学术投稿

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布

黄盈敏;方芝莉;卿芸;尹琳;冯炼强;田国宝;黄曦

关键词:肺炎克雷伯菌, β-内酰胺酶, 脉冲场凝胶电泳
摘要:目的 阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布.方法 用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE).结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC.产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTX-M-14).PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低.结论 广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主.
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  • 34例组织细胞坏死性淋巴结炎器官受累分析

    目的 探讨组织细胞坏死性淋巴结炎(HNL)的器官受累情况及治疗、预后,以提高对本病的认识.方法 收集1997年7月至2013年6月中山大学附属第三医院收治的34例HNL病例的临床资料,总结其器官受累特点、治疗与预后.结果 HNL可累及多个器官.34例患者均有淋巴结受累,血液受累者占67.6%(23/34),累及皮肤者占23.5%(8/34),累及肺脏者占14.7%(5/34),累及浆膜腔者占11.8%(4/34),累及脑膜者占5.9%(2/34),累及关节占2.9%(1/34).同时累及3个及以上器官者32.3%(11/34),定义为多器官受累,激素治疗起始剂量比非多器官受累组大(t=3.126,P<0.05),激素治疗时间亦较长(t=2.446,P<0.05).两组住院时间分别为(16.2±8.7)和(14.0±5.3)d,差异无统计学意义(t=0.751,P=0.465).结论 HNL激素治疗有效,多器官受累患者激素治疗起始剂量较大、时间较长.

    作者:石云锋;吴本权;周宇麒;刘慧;张天托 刊期: 2014年第04期

  • miR-143、miR-145及血管紧张素Ⅱ在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达

    目的 探究miR-143、miR-145及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达情况.方法 采用12例冠状动脉粥样硬化解剖病例的硬化冠状动脉及斑块和13例非心源性死因病例的冠状动脉血管的石蜡包埋组织,提取组织RNA,逆转录后运用qPCR技术检测miR-143、miR-145在病变冠脉组织和正常冠脉组织中的表达情况,同时运用免疫组织化学染色技术半定量AngⅡ在病变冠脉组织和正常冠脉组织中的表达情况.结果 冠状动脉粥样硬化组中miR-143、miR-145的表达量分别为(1.16±0.36)、(3.22±1.30),较对照组的(5.21±2.86)、(13.09±6.06)下降,差异均有统计学意义(P<0.01).AngⅡ主要表达于粥样硬化冠状动脉的巨噬细胞及成纤维细胞中,其表达量在冠状动脉粥样硬化组中为(7.09±0.71),较对照组的(42.75±29.59)下降,差异有统计学意义(P<0.01).对照组不同死因病例间miR-143、miR-145和AngⅡ表达差异无统计学意义.结论 miR-143、miR-145及AngⅡ在人冠状动脉粥样硬化斑块中表达下调.

    作者:郝理;游盛中;马素华;张东川;罗斌;权力 刊期: 2014年第04期

  • 广西玉林市非结核病防治机构网络报告肺结核患者转诊与追踪情况分析

    目的 分析玉林市2005-2012年非结防机构网络直报肺结核患者转诊、追踪及到位后活动性与涂阳肺结核检出情况及对发现活动性/涂阳患者的贡献率,为进一步做好该项工作提供科学依据.方法 对玉林市网络报告患者转诊追踪工作相关数据进行分析.结果 玉林市非结核防治机构网络直报肺结核及疑似患者转诊到位率、追踪到位率及总体到位率呈逐年上升趋势(P<0.001);到位后活动性肺结核及涂阳肺结核检出率分别为59.01%(16 725/28 345)和25.87%(7 333/28 345),未到位患者未到位原因主要是外出,非结核防治机构对发现活动性和涂阳肺结核患者的贡献率为53.13%和50.47%.结论 玉林市肺结核及疑似患者报告、转诊和追踪工作取得显著成效.

