学术投稿

用体外致敏的鼻咽癌患者B细胞构建全人源噬菌体单链抗体库

赵艳;李跃辉;黄建;李官成

关键词:鼻咽肿瘤, B淋巴细胞, 细菌噬菌体, 肽库
摘要:目的 构建全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体库,为筛选鼻咽癌相关抗原的抗体奠定基础.方法 采用体外致敏与EB病毒(EBV)转化鼻咽癌患者的外周血单个核细胞(PBMC),提取总RNA,用RT-PCR技术扩增人抗体重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,用编码(Gly4Ser)3的互补序列连接成单链抗体ScFv基因(VH-linker-VL),并克隆到噬菌粒载体FUSE5,转化大肠杆菌MC1061,构建噬菌体呈现型ScFv库.结果 成功地构建了全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体库,库容量为6.5×107,约100%的噬菌体基因中有ScFv基因的插入.结论 联合应用体外致敏和EBV转化及噬菌体呈现技术构建全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体库是可行的,这为进一步筛选鼻咽癌相关抗原的抗体奠定了基础.
中国医师杂志相关文献
  • 组织坏死性淋巴结炎的诊治进展

    组织坏死性淋巴结炎(HNL)首先于1972年由日本Kikuchi和Fujimoto报道,故又称Kikuchi-Fujimoto病或Kikuchi病,是一种病因不明的非肿瘤性、非特异性淋巴结肿大的自限性免疫性疾病,多见于小儿、中青年患者,尤以后者为甚,以顽固性发热、区域性淋巴结肿大和白细胞减少为特征,抗生素治疗无效,对糖皮质激素敏感.

    作者:宋广军;孙焱;魏来 刊期: 2008年第01期

  • 67例肺部疾病患儿支气管肺泡灌洗液检测

    目的 分析哮喘、慢性咳嗽及婴幼儿喘息患者支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞学特点,探讨其对儿科肺部疾病诊治的作用.方法 本院的住院和门诊患儿67例,分为哮喘组(24例)、慢性咳嗽(19例)和婴幼儿喘息组(24例),行纤维支气管镜进行肺泡灌洗,并对灌洗液细胞学分析.结果 哮喘患儿支气管肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞为2.7%(0.12~7.0)%,上皮细胞为3.0%(0.7~12.0)%,有升高;婴幼儿喘息组中性粒细胞明显增多;在婴幼喘息组中有特应征患儿BALF嗜酸性粒细胞为2.8%(0.5~5.1)%,上皮细胞为2.8%(1.5~4.2)%与组内无特征患儿相比明显增高,差异有统计学意义;在慢性咳嗽患儿中嗜酸性粒细胞为0.2%(0~4.2)%,17例均在1%以下,但有2例嗜酸性粒细胞异常增多,为4%和4.2%.结论 哮喘患儿支气管肺泡灌洗液以嗜酸性粒细胞和上皮细胞明显增多为其特征性改变;婴幼儿喘息者以中性粒细胞增多为主,考虑其大多数为感染诱发,而其中有特应征患儿嗜酸性粒细胞比例高于无特应征者,这部分患儿有转为哮喘的可能,应积极给与干预治疗;有的慢性咳嗽患儿中嗜酸性粒细胞异常增多,应进一步完善过敏原检查,BALF有助于其病因诊断.

    作者:郭纯;钟礼立;李云;黄寒 刊期: 2008年第01期

  • 罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠胰腺组织NF-κB及MCP-1表达的抑制作用

    目的 观察罗格列酮对高脂饮食诱导的实验性胰岛素抵抗大鼠胰腺组织NF-κB和MCP-1的表达水平的影响,从而探讨罗格列酮的抗炎机制.方法 将34只清洁级近交系雄性SD大鼠分为正常对照组(NC组,10只),单纯高脂喂养组(HF组,12只),高脂饮食+罗格列酮干预组(HFR组,12只).17周后,应用Western印迹方法检测肾组织NF-κB p65的含量;免疫组化SP法检测MCP-1的表达.结果 与A组相比,HF组及HFR组NF-κB在肾脏组织的含量均明增高,且差异有统计学意义(P<0.01).与HF组相比,罗格列酮处理后,NF-κB的表达明显下调(P<0.01).MCP-1在各组的表达的变化与NF-κB的趋势相同.结论 高脂饮食可诱导正常大鼠NF-κB以及其下游的分子MCP-1在胰腺中的高表达,罗格列酮可减少NF-κB和MCP-1的高表达,提示抗炎治疗对延缓糖尿病的发展有一定的作用.

