郝理;游盛中;马素华;张东川;罗斌;权力
目的 构建劳力型热射病大鼠模型,与居民型热射病大鼠模型比较.方法 雄性SPF级SD大鼠随机分为劳力型热射病组(E-HS)、居民型热射病组(C-HS)和相应的正常对照组(E-NC和C-NC组),每组16只.热射病组大鼠予39℃热暴露,E-HS组除了给予39℃热暴露外,同时让其在跑台持续运动.监测各组大鼠核心体温和动脉收缩压变化,对比核心体温调节反应和生存时间.结果 E-HS和C-HS组大鼠表现出不同的核心体温调节特征.尽管大核心体温差异无统计学意义,但是对比C-HS组大鼠,E-HS组大鼠核心体温上升速率显著加快(P<0.05),成模时间显著缩短(P<0.05),总热负荷和严重热负荷均显著减少(P<0.05),预后更差(P<0.05).结论 劳力型热射病大鼠模型相较与居民型热射病大鼠预后差,劳力型热射病大鼠模型的建立可为研究劳力型热射病的病理生理机制提供基础.
作者:帅军;郭进强;覃旻;罗炳德 刊期: 2014年第04期
目的 分析2009-2012年广州市黄埔区居民的主要死亡原因,了解居民健康状况,为制定疾病预防控制策略提供科学依据.方法 收集《国家疾病监测死因登记报告信息系统》中广州市黄埔区2009-2012年户籍居民死亡病例数据,采用描述流行病学方法、运用SPSS17.0软件进行统计分析,计算人群粗死亡率、标化死亡率、死因构成、平均期望寿命等指标.结果 广州市黄埔区2009-2012年居民平均死亡率476.37/10万(标化死亡率322.69/10万),其中男性平均死亡率为527.46/10万(标化死亡率401.98/10万),女性平均死亡率为417.43/10万(标化死亡率243.91/10万),两者比较差异有统计学意义(P<0.05).2009-2010年黄埔区居民平均期望寿命80.31岁,其中男性为78.57岁,女性为82.18岁.死亡率前5位的死因依次为恶性肿瘤、心脏病、呼吸系统疾病、脑血管病和诊断不明性疾病,占全死因构成的76.72%;死因监测三大类分析中慢性病占总死亡原因的79.52%.结论 黄埔区居民的死亡以慢性疾病为主,其中恶性肿瘤是危害居民健康的主要疾病和死因,对居民进行肿瘤防治知识普及、预防和干预是今后工作的重点.
作者:罗小华;刘嘉聪;黄昱;周焰华 刊期: 2014年第04期
目的 探讨孟鲁司特联合沙丁胺醇治疗咳嗽变异性哮喘患者的临床疗效.方法 回顾深圳市龙岗区坪地人民医院2011年6月至2013年6月间收治的192例咳嗽变异性哮喘小儿病例.按照随机分组法分为观察组(n=103)和对照组(n=89).对照组患者采用沙丁胺醇进行治疗,一天2次;观察组患者在对照组的基础上加用孟鲁司特进行治疗,每晚1次,口服,每次5 mg.对两组患者的治疗效果、咳嗽缓解时间、预后复发率以及不良反应等进行统计和分析.结果 观察组患者治疗的总有效率为92.2% (95/103),高于对照组的77.5% (69/89),差异有统计学意义(x2=5.381,P<0.05).观察组患者咳嗽缓解时间和半年复发率分别为(6.3±0.6)d和4.8%(5/103),均显著低于对照组的(10.2±1.1)d和11.2%(10/89),差异有统计学意义(P<0.05).两组患者在临床治疗中均无明显不良反应.结论 孟鲁司特联合沙丁胺醇在临床上能有效治疗咳嗽变异性哮喘,具有安全可控、快速有效和复发率低的优点,值得推广.
