冯发深;何霞;王铸;徐霖;张定梅;关琳琳;曹开源
目的 观察慢性应激状态下大鼠一般状况,血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)浓度,蓝斑(LC)中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、即刻早期基因c-fos的表达,以及逍遥散对其的干预效应.方法 将18只SD健康雄性大鼠随机分为正常对照、模型、逍遥散治疗组,每组6只.采用束缚的方法造模,观察大鼠行为、饮食、排便的变化;造模21d后取出蓝斑,用ELISA法检测血清中CRH浓度,Real-time PCR检测蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA的表达.结果 模型组大鼠行为、排便、饮食出现明显异常;与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH浓度升高,蓝斑中CRF mRNA和c-fosmRNA表达均上调(P<0.01);与模型组比较,逍遥散组大鼠血清CRH浓度下降,蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA表达下调(P<0.01);逍遥散组较对照组CRH浓度升高、CRF mRNA和c-fos mRNA表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 神经递质CRF介导了慢性束缚应激中LC的激活,转录因子c-fos亦参与了其调控,而逍遥散则可以有效地进行干预,下调其过表达.
作者:丁秀芳;陶杨;张丽华;张雪;高磊;孙学刚;陈育尧;吕志平 刊期: 2012年第06期
目的 克隆表达恶性疟原虫复制蛋白PJRPA2亚基,制备多抗,为该蛋白的功能研究奠定基础.方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pGEX-KG中,构建PfRPA2/pGEX-KG原核表达载体,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物,谷胱甘肽柱纯化蛋白,Westem blot检测其抗原性,以纯化的GST-PfRPA2免疫小鼠,制备抗PfRPA2的多抗,间接ELISA法检测鼠血清效价,Western blot鉴定多抗特异性.结果 成功构建了重组PfRPA2/pGEX-KG原核表达质粒,并在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达,纯化表达产物,制备抗PfRPA2的鼠多抗,效价为10-7,Westem blot证实此抗体可识别恶性疟原虫内与PfRPA2蛋白位置对应的特异性条带.结论 恶性疟原虫复制蛋白PfPA2亚基在大肠杆菌中获得可溶性高效表达,纯化表达产物能诱导小鼠生产能识别天然蛋白的特异性抗体.
作者:刘雅娟;李宏;周于婷;郝文波;李纪良;吴英松;罗树红;李明 刊期: 2012年第06期
目的 采用原核基因工程技术重组表达梅毒螺旋体TP47蛋白,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用.方法 PCR扩增获得TP47基因片段并构建pET28b-TP47原核表达重组质粒,转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导蛋白质表达,经镍柱纯化后通过质谱技术进行鉴定.采用免疫印迹法测定其与梅毒患者血清的免疫反应性.建立基于重组TP47抗原的ELISA间接法并对30份TPPA阳性血清和75份TPPA阴性血清进行方法学验证.结果 PCR扩增获得约1.1 kb的基因片段,成功构建原核表达载体pET28b -TP47.重组蛋白在细菌中以包涵体形式表达,约占菌体蛋白含量的70%,分子量约39 000 Mr,经纯化后其纯度约95%.经质谱分析表明重组蛋白为TP47蛋白.免疫印迹法证实TP47蛋白能够与梅毒患者血清发生特异性反应,ELISA测定TPPA阳性血清和阴性血清的符合率分别为97%(29/30)和97% (73/75).结论 通过DNA重组技术成功获得了梅毒螺旋体TP47蛋白,证实其与梅毒阳性血清具有良好的反应性,为研发新一代梅毒感染诊断试剂盒奠定了基础.
作者:林勇平;俞辉;张婷;林毅妍;宋金龙;刘忠民 刊期: 2012年第06期
目的 研究人热休克因子1( HSF1)对Fas配体(FasL)启动子转录活性的影响.方法 用在线启动子分析软件分析FasL启动子区转录因子结合位点;凝胶阻滞实验(EMSA)研究内源性HSF1与FasL启动子区的热休克元件(HSE)结合能力;将组成型活化的HSF1突变体与FasL启动子表达载体FasL-luc共同转染HeLa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统,检测荧光索酶活性.结果 在FasL启动子区发现HSE核心序列(nGAAnnTTCn),HSF1可以与该HSE体外结合;荧光素酶活性测定发现HSF1明显上调FasL-luc转录活性,突变该HSE,则转录激活作用消失.结论 HSF1对FasL具有转录调控作用.
