鄂顺梅;陈茶;曾建明;邹江英
目的 克隆表达一个新的旋毛虫组织蛋白酶基因CathepsinX,初步探讨其免疫学特性,为研究新的防治方法奠定科学基础.方法 从GenBank旋毛虫核酸数据库中筛选出功能未知的CathepsinX基因部分EST序列,使用RACE-PCR方法得到其全长编码基因序列.半定量RT-PCR分析该基因的转录.构建该基因的原核表达载体pET30a-TsCPX,大肠杆菌中IPTG诱导表达,His-tag亲和层析纯化获重组蛋白TsCPX;将纯化的重组蛋白40μg/只免疫BALB/c小鼠,免疫前1周及每次免疫后2周收集免疫血清,间接ELISA检测血清总IgG、亚类IgG1、IgG2a抗体浓度.结果 RACE-PCR克隆出TsCPX全长基因序列,共1227 bp;RT-PCR揭示TsCPX在旋毛虫三个发育时期均有380 bp扩增条带,条带光密度分析显示高转录水平出现在新生幼虫期.E.coli原核表达体系中成功克隆表达出重组蛋白TsCPX;重组蛋白免疫小鼠二次后,免疫血清总Igc迅速上升,三次免疫后达到峰值(P<0.001);IgG亚类IgG1抗体浓度随着免疫次数的增加迅速上升,亚类IgG2a无明显上升,两者间差异有统计学意义(P<0.001).结论 成功克隆的TsCPX基因在旋毛虫的三个生长发育时期均有转录表达,TsCPX重组蛋白具有较强免疫原性,能引起宿主(小鼠)Th2型为主的免疫应答,具有作为旋毛虫病免疫预防研究靶分子的潜在价值.
作者:周阳芳;贾飞飞;占建华;胡旭初;周兴旺 刊期: 2012年第06期
目的 探讨短期和长期过氧化状态对Sestrin2( Sesn2)及PKB胰岛素信号的影响及调控机理.方法 在人肝HepG2细胞株以葡萄糖氧化酶(GO)和含糖培养基共培养4h或16h分别造成细胞短期和长期氧化状态;或胰岛素刺激(15 min或16 h),然后以蛋白印迹法检测Sesn2蛋白含量和胰岛素信号变化(如PKB Ser473和Thr308磷酸化水平).为明确Sesn2作用,用Sesn2 siRNA沉默Sesn2后,探讨胰岛素信号及相关信号变化.结果 GO和胰岛素处理均可明显增加HepG2细胞Sens2蛋白水平;GO短期(4 h)处理可明显刺激胰岛素标志性信号分子PKB Ser473的磷酸化并刺激细胞Sesn2蛋白升高;而长时间(16h)GO处理则可抑制胰岛素刺激的Sesn2表达作用;Sesn2siRNA转染后,可增强胰岛素刺激的PKB Ser473和Thr308位点的磷酸化作用.因此,Sesn2对上述不同机制调控的两个PKB磷酸化位点均有抑制作用.结论 HepG2细胞在短期氧化状态下,可激活PKB活性(PKB Ser473磷酸化)并诱导Sesn2蛋白表达;长期过氧化及胰岛素刺激情况下能激活Sesn2功能,而Sesn2可分别通过对PKBSer473及PKB Thr308两个活性位点的抑制性作用和调控,实现对胰岛素信号及PKB活性的长期负反馈平衡作用.
作者:王国玉;何惠君;于志文 刊期: 2012年第06期
目的 观察慢性应激状态下大鼠一般状况,血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)浓度,蓝斑(LC)中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、即刻早期基因c-fos的表达,以及逍遥散对其的干预效应.方法 将18只SD健康雄性大鼠随机分为正常对照、模型、逍遥散治疗组,每组6只.采用束缚的方法造模,观察大鼠行为、饮食、排便的变化;造模21d后取出蓝斑,用ELISA法检测血清中CRH浓度,Real-time PCR检测蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA的表达.结果 模型组大鼠行为、排便、饮食出现明显异常;与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH浓度升高,蓝斑中CRF mRNA和c-fosmRNA表达均上调(P<0.01);与模型组比较,逍遥散组大鼠血清CRH浓度下降,蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA表达下调(P<0.01);逍遥散组较对照组CRH浓度升高、CRF mRNA和c-fos mRNA表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 神经递质CRF介导了慢性束缚应激中LC的激活,转录因子c-fos亦参与了其调控,而逍遥散则可以有效地进行干预,下调其过表达.
