孔焕育;曹莹;米鹏程;庞建新
目的 制备抗肺炎链球菌(S.pn)丝氨酸-苏氨酸激酶(STKP)基因的特定区域的免疫血清,为疫苗研究奠定基础.方法 PCR扩增S.pn STKP蛋白C末端314个氨基酸区域的基因,将其克隆入pMD19-T载体,将鉴定正确的STKP基因从pMD19-T载体亚克隆至PET-32a(+)原核表达载体进行诱导表达;获得的可溶性蛋白经Ni2+柱纯化及Western blot鉴定后,免疫家兔制备抗STKP血清,间接EHSA鉴定抗体效价,Western blot鉴定免疫血清特异性.结果 成功将STKP基因特定序列克隆入PET-32a(+)原核表达载体并诱导表达,形式以可溶性表达为主,经Ni2+柱层析法纯化STKP,纯度达92%,免疫家兔制备出STKP免疫血清,间接ELISA检测抗体效价为1∶100 000,Western blot证实免疫血清能与目的蛋白特异结合.结论 获得STKP重组蛋白及免疫血清,重组表达产物具有免疫原性,为S.pn多价联合蛋白疫苗研制奠定了基础.
作者:刘美玲;李有强;陈东成;屈平华;张轩;张汉运;陈兴文 刊期: 2014年第04期
当今神经系统感染性疾病发病呈现散发趋势,但神经型布氏杆菌病有增多趋势.其表现多样,以脑膜炎、脑膜脑炎、脊髓炎和脊髓病多见,而以脊髓压迫症发病的还未见报道.回顾性分析保定市第一医院2013年3日诊断明确的1例神经布氏杆菌病的临床表现、辅助检查结果以及诊断与治疗经过,并结合文献分析其发病特点.
作者:赵智江;高凤国;贾思琪 刊期: 2014年第04期
目的 探讨自然杀伤细胞(NK)在急性肝衰竭进展过程中的作用.方法 40只Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组腹腔注射四氯化碳诱导急性肝衰竭,对照组则注射橄榄油.分离小鼠外周血、肝脏、脾脏的淋巴细胞,用流式细胞仪检测其NK细胞的比例及相关受体表达情况.结果 急性肝衰竭小鼠肝脏NK细胞比例较对照组明显升高,差异有统计学意义[(37.2±2.8)%vs(15.3±1.5)%,P=0.0004],外周血以及脾脏中NK细胞比例均较对照组下降.急性肝衰竭小鼠肝脏活化性受体NKP46较抑制性受体NKG2A表达升高更明显,差异有统计学意义[(18.7±1.5)%vs(4.9±2.3)%;t=3.95,P=0.016)].结论 肝脏局部NK细胞在药物诱导的急性肝衰竭中发挥重要的作用.
作者:熊静;翁伟镇;陈俊峰;曹会娟;曾慧敏;高志良;林炳亮 刊期: 2014年第04期
目的 了解铜绿假单胞菌临床分布情况、耐药现状以及外膜通道蛋白OprD2的缺失与亚胺培南耐药的相关性.方法 收集2011-2013年深圳市第二人民医院临床分离到的949株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行12种抗生素药敏试验,通过设计引物,运用聚合酶链反应(PCR)方法扩增oprD2基因.结果 共949株铜绿假单胞菌,分离率前两位的科室是神经外科和ICU病房,分别占25.40%和22.76%;铜绿假单胞菌对12种抗生素的药敏试验中,敏感的是阿米卡星(85.88%),其次是氨曲南(85.25%),耐药率高的是头孢他啶(37.09%),对亚胺培南耐药的有312株,即亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)的分离率为32.88%(312/949);2012年6-12月筛选的81株IRPA中,有42株oprD2基因缺失,缺失率为51.85%.结论 临床分离铜绿假单胞菌耐药性严重,外膜通道蛋白OprD2缺失可能是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因之一.