    作者:谢英才;黄贵心;周和超 刊期: 2008年第01期

  • 盐酸氯普鲁卡因混合甲磺酸罗哌卡因硬膜外阻滞用于剖宫产的效果观察

    目的 盐酸氯普鲁卡因混合甲磺酸罗哌卡因卡因用于硬膜外麻醉剖宫产的阻滞效果.方法 采用随机双盲法将120例择期剖宫产手术的产妇分为两组:2.5%盐酸氯普鲁卡因(A组)、1.5%盐酸氯普鲁卡因和0.595%甲磺酸罗哌卡因混合液(B组)各60例,记录硬膜外腔给药后各组产妇的麻醉效果、术后PCIA效果及不良反应.结果 B组麻醉效果、术后PCIA效果都优于A组,差异有统计学意义,不良反应2组比较差异有统计学意义.结论 1.5%盐酸氯普鲁卡因和0.595%甲磺酸罗哌卡因混合液硬膜外麻醉用于剖宫产可起到互补作用,对母婴都较安全.

    作者:朱慧莉 刊期: 2008年第01期

  • 急性脑外伤组织双向凝胶电泳分析

    目的 利用蛋白质组学方法,寻找急性脑外伤组织的特异蛋白质.方法 提取脑外伤患者伤灶组织及正常组织的总蛋白质,通过双向凝胶电泳分离蛋白质,经生物质谱鉴定由图像分析软件所得出的具有表达差异的蛋白质点.结果 2组蛋白斑点总体分布相似,主要分布在等电点pI3-8,分子量Mr 14.4-75 kD,分析发现脑外伤组与正常组相比,有18个蛋白质上调和20个蛋白质下调,进一步质谱鉴定,其中7个蛋白质分别为NSFL1辅助因子、硫氧还蛋白、泛素羧基末端水解酶同工酶L1、血小板活化因子乙酰基水解酶IB-r亚单位、谷氨酸脱氢酶前体、二氢嘧啶酶相关蛋白2和微管蛋白.结论 脑外伤组与正常组相比蛋白质的表达具有差异.推测,这些蛋白质的变化可能与脑外伤的发展变化具有密切的关系.

    作者:李臻琰;钟广伟;王君宇;奚健;李炜;王素娥 刊期: 2008年第01期

  • 氟伐他汀对肺纤维化大鼠ERK信号通路的影响

    目的 观察ERK酶在博莱霉素致肺纤维化大鼠模型中的表达及活化,以及氟伐他汀对肺纤维化大鼠ERK信号通路的影响.方法 60只Wistar大鼠分成给药组、模型组和对照组,每组20只,于第7,14,28和42天每组处死5只,采用HE染色和Masson染色观察组织形态学的变化,采用免疫组化和免疫印迹Western blot蛋白定量的方法分析TGF-β1、ERK1/2,p-ERK在肺组织中的表达.结果 模型组大鼠肺组织中的TGF-β1、ERK1/2,p-ERK的表达明显高于同期时照组,各时间段中以第7天表达强.给药组的表达低于同期模型组,以第7和14天明显.结论 氟伐他汀能在一定程度上阻止大鼠肺纤维化的发生和发展,其机制同抑制ERK1/2的表达及活性有关.

    作者:徐芳;徐启勇;叶燕青 刊期: 2008年第01期

  • 锥颅血肿抽吸术治疗高血压性脑出血的疗效分析

    目的 观察锥颅血肿抽吸术治疗高血压性脑出血的临床疗效.方法 对血肿量20~100 ml的62例患者分成2组,治疗组28例,采用锥颅血肿抽吸术治疗,对照组34例.结果 随访半年,治疗组治愈率(85.7%)高于对照组(58.8%),而死亡率(14.3%)低于对照组(41.2%),其差异均有统计学意义( χ2=5.39,P<0.05).结论 锥颅血肿抽吸术的临床疗效明显优于内科保守治疗,为高血压性脑出血的一种有效的治疗方法.

