曾静；黄桂晓；黄树声；吴先哲；李伟东
目的 观察禽流感H5N1型病毒对NIH小鼠的致病性.方法 将NIH小鼠随机分为接毒组(20只)和对照组(10只),在负压感染实验室,接毒组于乙醚麻醉后给予AIV H5N1型病毒滴鼻,对照组予正常阴性尿囊液滴鼻,观察14d,记录小鼠的体温、体重、临床症状、死亡情况、病理变化、肺指数及抗体变化.结果 NIH小鼠感染禽流感H5N1型病毒后第1天就出现精神不振,病程主要集中在第3～7天,临床症状主要表现为弓背、蜷缩、竖毛、颤抖、反应迟钝、活动减少、爱扎堆,体重(下降)出现减轻,体温降低,死亡率为40％；接毒组死亡小鼠肺指数为(2.21±0.40),较对照组的(0.44±0.23)明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01);肺组织病理严重改变,第8天才能检出抗体(OD值等于0.231).结论 禽流感H5NI型病毒对NIH小鼠有一定的致病性.
作者：刘忠华；刘香梅；黄韧 刊期： 2012年第06期
目的 构建含有人nestin第二内含子的荧光素酶报告基因并检测其活性.方法 从NCBI数据库获得nestin 的DNA全长序列(NC_000001),用vector NTI软件分析找到其第二内含子位置,通过PCR的方法从人血全基因组DNA中钓取nestin的第二内含子全长片段,克隆到报告基因pGL3-promoter载体上,将报告基因载体转染至293T细胞,采用双荧光素酶报告基因系统评估第二内含子的活性.结果 成功钓取nestin第二内含子片段,长度为1 688 bp,测定其DNA序列正确.瞬时转染293T细胞,经双荧光报告实验显示转染了pGL3-nes-promoter载体的细胞其相对荧光素酶活性相比于空载组,大约提高了3.39倍,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功构建了含有nestin第二内含子的荧光素酶报告载体,为进一步研究nestin的调控机制奠定基础.
作者：朱媛媛；安靓 刊期： 2012年第06期
目的 研究人热休克因子1( HSF1)对Fas配体(FasL)启动子转录活性的影响.方法 用在线启动子分析软件分析FasL启动子区转录因子结合位点；凝胶阻滞实验(EMSA)研究内源性HSF1与FasL启动子区的热休克元件(HSE)结合能力；将组成型活化的HSF1突变体与FasL启动子表达载体FasL-luc共同转染HeLa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统,检测荧光索酶活性.结果 在FasL启动子区发现HSE核心序列(nGAAnnTTCn),HSF1可以与该HSE体外结合；荧光素酶活性测定发现HSF1明显上调FasL-luc转录活性,突变该HSE,则转录激活作用消失.结论 HSF1对FasL具有转录调控作用.
作者：鄂顺梅；陈茶；曾建明；邹江英 刊期： 2012年第06期
目的 对新发现的华支睾吸虫亲肌素样蛋白(CsMLP)进行克隆、原核表达,初步了解其重组产物的免疫学功能.方法 应用生物信息学分析软件,分析CsMLP的序列特点和基本理化特征；将CsMLP基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,诱导表达并用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,用纯化的CsMLP蛋白免疫SD大鼠获得抗血清;用Western blot进行免疫反应性及免疫原性分析；应用免疫荧光方法观察CsMLP在华支睾吸虫成虫的定位.结果 该cDNA序列全长为900 bp,编码190个氨基酸,具有Calponin功能域；PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a (+)-CsMLP重组质粒构建成功;SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中获得高效表达,分子量为21 300 Mr;经亲和层析获得了高纯度蛋白；重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清、感染了华支睾吸虫的SD大鼠血清识别；CsMLP主要定位于虫体富含肌肉组织的口、腹吸盘、咽部,在表膜、肠壁也有分布.结论 CsMLP可在原核表达系统中呈现高效的可溶性表达,具有免疫原性,其主要分布在华支睾吸虫肌肉丰富的组织.
