周柬；庞珏
目的 探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义.方法 从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本.其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶)；32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶).运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平.结果 相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890) vs (6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P＜0.05).而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P＜0.05).结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点.
作者：邓治亮；简志祥；孙建 刊期： 2012年第06期
目的 对我市流感样病例标本进行病原学检测,分析其病原学特点,为流感防控提供病原学依据.方法 采用MDCK细胞(狗肾细胞)培养法分离流感病毒,用血凝抑制试验对病毒株进行分型鉴定.结果 从哨点医院采集的520份标本中共分离出流感病毒41株,分离率为7.9％,以新甲型H1N1为主.其中新甲型H1N1 26株(63.4％),H3N2型5株(12.2％),B(Yamagata)型l株(2.4％),B(Victoria)型9株(22.0％).流感流行高峰出现在春季的1-3月和秋季的8-9月.健康人群血清中流感抗体的阳性率不高,高为新甲型H1N1抗体阳性率41.9％,低为B(Yamagata)的抗体阳性率,仅8.1％.对2010年2株新甲型H1N1进行基因测序,结果显示甲型H1N1基因未发生变异,暂时不会造成大的流行.结论 惠州市流感病毒的流行时间有明显的季节性,活动相对平缓,新甲型H1N1流感病毒是春季的优势毒株,下半年逐渐转变为H3N2型流感病毒.
作者：曾健君；方巧云；刘燕；严宇斌；罗泽燕；徐励琴 刊期： 2012年第06期
目的 克隆表达恶性疟原虫复制蛋白PJRPA2亚基,制备多抗,为该蛋白的功能研究奠定基础.方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pGEX-KG中,构建PfRPA2/pGEX-KG原核表达载体,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物,谷胱甘肽柱纯化蛋白,Westem blot检测其抗原性,以纯化的GST-PfRPA2免疫小鼠,制备抗PfRPA2的多抗,间接ELISA法检测鼠血清效价,Western blot鉴定多抗特异性.结果 成功构建了重组PfRPA2/pGEX-KG原核表达质粒,并在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达,纯化表达产物,制备抗PfRPA2的鼠多抗,效价为10-7,Westem blot证实此抗体可识别恶性疟原虫内与PfRPA2蛋白位置对应的特异性条带.结论 恶性疟原虫复制蛋白PfPA2亚基在大肠杆菌中获得可溶性高效表达,纯化表达产物能诱导小鼠生产能识别天然蛋白的特异性抗体.
作者：刘雅娟；李宏；周于婷；郝文波；李纪良；吴英松；罗树红；李明 刊期： 2012年第06期
目的 探讨妊娠合并血小板减少的围产期处理及产后出血情况.方法 收集2006年1月至2011年8月茂名市人民医院及广州医学院第三附属医院收治的218例妊娠合并血小板减少患者,根据分娩前血小板计数51×109～99× 109/L、21×109～50×1 09/L、≤20× 109/L分为A、B、C三组,每例患者针对原发病治疗,产前根据病情适当给予糖皮质激素,静脉注射丙种球蛋白,输入血小板治疗,分析各组的产后出血情况.结果 A、B、C三组的产后出血发生率分别为2.67％、7.46％、28.20％；平均出血量分别为(600±80)、(600±120)、(900±200)ml,产后24h平均阴道流血量分别为(250±30)、(250±80)、(500±100)ml,C组平均出血量及24h平均阴道流血量与A、B组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 妊娠合并血小板减少,在治疗原发病的基础上,给予对应治疗,适时终止妊娠可有效改善不良妊娠结局.
作者：李志英；余琳 刊期： 2012年第06期
目的 探讨精索静脉曲张Marmar术式的解剖学基础.方法 选择雄性SD大鼠100只,随机分为手术组80只和对照组20只,手术组分离及缩窄左肾静脉,对照组只分离不缩窄左肾静脉,同一条件下饲养8周,分别解剖两组大鼠精索静脉,并做血管铸型,记录及比较精索静脉系统分支数目、直径、侧枝循环数目和曲张程度.结果 手术组有51只SD大鼠可以观察到精索静脉明显曲张,腹股沟内环口水平以上及外环口水平以下精索静脉的直径较对照组明显增粗,差异均有统计学意义.手术组大鼠出现明显增粗的侧枝循环,出现的侧枝循环大部分位于外环口平面以下.对照组无或1～2支极细侧枝血管.结论 选择外环口平面以下可以有效结扎曲张的精索静脉避免漏扎导致复发.
