汪东篱;郑庆鸣;钟晓;列义;姚炜
目的 对深圳市2004-2011年伤寒沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型及耐药性分析,为临床用药和追踪传染源提供依据.方法 采用K-B法对42株伤寒沙门菌进行20种抗菌药物敏感性测试,并用PFGE对其进行分子分型.结果 42株伤寒沙门菌株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、甲氧苄啶、氯霉素和四环素17种药物的敏感率均超过90%,对萘啶酸耐药率高达61.5%.42株伤寒沙门菌株可分为SZ0001 -SZ0028共28个PFGE型别,其中流行优势型为SZ0023型别.结论 结合药物敏感试验结果和PFGE分子分型结果可以判断伤寒疫情的优势株型.
作者:林一曼;李迎慧;扈庆华;吕东月;邱亚群;石晓路 刊期: 2012年第06期
目的 探讨N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)在妊娠高血压疾病(PIH)心功能评估中的价值.方法 将102例PIH孕妇分为妊娠高血压组37例,轻度子痫前期组33例,重度子痫前期组32例,另外选取正常妊娠组32例及正常未孕育龄妇女32例作为对照组,采用电化学发光法测定患者血清NT-proBNP浓度.结果 PIH组、正常妊娠组和对照组的NT-proBNP水平分别为(300.52±134.44)、( 83.42±26.26)和(59.83±12.89)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠高血压组的NT-proBNP水平分别为(488.56±155.54)、(323.39±148.90)和(185.73±43.78)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).NT-proBNP与孕妇体重指数(BMI)呈正相关(r=0.602),与新生儿体重呈负相关(r=-0.279).结论 孕后NT-proBNP有所升高,而且是能够用于评估PIH孕妇心功能的敏感指标之一.
作者:陈晓燕;周俐琼;陈冀莹 刊期: 2012年第06期
目的 探讨精索静脉曲张Marmar术式的解剖学基础.方法 选择雄性SD大鼠100只,随机分为手术组80只和对照组20只,手术组分离及缩窄左肾静脉,对照组只分离不缩窄左肾静脉,同一条件下饲养8周,分别解剖两组大鼠精索静脉,并做血管铸型,记录及比较精索静脉系统分支数目、直径、侧枝循环数目和曲张程度.结果 手术组有51只SD大鼠可以观察到精索静脉明显曲张,腹股沟内环口水平以上及外环口水平以下精索静脉的直径较对照组明显增粗,差异均有统计学意义.手术组大鼠出现明显增粗的侧枝循环,出现的侧枝循环大部分位于外环口平面以下.对照组无或1~2支极细侧枝血管.结论 选择外环口平面以下可以有效结扎曲张的精索静脉避免漏扎导致复发.
作者:曾静;黄桂晓;黄树声;吴先哲;李伟东 刊期: 2012年第06期
目的 初步研究登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒(VLP)的免疫原性.方法 表达纯化各型VLP,用纯化好的VLP免疫BALB/c小鼠,将BALB/c小鼠随机分PBS组、灭活DENV1、灭活DENV2、纯化VLP1、纯化VLP2、纯化VLP1+2组,以灭活病毒为阳性对照,PBS为阴性对照.ELISA法检测小鼠血清抗VLP抗体效价以及血清IFN-γ、TNF-α细胞因子水平,流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4+细胞和CD8+细胞数.结果 登革病毒1、2型单、双价VLP均能刺激免疫小鼠产生一定程度的抗血清效价,VLP1的抗体水平较VLP2的低,双价VLP组针对DENV2抗原的抗体水平上升明显,是单价VLP2的2~3倍;攻毒后,灭活DENV1和VLP2可以产生高水平的IFN-γ,分别为60和35 pg/ml,双价VLP组的较低;VLP2组的TNF-α一直保持较高水平,双价VLP组中攻DENV2组的TNF-α水平较DENV1组高;三次免疫后,各实验组较之PBS组CD4+细胞的比例都有下降,而CD8+细胞变化不大,除灭活DENV1组有增加,其余各组都有减少.结论 无论单、双价VLP均能刺激小鼠产生一定程度的体液免疫和细胞免疫反应,联合免疫有一定程度的协同性.