作者：李文芳；黄艳；余新炳；胡月；李然；徐劲 刊期： 2012年第06期
目的 了解2008-2011年广州地区腹泻儿童空肠弯曲菌(CJ)的感染和耐药情况及其变迁,为CJ感染的临床治疗提供参考.方法 采用API-Campy鉴定系统及多重PCR对CJ进行鉴定,采用纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 4 423例粪便样本共检出345株CJ,总检出率为7.8％,2008-2011年各年检出率分别为8.0％、7.8％、7.9％、7.5％.CJ对复方新诺明和头孢哌酮几乎全部耐药,对氨苄西林、四环素及喹诺酮类药物的耐药率为23.0％～48.3％,但对亚胺培南、阿米卡星、氯霉素、红霉素、阿奇霉素则普遍敏感,耐药率在8.1％以下.CJ对氨苄西林的耐药率从2008年的23.0％上升到2011年的36.0％,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率从2008年的2.3％上升至2011年的12.8％,但对其余抗生素的耐药率则变化不大.结论 广州地区儿童空肠弯曲菌仍有较高的感染率,CJ对氨苄西林等部分抗生素的耐药率有逐年升高的趋势.
作者：李彩金；谢永强；周珍文；邓秋连；黄钰君；何艳明 刊期： 2012年第06期
目的 探讨深圳市龙岗区2007年麻疹发病的流行病学特征,为制定麻疹预防控制策略提供科学依据.方法 收集深圳市龙岗区2007年麻疹发病资料,按照发病时间、病人性别、年龄、职业分布等指标进行统计分析.结果 2007年全区共报告确诊麻疹病例1 351例,2007的麻疹发病率为30.18/10万,比2006年(16.88/10万)增加78.8％,差异有统计学意义(P＜0.01).发病时间集中在5～8月；发病人群以5岁以下的散居儿童和20～30岁年龄段的外来青工为主:职业以散居儿童发病多占52.5％,其次工人占20.1％.99.19％的病例无麻疹疫苗接种史或免疫史不详.结论 2007年麻疹发病显著升高,发病季节主要在夏季,5岁以下散居儿童和外来劳务青工是麻疹防控工作的重点易感人群,需积极开展麻疹疫苗的接种工作.
作者：杨克志；刘国栋；刘渠；谢瑞琼；骆文博 刊期： 2012年第06期
目的 探讨短期和长期过氧化状态对Sestrin2( Sesn2)及PKB胰岛素信号的影响及调控机理.方法 在人肝HepG2细胞株以葡萄糖氧化酶(GO)和含糖培养基共培养4h或16h分别造成细胞短期和长期氧化状态；或胰岛素刺激(15 min或16 h),然后以蛋白印迹法检测Sesn2蛋白含量和胰岛素信号变化(如PKB Ser473和Thr308磷酸化水平).为明确Sesn2作用,用Sesn2 siRNA沉默Sesn2后,探讨胰岛素信号及相关信号变化.结果 GO和胰岛素处理均可明显增加HepG2细胞Sens2蛋白水平；GO短期(4 h)处理可明显刺激胰岛素标志性信号分子PKB Ser473的磷酸化并刺激细胞Sesn2蛋白升高；而长时间(16h)GO处理则可抑制胰岛素刺激的Sesn2表达作用;Sesn2siRNA转染后,可增强胰岛素刺激的PKB Ser473和Thr308位点的磷酸化作用.因此,Sesn2对上述不同机制调控的两个PKB磷酸化位点均有抑制作用.结论 HepG2细胞在短期氧化状态下,可激活PKB活性(PKB Ser473磷酸化)并诱导Sesn2蛋白表达；长期过氧化及胰岛素刺激情况下能激活Sesn2功能,而Sesn2可分别通过对PKBSer473及PKB Thr308两个活性位点的抑制性作用和调控,实现对胰岛素信号及PKB活性的长期负反馈平衡作用.
作者：王国玉；何惠君；于志文 刊期： 2012年第06期
目的 研究基因1型慢性丙型肝炎(CHC)患者治疗过程中外周血自然调节性T细胞(nTreg)的动态变化及其与抗病毒疗效的关系.方法 32例初治的CHC患者,均为基因1型,治疗方案为干扰素联合利巴韦林治疗48周.分别在治疗前、治疗过程中2、4、8、12、24、48周以及治疗结束后12或24周采集外周血标本.用流式的方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中nTreg的比率.COBAS Ampliprep/COBAS Taqman HCV试剂盒检测HCV-RNA定量.结果 24例患者治疗12周时HCV-RNA转阴,并且随访至治疗结束后24周仍阴性,达到持续病毒学应答(SVR)；8例患者治疗12周时病毒量未转阴,无应答(NVR),24周时终止治疗.应答组和无应答组治疗前外周血中nTreg的比率差异无统计学意义(P＞0.05).应答组治疗过程中2、4、12、24、48周及治疗结束后各个时间点PBMC中nTreg水平分别为(0.91±0.22)％、(1.31±0.29)％、(1.78±0.43)％、(1.92±0.44)％、(1.90±0.37)％、(1.14±0.35)％;在治疗2周(P＜0.001)及治疗结束后(P＜0.001)下降明显.无应答组治疗过程中2、4、12、24周及治疗结束后各时间点PBMC中nTreg水平分别为(1.21±0.15)％、(1.24±0.18)％、(1.42±0.11)％、(1.45±0.11)％、(1.14±0.10)％；Treg水平在治疗4周时缓慢上升(P=0.005),在治疗结束后显著下降,与治疗24周比较差异有统计学意义(P＜0.001).结论 CHC患者外周血nTreg水平与干扰素/利巴韦林抗病毒治疗的疗效密切相关,抗病毒治疗2周时nTreg水平的下降可以预测其疗效.提示nTreg可能在机体清除病毒的早期过程中起着重要作用.