作者:罗海涛 刊期: 2014年第04期
目的 制备抗肺炎链球菌(S.pn)丝氨酸-苏氨酸激酶(STKP)基因的特定区域的免疫血清,为疫苗研究奠定基础.方法 PCR扩增S.pn STKP蛋白C末端314个氨基酸区域的基因,将其克隆入pMD19-T载体,将鉴定正确的STKP基因从pMD19-T载体亚克隆至PET-32a(+)原核表达载体进行诱导表达;获得的可溶性蛋白经Ni2+柱纯化及Western blot鉴定后,免疫家兔制备抗STKP血清,间接EHSA鉴定抗体效价,Western blot鉴定免疫血清特异性.结果 成功将STKP基因特定序列克隆入PET-32a(+)原核表达载体并诱导表达,形式以可溶性表达为主,经Ni2+柱层析法纯化STKP,纯度达92%,免疫家兔制备出STKP免疫血清,间接ELISA检测抗体效价为1∶100 000,Western blot证实免疫血清能与目的蛋白特异结合.结论 获得STKP重组蛋白及免疫血清,重组表达产物具有免疫原性,为S.pn多价联合蛋白疫苗研制奠定了基础.
作者:刘美玲;李有强;陈东成;屈平华;张轩;张汉运;陈兴文 刊期: 2014年第04期
目的 了解2012-2013年广州地区呼吸道感染人群中人鼻病毒(HRV)感染的流行特征.方法 收集2012-2013年广州市5家哨点医院符合条件的有发热并伴有呼吸道感染症状患者的咽拭子标本2 124份,采用实时荧光定量PCR检测标本中HRV的核酸,同时结合患者的临床基本信息,分析HRV的感染情况、人群分布和时间分布等.对HRV阳性的标本进一步进行流感病毒(IFv)、呼吸道合胞病毒(RSV)等7种常见呼吸道病毒的检测,以了解其共感染情况.结果 共收集咽拭子2 124份,1 254份来自门诊急诊病例,870份来自住院病例;男性1 253份,女性871份,男女检出率无明显差异;年龄范围0个月到103岁.HRV检测阳性的标本有101份,阳性检出率为4.76%:阳性标本中20例混合感染了至少一种其他呼吸道病毒,占HRV阳性标本的19.80%;IFV是常见的混合感染病毒.HRV全年散发,秋季检出率高(6.13%),冬季低(1.51%),不同季节检出率差异有统计学意义(X2=10.592,P<0.05).尤以感染0~4岁的婴幼儿和65岁的老年人为主,中青年检出率低.结论 广州地区HRV以感染儿童和老年人为主,尤其是4岁以下的婴幼儿;全年均可发生;男女感染率无明显差异;与IFV混合感染率较高.
作者:罗燕芬;钟慧玲;徐霖;庹玖玲;汪杨;朱勋;曾谷城;曹开源 刊期: 2014年第04期
目的 掌握重庆市布鲁氏菌病疫情及流行趋势,为布鲁氏菌病防治策略提供依据.方法 选择畜牧业发达,畜牧饲养量较大的区域作为监测点对重点职业人群进行病情监测;收集重庆市畜牧部门2008-2012年期间的畜间感染布鲁氏菌的资料.人群和动物血样均采用试管凝集试验进行检测.结果 2005-2012年共主动搜索重点职业人群18 521人,未发现符合布鲁氏菌病诊断标准的临床症状、体征的病例;重点人群采集血清标本3 727份,血清学阳性率为0.94%;以2011、2012年血清阳性率较高,随着年份的增加,阳性率呈上升趋势(x2趋势=14.04,P<0.01).男性血清学阳性率(1.16%)高于女性(0.38%)(x2=4.90,P<0.05);阳性者以青壮年为主;不同职业间感染率比较,差异有统计学意义(x2=42.86,P<0.01),以奶牛饲养员高(2.31%).共调查68 181头牲畜,血清阳性率为0.83%,均为奶牛,以2012年为高(1.83%),2009年低(0.01%);随着年份的增加,畜间布鲁氏菌病感染率呈上升趋势(x2趋势=453.49,P<0.01).结论 重庆市人间和畜间布鲁氏菌病感染呈上升趋势,奶牛是人间布鲁氏菌病感染的主要传染源,应加强牲畜检疫和人群监测,及时发现疫情.
