全星;杨红玲;顾晓琼;王嘉励
目的 利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据.方法 以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2重组载体,利用Y2HGold酵母双杂交系统,从人类通用cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白.结果 成功构建含诱饵蛋白基因的pGBKT7-PB1 -F2重组载体,转化酵母白激活和毒性实验显示为阴性;酵母双杂交实验显示Y2HGold和Y187酵母的结合率为5.22%,符合实验要求;经筛选和验证后,得到3个与截短型PB1 - F2蛋白有相互作用的阳性克隆,分别为钾/钠ATP酶β1亚基、热休克蛋白40和白介素-2受体γ亚基.结论 初步推断截短型H3N2流感病毒PB1-F2蛋白可能影响流感病毒在宿主细胞中的复制功能和凋亡调控.
作者:冯发深;何霞;王铸;徐霖;张定梅;关琳琳;曹开源 刊期: 2012年第06期
目的 研究人热休克因子1( HSF1)对Fas配体(FasL)启动子转录活性的影响.方法 用在线启动子分析软件分析FasL启动子区转录因子结合位点;凝胶阻滞实验(EMSA)研究内源性HSF1与FasL启动子区的热休克元件(HSE)结合能力;将组成型活化的HSF1突变体与FasL启动子表达载体FasL-luc共同转染HeLa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统,检测荧光索酶活性.结果 在FasL启动子区发现HSE核心序列(nGAAnnTTCn),HSF1可以与该HSE体外结合;荧光素酶活性测定发现HSF1明显上调FasL-luc转录活性,突变该HSE,则转录激活作用消失.结论 HSF1对FasL具有转录调控作用.
作者:鄂顺梅;陈茶;曾建明;邹江英 刊期: 2012年第06期
低密度脂蛋白受体( LDLR)对于维持血浆脂蛋白代谢平衡起到十分重要的作用.LDLR基因突变会导致血脂代谢紊乱,而血脂异常与动脉粥样硬化密切相关,是心脑血管疾病发生和发展的重要危险因素.本文就LDLR基因多态性与血脂异常、高血压及心脑血管疾病之间的关系进行综述.
作者:罗显云;姚震;王天松;张云波 刊期: 2012年第06期
目的 克隆表达一个新的旋毛虫组织蛋白酶基因CathepsinX,初步探讨其免疫学特性,为研究新的防治方法奠定科学基础.方法 从GenBank旋毛虫核酸数据库中筛选出功能未知的CathepsinX基因部分EST序列,使用RACE-PCR方法得到其全长编码基因序列.半定量RT-PCR分析该基因的转录.构建该基因的原核表达载体pET30a-TsCPX,大肠杆菌中IPTG诱导表达,His-tag亲和层析纯化获重组蛋白TsCPX;将纯化的重组蛋白40μg/只免疫BALB/c小鼠,免疫前1周及每次免疫后2周收集免疫血清,间接ELISA检测血清总IgG、亚类IgG1、IgG2a抗体浓度.结果 RACE-PCR克隆出TsCPX全长基因序列,共1227 bp;RT-PCR揭示TsCPX在旋毛虫三个发育时期均有380 bp扩增条带,条带光密度分析显示高转录水平出现在新生幼虫期.E.coli原核表达体系中成功克隆表达出重组蛋白TsCPX;重组蛋白免疫小鼠二次后,免疫血清总Igc迅速上升,三次免疫后达到峰值(P<0.001);IgG亚类IgG1抗体浓度随着免疫次数的增加迅速上升,亚类IgG2a无明显上升,两者间差异有统计学意义(P<0.001).结论 成功克隆的TsCPX基因在旋毛虫的三个生长发育时期均有转录表达,TsCPX重组蛋白具有较强免疫原性,能引起宿主(小鼠)Th2型为主的免疫应答,具有作为旋毛虫病免疫预防研究靶分子的潜在价值.
