余彬彬；翟李俊；徐伦武；郑金祥；黄二文；唐双柏；刘超；成建定
目的 探讨自然杀伤细胞(NK)在急性肝衰竭进展过程中的作用.方法 40只Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组腹腔注射四氯化碳诱导急性肝衰竭,对照组则注射橄榄油.分离小鼠外周血、肝脏、脾脏的淋巴细胞,用流式细胞仪检测其NK细胞的比例及相关受体表达情况.结果 急性肝衰竭小鼠肝脏NK细胞比例较对照组明显升高,差异有统计学意义[(37.2±2.8)％vs(15.3±1.5)％,P=0.0004],外周血以及脾脏中NK细胞比例均较对照组下降.急性肝衰竭小鼠肝脏活化性受体NKP46较抑制性受体NKG2A表达升高更明显,差异有统计学意义[(18.7±1.5)％vs(4.9±2.3)％;t=3.95,P=0.016)].结论 肝脏局部NK细胞在药物诱导的急性肝衰竭中发挥重要的作用.
作者：熊静；翁伟镇；陈俊峰；曹会娟；曾慧敏；高志良；林炳亮 刊期： 2014年第04期
目的 探讨miR-146a对登革病毒感染过程中炎性因子产生的影响及其调控机制.方法 建立过表达miR-146a的THP-1细胞模型,以Real-time PCR检测登革病毒诱导的炎性因子TNFα、IL-6、IL-12和IL-8的mRNA表达水平;采用Westem blot方法检测细胞丝裂原蛋白激酶(MAPK)信号通路在登革病毒感染后不同时间点的激活情况;通过免疫荧光检测登革病毒感染后核因子κB(NF-κB)的核转位情况.结果 miR-146a过表达细胞在登革病毒感染后所表达的TNFα、IL-6、IL-12和IL-8等炎性因子mRNA水平明显下调;miR-146a过表达可明显抑制MAPK、NF-κB信号通路的激活.结论 miR-146a通过抑制登革病毒诱导的MAPK、NF-κB信号通路激活从而调控炎性因子产生.
作者：王廷龙；吴思宇；李玉叶；张萍；黄曦 刊期： 2014年第04期
目的 克隆表达恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5(PfRh5)F2片段,并评价其抗原性.方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pTGub21b中,构建PfRh5F2/pTGub21b原核表达载体.IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,并用Western blot检测其抗原性.结果 成功构建了PfRh5F2/pTGub21b原核表达系统,并在大肠杆菌中可溶性高效表达,表达产物能被恶性疟患者血清识别,而重组抗原免疫鼠血清也能识别恶性疟患者血样中的相应抗原.结论 恶性疟原虫PfRh5 F2片段在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性和免疫原性.
作者：程莎莎；郝文波；罗树红；廖小青 刊期： 2014年第04期
目的 利用时间分辨免疫荧光分析技术(TRFIA)建立血清人附睾分泌蛋白-4(HE4)的检测试剂.方法 采用双抗体夹心法建立血清HE4-TRFIA检测试剂并对试剂的各项指标进行评价.结果 HE4-TRFIA检测试剂的灵敏度为0.73 pmol/L,测量范围为0.73～1 000 pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.6％～7.5％和8.3％～14.4％.与CA15-3、CEA、AFP、HBsAg和CA125无交叉反应.317份正常女性血清标本测试结果提示本试剂的正常参考值范围是0～90 pmol/L.与进口的同类试剂检测,检测结果的相关系数R2为0.976.结论 本HF4-TRFIA检测试剂各项指标均能达到临床检测要求,可望替代国外同类产品用于临床检测.