作者：曾静；黄桂晓；黄树声；吴先哲；李伟东 刊期： 2012年第06期
目的 探讨霍乱弧菌O1群稻叶型流行株和非流行株的蛋白表达的差异.方法 利用裂解液处理霍乱弧菌,提取全菌蛋白；采用pH梯度等电聚焦对菌蛋白进行双向电泳；考马斯亮蓝染色后获得的双向电泳图谱,并利用ImageMaster 2D Elite 5.0图象分析软件进行分析,找出差异蛋白；在此基础上,胰蛋白酶消化这些特殊差异蛋白,并进行质谱( MALDI-TOF-MS)分析.结果 获得了(1081±16)个蛋白斑点,蛋白主要集中在pI 4.00～7.20之间,重复胶的匹配点数为(1057±28),匹配率为97,85％;发现了有明显差异的21个蛋白点,并进行了质谱鉴定.结论 获得了霍乱弧菌O1群稻叶型流行株和非流行株的差异表达蛋白.
作者：林静佳；李军涛；邓志爱；陈守义 刊期： 2012年第06期
目的 对广州地区血小板输注无效患者进行两种不同试验方法的交叉配型并检测人类白细胞抗原(HLA)抗体特异性.方法 对62名临床不同疾病类型血小板输注＞2次的患者分别做流式细胞血小板交叉配型( Flow-XM)试验和经典补体依赖微量淋巴细胞毒交叉配型(NIH-CDC)试验,并进行群体反应性抗体(PRA)分析.结果 62例血小板输注无效患者通过NIH-CDC试验,得出血小板配型阳性标本22例,阳性率为35.48％;Flow-XM试验比NIHCDC试验阳性检出率高,为70.97％,两种配型结果的阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.01).分析配型阳性患者的HLA抗体特异性,除2例为阴性外,其余都证实存在针对供者的HLA抗体.结论 Flow-XM试验对于检测HLA抗体具有较高的灵敏度,值得推荐.
作者：全星；杨红玲；顾晓琼；王嘉励 刊期： 2012年第06期
目的 探讨短期和长期过氧化状态对Sestrin2( Sesn2)及PKB胰岛素信号的影响及调控机理.方法 在人肝HepG2细胞株以葡萄糖氧化酶(GO)和含糖培养基共培养4h或16h分别造成细胞短期和长期氧化状态；或胰岛素刺激(15 min或16 h),然后以蛋白印迹法检测Sesn2蛋白含量和胰岛素信号变化(如PKB Ser473和Thr308磷酸化水平).为明确Sesn2作用,用Sesn2 siRNA沉默Sesn2后,探讨胰岛素信号及相关信号变化.结果 GO和胰岛素处理均可明显增加HepG2细胞Sens2蛋白水平；GO短期(4 h)处理可明显刺激胰岛素标志性信号分子PKB Ser473的磷酸化并刺激细胞Sesn2蛋白升高；而长时间(16h)GO处理则可抑制胰岛素刺激的Sesn2表达作用;Sesn2siRNA转染后,可增强胰岛素刺激的PKB Ser473和Thr308位点的磷酸化作用.因此,Sesn2对上述不同机制调控的两个PKB磷酸化位点均有抑制作用.结论 HepG2细胞在短期氧化状态下,可激活PKB活性(PKB Ser473磷酸化)并诱导Sesn2蛋白表达；长期过氧化及胰岛素刺激情况下能激活Sesn2功能,而Sesn2可分别通过对PKBSer473及PKB Thr308两个活性位点的抑制性作用和调控,实现对胰岛素信号及PKB活性的长期负反馈平衡作用.
作者：王国玉；何惠君；于志文 刊期： 2012年第06期
目的 初步研究登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒(VLP)的免疫原性.方法 表达纯化各型VLP,用纯化好的VLP免疫BALB/c小鼠,将BALB/c小鼠随机分PBS组、灭活DENV1、灭活DENV2、纯化VLP1、纯化VLP2、纯化VLP1+2组,以灭活病毒为阳性对照,PBS为阴性对照.ELISA法检测小鼠血清抗VLP抗体效价以及血清IFN-γ、TNF-α细胞因子水平,流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4+细胞和CD8+细胞数.结果 登革病毒1、2型单、双价VLP均能刺激免疫小鼠产生一定程度的抗血清效价,VLP1的抗体水平较VLP2的低,双价VLP组针对DENV2抗原的抗体水平上升明显,是单价VLP2的2～3倍；攻毒后,灭活DENV1和VLP2可以产生高水平的IFN-γ,分别为60和35 pg/ml,双价VLP组的较低;VLP2组的TNF-α一直保持较高水平,双价VLP组中攻DENV2组的TNF-α水平较DENV1组高；三次免疫后,各实验组较之PBS组CD4+细胞的比例都有下降,而CD8+细胞变化不大,除灭活DENV1组有增加,其余各组都有减少.结论 无论单、双价VLP均能刺激小鼠产生一定程度的体液免疫和细胞免疫反应,联合免疫有一定程度的协同性.