作者:鄂顺梅;陈茶;曾建明;邹江英 刊期: 2012年第06期
目的 通过对江西省上饶县晚期血吸虫病人医疗救治项目实施情况进行分析,为进一步加强晚期血吸虫医疗救助项目的管理提供科学依据.方法 采用《江西省晚期血吸虫病人治疗救助信息管理系统》,对2005-2009年接受医疗救助的607例晚期血吸虫病人的相关资料进行分析.结果 607例晚期血吸虫病人中,男性占62.6%,女性占37.4%,50岁以上患者占83%.其中腹水型病人551例,占90.8%,救治1252例次,人均治疗2.3次;巨脾型病人56例,占9.2%,救治56例次,治疗次数均为1次.临床治愈及好转患者占89.0%.结论 上饶县晚期血吸虫医疗救助项目取得良好社会效益,达到了症状改善,病情好转的基本救治目的.
作者:周红;赵奀琴;黄书春;周玉玲;程立毅;陈远新;宁安 刊期: 2012年第06期
目的 调查配偶之间人类血小板抗原(HPA)的不配合率并评估其在新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)中的作用.方法 采用SSP法对200对广州汉族配偶进行了HPA-1~-16基因分型.结果 配偶双方HPA- 1~-6及HPA-15均在同一HPA位点具有不同基因型,HPA-7~- 14及HPA-16均为a/a纯合子.得到HPA-1~-16的等位基因频率,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6、HPA-5、HPA-1和HPA-4的不配合率为别为37.42%、37.02%、8.02%、3.84%、2.44%、0.75%和0.24%,其余HPA位点的不配合率为0.结论 HPA-5可能是广州汉族人群NAP重要的一个HPA系统,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6和HPA-4也分别具有其免疫学意义,这为HPA的抗体检测以及NAIT的诊断治疗提供了实验依据.
作者:周豪杰;杨承东;聂咏梅 刊期: 2012年第06期
目的 筛选主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因.方法 选取主动脉夹层患者为病例组(150例),按照性别、年龄、是否吸烟、合并高血压、糖尿病情况与病例组匹配的原则入选排除主动脉夹层、重大心血管疾病及肿瘤的志愿者为对照组(250例),均从外周血提取基因组DNA,采用DNA混合池技术为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选主动脉夹层发病相关的遗传易感基因.结果 对照组女性数量明显多于病例组(P<0.01);在年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数方面差异均无统计学意义(P>0.05).根据芯片扫描结果,挑选silhouette width计算值大于0.7,小等位基因频率(MAF)大于0.05,且SNPs位于已知名称基因上的前5个SNPs位点.结果发现,遗传变异位点SNP rs2970873(位于PPARGC1A基因)、SNPrs12678080(位于SGCZ基因)、SNP rs489526(位于UNC13C基因)、SNP rs6928665(位于TRAM2基因)和SNP rs17837003(位于ACCN1基因上)可能与主动脉夹层的发病机制有关.结论 SNPs rs2970873、rs12678080、rs489526、rs6928665和rs17837003可能与主动脉夹层发病机制相关.
作者:陈逸飞;钟诗龙;罗建方;薛凌;黎明;胡孜阳 刊期: 2012年第06期
目的 观察禽流感H5N1型病毒对NIH小鼠的致病性.方法 将NIH小鼠随机分为接毒组(20只)和对照组(10只),在负压感染实验室,接毒组于乙醚麻醉后给予AIV H5N1型病毒滴鼻,对照组予正常阴性尿囊液滴鼻,观察14d,记录小鼠的体温、体重、临床症状、死亡情况、病理变化、肺指数及抗体变化.结果 NIH小鼠感染禽流感H5N1型病毒后第1天就出现精神不振,病程主要集中在第3~7天,临床症状主要表现为弓背、蜷缩、竖毛、颤抖、反应迟钝、活动减少、爱扎堆,体重(下降)出现减轻,体温降低,死亡率为40%;接毒组死亡小鼠肺指数为(2.21±0.40),较对照组的(0.44±0.23)明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);肺组织病理严重改变,第8天才能检出抗体(OD值等于0.231).结论 禽流感H5NI型病毒对NIH小鼠有一定的致病性.
