刘传鸽;冯梓来;雷洁贞;崔楚平
目的 探讨2,4-二硝基苯肼(DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定水产品及水发产品中甲醛的方法.方法 采用超声法提取样品,提取液于60℃水浴中衍生20 min,用环己烷提取,后于液相色谱仪进行分析定量.结果 甲醛在0~20 μg/ml浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r为0.9998,相对标准偏差为0.9%~4.5%,加标回收率为93.00%~99.16%;检测结果与国标方法比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好等优点,而且简便、快捷,适合分析大批量样品.
作者:刘昶 刊期: 2014年第04期
目的 探讨胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病(T2DM)患者胰腺β细胞及血管内皮细胞功能的影响.方法 选取初诊T2DM患者196例,随机分为观察组(n=98)与对照组(n=98).对照组给予口服降糖药治疗,观察组给予胰岛素强化治疗,即于早、中、晚餐15 min前皮下注射门冬胰岛素,睡前皮下注射甘精胰岛素,总疗程均为8周.于治疗前后观察两组患者的血糖、HbA1c和胰岛素水平,计算胰腺β细胞功能指数(Homa-β)和胰岛素抵抗指数(Homa-IR),检测血清一氧化氮(NO)和内皮素(ET),超声测定内皮依赖性血管舒张功能(FMEDD)和非内皮依赖性舒张功能(NIEID).结果 治疗后,两组FBG、2hPPG、HbA1c、Homa-IR、ET水平均降低,Homa-β、NO均增高(P<0.05或P<0.01);且观见察组FBG、2hPPG、HbA1c、Homa-IR、ET水平均低于对照组,Homa-β、NO、FMEDD高于对照组(P<0.05),血糖达标时间少于对照组(P<0.05).结论 短期速效胰岛素联合长效胰岛素强化治疗初诊T2DM有效控制了血糖水平,保护了胰腺β细胞及血管内皮细胞功能,对控制T2DM进展和并发症的发生具有积极的作用.
作者:周卫东;任伟;韩金荣;刘慕华 刊期: 2014年第04期
目的 阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布.方法 用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE).结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC.产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTX-M-14).PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低.结论 广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主.
作者:黄盈敏;方芝莉;卿芸;尹琳;冯炼强;田国宝;黄曦 刊期: 2014年第04期
目的 分析玉林市2005-2012年非结防机构网络直报肺结核患者转诊、追踪及到位后活动性与涂阳肺结核检出情况及对发现活动性/涂阳患者的贡献率,为进一步做好该项工作提供科学依据.方法 对玉林市网络报告患者转诊追踪工作相关数据进行分析.结果 玉林市非结核防治机构网络直报肺结核及疑似患者转诊到位率、追踪到位率及总体到位率呈逐年上升趋势(P<0.001);到位后活动性肺结核及涂阳肺结核检出率分别为59.01%(16 725/28 345)和25.87%(7 333/28 345),未到位患者未到位原因主要是外出,非结核防治机构对发现活动性和涂阳肺结核患者的贡献率为53.13%和50.47%.结论 玉林市肺结核及疑似患者报告、转诊和追踪工作取得显著成效.
作者:陈晓 刊期: 2014年第04期
目的 观察胃造口管(经皮内镜下胃造口术留置)及鼻胃管给予肠内营养的疗效区别.方法 因吞咽功能障碍或意识障碍需要较长时间(>4周)实行管饲营养的门诊或住院患者50例,根据患者及其家属是否接受分为经皮内镜下胃造口术(PEG)组和鼻胃管(NGT)组.PEG组实行经皮内镜下胃造口术,术后通过胃造口管给予肠内营养;NGT组实行鼻胃管给予肠内营养,观察两组患者管饲过程的并发症包括返流、吸入性肺炎等的发生情况,以及人体测量指标和实验室检查指标包括三头肌皮褶厚度(TSF)、上臂围(AC)、上臂肌围(AMC)、血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)的变化,观察期为3个月.结果 治疗3个月后,NGT组的ALB、PA、TSF值均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05),而PEG组的ALB、PA、TSF、MC值均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05),且PEG组ALB、PA升高的量高于NGT组,PEG组治疗效果优于NGT组,差异有统计学意义(P<0.05);PEG组3个月内返流和吸入性肺炎等常见并发症发生率低于NGT组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 对于需要较长时间管饲喂养的病人,PEG的疗效明显优于传统的NGT.