作者：喻治准；刘岩；付春云；方丹云；江丽芳；周俊梅 刊期： 2012年第06期
目的 筛选主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因.方法 选取主动脉夹层患者为病例组(150例),按照性别、年龄、是否吸烟、合并高血压、糖尿病情况与病例组匹配的原则入选排除主动脉夹层、重大心血管疾病及肿瘤的志愿者为对照组(250例),均从外周血提取基因组DNA,采用DNA混合池技术为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选主动脉夹层发病相关的遗传易感基因.结果 对照组女性数量明显多于病例组(P＜0.01)；在年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数方面差异均无统计学意义(P＞0.05).根据芯片扫描结果,挑选silhouette width计算值大于0.7,小等位基因频率(MAF)大于0.05,且SNPs位于已知名称基因上的前5个SNPs位点.结果发现,遗传变异位点SNP rs2970873(位于PPARGC1A基因)、SNPrs12678080(位于SGCZ基因)、SNP rs489526(位于UNC13C基因)、SNP rs6928665(位于TRAM2基因)和SNP rs17837003(位于ACCN1基因上)可能与主动脉夹层的发病机制有关.结论 SNPs rs2970873、rs12678080、rs489526、rs6928665和rs17837003可能与主动脉夹层发病机制相关.
作者：陈逸飞；钟诗龙；罗建方；薛凌；黎明；胡孜阳 刊期： 2012年第06期
目的 采用原核基因工程技术重组表达梅毒螺旋体TP47蛋白,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用.方法 PCR扩增获得TP47基因片段并构建pET28b-TP47原核表达重组质粒,转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导蛋白质表达,经镍柱纯化后通过质谱技术进行鉴定.采用免疫印迹法测定其与梅毒患者血清的免疫反应性.建立基于重组TP47抗原的ELISA间接法并对30份TPPA阳性血清和75份TPPA阴性血清进行方法学验证.结果 PCR扩增获得约1.1 kb的基因片段,成功构建原核表达载体pET28b -TP47.重组蛋白在细菌中以包涵体形式表达,约占菌体蛋白含量的70％,分子量约39 000 Mr,经纯化后其纯度约95％.经质谱分析表明重组蛋白为TP47蛋白.免疫印迹法证实TP47蛋白能够与梅毒患者血清发生特异性反应,ELISA测定TPPA阳性血清和阴性血清的符合率分别为97％(29/30)和97％ (73/75).结论 通过DNA重组技术成功获得了梅毒螺旋体TP47蛋白,证实其与梅毒阳性血清具有良好的反应性,为研发新一代梅毒感染诊断试剂盒奠定了基础.
作者：林勇平；俞辉；张婷；林毅妍；宋金龙；刘忠民 刊期： 2012年第06期
目的 研究脑梗死相关蛋白在评估急性脑梗死(ACI)患者脑血管狭窄程度中的作用.方法 选取2010-2012年在珠江医院因ACI住院的患者,选取脑动脉造影结果狭窄程度＞70％及闭塞者为试验组(n=29),≤70％者及正常者为对照组(n=23).检测所有患者外周血脑梗死相关蛋白含量.结果 试验组患者超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血栓前体蛋白(TpP)、脂蛋白α(Lpα)外周血中含量分别为(3.51±2.25) mg/L、(1 797.08±162.35) μg/L、(363.81±218.34) mg/L,均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).D-二聚体(DDI)、纤维蛋白原(Fg)、血小板凝聚因子(vWF)的含量无明显变化.hs-CRP(P=0.029,OR =2.232)、TpP(P=0.032,OR=1.014)、Lpα( P=0.024,OR=1.009)与脑大动脉粥样硬化病变导致的脑血管狭窄程度相关,DDI(P=0.671)、Fg(P=0.248)、vWF (P=0.090)与脑血管的狭窄程度相关性不明显.高血压(P=0.029,OR=4.582)是脑血管狭窄的危险因素.结论 hs-CRP、TpP、Lpα、高血压是脑大动脉粥样硬化病变导致的ACI患者脑血管重度狭窄的危险因素,血清中hs-CRP、TpP、Lpα含量升高同时伴有高血压的ACI患者脑血管重度狭窄的可能性增大.
