杨平;曹杰;张通;王强;孙政;张伟健;曾山崎
目的 探讨比伐卢定(直接凝血酶抑制剂)在大鼠胰岛分离过程中保护胰岛细胞的作用.方法 将SD大鼠分为比伐卢定处理组和对照组,处理组在胰岛分离全过程中加用比伐卢定进行干预,对照组则不加比伐卢定处理,采用Ficoll非连续密度离心纯化后对两组胰岛细胞的凋亡(采用原位末端核苷酸标记法及流式细胞仪检测)、胰岛产量及活力方面进行比较性研究.结果 比伐卢定5000U处理组的胰岛细胞凋亡计数(5±4)个/HPF、凋亡率(16.5±3.6)%、Fas-1基因表达水平(4.6±1.9)%均显著低于对照组(P<0.01),胰岛产量(315.3±6.1)IEQ、胰岛素释放水平(179.11±2.18)mIU/L和Bcl-2基因表达水平(10.5±1.2)%均显著高于对照组(P<0.01),差异有统计学意义.结论 胰岛分离过程中加用比伐卢定对胰岛具有抑制凋亡、提高胰岛产量和保护胰岛活力的作用.
作者:邱立;柳玉红;温寿青;汪春福 刊期: 2013年第06期
目的 探讨IVF-ET助孕治疗中新鲜周期移植不孕而后续的冷冻周期成功妊娠的原因以指导治疗.方法 回顾性分析体外受精或单精子卵母细胞浆内注射-胚胎移植术(IVF/ICSI-ET)治疗患者950个周期,其中新鲜周期妊娠组780个周期和新鲜周期未孕冷冻周期妊娠组170个周期,比较两组患者年龄、不孕年限、病因及基础FSH水平、Gn使用情况、hCG日内膜、激素水平、卵泡数、获卵及胚胎情况的差异.采用单因素分析筛选出差异有统计学意义的因素进行多因素分析.结果 经Logistic回归分析得出hCG日P4、hCG日E2/1 000是妊娠的独立影响因素.hCG日P4(OR=1.653,P=0.015,95% CI:1.101~2.482),hCG日E2/1 000(OR=1.219,P=0.001,95% CI:1.085~1.369).hCG日酮孕每增加1 ng/ml,新鲜周期不孕而冷冻周期妊娠的风险将增加1.653倍.hCG日E2每增加1 000 pg/ml,新鲜周期不孕而冷冻周期妊娠的风险将增加1.219倍.结论 hCG日的P4和E2是导致新鲜移植不孕而冷冻周期妊娠的重要原因.P4和E2过高,可考虑放弃新鲜移植,采用冷冻移植.
作者:谭焱;宋亚丽;马从顺;刘颖;邢福祺 刊期: 2013年第06期
目的 了解深圳市福田区医疗机构消毒效果.方法 对2006-2012年146家医疗机构消毒效果监测数据进行分析.结果 共采样12 287份,合格11 857份,合格率96.5%.2006-2012年合格率分别为96.7%、97.2%、95.2%、95.9%、95.2%、97.9%、97.2%,差异有统计学意义(x2=39.465,P<0.05).室内空气、物体表面、医护人员手、使用中消毒液、污水合格率依次为97.3%、97.2%、90.9%、99.7%、98.9%、96.5%,差异有统计学意义(x2=374.858,P<0.05).市级医院、区级医院、私营医院和个体诊所的消毒合格率分别为97.8%、97.9%、97.3%和94.1%,差异有统计学意义(x2=104.470,P<0.05).结论 采取措施加强对医疗机构消毒工作的管理,重点是个体诊所和手卫生方面.
作者:钟剑明;周志峰;石向辉;刘小敏;黄慧萍;陈建忠 刊期: 2013年第06期
目的 观察实验小鼠脑内包囊的时空分布特点,为探讨弓形虫感染引起的情志和行为改变提供病理基础.方法 弓形虫PRU株经口感染小鼠,经HE染色和免疫组化检测,在显微镜下计算前额、海马、丘脑、小脑和杏仁核部位的包囊个数,然后随机选取上述部位的5个视野拍照,计算包囊的平均密度,并用方差分析比较不同脑组织包囊密度有无统计学差异.结果 弓形虫感染30和90 d时,HE染色和免疫组化后显微镜观察发现,小鼠不同位置弓形虫包囊密度差异有统计学意义,其中,丘脑的包囊密度大,其次是前额皮质、海马、杏仁核,小脑的包囊密度小.丘脑的包囊密度显著高于其他4个脑区(P<0.01),小脑的包囊密度显著低于其它4个部位(P<0.01),而前额皮质、海马和杏仁核所含的包囊密度差异无统计学意义(P>0.05);弓形虫感染1个月时,杏仁核包囊密度明显低于感染3个月(F=18.314,P<0.001),但是小脑的包囊密度高于感染3个月(F=18.314,P<0.001).结论 弓形虫包囊在慢性感染小鼠不同脑组织内的分布具有时空特异性,这可能是其临床表现的病理学基础.