作者:吴伟清;盖俊惠;李卓成 刊期: 2014年第04期
目的 了解广州市海珠区45岁以上中老年人代谢综合征(MS)患病情况和流行特征,为预防MS提供科学依据.方法 采用多阶段整群抽样方法,随机抽取海珠区45岁以上社区居民进行问卷调查,有效调查人数为2 212人,对样本人群进行体格检测,运用《中国成人血脂异常防治指南(2007版)》的MS诊断标准对资料进行分析.结果 海珠区45岁以上社区人群MS患病率为28.89%(639/2 212).随着年龄增加,MS患病率呈升高趋势(x2=72.93,P<0.05).常见的MS组合形式为“高甘油三酯血症+高血压+高血糖”,占总MS的23.00%.结论 广州市海珠区45岁以上中老年人具有较高的MS患病率;血脂、血糖、血压在MS中起着重要作用.
作者:孙莹;刘馨桦;李晗文;朱凯星 刊期: 2014年第04期
目的 了解2012-2013年广州地区呼吸道感染人群中人鼻病毒(HRV)感染的流行特征.方法 收集2012-2013年广州市5家哨点医院符合条件的有发热并伴有呼吸道感染症状患者的咽拭子标本2 124份,采用实时荧光定量PCR检测标本中HRV的核酸,同时结合患者的临床基本信息,分析HRV的感染情况、人群分布和时间分布等.对HRV阳性的标本进一步进行流感病毒(IFv)、呼吸道合胞病毒(RSV)等7种常见呼吸道病毒的检测,以了解其共感染情况.结果 共收集咽拭子2 124份,1 254份来自门诊急诊病例,870份来自住院病例;男性1 253份,女性871份,男女检出率无明显差异;年龄范围0个月到103岁.HRV检测阳性的标本有101份,阳性检出率为4.76%:阳性标本中20例混合感染了至少一种其他呼吸道病毒,占HRV阳性标本的19.80%;IFV是常见的混合感染病毒.HRV全年散发,秋季检出率高(6.13%),冬季低(1.51%),不同季节检出率差异有统计学意义(X2=10.592,P<0.05).尤以感染0~4岁的婴幼儿和65岁的老年人为主,中青年检出率低.结论 广州地区HRV以感染儿童和老年人为主,尤其是4岁以下的婴幼儿;全年均可发生;男女感染率无明显差异;与IFV混合感染率较高.
作者:罗燕芬;钟慧玲;徐霖;庹玖玲;汪杨;朱勋;曾谷城;曹开源 刊期: 2014年第04期
目的 研究近年来东莞市不明原因夜间睡眠猝死综合征(SUNDS)的流行病学特征,探寻有关的病因学线索.方法 收集东莞市2007-2013年SUNDS死亡病例,并在资料库中按年龄、性别和死亡时间相接近、1∶1匹配死因明确者作为对照组,同时对两组病例按年龄、性别、籍贯、死亡月份、死亡时刻及职业划分亚组,对病例资料数据进行统计分析,研究该病的流行病学特征.结果 2007-2013年东莞市SUNDS死亡病例共计565例;男女性别比为14.7∶1;2007-2013年各年发病率分别为0.68/10万、0.79/10万、0.60/10万、1.24/10万、1.20/10万、1.65/10万、0.93/10万;年龄分布在17~55岁,中位年龄为35岁,与全死因组年龄分布差异有统计学意义;发病例数高峰出现在3-6月份,低在10-12月份,与当地全年月平均气温变化趋势存在相关性;死亡高峰时段为凌晨0-1点,例数较低时段(凌晨3-4点)高出20多倍;病例籍贯来源多为湖南省(93例),有发病“聚集性”的是云南省(病例组/对照组4.25倍)、香港(3.67倍)及海南(2倍);SUNDS病例主要发生于劳动强度大、文化程度低的工厂一线工人、保安、清洁员等人群中.结论 近年来东莞市SUNDS的年均发病率未见下降,提示发病的高危因素依然存在,须作进一步流行病学调查查明高危因素.
作者:余彬彬;翟李俊;徐伦武;郑金祥;黄二文;唐双柏;刘超;成建定 刊期: 2014年第04期
目的 利用昆虫杆状病毒表达系统构建肠道病毒71型及柯萨奇病毒A16型(EV71/CA16)联合P1基因(HP1)重组杆状病毒.方法 利用重叠PCR的原理,设计合成HP1基因;HP1基因与载体pFastBac1连接后转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组穿梭杆粒HP1-bacmid;提取纯化重组杆粒转染Sf9细胞,收获重组杆状病毒;以SDS-PAGE、Western blot进行重组蛋白鉴定.结果 成功合成HP1基因;完成HP1与pFastBac1载体连接;获得了重组穿梭杆粒HP1-bacmid;并通过转染Sf9细胞,获得具有感染活性的重组杆状病毒;SDS-PAGE电泳结果显示重组病毒感染的Sf9细胞表达了大小约为100×103 Mr的目的蛋白条带,经Western blot鉴定,该条带能与EV71单克隆抗体特异结合.结论 成功构建了EV71/CA16联合P1基因重组杆状病毒,为下一步EV71/CA16联合P1蛋白的免疫鉴定奠定基础,并为兼抗EV71、CA16疫苗的研究提供参考.