作者:周阳芳;贾飞飞;占建华;胡旭初;周兴旺 刊期: 2012年第06期
目的 了解2006-2011年东莞市无偿献血人群的构成特点,为今后东莞市无偿献血宣传工作提供科学依据.方法 对东莞市2006-2011年无偿献血人群一般情况及献血情况的资料进行统计分析.结果 2006-2011年无偿献血共396 984人次,献血人群男、女性别比为2.28∶1;献血者文化程度多为初、高中,分别占总人数36.52%及27.01%;献血者职业以“生产、运输设备操作人员”者多,占22%.2007-2011年每年2月献血人次为当年低.固定献血者具有男性献血者多、捐献血小板者多、单次献血量较大、检验合格率高的人群特征.结论 东莞市无偿献血的重点人群是工人,应加强对非工人人群(如在校学生、企事业单位职工等)的无偿献血宣传,鼓励更多的献血者成为固定献血者.
作者:张婷;凌莉;张迪;杜莹映 刊期: 2012年第06期
目的 对广州地区血小板输注无效患者进行两种不同试验方法的交叉配型并检测人类白细胞抗原(HLA)抗体特异性.方法 对62名临床不同疾病类型血小板输注>2次的患者分别做流式细胞血小板交叉配型( Flow-XM)试验和经典补体依赖微量淋巴细胞毒交叉配型(NIH-CDC)试验,并进行群体反应性抗体(PRA)分析.结果 62例血小板输注无效患者通过NIH-CDC试验,得出血小板配型阳性标本22例,阳性率为35.48%;Flow-XM试验比NIHCDC试验阳性检出率高,为70.97%,两种配型结果的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01).分析配型阳性患者的HLA抗体特异性,除2例为阴性外,其余都证实存在针对供者的HLA抗体.结论 Flow-XM试验对于检测HLA抗体具有较高的灵敏度,值得推荐.
作者:全星;杨红玲;顾晓琼;王嘉励 刊期: 2012年第06期
目的 分析深圳市公明街道2005-2010年其他感染性腹泻流行特征,为有效控制其他感染性腹泻提供流行病学依据.方法 对深圳市公明街道2005-2010年疾病监测信息报告管理系统中报告的其他感染性腹泻病例进行流行病学描述性分析.结果 2005-2010年深圳市公明街道共报告其他感染性腹泻病例9 258例,年均发病率为214.64/10万(9258/4313263),其中2008年发病率高为301.00/10万(2273/755161).5岁以下年龄组占全部发病数的90.38%,散居儿童占总病例数的91.00%;10-12月为发病高峰.报告发病率居前5位的村镇为将石、公明、上村、合水口、长圳.轮状病毒感染所致的其他感染性腹泻病例4966例,占报告病例总数的53.64%.结论 深圳市公明街道2005-2010年感染性腹泻报告病例主要集中在0~5岁散居儿童,秋冬季是好发季节,轮状病毒感染为主要病因.
作者:汪东篱;郑庆鸣;钟晓;列义;姚炜 刊期: 2012年第06期
目的 为研制美沙酮维持治疗(MMT)者脱失风险评估量表,筛选、优化条目.方法 在文献研究基础上编制专家咨询问卷,应用德尔菲( Delphi)法,向22位在艾滋病防治和MMT 工作领域的专家发送3次问卷并对咨询结果进行分析.结果 专家权威系数均值为0.93,三轮咨询后,量表条目的重要性和可行性评分的协调系数分别为0.33和0.29(P<0.01),研制的《美沙酮维持治疗者脱失风险评估量表》包含6个维度,共32个条目;量表的内容效度比(CVR)为0.91,内部一致性信度测量显示Cronbach'α系数为0.83,相隔7d的重测信度达到可接受的水平(组内相关系数为0.96).结论 应用Delphi法对《美沙酮维持治疗者脱失风险评估量表》条目筛选的结果可取,量表具有良好的信度和效度.
作者:张媛;林鹏;李张;李艳;杨放;罗玉兰;付笑冰 刊期: 2012年第06期
目的 探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义.方法 从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本.其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶);32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶).运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平.结果 相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890) vs (6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P<0.05).而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P<0.05).结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点.