作者:刘忠华;刘香梅;黄韧 刊期: 2012年第06期
目的 观察柴芪益肝颗粒治疗四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的疗效及其对Leptin、TGF-β1和IL-13因子的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为模型组、柴芪益肝颗粒组、复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组和空白对照组,每组10只.大鼠腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化,光镜观察肝组织病理学改变,放射免疫分析法检测肝纤四项,液相芯片检测血清细胞因子.结果 与模型组比较,柴芪益肝颗粒组肝脏病理变化显著减轻,肝小叶结构基本清晰,细胞索、肝窦无明显异常;与模型组比较,透明质酸(P=0.001)、层粘连蛋白(P=0.005)和Ⅳ型胶原(P=0.000)水平显著降低,瘦素(P=0.012)、转化生长因子β1 (TGF-β1) (P=0.000)和白介素13(IL-13)(P=0.016)水平亦显著降低,差异均有统计学意义.结论 柴芪益肝颗粒显著改善肝纤维化,可能与其通过降低瘦素、TGF-β1和IL-13水平,抑制细胞外基质沉积有关.
作者:游敏玲;胡世平;罗满芳;廖蔚茜;靖林林 刊期: 2012年第06期
目的 探讨妊娠合并血小板减少的围产期处理及产后出血情况.方法 收集2006年1月至2011年8月茂名市人民医院及广州医学院第三附属医院收治的218例妊娠合并血小板减少患者,根据分娩前血小板计数51×109~99× 109/L、21×109~50×1 09/L、≤20× 109/L分为A、B、C三组,每例患者针对原发病治疗,产前根据病情适当给予糖皮质激素,静脉注射丙种球蛋白,输入血小板治疗,分析各组的产后出血情况.结果 A、B、C三组的产后出血发生率分别为2.67%、7.46%、28.20%;平均出血量分别为(600±80)、(600±120)、(900±200)ml,产后24h平均阴道流血量分别为(250±30)、(250±80)、(500±100)ml,C组平均出血量及24h平均阴道流血量与A、B组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 妊娠合并血小板减少,在治疗原发病的基础上,给予对应治疗,适时终止妊娠可有效改善不良妊娠结局.
作者:李志英;余琳 刊期: 2012年第06期
目的 利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据.方法 以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2重组载体,利用Y2HGold酵母双杂交系统,从人类通用cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白.结果 成功构建含诱饵蛋白基因的pGBKT7-PB1 -F2重组载体,转化酵母白激活和毒性实验显示为阴性;酵母双杂交实验显示Y2HGold和Y187酵母的结合率为5.22%,符合实验要求;经筛选和验证后,得到3个与截短型PB1 - F2蛋白有相互作用的阳性克隆,分别为钾/钠ATP酶β1亚基、热休克蛋白40和白介素-2受体γ亚基.结论 初步推断截短型H3N2流感病毒PB1-F2蛋白可能影响流感病毒在宿主细胞中的复制功能和凋亡调控.
作者:冯发深;何霞;王铸;徐霖;张定梅;关琳琳;曹开源 刊期: 2012年第06期
目的 对广州地区血小板输注无效患者进行两种不同试验方法的交叉配型并检测人类白细胞抗原(HLA)抗体特异性.方法 对62名临床不同疾病类型血小板输注>2次的患者分别做流式细胞血小板交叉配型( Flow-XM)试验和经典补体依赖微量淋巴细胞毒交叉配型(NIH-CDC)试验,并进行群体反应性抗体(PRA)分析.结果 62例血小板输注无效患者通过NIH-CDC试验,得出血小板配型阳性标本22例,阳性率为35.48%;Flow-XM试验比NIHCDC试验阳性检出率高,为70.97%,两种配型结果的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01).分析配型阳性患者的HLA抗体特异性,除2例为阴性外,其余都证实存在针对供者的HLA抗体.结论 Flow-XM试验对于检测HLA抗体具有较高的灵敏度,值得推荐.