    作者:石炎川;陈跃鸿 刊期: 2008年第01期

  • 用体外致敏的鼻咽癌患者B细胞构建全人源噬菌体单链抗体库

    目的 构建全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体库,为筛选鼻咽癌相关抗原的抗体奠定基础.方法 采用体外致敏与EB病毒(EBV)转化鼻咽癌患者的外周血单个核细胞(PBMC),提取总RNA,用RT-PCR技术扩增人抗体重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,用编码(Gly4Ser)3的互补序列连接成单链抗体ScFv基因(VH-linker-VL),并克隆到噬菌粒载体FUSE5,转化大肠杆菌MC1061,构建噬菌体呈现型ScFv库.结果 成功地构建了全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体库,库容量为6.5×107,约100%的噬菌体基因中有ScFv基因的插入.结论 联合应用体外致敏和EBV转化及噬菌体呈现技术构建全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体库是可行的,这为进一步筛选鼻咽癌相关抗原的抗体奠定了基础.

    作者:赵艳;李跃辉;黄建;李官成 刊期: 2008年第01期

  • 梭形细胞型脂肪肉瘤的临床病理分析(附3例报道)

    目的 探讨梭形细胞脂肪肉塘的临床病理特征、诊断及鉴别诊断要点.方法 对3例梭行细胞脂肪肉瘤进行光镜、免疫组化检测并结合临床病理特征进行分析.结果 肿瘤多见于成人,位于肩胛及上臂皮下组织,光镜下表现为神经样梭行细胞排列成旋涡状或束状,一些成熟的脂肪细胞中散在大小不一的核深染的非典型细胞.免疫组化示梭形胞Vimentin阳性,S-100及MSA部分阳性,MBP、HMB45、Des阴性,脂肪细胞及核深染的不典型细胞S-100阳性.结论 梭形细胞脂肪肉瘤一种极其少见恶性肿瘤,但预后较好,形态学上应与神经鞘瘤、脂肪肉瘤伴肌肉瘤分化、黏液型的纤维肉瘤、恶性间质细胞瘤相鉴别.

    作者:李俊军;何艳 刊期: 2008年第01期

  • 替加色罗联合聚乙二醇4000治疗便秘型肠易激综合征的临床研究

    目的 观察替加色罗联合聚乙二醇4000治疗便秘型肠易激综合征的临床疗效.方法 将 102例患者随机分为3组,治疗组35例口服替加色罗加聚乙二醇4000,对照组33例口服替加色罗,34例口服聚乙二醇4000进行疗效对比,3组患者治疗前后均检查结肠转运时间.结果 治疗组总有效率97.1%,均优于其他2组(P<0.05).3组患者经治疗后结肠转运时间均较治疗前明显缩短.结论 替加色罗联合聚乙二醇4000治疗便秘型肠易激综合征优于单一应用替加色罗组或聚乙二醇4000,推测其机制可能与缩短结肠转运时间有关.

    作者:计春燕;刘浩;汪毅;谭诗云 刊期: 2008年第01期

  • 前列地尔脂微球载体制剂治疗30例突发性耳聋疗效观察

    目的 探讨前列地尔微球载体制剂(商品名:凯时)治疗突发性耳聋(突聋)的临床疗效.方法 收集本院2006年6月份以来诊治的60例突聋患者的资料,其中用凯时治疗的有30例,未使用凯时治疗的有30例,在保持2组均衡可比的基础上,对其治疗效果进行统计学分析比较.结果 凯时治疗组有效率86.7%,治愈率43.3%,对照组有效率63.3%,治愈率23.3%,前者疗效高于后者(χ2=4.356,P=0.037<0.05).结论 凯时是治疗突聋的有效药物,治疗中无明显副作用.