作者:陈彩芳;陈艳鸿;黄鹤 刊期: 2014年第04期
目的 探讨外源性细胞因子IL-15、IL-21对HIV-1感染者T淋巴细胞增殖的影响.方法 研究对象为24例已接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)及25例未经HAART的HIV-1感染者(HAART组及HAART-na(i)ve组).以HIV-1P24编码区的氨基酸序列人工合成的12个肽段组成的肽段库作为特异性抗原表位,另添加外源性细胞因子IL-15或者IL-21,对两组研究对象的外周血单个核细胞(PBMC)进行体外刺激培养,采用羧乙基锗倍半氧化物(CFSE)对PBMC进行示踪染色;流式细胞仪检测刺激后的淋巴细胞的增殖情况.结果 HAART-na(i)ve组和HAART组中CD4+CD8+T细胞的增殖百分率,两组的组内比较可见,IL-21刺激的实验组(IL-21组)和IL-15刺激的实验组(IL-15组)均显著高于相应对照组(P均为0.000);HAART组CD8+T细胞增殖水平,IL-15组及IL-21组均明显高于HAART-na(i)ve组(Z=-2.394,P=0.017;Z=-2.130,P=0.033);HAART组与HAART-na(i)ve组中实验分组IL-15组及IL-21组CD4+细胞增殖情况比较差异均无统计学意义.结论 外源性IL-15、IL-21均能促进HIV-1感染者HARRT治疗前及治疗后CD4+及CD8+T淋巴细胞的增殖;且两种因子对CD8+T淋巴细胞增殖的作用HAART治疗后大于HAART治疗前.
作者:平岖;姚细安;李玉枝;赵令斋;唐漾波 刊期: 2014年第04期
Exosomes是一类起源于胞吐作用,直径约30~100 nm的微小囊泡,由多种细胞分泌.Exosomes具有特殊生物学功能,如调节免疫反应,介导病原体—宿主、病原体—病原体之间的相互作用等.本文就病原体感染中Exosomes的分泌、形态学特征、生物学功能以及其潜在的临床应用做一综述.
作者:王立富;孙希;吴忠道 刊期: 2014年第04期
目的 利用时间分辨免疫荧光分析技术(TRFIA)建立血清人附睾分泌蛋白-4(HE4)的检测试剂.方法 采用双抗体夹心法建立血清HE4-TRFIA检测试剂并对试剂的各项指标进行评价.结果 HE4-TRFIA检测试剂的灵敏度为0.73 pmol/L,测量范围为0.73~1 000 pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.6%~7.5%和8.3%~14.4%.与CA15-3、CEA、AFP、HBsAg和CA125无交叉反应.317份正常女性血清标本测试结果提示本试剂的正常参考值范围是0~90 pmol/L.与进口的同类试剂检测,检测结果的相关系数R2为0.976.结论 本HF4-TRFIA检测试剂各项指标均能达到临床检测要求,可望替代国外同类产品用于临床检测.
作者:陈少琅;万勇;张琼;周健伟;徐伟文;吴英松 刊期: 2014年第04期
目的 研究热休克处理小鼠肥大细胞瘤细胞P815对细胞Qa-1表达变化的影响.方法 将体外培养的小鼠肥大细胞瘤细胞P815分为四组,热休克组(共三组)及对照组,至于43℃水浴箱中0.5、1、1.5 h,然后恢复37℃、5%CO2恒温培养,4h后收集细胞,经RT-PCR技术及流式细胞技术,对Qa-1在RNA水平的变化和细胞表面表达进行分析.结果 热休克处理的三组细胞其Qa-1的表达均显著高于对照组,其中1h组升高明显;经热休克处理的靶细胞表面Qa-1表达0.5、1、1.5 h分别为(11.22±2.49)%、(14.22±3.32)%、(12.71±2.28)%,均高于对照组相应时间的(7.99±1.28)%、(7.84±2.28)%、(8.01±3.32)%,差异均有统计学意义(P<0.05).其中1h引起Qa-1表达升高明显.结论 热休克可引起小鼠肥大细胞瘤细胞P815 Qa-1表达水平升高,热休克1 h Qa-1表达水平升高明显.