作者：刘鹏；刘亚杰；贺雄军；罗丽丽 刊期： 2012年第06期
目的 通过对江西省上饶县晚期血吸虫病人医疗救治项目实施情况进行分析,为进一步加强晚期血吸虫医疗救助项目的管理提供科学依据.方法 采用《江西省晚期血吸虫病人治疗救助信息管理系统》,对2005-2009年接受医疗救助的607例晚期血吸虫病人的相关资料进行分析.结果 607例晚期血吸虫病人中,男性占62.6％,女性占37.4％,50岁以上患者占83％.其中腹水型病人551例,占90.8％,救治1252例次,人均治疗2.3次；巨脾型病人56例,占9.2％,救治56例次,治疗次数均为1次.临床治愈及好转患者占89.0％.结论 上饶县晚期血吸虫医疗救助项目取得良好社会效益,达到了症状改善,病情好转的基本救治目的.
作者：周红；赵奀琴；黄书春；周玉玲；程立毅；陈远新；宁安 刊期： 2012年第06期
目的 调查配偶之间人类血小板抗原(HPA)的不配合率并评估其在新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)中的作用.方法 采用SSP法对200对广州汉族配偶进行了HPA-1～-16基因分型.结果 配偶双方HPA- 1～-6及HPA-15均在同一HPA位点具有不同基因型,HPA-7～- 14及HPA-16均为a/a纯合子.得到HPA-1～-16的等位基因频率,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6、HPA-5、HPA-1和HPA-4的不配合率为别为37.42％、37.02％、8.02％、3.84％、2.44％、0.75％和0.24％,其余HPA位点的不配合率为0.结论 HPA-5可能是广州汉族人群NAP重要的一个HPA系统,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6和HPA-4也分别具有其免疫学意义,这为HPA的抗体检测以及NAIT的诊断治疗提供了实验依据.
作者：周豪杰；杨承东；聂咏梅 刊期： 2012年第06期
目的 分析深圳市公明街道2005-2010年其他感染性腹泻流行特征,为有效控制其他感染性腹泻提供流行病学依据.方法 对深圳市公明街道2005-2010年疾病监测信息报告管理系统中报告的其他感染性腹泻病例进行流行病学描述性分析.结果 2005-2010年深圳市公明街道共报告其他感染性腹泻病例9 258例,年均发病率为214.64/10万(9258/4313263),其中2008年发病率高为301.00/10万(2273/755161).5岁以下年龄组占全部发病数的90.38％,散居儿童占总病例数的91.00％;10-12月为发病高峰.报告发病率居前5位的村镇为将石、公明、上村、合水口、长圳.轮状病毒感染所致的其他感染性腹泻病例4966例,占报告病例总数的53.64％.结论 深圳市公明街道2005-2010年感染性腹泻报告病例主要集中在0～5岁散居儿童,秋冬季是好发季节,轮状病毒感染为主要病因.
作者：汪东篱；郑庆鸣；钟晓；列义；姚炜 刊期： 2012年第06期
目的 对深圳市2004-2011年伤寒沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型及耐药性分析,为临床用药和追踪传染源提供依据.方法 采用K-B法对42株伤寒沙门菌进行20种抗菌药物敏感性测试,并用PFGE对其进行分子分型.结果 42株伤寒沙门菌株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、甲氧苄啶、氯霉素和四环素17种药物的敏感率均超过90％,对萘啶酸耐药率高达61.5％.42株伤寒沙门菌株可分为SZ0001 -SZ0028共28个PFGE型别,其中流行优势型为SZ0023型别.结论 结合药物敏感试验结果和PFGE分子分型结果可以判断伤寒疫情的优势株型.