作者:黄文利;黄诚;吴成果;李心术 刊期: 2014年第04期
目的 构建过表达RN181基因的SMMC7721重组细胞株,研究RN181对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其凋亡机制.方法 构建高表达RN181逆转录病毒感染SMMC7721细胞,显微镜观察其细胞株荧光强弱,Western blot鉴定RN181蛋白表达水平;采用DAPI染色法、Western blot检测RN181对顺铂诱导SMMC7721细胞株凋亡的变化情况.结果 重组细胞株荧光表达良好,7721RN181细胞中RN181蛋白表达量高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05).DAPI染色法观察到在顺铂作用下,7721RN181的细胞凋亡阳性率高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测到7721RN181的activated caspase-3、cleaved PARP的表达量高于对照组,pro-caspase-6,pro-caspase-8的表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 RN181表达能促进肝癌细胞的凋亡,其可能通过参与死亡受体凋亡途径来促进肝癌细胞凋亡.进而推测RN181基因可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点.
作者:彭迎霞;张贤;张雪峰;高彦君;王穗海;李纪良 刊期: 2014年第04期
目的 探讨组织细胞坏死性淋巴结炎(HNL)的器官受累情况及治疗、预后,以提高对本病的认识.方法 收集1997年7月至2013年6月中山大学附属第三医院收治的34例HNL病例的临床资料,总结其器官受累特点、治疗与预后.结果 HNL可累及多个器官.34例患者均有淋巴结受累,血液受累者占67.6%(23/34),累及皮肤者占23.5%(8/34),累及肺脏者占14.7%(5/34),累及浆膜腔者占11.8%(4/34),累及脑膜者占5.9%(2/34),累及关节占2.9%(1/34).同时累及3个及以上器官者32.3%(11/34),定义为多器官受累,激素治疗起始剂量比非多器官受累组大(t=3.126,P<0.05),激素治疗时间亦较长(t=2.446,P<0.05).两组住院时间分别为(16.2±8.7)和(14.0±5.3)d,差异无统计学意义(t=0.751,P=0.465).结论 HNL激素治疗有效,多器官受累患者激素治疗起始剂量较大、时间较长.
作者:石云锋;吴本权;周宇麒;刘慧;张天托 刊期: 2014年第04期
目的 应用激光扫描共聚焦显微镜三维重建技术观察1-磷酸鞘氨醇(S1P)刺激下S1P受体2(S1PR2)的表达变化,并探讨共聚焦三维重建技术与普通单层扫描技术在生物组织功能和形态学研究中的应用价值.方法 S1P(10μmol/L)刺激脐静脉内皮细胞(HUVECs)6 h,Western blot检测S1PR2的表达变化;对细胞进行免疫荧光染色后,采用激光扫描共聚焦显微镜分别进行多层层切扫描和单层扫描,层切扫描之后对图像进行三维重建,比较两种技术的优劣.结果 Western blot结果显示S1P刺激6h后S1PR2表达显著性增高(P<0.05).荧光图像显示,单层扫描时S1P 6 h组荧光强度与对照组比较差异无统计学意义;而层切之后三维重建图像中,S1P刺激后S1PR2荧光强度显著高于正常对照组和单层扫描所得图像,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 激光扫描共聚焦显微镜三维重建技术,可以获得三维重构图像,并且具有三维立体及图像信息量更全的特点,更能客观的表现出整个细胞特定分子荧光强度的变化.