    作者:陈晓 刊期: 2014年第04期

  • 自然杀伤细胞在四氯化碳诱导的急性肝衰竭中的作用

    目的 探讨自然杀伤细胞(NK)在急性肝衰竭进展过程中的作用.方法 40只Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组腹腔注射四氯化碳诱导急性肝衰竭,对照组则注射橄榄油.分离小鼠外周血、肝脏、脾脏的淋巴细胞,用流式细胞仪检测其NK细胞的比例及相关受体表达情况.结果 急性肝衰竭小鼠肝脏NK细胞比例较对照组明显升高,差异有统计学意义[(37.2±2.8)%vs(15.3±1.5)%,P=0.0004],外周血以及脾脏中NK细胞比例均较对照组下降.急性肝衰竭小鼠肝脏活化性受体NKP46较抑制性受体NKG2A表达升高更明显,差异有统计学意义[(18.7±1.5)%vs(4.9±2.3)%;t=3.95,P=0.016)].结论 肝脏局部NK细胞在药物诱导的急性肝衰竭中发挥重要的作用.

    作者:熊静;翁伟镇;陈俊峰;曹会娟;曾慧敏;高志良;林炳亮 刊期: 2014年第04期

  • 经皮内镜下胃造口术和鼻胃管给予肠内营养的效果比较

    目的 观察胃造口管(经皮内镜下胃造口术留置)及鼻胃管给予肠内营养的疗效区别.方法 因吞咽功能障碍或意识障碍需要较长时间(>4周)实行管饲营养的门诊或住院患者50例,根据患者及其家属是否接受分为经皮内镜下胃造口术(PEG)组和鼻胃管(NGT)组.PEG组实行经皮内镜下胃造口术,术后通过胃造口管给予肠内营养;NGT组实行鼻胃管给予肠内营养,观察两组患者管饲过程的并发症包括返流、吸入性肺炎等的发生情况,以及人体测量指标和实验室检查指标包括三头肌皮褶厚度(TSF)、上臂围(AC)、上臂肌围(AMC)、血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)的变化,观察期为3个月.结果 治疗3个月后,NGT组的ALB、PA、TSF值均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05),而PEG组的ALB、PA、TSF、MC值均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05),且PEG组ALB、PA升高的量高于NGT组,PEG组治疗效果优于NGT组,差异有统计学意义(P<0.05);PEG组3个月内返流和吸入性肺炎等常见并发症发生率低于NGT组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 对于需要较长时间管饲喂养的病人,PEG的疗效明显优于传统的NGT.

    作者:陈彩芳;陈艳鸿;黄鹤 刊期: 2014年第04期

  • 以脊髓压迫症起病的布氏杆菌病1例报道并文献复习

    当今神经系统感染性疾病发病呈现散发趋势,但神经型布氏杆菌病有增多趋势.其表现多样,以脑膜炎、脑膜脑炎、脊髓炎和脊髓病多见,而以脊髓压迫症发病的还未见报道.回顾性分析保定市第一医院2013年3日诊断明确的1例神经布氏杆菌病的临床表现、辅助检查结果以及诊断与治疗经过,并结合文献分析其发病特点.