作者：陈少琅；万勇；张琼；周健伟；徐伟文；吴英松 刊期： 2014年第04期
目的 利用实时荧光定量RT-PCR建立快速检测人腺病毒(HADV)、人博卡病毒(HBoV)、人偏肺病毒(HMPV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)等四种呼吸道病毒的方法.方法 寻找四种呼吸道病毒的相对保守序列,针对该序列分别设计4对引物对及其相应的Taqman探针,将此保守序列作为目的基因片段,使用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系;采用10倍稀释体外转录RNA,检测建立的体系的灵敏度和重复性并建立反应体系标准曲线;通过临床样本检验体系的特异性.结果 HADV、HBoV、HMPV、HRSV四种病毒的检测灵敏度均为10 copies/μl,标准曲线的决定系数分别为:HADV R2=0.9998,HBoV R2=0.9981,HMPV R2=0.9981,HRSV R2=0.9947和0.9965,扩增效率分别为:HADV 105.08％,HBoV 107.81％,HMPV 102.08％,HRSV FAM荧光106.38％及CY5荧光107.95％.荧光RT-PCR反应体系检测体外转录的RNA的各个拷贝数浓度的变异系数均较低,对临床样本检验的特异性为100％.结论 本研究建立的实时荧光定量RT-PCR体系可快速、准确地检测人HADV、HBoV、HMPV、HRSV等四种呼吸道病毒,且重复性较好,特异性高.
作者：向蕾；陈仕菊；王昕；吕星；陆家海；房师松 刊期： 2014年第04期
目的 分析玉林市2005-2012年非结防机构网络直报肺结核患者转诊、追踪及到位后活动性与涂阳肺结核检出情况及对发现活动性/涂阳患者的贡献率,为进一步做好该项工作提供科学依据.方法 对玉林市网络报告患者转诊追踪工作相关数据进行分析.结果 玉林市非结核防治机构网络直报肺结核及疑似患者转诊到位率、追踪到位率及总体到位率呈逐年上升趋势(P＜0.001);到位后活动性肺结核及涂阳肺结核检出率分别为59.01％(16 725/28 345)和25.87％(7 333/28 345),未到位患者未到位原因主要是外出,非结核防治机构对发现活动性和涂阳肺结核患者的贡献率为53.13％和50.47％.结论 玉林市肺结核及疑似患者报告、转诊和追踪工作取得显著成效.
作者：陈晓 刊期： 2014年第04期
目的 了解广州市海珠区45岁以上中老年人代谢综合征(MS)患病情况和流行特征,为预防MS提供科学依据.方法 采用多阶段整群抽样方法,随机抽取海珠区45岁以上社区居民进行问卷调查,有效调查人数为2 212人,对样本人群进行体格检测,运用《中国成人血脂异常防治指南(2007版)》的MS诊断标准对资料进行分析.结果 海珠区45岁以上社区人群MS患病率为28.89％(639/2 212).随着年龄增加,MS患病率呈升高趋势(x2=72.93,P＜0.05).常见的MS组合形式为“高甘油三酯血症+高血压+高血糖”,占总MS的23.00％.结论 广州市海珠区45岁以上中老年人具有较高的MS患病率;血脂、血糖、血压在MS中起着重要作用.
作者：孙莹；刘馨桦；李晗文；朱凯星 刊期： 2014年第04期
目的 观察胃造口管(经皮内镜下胃造口术留置)及鼻胃管给予肠内营养的疗效区别.方法 因吞咽功能障碍或意识障碍需要较长时间(＞4周)实行管饲营养的门诊或住院患者50例,根据患者及其家属是否接受分为经皮内镜下胃造口术(PEG)组和鼻胃管(NGT)组.PEG组实行经皮内镜下胃造口术,术后通过胃造口管给予肠内营养;NGT组实行鼻胃管给予肠内营养,观察两组患者管饲过程的并发症包括返流、吸入性肺炎等的发生情况,以及人体测量指标和实验室检查指标包括三头肌皮褶厚度(TSF)、上臂围(AC)、上臂肌围(AMC)、血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)的变化,观察期为3个月.结果 治疗3个月后,NGT组的ALB、PA、TSF值均较治疗前升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而PEG组的ALB、PA、TSF、MC值均较治疗前升高,差异有统计学意义(P＜0.05),且PEG组ALB、PA升高的量高于NGT组,PEG组治疗效果优于NGT组,差异有统计学意义(P＜0.05);PEG组3个月内返流和吸入性肺炎等常见并发症发生率低于NGT组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 对于需要较长时间管饲喂养的病人,PEG的疗效明显优于传统的NGT.