作者:喻治准;刘岩;付春云;方丹云;江丽芳;周俊梅 刊期: 2012年第06期
目的 观察慢性应激状态下大鼠一般状况,血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)浓度,蓝斑(LC)中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、即刻早期基因c-fos的表达,以及逍遥散对其的干预效应.方法 将18只SD健康雄性大鼠随机分为正常对照、模型、逍遥散治疗组,每组6只.采用束缚的方法造模,观察大鼠行为、饮食、排便的变化;造模21d后取出蓝斑,用ELISA法检测血清中CRH浓度,Real-time PCR检测蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA的表达.结果 模型组大鼠行为、排便、饮食出现明显异常;与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH浓度升高,蓝斑中CRF mRNA和c-fosmRNA表达均上调(P<0.01);与模型组比较,逍遥散组大鼠血清CRH浓度下降,蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA表达下调(P<0.01);逍遥散组较对照组CRH浓度升高、CRF mRNA和c-fos mRNA表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 神经递质CRF介导了慢性束缚应激中LC的激活,转录因子c-fos亦参与了其调控,而逍遥散则可以有效地进行干预,下调其过表达.
作者:丁秀芳;陶杨;张丽华;张雪;高磊;孙学刚;陈育尧;吕志平 刊期: 2012年第06期
目的 筛选主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因.方法 选取主动脉夹层患者为病例组(150例),按照性别、年龄、是否吸烟、合并高血压、糖尿病情况与病例组匹配的原则入选排除主动脉夹层、重大心血管疾病及肿瘤的志愿者为对照组(250例),均从外周血提取基因组DNA,采用DNA混合池技术为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选主动脉夹层发病相关的遗传易感基因.结果 对照组女性数量明显多于病例组(P<0.01);在年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数方面差异均无统计学意义(P>0.05).根据芯片扫描结果,挑选silhouette width计算值大于0.7,小等位基因频率(MAF)大于0.05,且SNPs位于已知名称基因上的前5个SNPs位点.结果发现,遗传变异位点SNP rs2970873(位于PPARGC1A基因)、SNPrs12678080(位于SGCZ基因)、SNP rs489526(位于UNC13C基因)、SNP rs6928665(位于TRAM2基因)和SNP rs17837003(位于ACCN1基因上)可能与主动脉夹层的发病机制有关.结论 SNPs rs2970873、rs12678080、rs489526、rs6928665和rs17837003可能与主动脉夹层发病机制相关.
作者:陈逸飞;钟诗龙;罗建方;薛凌;黎明;胡孜阳 刊期: 2012年第06期
目的 探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义.方法 从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本.其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶);32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶).运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平.结果 相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890) vs (6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P<0.05).而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P<0.05).结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点.
作者:邓治亮;简志祥;孙建 刊期: 2012年第06期
目的 克隆表达一个新的旋毛虫组织蛋白酶基因CathepsinX,初步探讨其免疫学特性,为研究新的防治方法奠定科学基础.方法 从GenBank旋毛虫核酸数据库中筛选出功能未知的CathepsinX基因部分EST序列,使用RACE-PCR方法得到其全长编码基因序列.半定量RT-PCR分析该基因的转录.构建该基因的原核表达载体pET30a-TsCPX,大肠杆菌中IPTG诱导表达,His-tag亲和层析纯化获重组蛋白TsCPX;将纯化的重组蛋白40μg/只免疫BALB/c小鼠,免疫前1周及每次免疫后2周收集免疫血清,间接ELISA检测血清总IgG、亚类IgG1、IgG2a抗体浓度.结果 RACE-PCR克隆出TsCPX全长基因序列,共1227 bp;RT-PCR揭示TsCPX在旋毛虫三个发育时期均有380 bp扩增条带,条带光密度分析显示高转录水平出现在新生幼虫期.E.coli原核表达体系中成功克隆表达出重组蛋白TsCPX;重组蛋白免疫小鼠二次后,免疫血清总Igc迅速上升,三次免疫后达到峰值(P<0.001);IgG亚类IgG1抗体浓度随着免疫次数的增加迅速上升,亚类IgG2a无明显上升,两者间差异有统计学意义(P<0.001).结论 成功克隆的TsCPX基因在旋毛虫的三个生长发育时期均有转录表达,TsCPX重组蛋白具有较强免疫原性,能引起宿主(小鼠)Th2型为主的免疫应答,具有作为旋毛虫病免疫预防研究靶分子的潜在价值.