作者:邓治亮;简志祥;孙建 刊期: 2012年第06期
目的 构建含有人nestin第二内含子的荧光素酶报告基因并检测其活性.方法 从NCBI数据库获得nestin 的DNA全长序列(NC_000001),用vector NTI软件分析找到其第二内含子位置,通过PCR的方法从人血全基因组DNA中钓取nestin的第二内含子全长片段,克隆到报告基因pGL3-promoter载体上,将报告基因载体转染至293T细胞,采用双荧光素酶报告基因系统评估第二内含子的活性.结果 成功钓取nestin第二内含子片段,长度为1 688 bp,测定其DNA序列正确.瞬时转染293T细胞,经双荧光报告实验显示转染了pGL3-nes-promoter载体的细胞其相对荧光素酶活性相比于空载组,大约提高了3.39倍,差异有统计学意义(P<0.001).结论 成功构建了含有nestin第二内含子的荧光素酶报告载体,为进一步研究nestin的调控机制奠定基础.
作者:朱媛媛;安靓 刊期: 2012年第06期
目的 研究基因1型慢性丙型肝炎(CHC)患者治疗过程中外周血自然调节性T细胞(nTreg)的动态变化及其与抗病毒疗效的关系.方法 32例初治的CHC患者,均为基因1型,治疗方案为干扰素联合利巴韦林治疗48周.分别在治疗前、治疗过程中2、4、8、12、24、48周以及治疗结束后12或24周采集外周血标本.用流式的方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中nTreg的比率.COBAS Ampliprep/COBAS Taqman HCV试剂盒检测HCV-RNA定量.结果 24例患者治疗12周时HCV-RNA转阴,并且随访至治疗结束后24周仍阴性,达到持续病毒学应答(SVR);8例患者治疗12周时病毒量未转阴,无应答(NVR),24周时终止治疗.应答组和无应答组治疗前外周血中nTreg的比率差异无统计学意义(P>0.05).应答组治疗过程中2、4、12、24、48周及治疗结束后各个时间点PBMC中nTreg水平分别为(0.91±0.22)%、(1.31±0.29)%、(1.78±0.43)%、(1.92±0.44)%、(1.90±0.37)%、(1.14±0.35)%;在治疗2周(P<0.001)及治疗结束后(P<0.001)下降明显.无应答组治疗过程中2、4、12、24周及治疗结束后各时间点PBMC中nTreg水平分别为(1.21±0.15)%、(1.24±0.18)%、(1.42±0.11)%、(1.45±0.11)%、(1.14±0.10)%;Treg水平在治疗4周时缓慢上升(P=0.005),在治疗结束后显著下降,与治疗24周比较差异有统计学意义(P<0.001).结论 CHC患者外周血nTreg水平与干扰素/利巴韦林抗病毒治疗的疗效密切相关,抗病毒治疗2周时nTreg水平的下降可以预测其疗效.提示nTreg可能在机体清除病毒的早期过程中起着重要作用.
作者:邵晓琼;赵志新;蔡庆贤;张晓红;林潮双;高志良 刊期: 2012年第06期
目的 初步研究登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒(VLP)的免疫原性.方法 表达纯化各型VLP,用纯化好的VLP免疫BALB/c小鼠,将BALB/c小鼠随机分PBS组、灭活DENV1、灭活DENV2、纯化VLP1、纯化VLP2、纯化VLP1+2组,以灭活病毒为阳性对照,PBS为阴性对照.ELISA法检测小鼠血清抗VLP抗体效价以及血清IFN-γ、TNF-α细胞因子水平,流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4+细胞和CD8+细胞数.结果 登革病毒1、2型单、双价VLP均能刺激免疫小鼠产生一定程度的抗血清效价,VLP1的抗体水平较VLP2的低,双价VLP组针对DENV2抗原的抗体水平上升明显,是单价VLP2的2~3倍;攻毒后,灭活DENV1和VLP2可以产生高水平的IFN-γ,分别为60和35 pg/ml,双价VLP组的较低;VLP2组的TNF-α一直保持较高水平,双价VLP组中攻DENV2组的TNF-α水平较DENV1组高;三次免疫后,各实验组较之PBS组CD4+细胞的比例都有下降,而CD8+细胞变化不大,除灭活DENV1组有增加,其余各组都有减少.结论 无论单、双价VLP均能刺激小鼠产生一定程度的体液免疫和细胞免疫反应,联合免疫有一定程度的协同性.