作者:陈仕菊;向蕾;王昕;吕星;陆家海;房师松 刊期: 2014年第04期
目的 研究热休克处理小鼠肥大细胞瘤细胞P815对细胞Qa-1表达变化的影响.方法 将体外培养的小鼠肥大细胞瘤细胞P815分为四组,热休克组(共三组)及对照组,至于43℃水浴箱中0.5、1、1.5 h,然后恢复37℃、5%CO2恒温培养,4h后收集细胞,经RT-PCR技术及流式细胞技术,对Qa-1在RNA水平的变化和细胞表面表达进行分析.结果 热休克处理的三组细胞其Qa-1的表达均显著高于对照组,其中1h组升高明显;经热休克处理的靶细胞表面Qa-1表达0.5、1、1.5 h分别为(11.22±2.49)%、(14.22±3.32)%、(12.71±2.28)%,均高于对照组相应时间的(7.99±1.28)%、(7.84±2.28)%、(8.01±3.32)%,差异均有统计学意义(P<0.05).其中1h引起Qa-1表达升高明显.结论 热休克可引起小鼠肥大细胞瘤细胞P815 Qa-1表达水平升高,热休克1 h Qa-1表达水平升高明显.
作者:程子禾;熊伟;李敏;刘甜甜 刊期: 2014年第04期
目的 探讨组织细胞坏死性淋巴结炎(HNL)的器官受累情况及治疗、预后,以提高对本病的认识.方法 收集1997年7月至2013年6月中山大学附属第三医院收治的34例HNL病例的临床资料,总结其器官受累特点、治疗与预后.结果 HNL可累及多个器官.34例患者均有淋巴结受累,血液受累者占67.6%(23/34),累及皮肤者占23.5%(8/34),累及肺脏者占14.7%(5/34),累及浆膜腔者占11.8%(4/34),累及脑膜者占5.9%(2/34),累及关节占2.9%(1/34).同时累及3个及以上器官者32.3%(11/34),定义为多器官受累,激素治疗起始剂量比非多器官受累组大(t=3.126,P<0.05),激素治疗时间亦较长(t=2.446,P<0.05).两组住院时间分别为(16.2±8.7)和(14.0±5.3)d,差异无统计学意义(t=0.751,P=0.465).结论 HNL激素治疗有效,多器官受累患者激素治疗起始剂量较大、时间较长.
作者:石云锋;吴本权;周宇麒;刘慧;张天托 刊期: 2014年第04期
目的 探讨孟鲁司特联合沙丁胺醇治疗咳嗽变异性哮喘患者的临床疗效.方法 回顾深圳市龙岗区坪地人民医院2011年6月至2013年6月间收治的192例咳嗽变异性哮喘小儿病例.按照随机分组法分为观察组(n=103)和对照组(n=89).对照组患者采用沙丁胺醇进行治疗,一天2次;观察组患者在对照组的基础上加用孟鲁司特进行治疗,每晚1次,口服,每次5 mg.对两组患者的治疗效果、咳嗽缓解时间、预后复发率以及不良反应等进行统计和分析.结果 观察组患者治疗的总有效率为92.2% (95/103),高于对照组的77.5% (69/89),差异有统计学意义(x2=5.381,P<0.05).观察组患者咳嗽缓解时间和半年复发率分别为(6.3±0.6)d和4.8%(5/103),均显著低于对照组的(10.2±1.1)d和11.2%(10/89),差异有统计学意义(P<0.05).两组患者在临床治疗中均无明显不良反应.结论 孟鲁司特联合沙丁胺醇在临床上能有效治疗咳嗽变异性哮喘,具有安全可控、快速有效和复发率低的优点,值得推广.