    作者:罗鹏 刊期: 2008年第01期

  • 喘息婴幼儿血清ECP、IgE和过敏原诊断的临床价值

    目的 探讨婴幼儿喘息性疾病血清IgE、ECP水平和过敏原检测在其诊断中的价值及与哮喘的关系.方法 对120例喘息婴幼儿进行血清IgE、嗜酸性阳离子蛋白(ECP),食物过敏原(fx5E)、吸入过敏原(phaditop)检测,并与正常对照组和儿童哮喘组进行对比分析.结果 反复喘息组血清IgE、ECP水平较毛细支气管炎组及对照组增高(P<0.05).其血清IgE水平低于儿童哮喘组(P<0.05);血清ECP水平与儿童哮喘组比差异无统计学意义(P>0.05).毛细支气管炎组血清IgE、ECP水平较对照组增高(P<0.05);但均低于反复喘息组和儿童哮喘组(P<0.05).fx5E以婴幼儿反复喘息组阳性率高(37.1%),较毛细支气管炎组、儿童哮喘组及对照组均增高(P<0.05).phaditop阳性率以儿童哮喘组高(70.0%);反复喘息组和毛细支气管炎组增高不及儿童哮喘组(P<0.05).结论 婴幼儿时期喘息≥2次的患儿,血清IgE、ECP水平增高,过敏原检测阳性率高,为高危哮喘儿.对哮喘儿预防干预具有指导意义.

    作者:饶花平;陈艳萍;孟艳妮;段效军 刊期: 2008年第01期

  • 凋亡抑制蛋白Livin在胃癌中的表达研究

    目的 探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白Livin表达情况及其与临床病理因素的关系.方法 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化法检测胃癌组织中Livinα、Livinβ的mRNA的表达.结果 45例胃癌组织中RT-PCR检测Livin表达阳性率为48.8%.免疫组化检测80例胃癌组织Livin表达阳性率为55%,两种方法在正常和癌旁组都未检出阳性结果;Livin的表达与组织分化和淋巴结转移有关,组织分化差,淋巴结转移者Livin表达率高(P<0.05).结论 Livin在胃癌组织中表达增高,可作为胃癌的分子标志物,可能成为胃癌诊断和治疗的新分子靶点.

    作者:汪志兵;张振玉;罗新华;王劲松 刊期: 2008年第01期

  • 实验性肺纤维化肺组织胶原形成与核因子κB活性变化

    目的 观察实验性肺纤维化大鼠肺组织胶原形成与NF-κB活性变化,初步探讨NF-κB活性变化与肺组织胶原合成的关系.方法 用SD雄性大鼠一次性气管内注入博来霉素(BLM)(5 mg/kg体重)复制肺纤维化模型,对照组气管内注入生理盐水,于第1、7、14、21、28天处死,用羟脯氨酸含量测定法评估肺纤维化胶原形成程度.用HE染色结合NF-κB p65免疫组织化学方法观察肺组织NF-κB活性变化.结果 模型组大鼠肺组织自第1天开始即出现炎症细胞浸润,肺泡间隔增厚,自第7天开始肺组织出现胶原沉积,羟脯氨酸含量逐渐增高,于28 d达高峰.NF-κB p65蛋白表达自第1天增高,第7天达峰值,第14天回落,随着肺纤维化加重,第21天以后接近对照组水平.结论 肺组织NF-κB活化是肺纤维化过程中早期事件,可能在肺组织胶原沉积的形成中起重要作用.

    作者:王兴胜;崔社怀;杨雪梅;黄勇 刊期: 2008年第01期

  • BiPAP治疗重症肺炎致急性呼吸衰竭30例疗效观察

    目的 探讨无创双水平气道正压通气(BiPAP)治疗重症肺炎致急性呼吸衰竭(ARF)的疗效.方法 在常规治疗中,早期采用BiPAP呼吸机治疗重症肺炎致ARF 30例,观察治疗指标.结果 治疗前、后PaO2和SaO2分别为(48±4)mmHg、(69±10)mmHg和(82±3)%、(92±7)%,二者差异有统计学意义(P<0.05).气管插管率为23%(7/30),死亡率为10%(3/30).结论 早期、及时应用BiPAP呼吸机治疗重症肺炎致急性呼吸衰竭疗效较为肯定,可避免气管插管,有重要临床应用价值.