作者:周阳芳;贾飞飞;占建华;胡旭初;周兴旺 刊期: 2012年第06期
目的 了解2006-2011年东莞市无偿献血人群的构成特点,为今后东莞市无偿献血宣传工作提供科学依据.方法 对东莞市2006-2011年无偿献血人群一般情况及献血情况的资料进行统计分析.结果 2006-2011年无偿献血共396 984人次,献血人群男、女性别比为2.28∶1;献血者文化程度多为初、高中,分别占总人数36.52%及27.01%;献血者职业以“生产、运输设备操作人员”者多,占22%.2007-2011年每年2月献血人次为当年低.固定献血者具有男性献血者多、捐献血小板者多、单次献血量较大、检验合格率高的人群特征.结论 东莞市无偿献血的重点人群是工人,应加强对非工人人群(如在校学生、企事业单位职工等)的无偿献血宣传,鼓励更多的献血者成为固定献血者.
作者:张婷;凌莉;张迪;杜莹映 刊期: 2012年第06期
目的 研究基因1型慢性丙型肝炎(CHC)患者治疗过程中外周血自然调节性T细胞(nTreg)的动态变化及其与抗病毒疗效的关系.方法 32例初治的CHC患者,均为基因1型,治疗方案为干扰素联合利巴韦林治疗48周.分别在治疗前、治疗过程中2、4、8、12、24、48周以及治疗结束后12或24周采集外周血标本.用流式的方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中nTreg的比率.COBAS Ampliprep/COBAS Taqman HCV试剂盒检测HCV-RNA定量.结果 24例患者治疗12周时HCV-RNA转阴,并且随访至治疗结束后24周仍阴性,达到持续病毒学应答(SVR);8例患者治疗12周时病毒量未转阴,无应答(NVR),24周时终止治疗.应答组和无应答组治疗前外周血中nTreg的比率差异无统计学意义(P>0.05).应答组治疗过程中2、4、12、24、48周及治疗结束后各个时间点PBMC中nTreg水平分别为(0.91±0.22)%、(1.31±0.29)%、(1.78±0.43)%、(1.92±0.44)%、(1.90±0.37)%、(1.14±0.35)%;在治疗2周(P<0.001)及治疗结束后(P<0.001)下降明显.无应答组治疗过程中2、4、12、24周及治疗结束后各时间点PBMC中nTreg水平分别为(1.21±0.15)%、(1.24±0.18)%、(1.42±0.11)%、(1.45±0.11)%、(1.14±0.10)%;Treg水平在治疗4周时缓慢上升(P=0.005),在治疗结束后显著下降,与治疗24周比较差异有统计学意义(P<0.001).结论 CHC患者外周血nTreg水平与干扰素/利巴韦林抗病毒治疗的疗效密切相关,抗病毒治疗2周时nTreg水平的下降可以预测其疗效.提示nTreg可能在机体清除病毒的早期过程中起着重要作用.
作者:邵晓琼;赵志新;蔡庆贤;张晓红;林潮双;高志良 刊期: 2012年第06期
目的 对新发现的华支睾吸虫亲肌素样蛋白(CsMLP)进行克隆、原核表达,初步了解其重组产物的免疫学功能.方法 应用生物信息学分析软件,分析CsMLP的序列特点和基本理化特征;将CsMLP基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,诱导表达并用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,用纯化的CsMLP蛋白免疫SD大鼠获得抗血清;用Western blot进行免疫反应性及免疫原性分析;应用免疫荧光方法观察CsMLP在华支睾吸虫成虫的定位.结果 该cDNA序列全长为900 bp,编码190个氨基酸,具有Calponin功能域;PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a (+)-CsMLP重组质粒构建成功;SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中获得高效表达,分子量为21 300 Mr;经亲和层析获得了高纯度蛋白;重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清、感染了华支睾吸虫的SD大鼠血清识别;CsMLP主要定位于虫体富含肌肉组织的口、腹吸盘、咽部,在表膜、肠壁也有分布.结论 CsMLP可在原核表达系统中呈现高效的可溶性表达,具有免疫原性,其主要分布在华支睾吸虫肌肉丰富的组织.
作者:李文芳;黄艳;余新炳;胡月;李然;徐劲 刊期: 2012年第06期
目的 利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据.方法 以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2重组载体,利用Y2HGold酵母双杂交系统,从人类通用cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白.结果 成功构建含诱饵蛋白基因的pGBKT7-PB1 -F2重组载体,转化酵母白激活和毒性实验显示为阴性;酵母双杂交实验显示Y2HGold和Y187酵母的结合率为5.22%,符合实验要求;经筛选和验证后,得到3个与截短型PB1 - F2蛋白有相互作用的阳性克隆,分别为钾/钠ATP酶β1亚基、热休克蛋白40和白介素-2受体γ亚基.结论 初步推断截短型H3N2流感病毒PB1-F2蛋白可能影响流感病毒在宿主细胞中的复制功能和凋亡调控.