作者:喻治准;刘岩;付春云;方丹云;江丽芳;周俊梅 刊期: 2012年第06期
目的 为调查2009年8-10月深圳某医院妇产科产妇会阴侧切伤口发生医院感染事件的原因和预防相关院内感染的发生.方法 采用描述性分析和病例对照的方法,了解某医院产科医院感染发生情况并对医院感染发生相关因素进行探讨.结果 272例侧切术病人中8例发生医院感染,术后感染率为2.94%.经调查,会阴侧切缝合术后住院天数≥3 d(X2=0.01,P=0.01)、住院时有合并症(Fisher's Exect Test,P=0.04)是产科会阴侧切术产妇医院感染发生的危险因素,而产房物品表面(>5 cfu/m2)及病房空气(>200 cfu/m3)细菌污染严重可能为该次医院感染发生的直接原因.结论 提高手术质量,做好产后护理及产房与病房的消毒工作是预防产妇会阴侧切伤口发生医院感染的重要措施.
作者:邱莉芳;刘凤仁;梁享生;董建;王文玲;张起文 刊期: 2012年第06期
目的 通过对江西省上饶县晚期血吸虫病人医疗救治项目实施情况进行分析,为进一步加强晚期血吸虫医疗救助项目的管理提供科学依据.方法 采用《江西省晚期血吸虫病人治疗救助信息管理系统》,对2005-2009年接受医疗救助的607例晚期血吸虫病人的相关资料进行分析.结果 607例晚期血吸虫病人中,男性占62.6%,女性占37.4%,50岁以上患者占83%.其中腹水型病人551例,占90.8%,救治1252例次,人均治疗2.3次;巨脾型病人56例,占9.2%,救治56例次,治疗次数均为1次.临床治愈及好转患者占89.0%.结论 上饶县晚期血吸虫医疗救助项目取得良好社会效益,达到了症状改善,病情好转的基本救治目的.
作者:周红;赵奀琴;黄书春;周玉玲;程立毅;陈远新;宁安 刊期: 2012年第06期
目的 探讨精索静脉曲张Marmar术式的解剖学基础.方法 选择雄性SD大鼠100只,随机分为手术组80只和对照组20只,手术组分离及缩窄左肾静脉,对照组只分离不缩窄左肾静脉,同一条件下饲养8周,分别解剖两组大鼠精索静脉,并做血管铸型,记录及比较精索静脉系统分支数目、直径、侧枝循环数目和曲张程度.结果 手术组有51只SD大鼠可以观察到精索静脉明显曲张,腹股沟内环口水平以上及外环口水平以下精索静脉的直径较对照组明显增粗,差异均有统计学意义.手术组大鼠出现明显增粗的侧枝循环,出现的侧枝循环大部分位于外环口平面以下.对照组无或1~2支极细侧枝血管.结论 选择外环口平面以下可以有效结扎曲张的精索静脉避免漏扎导致复发.
作者:曾静;黄桂晓;黄树声;吴先哲;李伟东 刊期: 2012年第06期
目的 探讨用美沙酮替代治疗是否有效降低吸毒者肺部并发症罹患率,为美沙酮替代治疗对吸毒者并发症的影响提供更多的科学依据.方法 走访美沙酮替代治疗门诊和市戒毒所,调查、筛选和确定样本量,选取90例坚持用美沙酮替代治疗吸毒者(病例组)和90例不用美沙酮替代治疗吸毒者(对照组)进行摄胸片检查,对两组胸片X射线影像改变特征进行统计学分析.结果 两组人员性别和调查前吸毒时间差异无统计学意义(P>0.05);在研究中,病例组的治疗脱失率和对照组的跟踪脱落率均较高,分别为36.67%和33.33%;病例组X射线胸片检查异常6例,阳性率10.53%,主要病变为双肺纹理增粗4例,肺结核和肺感染各1例,X射线特征单一;对照组X射线胸片检查异常26例,阳性率43.33%,主要病变是肺结核病8例,双肺纹理增粗7例,并见胸积液4例、气胸3例和心影改变2例等,X射线特征复杂多样;两组胸片阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 坚持用美沙酮替代治疗可以有效降低吸毒者肺部并发症的罹患率.