作者:全星;杨红玲;顾晓琼;王嘉励 刊期: 2012年第06期
目的 探讨深圳市龙岗区2007年麻疹发病的流行病学特征,为制定麻疹预防控制策略提供科学依据.方法 收集深圳市龙岗区2007年麻疹发病资料,按照发病时间、病人性别、年龄、职业分布等指标进行统计分析.结果 2007年全区共报告确诊麻疹病例1 351例,2007的麻疹发病率为30.18/10万,比2006年(16.88/10万)增加78.8%,差异有统计学意义(P<0.01).发病时间集中在5~8月;发病人群以5岁以下的散居儿童和20~30岁年龄段的外来青工为主:职业以散居儿童发病多占52.5%,其次工人占20.1%.99.19%的病例无麻疹疫苗接种史或免疫史不详.结论 2007年麻疹发病显著升高,发病季节主要在夏季,5岁以下散居儿童和外来劳务青工是麻疹防控工作的重点易感人群,需积极开展麻疹疫苗的接种工作.
作者:杨克志;刘国栋;刘渠;谢瑞琼;骆文博 刊期: 2012年第06期
目的 分析深圳市公明街道2005-2010年其他感染性腹泻流行特征,为有效控制其他感染性腹泻提供流行病学依据.方法 对深圳市公明街道2005-2010年疾病监测信息报告管理系统中报告的其他感染性腹泻病例进行流行病学描述性分析.结果 2005-2010年深圳市公明街道共报告其他感染性腹泻病例9 258例,年均发病率为214.64/10万(9258/4313263),其中2008年发病率高为301.00/10万(2273/755161).5岁以下年龄组占全部发病数的90.38%,散居儿童占总病例数的91.00%;10-12月为发病高峰.报告发病率居前5位的村镇为将石、公明、上村、合水口、长圳.轮状病毒感染所致的其他感染性腹泻病例4966例,占报告病例总数的53.64%.结论 深圳市公明街道2005-2010年感染性腹泻报告病例主要集中在0~5岁散居儿童,秋冬季是好发季节,轮状病毒感染为主要病因.
作者:汪东篱;郑庆鸣;钟晓;列义;姚炜 刊期: 2012年第06期
目的 对我市流感样病例标本进行病原学检测,分析其病原学特点,为流感防控提供病原学依据.方法 采用MDCK细胞(狗肾细胞)培养法分离流感病毒,用血凝抑制试验对病毒株进行分型鉴定.结果 从哨点医院采集的520份标本中共分离出流感病毒41株,分离率为7.9%,以新甲型H1N1为主.其中新甲型H1N1 26株(63.4%),H3N2型5株(12.2%),B(Yamagata)型l株(2.4%),B(Victoria)型9株(22.0%).流感流行高峰出现在春季的1-3月和秋季的8-9月.健康人群血清中流感抗体的阳性率不高,高为新甲型H1N1抗体阳性率41.9%,低为B(Yamagata)的抗体阳性率,仅8.1%.对2010年2株新甲型H1N1进行基因测序,结果显示甲型H1N1基因未发生变异,暂时不会造成大的流行.结论 惠州市流感病毒的流行时间有明显的季节性,活动相对平缓,新甲型H1N1流感病毒是春季的优势毒株,下半年逐渐转变为H3N2型流感病毒.
作者:曾健君;方巧云;刘燕;严宇斌;罗泽燕;徐励琴 刊期: 2012年第06期
目的 探讨精索静脉曲张Marmar术式的解剖学基础.方法 选择雄性SD大鼠100只,随机分为手术组80只和对照组20只,手术组分离及缩窄左肾静脉,对照组只分离不缩窄左肾静脉,同一条件下饲养8周,分别解剖两组大鼠精索静脉,并做血管铸型,记录及比较精索静脉系统分支数目、直径、侧枝循环数目和曲张程度.结果 手术组有51只SD大鼠可以观察到精索静脉明显曲张,腹股沟内环口水平以上及外环口水平以下精索静脉的直径较对照组明显增粗,差异均有统计学意义.手术组大鼠出现明显增粗的侧枝循环,出现的侧枝循环大部分位于外环口平面以下.对照组无或1~2支极细侧枝血管.结论 选择外环口平面以下可以有效结扎曲张的精索静脉避免漏扎导致复发.