作者:冯发深;何霞;王铸;徐霖;张定梅;关琳琳;曹开源 刊期: 2012年第06期
目的 探讨深圳市龙岗区2007年麻疹发病的流行病学特征,为制定麻疹预防控制策略提供科学依据.方法 收集深圳市龙岗区2007年麻疹发病资料,按照发病时间、病人性别、年龄、职业分布等指标进行统计分析.结果 2007年全区共报告确诊麻疹病例1 351例,2007的麻疹发病率为30.18/10万,比2006年(16.88/10万)增加78.8%,差异有统计学意义(P<0.01).发病时间集中在5~8月;发病人群以5岁以下的散居儿童和20~30岁年龄段的外来青工为主:职业以散居儿童发病多占52.5%,其次工人占20.1%.99.19%的病例无麻疹疫苗接种史或免疫史不详.结论 2007年麻疹发病显著升高,发病季节主要在夏季,5岁以下散居儿童和外来劳务青工是麻疹防控工作的重点易感人群,需积极开展麻疹疫苗的接种工作.
作者:杨克志;刘国栋;刘渠;谢瑞琼;骆文博 刊期: 2012年第06期
目的 通过对江西省上饶县晚期血吸虫病人医疗救治项目实施情况进行分析,为进一步加强晚期血吸虫医疗救助项目的管理提供科学依据.方法 采用《江西省晚期血吸虫病人治疗救助信息管理系统》,对2005-2009年接受医疗救助的607例晚期血吸虫病人的相关资料进行分析.结果 607例晚期血吸虫病人中,男性占62.6%,女性占37.4%,50岁以上患者占83%.其中腹水型病人551例,占90.8%,救治1252例次,人均治疗2.3次;巨脾型病人56例,占9.2%,救治56例次,治疗次数均为1次.临床治愈及好转患者占89.0%.结论 上饶县晚期血吸虫医疗救助项目取得良好社会效益,达到了症状改善,病情好转的基本救治目的.
作者:周红;赵奀琴;黄书春;周玉玲;程立毅;陈远新;宁安 刊期: 2012年第06期
目的 了解2008-2011年广州地区腹泻儿童空肠弯曲菌(CJ)的感染和耐药情况及其变迁,为CJ感染的临床治疗提供参考.方法 采用API-Campy鉴定系统及多重PCR对CJ进行鉴定,采用纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 4 423例粪便样本共检出345株CJ,总检出率为7.8%,2008-2011年各年检出率分别为8.0%、7.8%、7.9%、7.5%.CJ对复方新诺明和头孢哌酮几乎全部耐药,对氨苄西林、四环素及喹诺酮类药物的耐药率为23.0%~48.3%,但对亚胺培南、阿米卡星、氯霉素、红霉素、阿奇霉素则普遍敏感,耐药率在8.1%以下.CJ对氨苄西林的耐药率从2008年的23.0%上升到2011年的36.0%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率从2008年的2.3%上升至2011年的12.8%,但对其余抗生素的耐药率则变化不大.结论 广州地区儿童空肠弯曲菌仍有较高的感染率,CJ对氨苄西林等部分抗生素的耐药率有逐年升高的趋势.
作者:李彩金;谢永强;周珍文;邓秋连;黄钰君;何艳明 刊期: 2012年第06期
目的 构建含有人nestin第二内含子的荧光素酶报告基因并检测其活性.方法 从NCBI数据库获得nestin 的DNA全长序列(NC_000001),用vector NTI软件分析找到其第二内含子位置,通过PCR的方法从人血全基因组DNA中钓取nestin的第二内含子全长片段,克隆到报告基因pGL3-promoter载体上,将报告基因载体转染至293T细胞,采用双荧光素酶报告基因系统评估第二内含子的活性.结果 成功钓取nestin第二内含子片段,长度为1 688 bp,测定其DNA序列正确.瞬时转染293T细胞,经双荧光报告实验显示转染了pGL3-nes-promoter载体的细胞其相对荧光素酶活性相比于空载组,大约提高了3.39倍,差异有统计学意义(P<0.001).结论 成功构建了含有nestin第二内含子的荧光素酶报告载体,为进一步研究nestin的调控机制奠定基础.