作者:申善良;刘敏;姚云英;吴焜;陈晓光 刊期: 2013年第06期
目的 观察促红细胞生成素(EPO)对同型半胱氨酸(Hcy)导致的血管内皮细胞损伤是否具有保护作用.方法 采用不同浓度(1.25、2.5、5、10、20 mmol/L)的Hcy处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察细胞的损伤情况,建立Hcv诱导的内皮细胞损伤模型,然后采用不同浓度(0.1、1、10、100 U/ml)的EPO进行预处理,观察细胞的损伤情况.通过MTT法测定细胞存活率,ELISA法检测细胞上清IL-6含量,Hoechst33258染色检测细胞凋亡来评价细胞损伤情况.结果 Hcy对HUVEC有损伤作用,并且随浓度增加损伤作用更明显.EPO可增加细胞存活率,抑制Hcy诱导HUVEC IL-6的产生,抑制细胞凋亡.结论 EPO对Hcy导致的内皮细胞损伤具有一定的保护作用.
作者:李敏子;杨卫红;刘振华 刊期: 2013年第06期
目的 研究Bridging integrator 1 (BIN1)在胃腺癌中的表达及其预后价值.方法 通过免疫组化研究BIN1在234个胃腺癌组织样本中的表达,之后运用荧光定量PCR (RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blotting)技术对免疫组化结果进行进一步验证.结果 通过免疫组化数据表明,在234个胃腺癌病例中,有128例的BIN1表达水平下降(54.7%).此外,BIN1的表达水平与组织学分级、肿瘤侵袭、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P<0.05).通过RT-qPCR和Western blotting分析,发现与非胃腺癌组织相比较,大多数肿瘤组织中的BIN1的转录和转录后水平下调(P=0.001 5和P=0.012).Kaplan-Meier存活曲线证实BIN1表达水平的下降与胃腺癌患者的预后不良有关.进一步的多因素分析结果提示BIN1是胃腺癌患者的总存活率的独立预后因子(HR=0.552,95%CI:0.354~0.862,P=0.009).结论 在胃腺癌中BIN1表达的下降可导致疾病预后不良,BIN1作为潜在的肿瘤抑制基因可能在防止肿瘤进展方面起重要作用.
作者:刘传新;罗荣城 刊期: 2013年第06期
目的 观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和APC蛋白表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制.方法 以不同浓度(0、0.5、1、4μg/ml)的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48 h后,应用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析APC蛋白的变化.结果 1 μg/ml以上浓度的藤黄酸可以显著抑制人结肠癌细胞株SW480细胞增殖,且随浓度增加效果增强,随着时间增加抑制率显著增加(P<0.01).藤黄酸浓度达到4 μg/ml时,C2/M期细胞达到54.74%;藤黄酸浓度为0、0.5、1、4μg/ml时SW480细胞的凋亡率分别为(0.17±0.08)%、(0.85±0.19)%、(7.12±1.21)%、(15.87±1.59)%.用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24 h,APC蛋白的表达随药物浓度的升高而增加(P<0.01).结论 藤黄酸能够抑制人结肠癌细胞株SW480增殖并诱导其凋亡,干扰SW480细胞周期使其阻断于G2/M期,高表达APC蛋白有可能是藤黄酸抗癌作用的重要机制.
作者:杨平;曹杰;张通;王强;孙政;张伟健;曾山崎 刊期: 2013年第06期
目的 对近年广州市无偿献血血液报废情况进行分析,探讨降低血液报废率的措施,以减少血液浪费.方法 收集广州血液中心2010-2012年所有血液采集制备信息和血液报废的信息,使用统计软件进行整理分析.结果 共采集制备血液2 827 955 U,报废179 794 U,报废率为6.35%;感染性不合格血液导致的报废占总报废量的64.79%,是血液报废的主要原因.感染性不合格血液报废率由高到低依次为ALT (2.12%) >HBV (0.85%)>梅毒(0.53%)>HCV(0.49%)>HⅣ(0.12%);非感染性不合格原因的报废占总报废量的35.20%,报废率由高到低依次为乳糜血(1.63%)>过期血(0.27%)>血袋破裂和渗漏(0.16%)>其他(0.08%)>溶血(0.06%)>血凝块(0.01%)>纤维蛋白析出(0.005%).结论 血液报废的主要原因是感染性标志物阳性导致的血液不合格.做好献血前的征询和宣传,进行ALT初筛,加强献血知识普及和献血前注意事项的告知,对降低血液报废率,加强血液安全有重要意义.