作者：邵晓琼；赵志新；蔡庆贤；张晓红；林潮双；高志良 刊期： 2012年第06期
目的 筛选主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因.方法 选取主动脉夹层患者为病例组(150例),按照性别、年龄、是否吸烟、合并高血压、糖尿病情况与病例组匹配的原则入选排除主动脉夹层、重大心血管疾病及肿瘤的志愿者为对照组(250例),均从外周血提取基因组DNA,采用DNA混合池技术为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选主动脉夹层发病相关的遗传易感基因.结果 对照组女性数量明显多于病例组(P＜0.01)；在年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数方面差异均无统计学意义(P＞0.05).根据芯片扫描结果,挑选silhouette width计算值大于0.7,小等位基因频率(MAF)大于0.05,且SNPs位于已知名称基因上的前5个SNPs位点.结果发现,遗传变异位点SNP rs2970873(位于PPARGC1A基因)、SNPrs12678080(位于SGCZ基因)、SNP rs489526(位于UNC13C基因)、SNP rs6928665(位于TRAM2基因)和SNP rs17837003(位于ACCN1基因上)可能与主动脉夹层的发病机制有关.结论 SNPs rs2970873、rs12678080、rs489526、rs6928665和rs17837003可能与主动脉夹层发病机制相关.
作者：陈逸飞；钟诗龙；罗建方；薛凌；黎明；胡孜阳 刊期： 2012年第06期
目的 研究酪氨酸蛋白激酶-7 (PTK7)在食管鳞状细胞癌、癌旁组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌的发展、侵袭、淋巴结转移的关系,分析其在食管鳞癌中的诊断价值及预后变化.方法 收集食管鳞状细胞癌标本80例及癌旁组织63例,采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶连结(SP)法检测PTK7蛋白的表达,结合临床相关因素进行X2检验及Kaplan-meier等统计学分析.结果 80例患者食管鳞状细胞癌组织中有45例PTK7蛋白表达阳性(x2=50.17,P＜0.01),食管癌旁非典型增生及正常鳞状上皮中PTK7蛋白表达均阴性.PTK7表达与食管鳞癌的年龄、性别、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、浸润长度、临床分期等比较差异无统计学意义(P＞0.05);与5年生存率比较差异亦无统计学意义(x2=0.2,P＞0.1)；当肿瘤组织PTK7蛋白表达综合免疫组化评分≥5分时,5年生存率有下降趋势(x2=3.35,P=0.06).结论 PTK7表达与食管鳞癌有关,当PTK7综合免疫评分≥5分时,5年生存率有下降趋势.利用检测PTK7的表达,有助于综合判断食管鳞癌的相关性和临床预后.
作者：黄群锋；倪仰鹏；李易奕；肖建彪；陈龙华 刊期： 2012年第06期
目的 观察柴芪益肝颗粒治疗四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的疗效及其对Leptin、TGF-β1和IL-13因子的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为模型组、柴芪益肝颗粒组、复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组和空白对照组,每组10只.大鼠腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化,光镜观察肝组织病理学改变,放射免疫分析法检测肝纤四项,液相芯片检测血清细胞因子.结果 与模型组比较,柴芪益肝颗粒组肝脏病理变化显著减轻,肝小叶结构基本清晰,细胞索、肝窦无明显异常；与模型组比较,透明质酸(P=0.001)、层粘连蛋白(P=0.005)和Ⅳ型胶原(P=0.000)水平显著降低,瘦素(P=0.012)、转化生长因子β1 (TGF-β1) (P=0.000)和白介素13(IL-13)(P=0.016)水平亦显著降低,差异均有统计学意义.结论 柴芪益肝颗粒显著改善肝纤维化,可能与其通过降低瘦素、TGF-β1和IL-13水平,抑制细胞外基质沉积有关.