    作者:赵智江;高凤国;贾思琪 刊期: 2014年第04期

  • 外源性IL-15、IL-21对HIV-1感染者T淋巴细胞增殖的影响

    目的 探讨外源性细胞因子IL-15、IL-21对HIV-1感染者T淋巴细胞增殖的影响.方法 研究对象为24例已接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)及25例未经HAART的HIV-1感染者(HAART组及HAART-na(i)ve组).以HIV-1P24编码区的氨基酸序列人工合成的12个肽段组成的肽段库作为特异性抗原表位,另添加外源性细胞因子IL-15或者IL-21,对两组研究对象的外周血单个核细胞(PBMC)进行体外刺激培养,采用羧乙基锗倍半氧化物(CFSE)对PBMC进行示踪染色;流式细胞仪检测刺激后的淋巴细胞的增殖情况.结果 HAART-na(i)ve组和HAART组中CD4+CD8+T细胞的增殖百分率,两组的组内比较可见,IL-21刺激的实验组(IL-21组)和IL-15刺激的实验组(IL-15组)均显著高于相应对照组(P均为0.000);HAART组CD8+T细胞增殖水平,IL-15组及IL-21组均明显高于HAART-na(i)ve组(Z=-2.394,P=0.017;Z=-2.130,P=0.033);HAART组与HAART-na(i)ve组中实验分组IL-15组及IL-21组CD4+细胞增殖情况比较差异均无统计学意义.结论 外源性IL-15、IL-21均能促进HIV-1感染者HARRT治疗前及治疗后CD4+及CD8+T淋巴细胞的增殖;且两种因子对CD8+T淋巴细胞增殖的作用HAART治疗后大于HAART治疗前.

    作者:平岖;姚细安;李玉枝;赵令斋;唐漾波 刊期: 2014年第04期

  • 肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布

    目的 阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布.方法 用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE).结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC.产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTX-M-14).PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低.结论 广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主.

    作者:黄盈敏;方芝莉;卿芸;尹琳;冯炼强;田国宝;黄曦 刊期: 2014年第04期

  • 铜绿假单胞菌的耐药现状及外膜通道蛋白OprD2的研究

    目的 了解铜绿假单胞菌临床分布情况、耐药现状以及外膜通道蛋白OprD2的缺失与亚胺培南耐药的相关性.方法 收集2011-2013年深圳市第二人民医院临床分离到的949株铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行12种抗生素药敏试验,通过设计引物,运用聚合酶链反应(PCR)方法扩增oprD2基因.结果 共949株铜绿假单胞菌,分离率前两位的科室是神经外科和ICU病房,分别占25.40%和22.76%;铜绿假单胞菌对12种抗生素的药敏试验中,敏感的是阿米卡星(85.88%),其次是氨曲南(85.25%),耐药率高的是头孢他啶(37.09%),对亚胺培南耐药的有312株,即亚胺培南耐药铜绿假单胞菌(IRPA)的分离率为32.88%(312/949);2012年6-12月筛选的81株IRPA中,有42株oprD2基因缺失,缺失率为51.85%.结论 临床分离铜绿假单胞菌耐药性严重,外膜通道蛋白OprD2缺失可能是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因之一.

    作者:吴伟清;盖俊惠;李卓成 刊期: 2014年第04期

  • DNPH柱前衍生高效液相色谱法测定水产品及水发产品中甲醛的方法

    目的 探讨2,4-二硝基苯肼(DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定水产品及水发产品中甲醛的方法.方法 采用超声法提取样品,提取液于60℃水浴中衍生20 min,用环己烷提取,后于液相色谱仪进行分析定量.结果 甲醛在0~20 μg/ml浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r为0.9998,相对标准偏差为0.9%~4.5%,加标回收率为93.00%~99.16%;检测结果与国标方法比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好等优点,而且简便、快捷,适合分析大批量样品.

    作者:刘昶 刊期: 2014年第04期

  • 东莞市无偿献血者文化程度与血液检测结果关系分析

    目的 分析2007-2012年东莞市不同文化程度的无偿献血者的5项血液检测结果,了解无偿献血者血液感染情况,从中找出献血的主体人群,为招募低危献血者提供依据.方法 收集2007年1月至2012年12月的无偿献血者资料(文化程度)及其血液ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP检测结果,分析两者间的关系.结果 高中和初中文化程度的献血者,约占总体人群的66.35%(229 443/345 809).不同文化程度的血液检测指标的总阳性率差异有统计学意义(x2=338.27,P<0.05),以“大学本科及以上”及“不详”为低阳性率组,随着文化程度的降低,血液检测指标的阳性率有逐渐增高的趋势.结论 重视血源招募工作,招募的对象集中在学历相对较高的人群,同时尽量组织动员在校大学生积极参与无偿献血.