作者:徐国胜;黄可君;游冉冉 刊期: 2013年第06期
目的 观察脾脏NK细胞及NKT细胞在黄芪多糖(APS)发挥免疫佐剂功能的作用.方法 使用鸡卵白蛋白(OVA)与APS经皮下免疫C57BL/6小鼠3次.末次免疫7~14 d,取血清,使用ELISA观察OVA特异性抗体的含量;分离脾脏淋巴细胞,使用流式细胞仪检测NK和NKT细胞的百分比含量;使用PMA和Ionimycin刺激淋巴细胞,使用细胞内细胞因子染色的方法检测IFN-γ和IL-4的分泌情况.结果 APS组小鼠OVA特异性抗体含量明显高于OVA组小鼠(P<0.05),但小鼠脾脏内NK和NKT细胞的百分比含量与OVA组和正常小鼠差别不大(P>0.05).经PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NK细胞中IL-4+细胞明显高于OVA组和正常组(P<0.05),且IFN-γ+细胞的比例明显下降(P<0.05);虽然经过PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NKT细胞中IL-4+细胞升高不明显,但是IFN-γ+细胞的比例明显下降(P<0.05).结论 APS可以通过调节NK和NKT细胞的功能来促进体液免疫应答.
作者:谢红艳;张文伟;林丹义;吴凡;余秀雪;陈殿慧;罗雪平;王颖;黄俊 刊期: 2013年第06期
目的 研究重组广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(AcCystatin)的理化性质及其生物学功能.方法 原核表达质粒pGEX-4T-1-AcCystatin经诱导表达、纯化酶切后获得纯化AcCystatin,采用Edman降解法N-端氨基酸测序进行重组蛋白鉴定.分别检测其紫外光谱、荧光光谱、圆二色谱和对人源Cathepsin B、Cathepsin G、Cathepsin L和Cathepsin S酶的抑制活性,分析AcCystatin理化性质.结果 重组AcCystatin蛋白经纯化、酶切后相对分子质量约为13 600,纯化效果良好,氨基酸测序结果与理论氨基酸序列完全相同.光谱学检测结果显示重组AcCystatin可形成二硫键,二级结构中α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别占39.57%、35.28%和25.25%.酶抑制实验结果显示AcCystatin可显著抑制Cathepsin B、Cathepsin L和Cathepsin S酶的活性,但对Cathepsin G酶活性无明显作用.结论 获得的可溶性AcCystatin重组蛋白产量大、纯度高、蛋白结构折叠正常,具有良好的生物学活性,为AcCystatin免疫调节机制的深入研究奠定了实验基础.
作者:祝程诚;李宝钏;李舒婷;朱钥;姬鹏宇;赵子然;吴忠道;吕志跃 刊期: 2013年第06期
目的 对云南宾川地区爆发人体片形吸虫病的村落进行牛羊的片形吸虫感染调查和检测,为当地片形吸虫病的研究提供数据.方法 采用尼龙袋集卵法收集牛羊粪便中的虫卵,进行镜检.对检出的样本进行PCR扩增和测序;用MP法、NJ法及ML法进行种系发育分析.结果 从134 (28.63%)头牛和27(25.23%)头羊中查到了片形吸虫的虫卵,对所检到的虫卵进行线粒体pcox1基因的扩增和测序,比对后发现所检样本主要为肝片吸虫和大片吸虫两个种.采用MP法、NJ法及ML法进行种系发育分析表明,宾川地区牛羊感染的片形吸虫虫种主要为肝片吸虫和大片吸虫两种.结论 宾川地区牛羊片形吸虫感染严重,云南宾川为肝片形吸虫及大片形吸虫混合感染地区,当地政府应重视该病的防治.