作者:关晓熙;张焕彩;梁定宇;司徒荣阮;梁坚忠;陈缘超;吴松润 刊期: 2012年第06期
目的 了解开平市农村居民华支睾吸虫病防治知识、态度、行为的状况,为制定该病的干预对策提供科学依据.方法 2010年在开平市按东、南、西、北、中各选1个镇的1个村委,每村按整群抽样对年龄≥8岁的居民进行问卷调查200人以上,采用广东省疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所制定的《华支睾吸虫病卫生知识与卫生行为问卷》.用Epidata3.1和SAS9.0对资料进行统计分析.结果 调查5个镇5个村的居民917人,年龄8~91岁,以农民为主,占68.16 %(625/917),学生占26.17%(240/917),其他占5.67%(52/917).该人群对肝吸虫病防治知识知晓率达96.00%(880/917),其中对该病感染途径知晓率为95.53%、知道其危害的占94.98%、知道感染后需就医治疗的占97.06%、而知道如何预防的仅占71.10%.态度正确率,自愿接受检查或主动就医检查的占68.27%(626/917)人,但支持或赞成开展肝吸虫病防治仅有34.13%(313/917).吃淡水鱼生或未煮熟的淡水鱼、用生鱼喂养猫狗等家畜、生熟食品蛄板未分开的等易感危险行为发生率分别为46.46%、56.92%和11.12%.结论 开平市农村居民华支睾吸虫病防治知识知晓率已处于较高水平,但态度和行为的正确率偏低,需进一步探索有针对性的干预措施.
作者:陈缘超;吴丽兰;许楠;黄立本 刊期: 2012年第06期
目的 探讨全自动细菌性阴道病(BV)检测系统在BV诊断中的的临床应用价值.方法 取943例疑为细菌性阴道病的阴道分泌物标本,同时用全自动BV检测系统和Amsel金标准法进行对比检测.结果 采用全自动BV检测系统检测阳性率为18.2%,Amsel法检测阳性率为17.7%,两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05).两种方法同时检测阳性有161例,同时检测阴性有765例,符合率达到98.2%.与Amsel法比较,全自动BV检测系统诊断BV的灵敏性为96.4%,特异性为98.6%.结论 全自动BV检测系统操作简便、快速,结果客观准确,适用于门诊病人的BV快速检测,值得推广使用.
作者:吴少卿;曹文平;文道林 刊期: 2012年第06期
目的 探讨N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)在妊娠高血压疾病(PIH)心功能评估中的价值.方法 将102例PIH孕妇分为妊娠高血压组37例,轻度子痫前期组33例,重度子痫前期组32例,另外选取正常妊娠组32例及正常未孕育龄妇女32例作为对照组,采用电化学发光法测定患者血清NT-proBNP浓度.结果 PIH组、正常妊娠组和对照组的NT-proBNP水平分别为(300.52±134.44)、( 83.42±26.26)和(59.83±12.89)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠高血压组的NT-proBNP水平分别为(488.56±155.54)、(323.39±148.90)和(185.73±43.78)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).NT-proBNP与孕妇体重指数(BMI)呈正相关(r=0.602),与新生儿体重呈负相关(r=-0.279).结论 孕后NT-proBNP有所升高,而且是能够用于评估PIH孕妇心功能的敏感指标之一.
作者:陈晓燕;周俐琼;陈冀莹 刊期: 2012年第06期
目的 探讨深圳市龙岗区2007年麻疹发病的流行病学特征,为制定麻疹预防控制策略提供科学依据.方法 收集深圳市龙岗区2007年麻疹发病资料,按照发病时间、病人性别、年龄、职业分布等指标进行统计分析.结果 2007年全区共报告确诊麻疹病例1 351例,2007的麻疹发病率为30.18/10万,比2006年(16.88/10万)增加78.8%,差异有统计学意义(P<0.01).发病时间集中在5~8月;发病人群以5岁以下的散居儿童和20~30岁年龄段的外来青工为主:职业以散居儿童发病多占52.5%,其次工人占20.1%.99.19%的病例无麻疹疫苗接种史或免疫史不详.结论 2007年麻疹发病显著升高,发病季节主要在夏季,5岁以下散居儿童和外来劳务青工是麻疹防控工作的重点易感人群,需积极开展麻疹疫苗的接种工作.
作者:杨克志;刘国栋;刘渠;谢瑞琼;骆文博 刊期: 2012年第06期