    作者:费亚涛;黄志森;王德文 刊期: 2014年第04期

  • 唐氏筛查高风险对胎儿其他染色体异常的预测意义

    目的 研究唐氏筛查高风险与其他染色体异常的关系,为降低其他染色体异常胎儿的出生提供参考.方法 回顾广州医科大学附属第三医院2010年1月至2013年6月共10 291例有产前诊断指征前来咨询的病例,研究唐氏筛查高风险并进行胎儿染色体核型分析的病例中所有异常染色体核型的分布.结果 4 163例唐氏筛查高风险的孕妇中3 336例同意进行染色体核型分析,其中97例检出染色体异常(2.91%),21、18、13三体综合征有46例(47.42%),而其他染色体异常包括性染色体异常、平衡易位、臂间倒位及嵌合体等共51例(51.55%).结论 唐氏筛查可以提示除21、18、13三体综合征以外的其他染色体异常,孕期唐氏筛查高风险有必要对胎儿进行进一步的产前诊断,并进行胎儿染色体核型分析,从而可以有力的降低出生缺陷儿的出生.

    作者:李海军;李志华;陈敏;陈兢思;陈菲;黄丽娟;潘悦健;赖峥菲;孙筱放 刊期: 2014年第04期

  • miR-146a对登革病毒诱导的炎性因子的负调控及机制研究

    目的 探讨miR-146a对登革病毒感染过程中炎性因子产生的影响及其调控机制.方法 建立过表达miR-146a的THP-1细胞模型,以Real-time PCR检测登革病毒诱导的炎性因子TNFα、IL-6、IL-12和IL-8的mRNA表达水平;采用Westem blot方法检测细胞丝裂原蛋白激酶(MAPK)信号通路在登革病毒感染后不同时间点的激活情况;通过免疫荧光检测登革病毒感染后核因子κB(NF-κB)的核转位情况.结果 miR-146a过表达细胞在登革病毒感染后所表达的TNFα、IL-6、IL-12和IL-8等炎性因子mRNA水平明显下调;miR-146a过表达可明显抑制MAPK、NF-κB信号通路的激活.结论 miR-146a通过抑制登革病毒诱导的MAPK、NF-κB信号通路激活从而调控炎性因子产生.

    作者:王廷龙;吴思宇;李玉叶;张萍;黄曦 刊期: 2014年第04期

  • 重庆市布鲁氏菌病流行趋势分析

    目的 掌握重庆市布鲁氏菌病疫情及流行趋势,为布鲁氏菌病防治策略提供依据.方法 选择畜牧业发达,畜牧饲养量较大的区域作为监测点对重点职业人群进行病情监测;收集重庆市畜牧部门2008-2012年期间的畜间感染布鲁氏菌的资料.人群和动物血样均采用试管凝集试验进行检测.结果 2005-2012年共主动搜索重点职业人群18 521人,未发现符合布鲁氏菌病诊断标准的临床症状、体征的病例;重点人群采集血清标本3 727份,血清学阳性率为0.94%;以2011、2012年血清阳性率较高,随着年份的增加,阳性率呈上升趋势(x2趋势=14.04,P<0.01).男性血清学阳性率(1.16%)高于女性(0.38%)(x2=4.90,P<0.05);阳性者以青壮年为主;不同职业间感染率比较,差异有统计学意义(x2=42.86,P<0.01),以奶牛饲养员高(2.31%).共调查68 181头牲畜,血清阳性率为0.83%,均为奶牛,以2012年为高(1.83%),2009年低(0.01%);随着年份的增加,畜间布鲁氏菌病感染率呈上升趋势(x2趋势=453.49,P<0.01).结论 重庆市人间和畜间布鲁氏菌病感染呈上升趋势,奶牛是人间布鲁氏菌病感染的主要传染源,应加强牲畜检疫和人群监测,及时发现疫情.