作者:艾琳;陈木新;吕山;臧伟;诸廷俊;许学年;蔡玉春;陈韶红;罗家军 刊期: 2013年第06期
目的 探讨不同类型体力活动与缺血性脑卒中的关系.方法 运用病例对照研究的方法,将146例缺血性脑卒中患者作为病例组,156名非脑血管疾病居民作为对照组,运用多因素非条件Logisitic回归模型分析不同类型体力活动与缺血性脑卒中的相关性.结果 多因素非条件Logistic回归分析提示,与闲暇时间体力活动不活跃居民比较,闲暇时间体力活动活跃居民的OR=0.042(95%CI:0.011~0.158),与交通行程体力活动不活跃居民比较,交通行程体力活动活跃居民的OR=0.181(95%CI:0.061~0.534).结论 在该调查人群中闲暇时间体力活动、交通行程体力活动可能与缺血性脑卒中相关.
作者:霍富元;李粲;韩莉娜;谭盛 刊期: 2013年第06期
目的 了解广州市海珠区18岁以上社区居民脑卒中患病率及高血压、糖尿病等常见危险因素在人群中的分布.方法 2012年12月采用Kish Grid表法分层抽样后问卷调查的方法,在海珠区瑞宝社区抽取1 000人为调查对象,采用x2检验和t检验对结果进行统计分析.结果 海珠区居民脑卒中、冠心病的患病率均较2008年有明显上升(3.4% vs 1.6%,18.5%vs 4.5%),而高血压病、糖尿病、血脂异常、肥胖率和吸烟率均较2008年下降(16.2% vs 22.9%,7.0%vs 9.2%,37.9% vs 59.7%,6.2%vs 7.1%,18.2%vs 24.6%),差异有统计学意义(P<0.05).男性高血压患病率、吸烟率和饮酒率分别为20.0%、29.0%和11.2%,与女性11.9%、5.8%和5.1%相比较高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 海珠区脑卒中患病率上升呈年轻化趋势,冠心病患病率较前增高,应提倡早期对心脑血管疾病相同危险因素进行筛查并控制预防.
作者:李粲;韩莉娜;霍富元;陈健;金俊;吴培华;李武英;郭阳;谭盛 刊期: 2013年第06期
目的 研究外源性肿瘤坏死因子α(TNF-α)对原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性及程序性死亡因子配体PD-L1蛋白表达的影响,探讨动脉粥样硬化的免疫机制.方法 体外培养HUVECs,加入不同浓度TNF-α持续刺激48 h,CCK-8法检测450 nm波长处吸光度值(OD值),计算细胞生长存活率.选同代细胞重复培养并干预,Western blot方法检测细胞PD-L1蛋白表达.使用SB203580阻断p38MAPK通路后再用TNF-α干预HUVECs,比较各组细胞PD-L1蛋白表达.结果 实验组HUVECs在450 nm波长处的吸光度值较空白对照组明显降低(P<0.05),细胞存活率依次下降.实验组细胞PD-L1蛋白表达随TNF-α浓度增高逐渐降低(P<0.05).TNF-α单独刺激组PD-L1蛋白表达较TNF-α与SB203580共刺激组明显降低(P<0.05),SB203580阻断效应明显.结论 TNF-α可明显抑制HUVECs细胞活性,并降低PD-L1蛋白表达,p38MAPK通路可能参与了这一过程.
作者:吕自明;刘映峰;缪绯;龙日;刘芃;刘磊 刊期: 2013年第06期
目的 采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法.方法 根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因(ompA)序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法.结果 建立的荧光定量PCR检测方法的低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100107线性关系良好(r2=0.997),比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00%,阴性符合率为95.09%,总符合率为96.81%.结论 建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.
作者:陆中奎 刊期: 2013年第06期
目的 探讨尿浓缩和稀释对随机尿蛋白和肌酐比结果的影响.方法 选取慢性肾脏病人213例,按照随机尿肌酐(Ucr)浓度分为5组,A组:35例,Ucr≤2 000 mmol/L;B组:33例,2 000 mmol/L<Ucr≤3 000 mmol/L;C组:46例,3 000 mmol/L< Ucr≤7000 mmol/L;D组:58例,7 000 mmol/L<Ucr≤15 000 mmol/L;E组:41例,Ucr>15 000 mmol/L.所有病例均测定尿蛋白/尿肌酐比值(UACR)和24 h尿蛋白定量(24 h UTP)水平,对各组UACR和24 h UTP进行相关分析和Kappa检验.结果 B、C、D组患者随机尿UACR与24 h UTP呈高度相关且一致性较强,r值分别为0.836、0.886、0.868,Kappa值分别为0.762、0.758、0.753;而A、E组两者呈较低相关且一致性较差.B、C、D组总的r和Kappa值分别为0.887和0.757,仍具有较高的相关性和中度一致性.结论 慢性肾病患者在随机尿2 000 mmol/L<Ucr≤15 000 mmol/L时,UACR可作为24 h UTP定量检测的初筛实验;而在Ucr≤2 000 mmol/L和>15 000 mmol/L时,随机尿UACR结果不可靠.