作者:萧艳;王立群;黄巧冰 刊期: 2014年第04期
目的 探讨冠心病患者血清降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)表达量与冠状动脉粥样硬化病变程度的相关性.方法 118例冠状动脉造影术患者按造影结果分为冠心病组(n=89)和正常对照组(n=29),随即,采用改良Censini评分方法将冠心病组患者分为<30分组(n=24)、30~60分组(n=37)和>60分组(n=28),分别检测各组患者PCT和hs-CRP的含量.结果 冠心病患者PCT和hs-CRP含量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);同时,冠心病患者PCT和hs-CRP含量随Gensini评分增加而逐渐上升,相关系数分别为0.88和0.90,呈正相关性(P<0.05).结论 PCT、hs-CRP的含量与冠状动脉粥样硬化病变程度呈正相关,联合检测PCT和hs-CRP的含量有助于早期诊断冠状动脉粥样硬化引起的冠心病.
作者:刘志祥;谢飞;吴玉竹;李文兵 刊期: 2014年第04期
目的 利用时间分辨免疫荧光分析技术(TRFIA)建立血清人附睾分泌蛋白-4(HE4)的检测试剂.方法 采用双抗体夹心法建立血清HE4-TRFIA检测试剂并对试剂的各项指标进行评价.结果 HE4-TRFIA检测试剂的灵敏度为0.73 pmol/L,测量范围为0.73~1 000 pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.6%~7.5%和8.3%~14.4%.与CA15-3、CEA、AFP、HBsAg和CA125无交叉反应.317份正常女性血清标本测试结果提示本试剂的正常参考值范围是0~90 pmol/L.与进口的同类试剂检测,检测结果的相关系数R2为0.976.结论 本HF4-TRFIA检测试剂各项指标均能达到临床检测要求,可望替代国外同类产品用于临床检测.
作者:陈少琅;万勇;张琼;周健伟;徐伟文;吴英松 刊期: 2014年第04期
目的 利用实时荧光定量RT-PCR建立快速检测人腺病毒(HADV)、人博卡病毒(HBoV)、人偏肺病毒(HMPV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)等四种呼吸道病毒的方法.方法 寻找四种呼吸道病毒的相对保守序列,针对该序列分别设计4对引物对及其相应的Taqman探针,将此保守序列作为目的基因片段,使用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系;采用10倍稀释体外转录RNA,检测建立的体系的灵敏度和重复性并建立反应体系标准曲线;通过临床样本检验体系的特异性.结果 HADV、HBoV、HMPV、HRSV四种病毒的检测灵敏度均为10 copies/μl,标准曲线的决定系数分别为:HADV R2=0.9998,HBoV R2=0.9981,HMPV R2=0.9981,HRSV R2=0.9947和0.9965,扩增效率分别为:HADV 105.08%,HBoV 107.81%,HMPV 102.08%,HRSV FAM荧光106.38%及CY5荧光107.95%.荧光RT-PCR反应体系检测体外转录的RNA的各个拷贝数浓度的变异系数均较低,对临床样本检验的特异性为100%.结论 本研究建立的实时荧光定量RT-PCR体系可快速、准确地检测人HADV、HBoV、HMPV、HRSV等四种呼吸道病毒,且重复性较好,特异性高.
作者:向蕾;陈仕菊;王昕;吕星;陆家海;房师松 刊期: 2014年第04期
目的 利用昆虫杆状病毒表达系统构建肠道病毒71型及柯萨奇病毒A16型(EV71/CA16)联合P1基因(HP1)重组杆状病毒.方法 利用重叠PCR的原理,设计合成HP1基因;HP1基因与载体pFastBac1连接后转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组穿梭杆粒HP1-bacmid;提取纯化重组杆粒转染Sf9细胞,收获重组杆状病毒;以SDS-PAGE、Western blot进行重组蛋白鉴定.结果 成功合成HP1基因;完成HP1与pFastBac1载体连接;获得了重组穿梭杆粒HP1-bacmid;并通过转染Sf9细胞,获得具有感染活性的重组杆状病毒;SDS-PAGE电泳结果显示重组病毒感染的Sf9细胞表达了大小约为100×103 Mr的目的蛋白条带,经Western blot鉴定,该条带能与EV71单克隆抗体特异结合.结论 成功构建了EV71/CA16联合P1基因重组杆状病毒,为下一步EV71/CA16联合P1蛋白的免疫鉴定奠定基础,并为兼抗EV71、CA16疫苗的研究提供参考.
