 经病理诊断为轻度慢性乙型肝炎者为105例,临床诊断与之的符合率为67.3%(105/156),中度28例(18.0%)、重度3例(1.9%)、肝硬化20例(12.8%);另外,肝组织炎症分级为G3～4者共48例(30.8%),纤维化分期为S3～4者共39例(25.0%);病理诊断为轻度慢性乙型肝炎与非轻度者之间的ALT、AST、Tbil和ALB水平差异无统计学意义.结论 对于临床诊断轻度慢性乙型肝炎患者好行肝脏穿刺活检,以便更好指导诊断和抗病毒治疗.
作者：陈禄彪；黄海辉；舒欣；徐启桓；陈旎；张卡；李刚 刊期： 2009年第02期
目的 对一株致婴儿死亡的腺病毒Ad7d2的基因特点进行分析.方法 对2006年北京儿童医院1名住院儿童(治疗过程中死亡)的鼻咽分泌物进行病毒分离,对病毒核酸进行六邻体和纤维部分BJ060316-1,经PCR扩增以及序列测定和分析确定为腺病毒Acr7d2.结果 对其六邻体和纤维基因进一步分析发现BJ060316-1与Ad7d2同源性高,六邻体基因950 bp片段与以色列1993年分离株Ad7d2原型株AF321311核苷酸同源性为99.5%,对推断的氨基酸序列比对发现,BJ060316.1在253位缺失了谷氨酰氨,而在495位的丝氨酸被精氨酸代替.扩增的975 bp纤维基因片段与日本2005年Ad7分离株AB243118核苷酸同源性为99.7%.结论 腺病毒Ad7d2分离株BJ060316-1未发现毒力位点突变.
作者：唐浏英；刘秀云；许文波 刊期： 2009年第02期
目的 探讨人乳头瘤病毒(Human papiuomavirus,HPV)与我国食管癌发生的相关性.方法 汇总了国内有关HPV与食管癌相关的论文,选择采用PCR方法检测的论文对发表的数据进行Meta分析.结果 我们以检测方法为PCR、标本为石蜡包埋标本、论文中列出或提示了引物序列的15篇论文作为入选论文.15篇文献涉及蜡块标本共980份,按照只要检出一个HPV型别即为HPV阳性进行计算,检出阳性例数为460例,各地HPV检出率为8.3%～69.8%,HPV平均检出率为46.9%(95%CI:43.8%～50.0%).在以上980份样品中,检测范围包括了HPV16型的样品有556份,阳性份数为139份,各地检出率为4.4%～63.4%,平均检出率为25.0%(95%CI:21.4%～28.6%);检测范围包括HPV18型的样本有485份,阳性份数为33份,各地检出率为0%～19.0%,HPV18型的平均检出率为6.8%(95%CI:4.6%～9.0%).以上15篇论文中,使用同一引物的文献只有4篇,共检测406份石蜡包埋标本,HPV阳性率为20.3%～67.6%,平均检出率为40.2%(95%17 CI:36.0%～45.4%).结论 我国食管癌组织中有HPV存在,并且HPV感染可能食管癌发生的重要病因.
作者：李淑英；李颖；沈立萍；吴晓舟；赵晓瑜；周玲；刘宏图；曾毅 刊期： 2009年第02期
目的 在腹泻住院患儿粪便标本中检测人双埃可病毒(HPeV),探讨HPeV与婴幼儿重症腹泻之间的联系.方法 通过Real-time PCR直接从<5岁未知病原住院腹泻患儿粪便标本中检测HPeV,进而通过基于VP3/VP1连接区的巢式PCR扩增片段的测序结果进行分型.结果 99份腹泻粪便标本,HPeV阳性24例(24%),其中,以HPeV1为主(50%),其次为HPeV3(25%),HPeV4(8.3%),HPeV6(4.2%),还有3例HPeV阳性标本未能分型,未检测到HPeV2、5、7、8.HPeV感染的住院腹泻患儿主要为<1岁患儿.HPeV感染高峰为秋冬季节,10月达到峰值.VP3/VP1连接区基因与已知HPeV的病因构成及深入了解HPeV的病原学及流行病学特点有重要意义.
作者：张栋梁；章青；李丹地；程卫霞；徐子乾；靳淼；虞结梅；朱琳；崔淑娴；李佩珍；段招军 刊期： 2009年第02期
中华实验和临床病毒学杂志
主管:实验和临床病毒学杂志
主办：中国科学技术协会