作者:黄志宏;付文金;徐娜媚;方海畴;方爱娟;陈楚填 刊期: 2013年第06期
目的 观察残余肾功能(RRF)对透析患者心功能的影响分析.方法 将100例维持性血液透析患者以内生肌酐清除率水平为依据分为RRF(+)组和RRF(-)组,并对两组患者进行尿量(UR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、尿素氮(BUN)、肌肝(Scr)、血磷(P3+)、碳酸氢根(HCO3-)、甲状旁腺素(PTH)、血红蛋白(Hb)、内生肌酐清除率(Ccr)的检测,以及分析左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)的变化.结果 治疗1年后,两组患者的UR、Scr、HCO3-和Ccr与治疗前相比差异均有统计学意义(P<0.05),RRF(+)组的Hb高于RRF(-)组(P<0.05),PTH水平低于RRF(-)组(P<0.05).治疗后RRF(+)组的LVEF和LVFS均高于RRF(-)组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 RRF能提高血液透析患者的透析效能,降低心脏负荷,减低肾毒性物质对心脏的毒害从而改善长期血透患者的心功能损害.
作者:黄宇静;伍锦泉;黄力 刊期: 2013年第06期
目的 探讨尿低分子量蛋白联合检测在新生儿羊水粪染肾损害中的临床意义.方法 采用病例对照研究的方法,选择120例足月新生儿,其中90例羊水粪染新生儿为研究组,按污染程度分为3组,30名正常羊水新生儿为对照组.测定血气分析、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)及尿微量白蛋白(MALB)水平.结果 随着羊水粪染程度加重,BUN、Cr、尿β2-MG、尿α1-MG及尿MALB水平逐渐增高.研究组和对照组中的BUN和Cr水平比较差异均无统计学意义(P>0.05).脐带血pH值(血气分析)、尿β2-MG、尿α1-MG及尿MALB在羊水Ⅲ度粪染组中的含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而在Ⅰ、Ⅱ度粪染组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 尿低分子量蛋白联合检测对羊水粪染引起的肾功能损害早期发现及评估其程度有一定的意义.
作者:李丽;陈敬国 刊期: 2013年第06期
目的 探讨肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)在新型毒品中毒患者诊治中的意义.方法 将232例新型毒品中毒危重患者按照cTnI的水平分为升高组(97例)和正常组(135例),分别对两组患者一般临床资料、生化指标及APACHEⅡ评分、多器官功能障碍综合征(MODS)发生率、机械通气使用率、总住院时间、死亡率等临床指标进行系统回顾性分析.结果 两组患者一般临床资料、生化指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).cTnI升高组APACHEⅡ评分、MODS发生率、机械通气使用率、死亡率、总住院时间均高于cTnI正常组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 伴有cTnI升高的新型毒品中毒危重患者有较高的APACHEⅡ评分、MODS发生率、机械通气使用率和死亡率,且总住院时间较长.监测cTnI水平在新型毒品中毒危重患者病情评估和治疗中可发挥重要作用.
作者:管健;蓝光明;吴彪;郭旭昌;张文;朱永 刊期: 2013年第06期
目的 应用代谢组学方法探索疲劳型亚健康的尿液代谢标志物.方法 分别收集正常对照组和疲劳型亚健康的尿液,应用1H NMR代谢组学方法,建立疲劳型亚健康尿代谢物的诊断分子指标.结果 健康组和疲劳型亚健康组尿液代谢谱差异有统计学意义,其中疲劳型亚健康组有3-磷酸甘油酸(3.65 ppm)、辅酶Q(4.01 ppm)、α-酮戊二酸(3.00 ppm)、丙氨酸(3.77 ppm)、组胺(3.29 ppm)、鸟苷(3.81 ppm)等6个代谢物水平显著升高(P<0.05).这些化合物涉及到糖异生、糖酵解、三羧酸循环、脂肪酸、氨基酸以及嘌呤等多条代谢通路.结论 能量代谢紊乱可能参与了疲劳型亚健康的发生发展过程,其中特异的代谢标志物可用于疲劳型亚健康的评价.
作者:刘艳艳;肖雅;邱玉明;孙晓敏;欧阳明子;黄颖;李斐;罗仁;赵晓山 刊期: 2013年第06期