作者:程子禾;熊伟;李敏;刘甜甜 刊期: 2014年第04期
目的 分别构建带有绿色荧光GFP标签和带有FLAG标签的细胞珠蛋白(CYGB)真核表达载体,观察其在人肝星状细胞(LX-2)的表达定位情况,探讨细胞珠蛋白经不同载体介导表达的定位差异.方法 提取人肝癌细胞(HepG2)总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得CYGB的cDNA,以cDNA为模板采用PCR法扩增得到CYGB编码序列.将其酶切后分别连接至带有GFP标签和FLAG标签的载体上,酶切与测序鉴定阳性克隆.随后将重组质粒分别瞬时转染LX-2细胞,Western blot鉴定表达情况.利用细胞免疫荧光定位,在荧光显微镜下观察两组定位差异.结果 双酶切和测序鉴定表明pEGFP-N1-CYGB和pcDNA3.0-CYGB-FLAG真核表达载体构建成功;经Western blot鉴定,转染的两个载体都能够在LX-2细胞中表达融合蛋白;通过荧光显微镜发现,pEGFP-N1-CYGB和pcDNA3.0-CYGB-FLAG介导的表达产物分别定位在整个细胞和细胞质中.结论 可能由于GFP分子量大等多种原因,导致带GFP标签的融合蛋白定位与带FLAG标签的定位不同,带FLAG标签的融合蛋白定位结果更加可信.
作者:邹珊珊;王萍;魏威;李珍;董文其 刊期: 2014年第04期
目的 构建劳力型热射病大鼠模型,与居民型热射病大鼠模型比较.方法 雄性SPF级SD大鼠随机分为劳力型热射病组(E-HS)、居民型热射病组(C-HS)和相应的正常对照组(E-NC和C-NC组),每组16只.热射病组大鼠予39℃热暴露,E-HS组除了给予39℃热暴露外,同时让其在跑台持续运动.监测各组大鼠核心体温和动脉收缩压变化,对比核心体温调节反应和生存时间.结果 E-HS和C-HS组大鼠表现出不同的核心体温调节特征.尽管大核心体温差异无统计学意义,但是对比C-HS组大鼠,E-HS组大鼠核心体温上升速率显著加快(P<0.05),成模时间显著缩短(P<0.05),总热负荷和严重热负荷均显著减少(P<0.05),预后更差(P<0.05).结论 劳力型热射病大鼠模型相较与居民型热射病大鼠预后差,劳力型热射病大鼠模型的建立可为研究劳力型热射病的病理生理机制提供基础.
作者:帅军;郭进强;覃旻;罗炳德 刊期: 2014年第04期
目的 了解铜绿假单胞菌临床分布情况、耐药现状以及外膜通道蛋白OprD2的缺失与亚胺培南耐药的相关性.方法 收集2011-2013年深圳市第二人民医院临床分离到的949株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行12种抗生素药敏试验,通过设计引物,运用聚合酶链反应(PCR)方法扩增oprD2基因.结果 共949株铜绿假单胞菌,分离率前两位的科室是神经外科和ICU病房,分别占25.40%和22.76%;铜绿假单胞菌对12种抗生素的药敏试验中,敏感的是阿米卡星(85.88%),其次是氨曲南(85.25%),耐药率高的是头孢他啶(37.09%),对亚胺培南耐药的有312株,即亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)的分离率为32.88%(312/949);2012年6-12月筛选的81株IRPA中,有42株oprD2基因缺失,缺失率为51.85%.结论 临床分离铜绿假单胞菌耐药性严重,外膜通道蛋白OprD2缺失可能是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因之一.
作者:吴伟清;盖俊惠;李卓成 刊期: 2014年第04期
当今神经系统感染性疾病发病呈现散发趋势,但神经型布氏杆菌病有增多趋势.其表现多样,以脑膜炎、脑膜脑炎、脊髓炎和脊髓病多见,而以脊髓压迫症发病的还未见报道.回顾性分析保定市第一医院2013年3日诊断明确的1例神经布氏杆菌病的临床表现、辅助检查结果以及诊断与治疗经过,并结合文献分析其发病特点.