作者：林一曼；李迎慧；扈庆华；吕东月；邱亚群；石晓路 刊期： 2012年第06期
目的 研究酪氨酸蛋白激酶-7 (PTK7)在食管鳞状细胞癌、癌旁组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌的发展、侵袭、淋巴结转移的关系,分析其在食管鳞癌中的诊断价值及预后变化.方法 收集食管鳞状细胞癌标本80例及癌旁组织63例,采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶连结(SP)法检测PTK7蛋白的表达,结合临床相关因素进行X2检验及Kaplan-meier等统计学分析.结果 80例患者食管鳞状细胞癌组织中有45例PTK7蛋白表达阳性(x2=50.17,P＜0.01),食管癌旁非典型增生及正常鳞状上皮中PTK7蛋白表达均阴性.PTK7表达与食管鳞癌的年龄、性别、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、浸润长度、临床分期等比较差异无统计学意义(P＞0.05);与5年生存率比较差异亦无统计学意义(x2=0.2,P＞0.1)；当肿瘤组织PTK7蛋白表达综合免疫组化评分≥5分时,5年生存率有下降趋势(x2=3.35,P=0.06).结论 PTK7表达与食管鳞癌有关,当PTK7综合免疫评分≥5分时,5年生存率有下降趋势.利用检测PTK7的表达,有助于综合判断食管鳞癌的相关性和临床预后.
作者：黄群锋；倪仰鹏；李易奕；肖建彪；陈龙华 刊期： 2012年第06期
目的 克隆表达一个新的旋毛虫组织蛋白酶基因CathepsinX,初步探讨其免疫学特性,为研究新的防治方法奠定科学基础.方法 从GenBank旋毛虫核酸数据库中筛选出功能未知的CathepsinX基因部分EST序列,使用RACE-PCR方法得到其全长编码基因序列.半定量RT-PCR分析该基因的转录.构建该基因的原核表达载体pET30a-TsCPX,大肠杆菌中IPTG诱导表达,His-tag亲和层析纯化获重组蛋白TsCPX；将纯化的重组蛋白40μg/只免疫BALB/c小鼠,免疫前1周及每次免疫后2周收集免疫血清,间接ELISA检测血清总IgG、亚类IgG1、IgG2a抗体浓度.结果 RACE-PCR克隆出TsCPX全长基因序列,共1227 bp；RT-PCR揭示TsCPX在旋毛虫三个发育时期均有380 bp扩增条带,条带光密度分析显示高转录水平出现在新生幼虫期.E.coli原核表达体系中成功克隆表达出重组蛋白TsCPX;重组蛋白免疫小鼠二次后,免疫血清总Igc迅速上升,三次免疫后达到峰值(P＜0.001)；IgG亚类IgG1抗体浓度随着免疫次数的增加迅速上升,亚类IgG2a无明显上升,两者间差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功克隆的TsCPX基因在旋毛虫的三个生长发育时期均有转录表达,TsCPX重组蛋白具有较强免疫原性,能引起宿主(小鼠)Th2型为主的免疫应答,具有作为旋毛虫病免疫预防研究靶分子的潜在价值.
作者：周阳芳；贾飞飞；占建华；胡旭初；周兴旺 刊期： 2012年第06期
目的 探讨中医体质与大学生疲劳发生的相关性.方法 整群抽样抽取广州某大学6 029名大学生,进行问卷调查了解疲劳状况及中医体质分型,进行卡方检验、多分类Logistic回归分析.结果 疲劳发生情况为“总是”占3.3％(196)、“经常”占19.7％(1 187).男、女大学生发生疲劳的差异有统计学意义(x2=44.725,P=0.000).多分类Logistic回归分析显示,“总是”发生疲劳时平和质为保护因素,气虚质、瘀血质及湿热质为危险因素；“经常”发生疲劳时平和质为保护因素,气虚质、瘀血质为危险因素；“有时”发生疲劳时只有平和质密切相关,为保护因素;“很少”发生疲劳时各体质对模型无贡献.结论气虚质、瘀血质和湿热质是大学生发生疲劳的危险因素,而平和质是保护因素.
作者：严美花；陈晶；孙晓敏；谭为；张乐；肖雅；谢豪杰；罗仁；赵晓山 刊期： 2012年第06期
目的 利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据.方法 以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2重组载体,利用Y2HGold酵母双杂交系统,从人类通用cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白.结果 成功构建含诱饵蛋白基因的pGBKT7-PB1 -F2重组载体,转化酵母白激活和毒性实验显示为阴性;酵母双杂交实验显示Y2HGold和Y187酵母的结合率为5.22％,符合实验要求;经筛选和验证后,得到3个与截短型PB1 - F2蛋白有相互作用的阳性克隆,分别为钾/钠ATP酶β1亚基、热休克蛋白40和白介素-2受体γ亚基.结论 初步推断截短型H3N2流感病毒PB1-F2蛋白可能影响流感病毒在宿主细胞中的复制功能和凋亡调控.
作者：冯发深；何霞；王铸；徐霖；张定梅；关琳琳；曹开源 刊期： 2012年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