作者：游敏玲；胡世平；罗满芳；廖蔚茜；靖林林 刊期： 2012年第06期
目的 调查配偶之间人类血小板抗原(HPA)的不配合率并评估其在新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)中的作用.方法 采用SSP法对200对广州汉族配偶进行了HPA-1～-16基因分型.结果 配偶双方HPA- 1～-6及HPA-15均在同一HPA位点具有不同基因型,HPA-7～- 14及HPA-16均为a/a纯合子.得到HPA-1～-16的等位基因频率,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6、HPA-5、HPA-1和HPA-4的不配合率为别为37.42％、37.02％、8.02％、3.84％、2.44％、0.75％和0.24％,其余HPA位点的不配合率为0.结论 HPA-5可能是广州汉族人群NAP重要的一个HPA系统,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6和HPA-4也分别具有其免疫学意义,这为HPA的抗体检测以及NAIT的诊断治疗提供了实验依据.
作者：周豪杰；杨承东；聂咏梅 刊期： 2012年第06期
目的 对深圳市2004-2011年伤寒沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型及耐药性分析,为临床用药和追踪传染源提供依据.方法 采用K-B法对42株伤寒沙门菌进行20种抗菌药物敏感性测试,并用PFGE对其进行分子分型.结果 42株伤寒沙门菌株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、甲氧苄啶、氯霉素和四环素17种药物的敏感率均超过90％,对萘啶酸耐药率高达61.5％.42株伤寒沙门菌株可分为SZ0001 -SZ0028共28个PFGE型别,其中流行优势型为SZ0023型别.结论 结合药物敏感试验结果和PFGE分子分型结果可以判断伤寒疫情的优势株型.
作者：林一曼；李迎慧；扈庆华；吕东月；邱亚群；石晓路 刊期： 2012年第06期
目的 分析柳州市1999-2010年50岁以上人群艾滋病流行特点,为今后制定艾滋病防治措施提供科学依据.方法 收集和分析柳州市1999-2010年50岁以上人群艾滋病疫情报告、综合监测和专项调查资料.结果 1999-2010年累计报告50岁以上人群HIV感染者/AIDS病人1 788人,其中AIDS 977人,死亡608人;男1 367例,女421例,男女性别比为3.25∶1；职业以农民为主,占50.78％；文化程度初中以下的占73.43％;传播途径以异性传播为主,占75.84％,且历年统计显示异性传播呈逐年上升趋势,2010年达到96.94％;50岁以上病例存活时间逐年延长,但超过3年的仅占3.34％,远远低于全人群的12.29％,差异有统计学意义(x2=27.50,P＜0.01)；病例发现晚,导致治疗晚是主因.结论 50岁以上人群艾滋病疫情发展迅速,艾滋病防治难度大,必须尽快采取有效的预防控制措施.
作者：白玉；梁庆香；黄宝杨 刊期： 2012年第06期
目的 探讨N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)在妊娠高血压疾病(PIH)心功能评估中的价值.方法 将102例PIH孕妇分为妊娠高血压组37例,轻度子痫前期组33例,重度子痫前期组32例,另外选取正常妊娠组32例及正常未孕育龄妇女32例作为对照组,采用电化学发光法测定患者血清NT-proBNP浓度.结果 PIH组、正常妊娠组和对照组的NT-proBNP水平分别为(300.52±134.44)、( 83.42±26.26)和(59.83±12.89)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠高血压组的NT-proBNP水平分别为(488.56±155.54)、(323.39±148.90)和(185.73±43.78)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).NT-proBNP与孕妇体重指数(BMI)呈正相关(r=0.602),与新生儿体重呈负相关(r=-0.279).结论 孕后NT-proBNP有所升高,而且是能够用于评估PIH孕妇心功能的敏感指标之一.
作者：陈晓燕；周俐琼；陈冀莹 刊期： 2012年第06期
目的 探讨霍乱弧菌O1群稻叶型流行株和非流行株的蛋白表达的差异.方法 利用裂解液处理霍乱弧菌,提取全菌蛋白；采用pH梯度等电聚焦对菌蛋白进行双向电泳；考马斯亮蓝染色后获得的双向电泳图谱,并利用ImageMaster 2D Elite 5.0图象分析软件进行分析,找出差异蛋白；在此基础上,胰蛋白酶消化这些特殊差异蛋白,并进行质谱( MALDI-TOF-MS)分析.结果 获得了(1081±16)个蛋白斑点,蛋白主要集中在pI 4.00～7.20之间,重复胶的匹配点数为(1057±28),匹配率为97,85％;发现了有明显差异的21个蛋白点,并进行了质谱鉴定.结论 获得了霍乱弧菌O1群稻叶型流行株和非流行株的差异表达蛋白.