作者：陈彩芳；陈艳鸿；黄鹤 刊期： 2014年第04期
目的 分析2007-2012年东莞市不同文化程度的无偿献血者的5项血液检测结果,了解无偿献血者血液感染情况,从中找出献血的主体人群,为招募低危献血者提供依据.方法 收集2007年1月至2012年12月的无偿献血者资料(文化程度)及其血液ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP检测结果,分析两者间的关系.结果 高中和初中文化程度的献血者,约占总体人群的66.35％(229 443/345 809).不同文化程度的血液检测指标的总阳性率差异有统计学意义(x2=338.27,P＜0.05),以“大学本科及以上”及“不详”为低阳性率组,随着文化程度的降低,血液检测指标的阳性率有逐渐增高的趋势.结论 重视血源招募工作,招募的对象集中在学历相对较高的人群,同时尽量组织动员在校大学生积极参与无偿献血.
作者：费亚涛；黄志森；王德文 刊期： 2014年第04期
目的 了解铜绿假单胞菌临床分布情况、耐药现状以及外膜通道蛋白OprD2的缺失与亚胺培南耐药的相关性.方法 收集2011-2013年深圳市第二人民医院临床分离到的949株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行12种抗生素药敏试验,通过设计引物,运用聚合酶链反应(PCR)方法扩增oprD2基因.结果 共949株铜绿假单胞菌,分离率前两位的科室是神经外科和ICU病房,分别占25.40％和22.76％;铜绿假单胞菌对12种抗生素的药敏试验中,敏感的是阿米卡星(85.88％),其次是氨曲南(85.25％),耐药率高的是头孢他啶(37.09％),对亚胺培南耐药的有312株,即亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)的分离率为32.88％(312/949);2012年6-12月筛选的81株IRPA中,有42株oprD2基因缺失,缺失率为51.85％.结论 临床分离铜绿假单胞菌耐药性严重,外膜通道蛋白OprD2缺失可能是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因之一.
作者：吴伟清；盖俊惠；李卓成 刊期： 2014年第04期
目的 分析2009-2012年广州市黄埔区居民的主要死亡原因,了解居民健康状况,为制定疾病预防控制策略提供科学依据.方法 收集《国家疾病监测死因登记报告信息系统》中广州市黄埔区2009-2012年户籍居民死亡病例数据,采用描述流行病学方法、运用SPSS17.0软件进行统计分析,计算人群粗死亡率、标化死亡率、死因构成、平均期望寿命等指标.结果 广州市黄埔区2009-2012年居民平均死亡率476.37/10万(标化死亡率322.69/10万),其中男性平均死亡率为527.46/10万(标化死亡率401.98/10万),女性平均死亡率为417.43/10万(标化死亡率243.91/10万),两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).2009-2010年黄埔区居民平均期望寿命80.31岁,其中男性为78.57岁,女性为82.18岁.死亡率前5位的死因依次为恶性肿瘤、心脏病、呼吸系统疾病、脑血管病和诊断不明性疾病,占全死因构成的76.72％;死因监测三大类分析中慢性病占总死亡原因的79.52％.结论 黄埔区居民的死亡以慢性疾病为主,其中恶性肿瘤是危害居民健康的主要疾病和死因,对居民进行肿瘤防治知识普及、预防和干预是今后工作的重点.
作者：罗小华；刘嘉聪；黄昱；周焰华 刊期： 2014年第04期
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)导致脑弓形虫病或全身其他器官的损害.其中,肺损害的发生率排在弓形虫病脑外器官损害的第二或第三位.肺弓形虫病临床表现严重,且病程发展快,病死率高.本文就肺弓形虫病的感染方式、高发人群、临床症状、免疫病理机制及诊断方法做一综述.
作者：刘晋锋；吕芳丽 刊期： 2014年第04期
目的 探讨2,4-二硝基苯肼(DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定水产品及水发产品中甲醛的方法.方法 采用超声法提取样品,提取液于60℃水浴中衍生20 min,用环己烷提取,后于液相色谱仪进行分析定量.结果 甲醛在0～20 μg/ml浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r为0.9998,相对标准偏差为0.9％～4.5％,加标回收率为93.00％～99.16％;检测结果与国标方法比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好等优点,而且简便、快捷,适合分析大批量样品.