作者:曾静;黄桂晓;黄树声;吴先哲;李伟东 刊期: 2012年第06期
目的 了解开平市农村居民华支睾吸虫病防治知识、态度、行为的状况,为制定该病的干预对策提供科学依据.方法 2010年在开平市按东、南、西、北、中各选1个镇的1个村委,每村按整群抽样对年龄≥8岁的居民进行问卷调查200人以上,采用广东省疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所制定的《华支睾吸虫病卫生知识与卫生行为问卷》.用Epidata3.1和SAS9.0对资料进行统计分析.结果 调查5个镇5个村的居民917人,年龄8~91岁,以农民为主,占68.16 %(625/917),学生占26.17%(240/917),其他占5.67%(52/917).该人群对肝吸虫病防治知识知晓率达96.00%(880/917),其中对该病感染途径知晓率为95.53%、知道其危害的占94.98%、知道感染后需就医治疗的占97.06%、而知道如何预防的仅占71.10%.态度正确率,自愿接受检查或主动就医检查的占68.27%(626/917)人,但支持或赞成开展肝吸虫病防治仅有34.13%(313/917).吃淡水鱼生或未煮熟的淡水鱼、用生鱼喂养猫狗等家畜、生熟食品蛄板未分开的等易感危险行为发生率分别为46.46%、56.92%和11.12%.结论 开平市农村居民华支睾吸虫病防治知识知晓率已处于较高水平,但态度和行为的正确率偏低,需进一步探索有针对性的干预措施.
作者:陈缘超;吴丽兰;许楠;黄立本 刊期: 2012年第06期
目的 了解2008-2011年广州地区腹泻儿童空肠弯曲菌(CJ)的感染和耐药情况及其变迁,为CJ感染的临床治疗提供参考.方法 采用API-Campy鉴定系统及多重PCR对CJ进行鉴定,采用纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 4 423例粪便样本共检出345株CJ,总检出率为7.8%,2008-2011年各年检出率分别为8.0%、7.8%、7.9%、7.5%.CJ对复方新诺明和头孢哌酮几乎全部耐药,对氨苄西林、四环素及喹诺酮类药物的耐药率为23.0%~48.3%,但对亚胺培南、阿米卡星、氯霉素、红霉素、阿奇霉素则普遍敏感,耐药率在8.1%以下.CJ对氨苄西林的耐药率从2008年的23.0%上升到2011年的36.0%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率从2008年的2.3%上升至2011年的12.8%,但对其余抗生素的耐药率则变化不大.结论 广州地区儿童空肠弯曲菌仍有较高的感染率,CJ对氨苄西林等部分抗生素的耐药率有逐年升高的趋势.
作者:李彩金;谢永强;周珍文;邓秋连;黄钰君;何艳明 刊期: 2012年第06期
目的 探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义.方法 从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本.其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶);32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶).运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平.结果 相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890) vs (6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P<0.05).而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P<0.05).结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点.
作者:邓治亮;简志祥;孙建 刊期: 2012年第06期
目的 为研制美沙酮维持治疗(MMT)者脱失风险评估量表,筛选、优化条目.方法 在文献研究基础上编制专家咨询问卷,应用德尔菲( Delphi)法,向22位在艾滋病防治和MMT 工作领域的专家发送3次问卷并对咨询结果进行分析.结果 专家权威系数均值为0.93,三轮咨询后,量表条目的重要性和可行性评分的协调系数分别为0.33和0.29(P<0.01),研制的《美沙酮维持治疗者脱失风险评估量表》包含6个维度,共32个条目;量表的内容效度比(CVR)为0.91,内部一致性信度测量显示Cronbach'α系数为0.83,相隔7d的重测信度达到可接受的水平(组内相关系数为0.96).结论 应用Delphi法对《美沙酮维持治疗者脱失风险评估量表》条目筛选的结果可取,量表具有良好的信度和效度.
作者:张媛;林鹏;李张;李艳;杨放;罗玉兰;付笑冰 刊期: 2012年第06期