作者:陈仕菊;向蕾;王昕;吕星;陆家海;房师松 刊期: 2014年第04期
目的 研究近年来东莞市不明原因夜间睡眠猝死综合征(SUNDS)的流行病学特征,探寻有关的病因学线索.方法 收集东莞市2007-2013年SUNDS死亡病例,并在资料库中按年龄、性别和死亡时间相接近、1∶1匹配死因明确者作为对照组,同时对两组病例按年龄、性别、籍贯、死亡月份、死亡时刻及职业划分亚组,对病例资料数据进行统计分析,研究该病的流行病学特征.结果 2007-2013年东莞市SUNDS死亡病例共计565例;男女性别比为14.7∶1;2007-2013年各年发病率分别为0.68/10万、0.79/10万、0.60/10万、1.24/10万、1.20/10万、1.65/10万、0.93/10万;年龄分布在17~55岁,中位年龄为35岁,与全死因组年龄分布差异有统计学意义;发病例数高峰出现在3-6月份,低在10-12月份,与当地全年月平均气温变化趋势存在相关性;死亡高峰时段为凌晨0-1点,例数较低时段(凌晨3-4点)高出20多倍;病例籍贯来源多为湖南省(93例),有发病“聚集性”的是云南省(病例组/对照组4.25倍)、香港(3.67倍)及海南(2倍);SUNDS病例主要发生于劳动强度大、文化程度低的工厂一线工人、保安、清洁员等人群中.结论 近年来东莞市SUNDS的年均发病率未见下降,提示发病的高危因素依然存在,须作进一步流行病学调查查明高危因素.
作者:余彬彬;翟李俊;徐伦武;郑金祥;黄二文;唐双柏;刘超;成建定 刊期: 2014年第04期
目的 评价降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和中性杆状核粒细胞(Nst)分类计数联合检测在新生儿败血症诊断中的价值.方法 比较35例败血症组与30例对照组血中PCT、hs-CRP和Nst比值的差异.结果 新生儿败血症组PCT、hs-CRP和Nst比值水平分别为(23.51±10.02)ng/ml、(19.54±8.92)mg/L、(20±8.5)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05).PCT灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值比hs-CRP及Nst高,但联合检测PCT、hs-CRP和Nst的灵敏度比单独PCT高.结论 PCT、hs-CRP和Nst比值可作为新生儿败血症快速有效诊断的检测指标,联合检测可进一步提高检出率.
作者:李惠卿;陈日炳;唐万兵 刊期: 2014年第04期
目的 克隆表达恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5(PfRh5)F2片段,并评价其抗原性.方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pTGub21b中,构建PfRh5F2/pTGub21b原核表达载体.IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,并用Western blot检测其抗原性.结果 成功构建了PfRh5F2/pTGub21b原核表达系统,并在大肠杆菌中可溶性高效表达,表达产物能被恶性疟患者血清识别,而重组抗原免疫鼠血清也能识别恶性疟患者血样中的相应抗原.结论 恶性疟原虫PfRh5 F2片段在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性和免疫原性.
作者:程莎莎;郝文波;罗树红;廖小青 刊期: 2014年第04期
目的 探讨外源性细胞因子IL-15、IL-21对HIV-1感染者T淋巴细胞增殖的影响.方法 研究对象为24例已接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)及25例未经HAART的HIV-1感染者(HAART组及HAART-na(i)ve组).以HIV-1P24编码区的氨基酸序列人工合成的12个肽段组成的肽段库作为特异性抗原表位,另添加外源性细胞因子IL-15或者IL-21,对两组研究对象的外周血单个核细胞(PBMC)进行体外刺激培养,采用羧乙基锗倍半氧化物(CFSE)对PBMC进行示踪染色;流式细胞仪检测刺激后的淋巴细胞的增殖情况.结果 HAART-na(i)ve组和HAART组中CD4+CD8+T细胞的增殖百分率,两组的组内比较可见,IL-21刺激的实验组(IL-21组)和IL-15刺激的实验组(IL-15组)均显著高于相应对照组(P均为0.000);HAART组CD8+T细胞增殖水平,IL-15组及IL-21组均明显高于HAART-na(i)ve组(Z=-2.394,P=0.017;Z=-2.130,P=0.033);HAART组与HAART-na(i)ve组中实验分组IL-15组及IL-21组CD4+细胞增殖情况比较差异均无统计学意义.结论 外源性IL-15、IL-21均能促进HIV-1感染者HARRT治疗前及治疗后CD4+及CD8+T淋巴细胞的增殖;且两种因子对CD8+T淋巴细胞增殖的作用HAART治疗后大于HAART治疗前.