作者：林静佳；李军涛；邓志爱；陈守义 刊期： 2012年第06期
目的 为研制美沙酮维持治疗(MMT)者脱失风险评估量表,筛选、优化条目.方法 在文献研究基础上编制专家咨询问卷,应用德尔菲( Delphi)法,向22位在艾滋病防治和MMT 工作领域的专家发送3次问卷并对咨询结果进行分析.结果 专家权威系数均值为0.93,三轮咨询后,量表条目的重要性和可行性评分的协调系数分别为0.33和0.29(P＜0.01),研制的《美沙酮维持治疗者脱失风险评估量表》包含6个维度,共32个条目；量表的内容效度比(CVR)为0.91,内部一致性信度测量显示Cronbach'α系数为0.83,相隔7d的重测信度达到可接受的水平(组内相关系数为0.96).结论 应用Delphi法对《美沙酮维持治疗者脱失风险评估量表》条目筛选的结果可取,量表具有良好的信度和效度.
作者：张媛；林鹏；李张；李艳；杨放；罗玉兰；付笑冰 刊期： 2012年第06期
目的 探讨精索静脉曲张Marmar术式的解剖学基础.方法 选择雄性SD大鼠100只,随机分为手术组80只和对照组20只,手术组分离及缩窄左肾静脉,对照组只分离不缩窄左肾静脉,同一条件下饲养8周,分别解剖两组大鼠精索静脉,并做血管铸型,记录及比较精索静脉系统分支数目、直径、侧枝循环数目和曲张程度.结果 手术组有51只SD大鼠可以观察到精索静脉明显曲张,腹股沟内环口水平以上及外环口水平以下精索静脉的直径较对照组明显增粗,差异均有统计学意义.手术组大鼠出现明显增粗的侧枝循环,出现的侧枝循环大部分位于外环口平面以下.对照组无或1～2支极细侧枝血管.结论 选择外环口平面以下可以有效结扎曲张的精索静脉避免漏扎导致复发.
作者：曾静；黄桂晓；黄树声；吴先哲；李伟东 刊期： 2012年第06期
目的 利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据.方法 以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2重组载体,利用Y2HGold酵母双杂交系统,从人类通用cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白.结果 成功构建含诱饵蛋白基因的pGBKT7-PB1 -F2重组载体,转化酵母白激活和毒性实验显示为阴性;酵母双杂交实验显示Y2HGold和Y187酵母的结合率为5.22％,符合实验要求;经筛选和验证后,得到3个与截短型PB1 - F2蛋白有相互作用的阳性克隆,分别为钾/钠ATP酶β1亚基、热休克蛋白40和白介素-2受体γ亚基.结论 初步推断截短型H3N2流感病毒PB1-F2蛋白可能影响流感病毒在宿主细胞中的复制功能和凋亡调控.
作者：冯发深；何霞；王铸；徐霖；张定梅；关琳琳；曹开源 刊期： 2012年第06期
目的 观察右美托咪定在小儿扁桃体、腺样体切除手术术后围拔管期的镇静作用.方法 选择择期进行扁桃体、腺样体切除手术的患儿60例,随机分为常规组(A组)和右美托咪定组(B组)各30例；两组均以丙泊酚和瑞芬太尼靶控输注诱导及维持,手术结束时停药,并静注曲马多2 mg/kg.B组手术结束前10 min静脉注射右美托咪定0.5 μg/kg,输注时间10 min.两组均等待患儿自然清醒拔管,观察两组生命体征变化、术后睁眼时间、拔管时间以及苏醒期躁动、上呼吸道梗阻、术后恶心呕吐等情况.结果 B组拔管时和术后清醒时平均动脉压(MAP)和心率(HR)较A组低,差异有统计学意义(P＜0.05)；B组睁眼时间和拔管时间长于A组,差异有统计学意义(P＜0.05)；A、B组术后上呼吸道梗阻率分别为6.7％和10.0％,术后恶心呕吐发生率为16.7％和13.3％,差异均无统计学意义;B组苏醒期躁动发生率为10.0％,较A组的30.0％低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 右美托咪定在手术围拔管期的应用能较好地用于儿童扁桃体手术术后拔管期的镇静,稳定患儿循环情况,减少苏醒期躁动的发生.
作者：林树勇；程碧珍；庄少惠；程明华 刊期： 2012年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