作者:赵智江;高凤国;贾思琪 刊期: 2014年第04期
目的 探讨冠心病患者血清降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)表达量与冠状动脉粥样硬化病变程度的相关性.方法 118例冠状动脉造影术患者按造影结果分为冠心病组(n=89)和正常对照组(n=29),随即,采用改良Censini评分方法将冠心病组患者分为<30分组(n=24)、30~60分组(n=37)和>60分组(n=28),分别检测各组患者PCT和hs-CRP的含量.结果 冠心病患者PCT和hs-CRP含量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);同时,冠心病患者PCT和hs-CRP含量随Gensini评分增加而逐渐上升,相关系数分别为0.88和0.90,呈正相关性(P<0.05).结论 PCT、hs-CRP的含量与冠状动脉粥样硬化病变程度呈正相关,联合检测PCT和hs-CRP的含量有助于早期诊断冠状动脉粥样硬化引起的冠心病.
作者:刘志祥;谢飞;吴玉竹;李文兵 刊期: 2014年第04期
目的 分析云浮市2006-2012年恙虫病疫情资料,为开展预防控制工作提供参考.方法 对云浮市2006-2012年恙虫病疫情资料采用描述性流行病学方法进行分析.结果 2006-2012年云浮市全市共报告恙虫病例567例,死亡3例,年均报告发病率为3.42/10万,2006-2012年各年报告发病率依次为0.13/10万、0.26/10万、2.70/10万、2.67/10万、3.30/10万、5.21/10万和9.54/10万,发病率逐年升高.5-11月为发病高峰期,病例主要集中在云安县(346例)和云城区(176例),所报告病例数占总数的92.06%;男性247例,女性320例,男女性别比为1∶1.30;40岁以上年龄组为主报告病例数472(占83.25%);职业以农民为主报告病例数498(占87.83%).结论 云浮市恙虫病发病率呈逐年增长趋势,建议加强恙虫病的监测,对高危人群开展健康教育以降低发生恙虫病流行的风险.
作者:刘传鸽;冯梓来;雷洁贞;崔楚平 刊期: 2014年第04期
目的 构建过表达RN181基因的SMMC7721重组细胞株,研究RN181对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其凋亡机制.方法 构建高表达RN181逆转录病毒感染SMMC7721细胞,显微镜观察其细胞株荧光强弱,Western blot鉴定RN181蛋白表达水平;采用DAPI染色法、Western blot检测RN181对顺铂诱导SMMC7721细胞株凋亡的变化情况.结果 重组细胞株荧光表达良好,7721RN181细胞中RN181蛋白表达量高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05).DAPI染色法观察到在顺铂作用下,7721RN181的细胞凋亡阳性率高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测到7721RN181的activated caspase-3、cleaved PARP的表达量高于对照组,pro-caspase-6,pro-caspase-8的表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 RN181表达能促进肝癌细胞的凋亡,其可能通过参与死亡受体凋亡途径来促进肝癌细胞凋亡.进而推测RN181基因可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点.
作者:彭迎霞;张贤;张雪峰;高彦君;王穗海;李纪良 刊期: 2014年第04期
目的 研究近年来东莞市不明原因夜间睡眠猝死综合征(SUNDS)的流行病学特征,探寻有关的病因学线索.方法 收集东莞市2007-2013年SUNDS死亡病例,并在资料库中按年龄、性别和死亡时间相接近、1∶1匹配死因明确者作为对照组,同时对两组病例按年龄、性别、籍贯、死亡月份、死亡时刻及职业划分亚组,对病例资料数据进行统计分析,研究该病的流行病学特征.结果 2007-2013年东莞市SUNDS死亡病例共计565例;男女性别比为14.7∶1;2007-2013年各年发病率分别为0.68/10万、0.79/10万、0.60/10万、1.24/10万、1.20/10万、1.65/10万、0.93/10万;年龄分布在17~55岁,中位年龄为35岁,与全死因组年龄分布差异有统计学意义;发病例数高峰出现在3-6月份,低在10-12月份,与当地全年月平均气温变化趋势存在相关性;死亡高峰时段为凌晨0-1点,例数较低时段(凌晨3-4点)高出20多倍;病例籍贯来源多为湖南省(93例),有发病“聚集性”的是云南省(病例组/对照组4.25倍)、香港(3.67倍)及海南(2倍);SUNDS病例主要发生于劳动强度大、文化程度低的工厂一线工人、保安、清洁员等人群中.结论 近年来东莞市SUNDS的年均发病率未见下降,提示发病的高危因素依然存在,须作进一步流行病学调查查明高危因素.