作者:平岖;姚细安;李玉枝;赵令斋;唐漾波 刊期: 2014年第04期
目的 探讨苏灵(SL)体外对人血浆凝固时间的影响、局部给药对小鼠剪尾后出血的促凝作用及体外对纤溶系统的影响.方法 将磷酸钠缓冲液、SL溶液和人凝血酶溶液与人血浆混合,血凝仪测定其凝固时间;将分别浸有磷酸钠缓冲液(溶媒组)、SL溶液和人凝血酶溶液的纱布敷于小鼠剪尾后的伤口上,计算出血时间和出血量,评价各组的止血效果;采用SDS-PAGE方法检测SL对人纤溶酶原的降解作用,吸光度法测定SL体外对FXa+t-PA诱导的纤溶酶原激活作用的影响.结果 SL和人凝血酶能明显缩短人血浆凝固时间,并能明显缩短小鼠剪尾的止血时间及减少出血量,与溶媒组比较差异有统计学意义(P<0.05);SL对人纤溶酶原没有直接的裂解作用,不激活人纤溶酶原;SL可抑制FXa+t-PA诱导的人纤溶酶原体外激活.结论 SL具有良好的局部止血效果,其部分作用机制可能与抑制FXa激活纤溶系统有关.
作者:孔焕育;曹莹;米鹏程;庞建新 刊期: 2014年第04期
目的 探讨miR-146a对登革病毒感染过程中炎性因子产生的影响及其调控机制.方法 建立过表达miR-146a的THP-1细胞模型,以Real-time PCR检测登革病毒诱导的炎性因子TNFα、IL-6、IL-12和IL-8的mRNA表达水平;采用Westem blot方法检测细胞丝裂原蛋白激酶(MAPK)信号通路在登革病毒感染后不同时间点的激活情况;通过免疫荧光检测登革病毒感染后核因子κB(NF-κB)的核转位情况.结果 miR-146a过表达细胞在登革病毒感染后所表达的TNFα、IL-6、IL-12和IL-8等炎性因子mRNA水平明显下调;miR-146a过表达可明显抑制MAPK、NF-κB信号通路的激活.结论 miR-146a通过抑制登革病毒诱导的MAPK、NF-κB信号通路激活从而调控炎性因子产生.
作者:王廷龙;吴思宇;李玉叶;张萍;黄曦 刊期: 2014年第04期
目的 分析玉林市2005-2012年非结防机构网络直报肺结核患者转诊、追踪及到位后活动性与涂阳肺结核检出情况及对发现活动性/涂阳患者的贡献率,为进一步做好该项工作提供科学依据.方法 对玉林市网络报告患者转诊追踪工作相关数据进行分析.结果 玉林市非结核防治机构网络直报肺结核及疑似患者转诊到位率、追踪到位率及总体到位率呈逐年上升趋势(P<0.001);到位后活动性肺结核及涂阳肺结核检出率分别为59.01%(16 725/28 345)和25.87%(7 333/28 345),未到位患者未到位原因主要是外出,非结核防治机构对发现活动性和涂阳肺结核患者的贡献率为53.13%和50.47%.结论 玉林市肺结核及疑似患者报告、转诊和追踪工作取得显著成效.
作者:陈晓 刊期: 2014年第04期