    作者:杜娟;左右;冯清洲;晏斌林;刘晅 刊期: 2008年第01期

  • 无防腐剂聚乙烯醇滴眼液治疗干眼的临床研究

    目的 评价国产无防腐剂聚乙烯醇(PVA)滴眼液治疗干眼的疗效和依从性.方法 治疗组19例19眼,对照组21例21眼,分别用国产无防腐剂PVA滴眼液和进口无防腐剂人工泪液点眼.结果 治疗组与对照组治疗14 d后各指标较治疗前均有改善(P<0.05);2组各指标在治疗前、治疗7 d和14 d时比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗依从性比较,2组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 国产无防腐剂PVA滴眼液可有效治疗干眼,其疗效及治疗依从性与进口同类产品相似.

    作者:梁凌毅;刘祖国;邹文进 刊期: 2008年第01期

  • 依达拉奉治疗急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的疗效观察

    目的 观察依达拉奉对急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的治疗作用.方法 选有昏迷史的62例急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者,随机分为2组,对照组(32例)予高压氧、脑细胞活化剂治疗,治疗组(30例)在对照组治疗的基础上加用依达拉奉,观察治疗效果.结果 2组之间的有效率差异有统计学意义(P<0.05).结论 选择有效的药物,及早应用高压氧和充足的疗程对DEACMP有显著的预防和治疗的措施.

    作者:欧阳晓春;余小骊;翁燕红;王水华 刊期: 2008年第01期

  • 恶性肿瘤致继发型贲门失驰缓症17例临床分析

    目的 探讨恶性肿瘤致继发型贲门失驰缓症的临床特征及诊断.方法 分析归纳17例恶性肿瘤致继发型贲门失驰缓症患者临床症状、体征、辅助检查资料,结合复习国内外相关文献.结果 17例患者平均年龄43.26岁,平均病程2.41月,平均体重减轻12.49 kg,与原发型贲门失驰缓症患者差异有统计学意义;患者均表现有吞咽困难,15例为首发症状,误诊率达82.3%,胃镜和上消化道钡餐检查与原发型患者有类似改变;原发病均为恶性肿瘤.结论 对年龄>30岁、病程短、病情进行性加重的贲门失弛缓症首诊患者,宜仔细全面检查.

    作者:周伏喜;刘德良;吴小平;霍继荣;凌奇荷 刊期: 2008年第01期

  • 持续皮下胰岛素输注对2型糖尿病并发急性心肌梗死预后影响的研究

    目的 探讨持续皮下胰岛素输注(CSⅡ)对2型糖尿病并发急性心肌梗死患者近期预后的影响.方法 将2型糖尿病并发急性心肌梗死患者随机分为2组,分别使用胰岛素泵持续皮下胰岛素输注(CSⅡ)组和每日多次皮下注射胰岛素(MSⅡ)组,并将2组治疗结果进行比较.结果 CSⅡ组比MSⅡ组血糖控制更理想,低血糖发生率减少,心脏严重事件发生率、院内感染率、死亡率明显减少.结论 CSⅡ治疗2型糖尿病并发急性心肌梗死安全有效,快速平稳地降低血糖,减少心脏严重事件的发生率及死亡率.

    作者:代凤莲;代建军;周静 刊期: 2008年第01期

  • 谷氨酰胺对创伤性脑损伤后肠黏膜屏障的影响

    目的 探讨谷氨酰胺对大鼠创伤性脑损伤后肠黏膜屏障的影响.方法 54只雄性Wistar成年大鼠分为对照组(N组,6只)、脑损伤组(T组,24只)及脑损伤后谷氨酰胺治疗组(G组,24只),T和G组按脑损伤后检测时间分为1、3、5、7 d组,6 只/组,应用组织病理和电镜观察肠黏膜结构的变化,并测定血浆内毒素水平,来评价肠黏膜屏障功能.结果 谷氨酰胺能减轻创伤性脑损伤后肠黏膜的病理损害,使血浆内毒素水平降低.结论 谷氨酰胺对创伤性脑损伤后肠黏膜屏障损害有一定的保护作用.

    作者:李鸣;杭春华;詹怀义;叶建平 刊期: 2008年第01期

中国医师杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华医学会 湖南省医学会