作者:朱媛媛;安靓 刊期: 2012年第06期
目的 分析柳州市1999-2010年50岁以上人群艾滋病流行特点,为今后制定艾滋病防治措施提供科学依据.方法 收集和分析柳州市1999-2010年50岁以上人群艾滋病疫情报告、综合监测和专项调查资料.结果 1999-2010年累计报告50岁以上人群HIV感染者/AIDS病人1 788人,其中AIDS 977人,死亡608人;男1 367例,女421例,男女性别比为3.25∶1;职业以农民为主,占50.78%;文化程度初中以下的占73.43%;传播途径以异性传播为主,占75.84%,且历年统计显示异性传播呈逐年上升趋势,2010年达到96.94%;50岁以上病例存活时间逐年延长,但超过3年的仅占3.34%,远远低于全人群的12.29%,差异有统计学意义(x2=27.50,P<0.01);病例发现晚,导致治疗晚是主因.结论 50岁以上人群艾滋病疫情发展迅速,艾滋病防治难度大,必须尽快采取有效的预防控制措施.
作者:白玉;梁庆香;黄宝杨 刊期: 2012年第06期
目的 探讨妊娠合并血小板减少的围产期处理及产后出血情况.方法 收集2006年1月至2011年8月茂名市人民医院及广州医学院第三附属医院收治的218例妊娠合并血小板减少患者,根据分娩前血小板计数51×109~99× 109/L、21×109~50×1 09/L、≤20× 109/L分为A、B、C三组,每例患者针对原发病治疗,产前根据病情适当给予糖皮质激素,静脉注射丙种球蛋白,输入血小板治疗,分析各组的产后出血情况.结果 A、B、C三组的产后出血发生率分别为2.67%、7.46%、28.20%;平均出血量分别为(600±80)、(600±120)、(900±200)ml,产后24h平均阴道流血量分别为(250±30)、(250±80)、(500±100)ml,C组平均出血量及24h平均阴道流血量与A、B组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 妊娠合并血小板减少,在治疗原发病的基础上,给予对应治疗,适时终止妊娠可有效改善不良妊娠结局.
作者:李志英;余琳 刊期: 2012年第06期
目的 对我市流感样病例标本进行病原学检测,分析其病原学特点,为流感防控提供病原学依据.方法 采用MDCK细胞(狗肾细胞)培养法分离流感病毒,用血凝抑制试验对病毒株进行分型鉴定.结果 从哨点医院采集的520份标本中共分离出流感病毒41株,分离率为7.9%,以新甲型H1N1为主.其中新甲型H1N1 26株(63.4%),H3N2型5株(12.2%),B(Yamagata)型l株(2.4%),B(Victoria)型9株(22.0%).流感流行高峰出现在春季的1-3月和秋季的8-9月.健康人群血清中流感抗体的阳性率不高,高为新甲型H1N1抗体阳性率41.9%,低为B(Yamagata)的抗体阳性率,仅8.1%.对2010年2株新甲型H1N1进行基因测序,结果显示甲型H1N1基因未发生变异,暂时不会造成大的流行.结论 惠州市流感病毒的流行时间有明显的季节性,活动相对平缓,新甲型H1N1流感病毒是春季的优势毒株,下半年逐渐转变为H3N2型流感病毒.
作者:曾健君;方巧云;刘燕;严宇斌;罗泽燕;徐励琴 刊期: 2012年第06期
目的 调查配偶之间人类血小板抗原(HPA)的不配合率并评估其在新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)中的作用.方法 采用SSP法对200对广州汉族配偶进行了HPA-1~-16基因分型.结果 配偶双方HPA- 1~-6及HPA-15均在同一HPA位点具有不同基因型,HPA-7~- 14及HPA-16均为a/a纯合子.得到HPA-1~-16的等位基因频率,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6、HPA-5、HPA-1和HPA-4的不配合率为别为37.42%、37.02%、8.02%、3.84%、2.44%、0.75%和0.24%,其余HPA位点的不配合率为0.结论 HPA-5可能是广州汉族人群NAP重要的一个HPA系统,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6和HPA-4也分别具有其免疫学意义,这为HPA的抗体检测以及NAIT的诊断治疗提供了实验依据.
作者:周豪杰;杨承东;聂咏梅 刊期: 2012年第06期