作者：刘昶 刊期： 2014年第04期
目的 探讨胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病(T2DM)患者胰腺β细胞及血管内皮细胞功能的影响.方法 选取初诊T2DM患者196例,随机分为观察组(n=98)与对照组(n=98).对照组给予口服降糖药治疗,观察组给予胰岛素强化治疗,即于早、中、晚餐15 min前皮下注射门冬胰岛素,睡前皮下注射甘精胰岛素,总疗程均为8周.于治疗前后观察两组患者的血糖、HbA1c和胰岛素水平,计算胰腺β细胞功能指数(Homa-β)和胰岛素抵抗指数(Homa-IR),检测血清一氧化氮(NO)和内皮素(ET),超声测定内皮依赖性血管舒张功能(FMEDD)和非内皮依赖性舒张功能(NIEID).结果 治疗后,两组FBG、2hPPG、HbA1c、Homa-IR、ET水平均降低,Homa-β、NO均增高(P＜0.05或P＜0.01);且观见察组FBG、2hPPG、HbA1c、Homa-IR、ET水平均低于对照组,Homa-β、NO、FMEDD高于对照组(P＜0.05),血糖达标时间少于对照组(P＜0.05).结论 短期速效胰岛素联合长效胰岛素强化治疗初诊T2DM有效控制了血糖水平,保护了胰腺β细胞及血管内皮细胞功能,对控制T2DM进展和并发症的发生具有积极的作用.
作者：周卫东；任伟；韩金荣；刘慕华 刊期： 2014年第04期
目的 了解2012-2013年广州地区呼吸道感染人群中人鼻病毒(HRV)感染的流行特征.方法 收集2012-2013年广州市5家哨点医院符合条件的有发热并伴有呼吸道感染症状患者的咽拭子标本2 124份,采用实时荧光定量PCR检测标本中HRV的核酸,同时结合患者的临床基本信息,分析HRV的感染情况、人群分布和时间分布等.对HRV阳性的标本进一步进行流感病毒(IFv)、呼吸道合胞病毒(RSV)等7种常见呼吸道病毒的检测,以了解其共感染情况.结果 共收集咽拭子2 124份,1 254份来自门诊急诊病例,870份来自住院病例;男性1 253份,女性871份,男女检出率无明显差异;年龄范围0个月到103岁.HRV检测阳性的标本有101份,阳性检出率为4.76％:阳性标本中20例混合感染了至少一种其他呼吸道病毒,占HRV阳性标本的19.80％;IFV是常见的混合感染病毒.HRV全年散发,秋季检出率高(6.13％),冬季低(1.51％),不同季节检出率差异有统计学意义(X2=10.592,P＜0.05).尤以感染0～4岁的婴幼儿和65岁的老年人为主,中青年检出率低.结论 广州地区HRV以感染儿童和老年人为主,尤其是4岁以下的婴幼儿;全年均可发生;男女感染率无明显差异;与IFV混合感染率较高.
作者：罗燕芬；钟慧玲；徐霖；庹玖玲；汪杨；朱勋；曾谷城；曹开源 刊期： 2014年第04期
目的 调查广州北部(从化区、增城区、龙门县、新丰县)山区淡水螺、淡水蟹感染并殖吸虫尾蚴、囊蚴的情况,了解并殖吸虫流行分布状况.方法 采集山溪螺蛳、溪蟹,检查并殖吸虫尾蚴、囊蚴,鉴定并殖吸虫虫种.结果 从化区良口镇螺蛳尾蚴感染率0.32％,螺种为放逸短沟蜷;溪蟹囊蚴感染率100％,蟹种为平和华溪蟹.吕田镇螺蛳尾蚴感染率0.32％,螺种为拟钉螺;溪蟹感染率为36.73％,蟹种为平远南海溪蟹.龙门县南昆山尾蚴感染率0.15％,螺种为放逸短沟蜷;溪蟹囊蚴感染率为100％,溪种为平和华溪蟹.增城区、新丰县各调查点收集的螺蛳、溪蟹均未检测到尾蚴及囊蚴.结论 广州北部山区从化区良口镇、南昆山为卫氏并殖吸虫超高度疫源地(Ⅰ级).吕田镇为斯氏狸殖吸虫中度疫源地(Ⅲ级).