作者:余彬彬;翟李俊;徐伦武;郑金祥;黄二文;唐双柏;刘超;成建定 刊期: 2014年第04期
目的 评价降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和中性杆状核粒细胞(Nst)分类计数联合检测在新生儿败血症诊断中的价值.方法 比较35例败血症组与30例对照组血中PCT、hs-CRP和Nst比值的差异.结果 新生儿败血症组PCT、hs-CRP和Nst比值水平分别为(23.51±10.02)ng/ml、(19.54±8.92)mg/L、(20±8.5)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05).PCT灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值比hs-CRP及Nst高,但联合检测PCT、hs-CRP和Nst的灵敏度比单独PCT高.结论 PCT、hs-CRP和Nst比值可作为新生儿败血症快速有效诊断的检测指标,联合检测可进一步提高检出率.
作者:李惠卿;陈日炳;唐万兵 刊期: 2014年第04期
目的 制备抗肺炎链球菌(S.pn)丝氨酸-苏氨酸激酶(STKP)基因的特定区域的免疫血清,为疫苗研究奠定基础.方法 PCR扩增S.pn STKP蛋白C末端314个氨基酸区域的基因,将其克隆入pMD19-T载体,将鉴定正确的STKP基因从pMD19-T载体亚克隆至PET-32a(+)原核表达载体进行诱导表达;获得的可溶性蛋白经Ni2+柱纯化及Western blot鉴定后,免疫家兔制备抗STKP血清,间接EHSA鉴定抗体效价,Western blot鉴定免疫血清特异性.结果 成功将STKP基因特定序列克隆入PET-32a(+)原核表达载体并诱导表达,形式以可溶性表达为主,经Ni2+柱层析法纯化STKP,纯度达92%,免疫家兔制备出STKP免疫血清,间接ELISA检测抗体效价为1∶100 000,Western blot证实免疫血清能与目的蛋白特异结合.结论 获得STKP重组蛋白及免疫血清,重组表达产物具有免疫原性,为S.pn多价联合蛋白疫苗研制奠定了基础.
作者:刘美玲;李有强;陈东成;屈平华;张轩;张汉运;陈兴文 刊期: 2014年第04期
目的 掌握重庆市布鲁氏菌病疫情及流行趋势,为布鲁氏菌病防治策略提供依据.方法 选择畜牧业发达,畜牧饲养量较大的区域作为监测点对重点职业人群进行病情监测;收集重庆市畜牧部门2008-2012年期间的畜间感染布鲁氏菌的资料.人群和动物血样均采用试管凝集试验进行检测.结果 2005-2012年共主动搜索重点职业人群18 521人,未发现符合布鲁氏菌病诊断标准的临床症状、体征的病例;重点人群采集血清标本3 727份,血清学阳性率为0.94%;以2011、2012年血清阳性率较高,随着年份的增加,阳性率呈上升趋势(x2趋势=14.04,P<0.01).男性血清学阳性率(1.16%)高于女性(0.38%)(x2=4.90,P<0.05);阳性者以青壮年为主;不同职业间感染率比较,差异有统计学意义(x2=42.86,P<0.01),以奶牛饲养员高(2.31%).共调查68 181头牲畜,血清阳性率为0.83%,均为奶牛,以2012年为高(1.83%),2009年低(0.01%);随着年份的增加,畜间布鲁氏菌病感染率呈上升趋势(x2趋势=453.49,P<0.01).结论 重庆市人间和畜间布鲁氏菌病感染呈上升趋势,奶牛是人间布鲁氏菌病感染的主要传染源,应加强牲畜检疫和人群监测,及时发现疫情.
作者:黄文利;黄诚;吴成果;李心术 刊期: 2014年第04期