    作者:黄文利;黄诚;吴成果;李心术 刊期: 2014年第04期

  • 2007-2013年东莞市不明原因夜间睡眠猝死综合征的流行病学特征分析

    目的 研究近年来东莞市不明原因夜间睡眠猝死综合征(SUNDS)的流行病学特征,探寻有关的病因学线索.方法 收集东莞市2007-2013年SUNDS死亡病例,并在资料库中按年龄、性别和死亡时间相接近、1∶1匹配死因明确者作为对照组,同时对两组病例按年龄、性别、籍贯、死亡月份、死亡时刻及职业划分亚组,对病例资料数据进行统计分析,研究该病的流行病学特征.结果 2007-2013年东莞市SUNDS死亡病例共计565例;男女性别比为14.7∶1;2007-2013年各年发病率分别为0.68/10万、0.79/10万、0.60/10万、1.24/10万、1.20/10万、1.65/10万、0.93/10万;年龄分布在17~55岁,中位年龄为35岁,与全死因组年龄分布差异有统计学意义;发病例数高峰出现在3-6月份,低在10-12月份,与当地全年月平均气温变化趋势存在相关性;死亡高峰时段为凌晨0-1点,例数较低时段(凌晨3-4点)高出20多倍;病例籍贯来源多为湖南省(93例),有发病“聚集性”的是云南省(病例组/对照组4.25倍)、香港(3.67倍)及海南(2倍);SUNDS病例主要发生于劳动强度大、文化程度低的工厂一线工人、保安、清洁员等人群中.结论 近年来东莞市SUNDS的年均发病率未见下降,提示发病的高危因素依然存在,须作进一步流行病学调查查明高危因素.

    作者:余彬彬;翟李俊;徐伦武;郑金祥;黄二文;唐双柏;刘超;成建定 刊期: 2014年第04期

  • 苏灵局部止血及体外抑制FXa+t-PA诱导纤溶酶原激活作用

    目的 探讨苏灵(SL)体外对人血浆凝固时间的影响、局部给药对小鼠剪尾后出血的促凝作用及体外对纤溶系统的影响.方法 将磷酸钠缓冲液、SL溶液和人凝血酶溶液与人血浆混合,血凝仪测定其凝固时间;将分别浸有磷酸钠缓冲液(溶媒组)、SL溶液和人凝血酶溶液的纱布敷于小鼠剪尾后的伤口上,计算出血时间和出血量,评价各组的止血效果;采用SDS-PAGE方法检测SL对人纤溶酶原的降解作用,吸光度法测定SL体外对FXa+t-PA诱导的纤溶酶原激活作用的影响.结果 SL和人凝血酶能明显缩短人血浆凝固时间,并能明显缩短小鼠剪尾的止血时间及减少出血量,与溶媒组比较差异有统计学意义(P<0.05);SL对人纤溶酶原没有直接的裂解作用,不激活人纤溶酶原;SL可抑制FXa+t-PA诱导的人纤溶酶原体外激活.结论 SL具有良好的局部止血效果,其部分作用机制可能与抑制FXa激活纤溶系统有关.

    作者:孔焕育;曹莹;米鹏程;庞建新 刊期: 2014年第04期

  • PCT、hs-CRP和Nst分类计数联合检测在新生儿败血症诊断中的应用

    目的 评价降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和中性杆状核粒细胞(Nst)分类计数联合检测在新生儿败血症诊断中的价值.方法 比较35例败血症组与30例对照组血中PCT、hs-CRP和Nst比值的差异.结果 新生儿败血症组PCT、hs-CRP和Nst比值水平分别为(23.51±10.02)ng/ml、(19.54±8.92)mg/L、(20±8.5)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05).PCT灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值比hs-CRP及Nst高,但联合检测PCT、hs-CRP和Nst的灵敏度比单独PCT高.结论 PCT、hs-CRP和Nst比值可作为新生儿败血症快速有效诊断的检测指标,联合检测可进一步提高检出率.