作者：赵太平；陆予云；沈浩贤；龙小山；魏桂芬；罗健留 刊期： 2014年第04期
目的 应用激光扫描共聚焦显微镜三维重建技术观察1-磷酸鞘氨醇(S1P)刺激下S1P受体2(S1PR2)的表达变化,并探讨共聚焦三维重建技术与普通单层扫描技术在生物组织功能和形态学研究中的应用价值.方法 S1P(10μmol/L)刺激脐静脉内皮细胞(HUVECs)6 h,Western blot检测S1PR2的表达变化;对细胞进行免疫荧光染色后,采用激光扫描共聚焦显微镜分别进行多层层切扫描和单层扫描,层切扫描之后对图像进行三维重建,比较两种技术的优劣.结果 Western blot结果显示S1P刺激6h后S1PR2表达显著性增高(P＜0.05).荧光图像显示,单层扫描时S1P 6 h组荧光强度与对照组比较差异无统计学意义;而层切之后三维重建图像中,S1P刺激后S1PR2荧光强度显著高于正常对照组和单层扫描所得图像,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 激光扫描共聚焦显微镜三维重建技术,可以获得三维重构图像,并且具有三维立体及图像信息量更全的特点,更能客观的表现出整个细胞特定分子荧光强度的变化.
作者：萧艳；王立群；黄巧冰 刊期： 2014年第04期
目的 研究热休克处理小鼠肥大细胞瘤细胞P815对细胞Qa-1表达变化的影响.方法 将体外培养的小鼠肥大细胞瘤细胞P815分为四组,热休克组(共三组)及对照组,至于43℃水浴箱中0.5、1、1.5 h,然后恢复37℃、5％CO2恒温培养,4h后收集细胞,经RT-PCR技术及流式细胞技术,对Qa-1在RNA水平的变化和细胞表面表达进行分析.结果 热休克处理的三组细胞其Qa-1的表达均显著高于对照组,其中1h组升高明显;经热休克处理的靶细胞表面Qa-1表达0.5、1、1.5 h分别为(11.22±2.49)％、(14.22±3.32)％、(12.71±2.28)％,均高于对照组相应时间的(7.99±1.28)％、(7.84±2.28)％、(8.01±3.32)％,差异均有统计学意义(P＜0.05).其中1h引起Qa-1表达升高明显.结论 热休克可引起小鼠肥大细胞瘤细胞P815 Qa-1表达水平升高,热休克1 h Qa-1表达水平升高明显.
作者：程子禾；熊伟；李敏；刘甜甜 刊期： 2014年第04期
目的 制备抗肺炎链球菌(S.pn)丝氨酸-苏氨酸激酶(STKP)基因的特定区域的免疫血清,为疫苗研究奠定基础.方法 PCR扩增S.pn STKP蛋白C末端314个氨基酸区域的基因,将其克隆入pMD19-T载体,将鉴定正确的STKP基因从pMD19-T载体亚克隆至PET-32a(+)原核表达载体进行诱导表达;获得的可溶性蛋白经Ni2+柱纯化及Western blot鉴定后,免疫家兔制备抗STKP血清,间接EHSA鉴定抗体效价,Western blot鉴定免疫血清特异性.结果 成功将STKP基因特定序列克隆入PET-32a(+)原核表达载体并诱导表达,形式以可溶性表达为主,经Ni2+柱层析法纯化STKP,纯度达92％,免疫家兔制备出STKP免疫血清,间接ELISA检测抗体效价为1∶100 000,Western blot证实免疫血清能与目的蛋白特异结合.结论 获得STKP重组蛋白及免疫血清,重组表达产物具有免疫原性,为S.pn多价联合蛋白疫苗研制奠定了基础.
作者：刘美玲；李有强；陈东成；屈平华；张轩；张汉运；陈兴文 刊期： 2014年第04期
目的 阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布.方法 用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE).结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC.产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTX-M-14).PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低.结论 广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主.
作者：黄盈敏；方芝莉；卿芸；尹琳；冯炼强；田国宝；黄曦 刊期： 2014年第04期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