作者:罗海涛 刊期: 2014年第04期
目的 回顾性分析人工肝血浆置换联合持续性血液透析滤过治疗肝衰竭的疗效及其影响因素.方法 收集2008年1月至2012年12月于佛山市第一人民医院在内科综合治疗基础上接受血浆置换联合持续性血液透析滤过治疗的肝衰竭患者77例,观察人工肝治疗前后的临床症状、生化指标(转氨酶、胆红素、凝血功能、肾功能、电解质)和不良反应.结果 人工肝治疗的肝衰竭患者,治疗后临床症状改善有效率为64.9%,转氨酶、总胆红素、凝血功能、肾功能、电解质均较治疗前有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05),其疗效与肝衰竭分期相关,以早期有效率高(P<0.05).治疗过程中出现35例次不良反应,经对症处理后,所有不良反应均可缓解.结论 在内科综合治疗基础之上,血浆置换联合持续性血液透析滤过治疗能有效治疗肝衰竭患者,不良反应少,可作为治疗肝衰竭的重要手段.
作者:吴李贤;叶一农;何宏亮;龙辉;白红莲;李宗良;邓洪 刊期: 2014年第04期
目的 阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布.方法 用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE).结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC.产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTX-M-14).PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低.结论 广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主.
作者:黄盈敏;方芝莉;卿芸;尹琳;冯炼强;田国宝;黄曦 刊期: 2014年第04期
目的 分析玉林市2005-2012年非结防机构网络直报肺结核患者转诊、追踪及到位后活动性与涂阳肺结核检出情况及对发现活动性/涂阳患者的贡献率,为进一步做好该项工作提供科学依据.方法 对玉林市网络报告患者转诊追踪工作相关数据进行分析.结果 玉林市非结核防治机构网络直报肺结核及疑似患者转诊到位率、追踪到位率及总体到位率呈逐年上升趋势(P<0.001);到位后活动性肺结核及涂阳肺结核检出率分别为59.01%(16 725/28 345)和25.87%(7 333/28 345),未到位患者未到位原因主要是外出,非结核防治机构对发现活动性和涂阳肺结核患者的贡献率为53.13%和50.47%.结论 玉林市肺结核及疑似患者报告、转诊和追踪工作取得显著成效.
作者:陈晓 刊期: 2014年第04期
目的 分析云浮市2006-2012年恙虫病疫情资料,为开展预防控制工作提供参考.方法 对云浮市2006-2012年恙虫病疫情资料采用描述性流行病学方法进行分析.结果 2006-2012年云浮市全市共报告恙虫病例567例,死亡3例,年均报告发病率为3.42/10万,2006-2012年各年报告发病率依次为0.13/10万、0.26/10万、2.70/10万、2.67/10万、3.30/10万、5.21/10万和9.54/10万,发病率逐年升高.5-11月为发病高峰期,病例主要集中在云安县(346例)和云城区(176例),所报告病例数占总数的92.06%;男性247例,女性320例,男女性别比为1∶1.30;40岁以上年龄组为主报告病例数472(占83.25%);职业以农民为主报告病例数498(占87.83%).结论 云浮市恙虫病发病率呈逐年增长趋势,建议加强恙虫病的监测,对高危人群开展健康教育以降低发生恙虫病流行的风险.
作者:刘传鸽;冯梓来;雷洁贞;崔楚平 刊期: 2014年第04期
目的 探讨miR-146a对登革病毒感染过程中炎性因子产生的影响及其调控机制.方法 建立过表达miR-146a的THP-1细胞模型,以Real-time PCR检测登革病毒诱导的炎性因子TNFα、IL-6、IL-12和IL-8的mRNA表达水平;采用Westem blot方法检测细胞丝裂原蛋白激酶(MAPK)信号通路在登革病毒感染后不同时间点的激活情况;通过免疫荧光检测登革病毒感染后核因子κB(NF-κB)的核转位情况.结果 miR-146a过表达细胞在登革病毒感染后所表达的TNFα、IL-6、IL-12和IL-8等炎性因子mRNA水平明显下调;miR-146a过表达可明显抑制MAPK、NF-κB信号通路的激活.结论 miR-146a通过抑制登革病毒诱导的MAPK、NF-κB信号通路激活从而调控炎性因子产生.