    作者:李惠卿;陈日炳;唐万兵 刊期: 2014年第04期

  • 三维重建技术观察1-磷酸鞘氨醇刺激其受体2在内皮细胞的表达

    目的 应用激光扫描共聚焦显微镜三维重建技术观察1-磷酸鞘氨醇(S1P)刺激下S1P受体2(S1PR2)的表达变化,并探讨共聚焦三维重建技术与普通单层扫描技术在生物组织功能和形态学研究中的应用价值.方法 S1P(10μmol/L)刺激脐静脉内皮细胞(HUVECs)6 h,Western blot检测S1PR2的表达变化;对细胞进行免疫荧光染色后,采用激光扫描共聚焦显微镜分别进行多层层切扫描和单层扫描,层切扫描之后对图像进行三维重建,比较两种技术的优劣.结果 Western blot结果显示S1P刺激6h后S1PR2表达显著性增高(P<0.05).荧光图像显示,单层扫描时S1P 6 h组荧光强度与对照组比较差异无统计学意义;而层切之后三维重建图像中,S1P刺激后S1PR2荧光强度显著高于正常对照组和单层扫描所得图像,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 激光扫描共聚焦显微镜三维重建技术,可以获得三维重构图像,并且具有三维立体及图像信息量更全的特点,更能客观的表现出整个细胞特定分子荧光强度的变化.

    作者:萧艳;王立群;黄巧冰 刊期: 2014年第04期

  • 劳力型与居民型热射病大鼠模型的比较

    目的 构建劳力型热射病大鼠模型,与居民型热射病大鼠模型比较.方法 雄性SPF级SD大鼠随机分为劳力型热射病组(E-HS)、居民型热射病组(C-HS)和相应的正常对照组(E-NC和C-NC组),每组16只.热射病组大鼠予39℃热暴露,E-HS组除了给予39℃热暴露外,同时让其在跑台持续运动.监测各组大鼠核心体温和动脉收缩压变化,对比核心体温调节反应和生存时间.结果 E-HS和C-HS组大鼠表现出不同的核心体温调节特征.尽管大核心体温差异无统计学意义,但是对比C-HS组大鼠,E-HS组大鼠核心体温上升速率显著加快(P<0.05),成模时间显著缩短(P<0.05),总热负荷和严重热负荷均显著减少(P<0.05),预后更差(P<0.05).结论 劳力型热射病大鼠模型相较与居民型热射病大鼠预后差,劳力型热射病大鼠模型的建立可为研究劳力型热射病的病理生理机制提供基础.

    作者:帅军;郭进强;覃旻;罗炳德 刊期: 2014年第04期

  • 携带GFP和FLAG标签的真核表达载体介导细胞珠蛋白在细胞内表达的定位研究

    目的 分别构建带有绿色荧光GFP标签和带有FLAG标签的细胞珠蛋白(CYGB)真核表达载体,观察其在人肝星状细胞(LX-2)的表达定位情况,探讨细胞珠蛋白经不同载体介导表达的定位差异.方法 提取人肝癌细胞(HepG2)总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得CYGB的cDNA,以cDNA为模板采用PCR法扩增得到CYGB编码序列.将其酶切后分别连接至带有GFP标签和FLAG标签的载体上,酶切与测序鉴定阳性克隆.随后将重组质粒分别瞬时转染LX-2细胞,Western blot鉴定表达情况.利用细胞免疫荧光定位,在荧光显微镜下观察两组定位差异.结果 双酶切和测序鉴定表明pEGFP-N1-CYGB和pcDNA3.0-CYGB-FLAG真核表达载体构建成功;经Western blot鉴定,转染的两个载体都能够在LX-2细胞中表达融合蛋白;通过荧光显微镜发现,pEGFP-N1-CYGB和pcDNA3.0-CYGB-FLAG介导的表达产物分别定位在整个细胞和细胞质中.结论 可能由于GFP分子量大等多种原因,导致带GFP标签的融合蛋白定位与带FLAG标签的定位不同,带FLAG标签的融合蛋白定位结果更加可信.

    作者:邹珊珊;王萍;魏威;李珍;董文其 刊期: 2014年第04期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会