作者:王廷龙;吴思宇;李玉叶;张萍;黄曦 刊期: 2014年第04期
目的 评价降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和中性杆状核粒细胞(Nst)分类计数联合检测在新生儿败血症诊断中的价值.方法 比较35例败血症组与30例对照组血中PCT、hs-CRP和Nst比值的差异.结果 新生儿败血症组PCT、hs-CRP和Nst比值水平分别为(23.51±10.02)ng/ml、(19.54±8.92)mg/L、(20±8.5)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05).PCT灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值比hs-CRP及Nst高,但联合检测PCT、hs-CRP和Nst的灵敏度比单独PCT高.结论 PCT、hs-CRP和Nst比值可作为新生儿败血症快速有效诊断的检测指标,联合检测可进一步提高检出率.
作者:李惠卿;陈日炳;唐万兵 刊期: 2014年第04期
目的 构建过表达RN181基因的SMMC7721重组细胞株,研究RN181对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其凋亡机制.方法 构建高表达RN181逆转录病毒感染SMMC7721细胞,显微镜观察其细胞株荧光强弱,Western blot鉴定RN181蛋白表达水平;采用DAPI染色法、Western blot检测RN181对顺铂诱导SMMC7721细胞株凋亡的变化情况.结果 重组细胞株荧光表达良好,7721RN181细胞中RN181蛋白表达量高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05).DAPI染色法观察到在顺铂作用下,7721RN181的细胞凋亡阳性率高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测到7721RN181的activated caspase-3、cleaved PARP的表达量高于对照组,pro-caspase-6,pro-caspase-8的表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 RN181表达能促进肝癌细胞的凋亡,其可能通过参与死亡受体凋亡途径来促进肝癌细胞凋亡.进而推测RN181基因可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点.
作者:彭迎霞;张贤;张雪峰;高彦君;王穗海;李纪良 刊期: 2014年第04期
目的 研究唐氏筛查高风险与其他染色体异常的关系,为降低其他染色体异常胎儿的出生提供参考.方法 回顾广州医科大学附属第三医院2010年1月至2013年6月共10 291例有产前诊断指征前来咨询的病例,研究唐氏筛查高风险并进行胎儿染色体核型分析的病例中所有异常染色体核型的分布.结果 4 163例唐氏筛查高风险的孕妇中3 336例同意进行染色体核型分析,其中97例检出染色体异常(2.91%),21、18、13三体综合征有46例(47.42%),而其他染色体异常包括性染色体异常、平衡易位、臂间倒位及嵌合体等共51例(51.55%).结论 唐氏筛查可以提示除21、18、13三体综合征以外的其他染色体异常,孕期唐氏筛查高风险有必要对胎儿进行进一步的产前诊断,并进行胎儿染色体核型分析,从而可以有力的降低出生缺陷儿的出生.
作者:李海军;李志华;陈敏;陈兢思;陈菲;黄丽娟;潘悦健;赖峥菲;孙筱放 刊期: 2014年第04期
目的 分析2009-2012年广州市黄埔区居民的主要死亡原因,了解居民健康状况,为制定疾病预防控制策略提供科学依据.方法 收集《国家疾病监测死因登记报告信息系统》中广州市黄埔区2009-2012年户籍居民死亡病例数据,采用描述流行病学方法、运用SPSS17.0软件进行统计分析,计算人群粗死亡率、标化死亡率、死因构成、平均期望寿命等指标.结果 广州市黄埔区2009-2012年居民平均死亡率476.37/10万(标化死亡率322.69/10万),其中男性平均死亡率为527.46/10万(标化死亡率401.98/10万),女性平均死亡率为417.43/10万(标化死亡率243.91/10万),两者比较差异有统计学意义(P<0.05).2009-2010年黄埔区居民平均期望寿命80.31岁,其中男性为78.57岁,女性为82.18岁.死亡率前5位的死因依次为恶性肿瘤、心脏病、呼吸系统疾病、脑血管病和诊断不明性疾病,占全死因构成的76.72%;死因监测三大类分析中慢性病占总死亡原因的79.52%.结论 黄埔区居民的死亡以慢性疾病为主,其中恶性肿瘤是危害居民健康的主要疾病和死因,对居民进行肿瘤防治知识普及、预防和干预是今后工作的重点.
作者:罗小华;刘嘉聪;黄昱;周焰华 刊期: 2014年第04期