作者:丁秀芳;陶杨;张丽华;张雪;高磊;孙学刚;陈育尧;吕志平 刊期: 2012年第06期
目的 探讨全自动细菌性阴道病(BV)检测系统在BV诊断中的的临床应用价值.方法 取943例疑为细菌性阴道病的阴道分泌物标本,同时用全自动BV检测系统和Amsel金标准法进行对比检测.结果 采用全自动BV检测系统检测阳性率为18.2%,Amsel法检测阳性率为17.7%,两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05).两种方法同时检测阳性有161例,同时检测阴性有765例,符合率达到98.2%.与Amsel法比较,全自动BV检测系统诊断BV的灵敏性为96.4%,特异性为98.6%.结论 全自动BV检测系统操作简便、快速,结果客观准确,适用于门诊病人的BV快速检测,值得推广使用.
作者:吴少卿;曹文平;文道林 刊期: 2012年第06期
目的 探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、前清蛋白(PA)和心肌酶谱在儿童感染性疾病中的意义.方法 将548例感染性疾病患儿依据病情分为细菌感染和病毒感染组,另选112例健康儿童作为对照组.检测各组血清的hsCRP、PA和心肌酶谱数值,分析其变化与疾病的关系.结果 细菌感染组的hs-CRP显著增高(45.2 mg/L),PA显著降低[( 107.15±28.17) mg/L],与病毒感染组和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).而病毒感染组儿童心肌酶谱各项检测值则明显高于细菌感染组(P<0.01).结论 在儿童感染性疾病诊治中,同时检测hs-CRP、PA与心肌酶谱对于鉴别细菌与病毒感染具有重要意义,不仅有利于疾病早期诊断,而且对病情监测及判断预后均有重要的临床价值.
作者:王淑慧;李梅爱;林爱君 刊期: 2012年第06期
目的 探讨妊娠合并血小板减少的围产期处理及产后出血情况.方法 收集2006年1月至2011年8月茂名市人民医院及广州医学院第三附属医院收治的218例妊娠合并血小板减少患者,根据分娩前血小板计数51×109~99× 109/L、21×109~50×1 09/L、≤20× 109/L分为A、B、C三组,每例患者针对原发病治疗,产前根据病情适当给予糖皮质激素,静脉注射丙种球蛋白,输入血小板治疗,分析各组的产后出血情况.结果 A、B、C三组的产后出血发生率分别为2.67%、7.46%、28.20%;平均出血量分别为(600±80)、(600±120)、(900±200)ml,产后24h平均阴道流血量分别为(250±30)、(250±80)、(500±100)ml,C组平均出血量及24h平均阴道流血量与A、B组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 妊娠合并血小板减少,在治疗原发病的基础上,给予对应治疗,适时终止妊娠可有效改善不良妊娠结局.
作者:李志英;余琳 刊期: 2012年第06期
目的 观察美托洛尔联合硝酸异山梨酯对慢性心力衰竭(CHF)患者的疗效及其对血浆N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响.方法 选取慢性心力衰竭患者130例,随机分为观察组和对照组,各65例.对照组予以硝酸异山梨酯等支持对症治疗,观察组在对照组基础上予以美托洛尔治疗.观察两组的疗效、心功能分级和其他指标的变化.结果 观察组的总有效率为90.77%,优于对照组的72.31%,差异有统计学意义(P<0.01).治疗后两组的心功能分级、左室舒张末内径、N-端脑利钠肽前体和高敏C反应蛋白水平较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),而观察组降低较对照组更为明显;而左心室射血分数方面,两组治疗后出现明显的提高(P<0.01),观察组提高较对照更为明显.结论 美托洛尔联合硝酸异山梨酯对慢性心力衰竭的疗效显著,能改善心功能,提高临床疗效.
作者:周柬;庞珏 刊期: 2012年第06期
目的 为调查2009年8-10月深圳某医院妇产科产妇会阴侧切伤口发生医院感染事件的原因和预防相关院内感染的发生.方法 采用描述性分析和病例对照的方法,了解某医院产科医院感染发生情况并对医院感染发生相关因素进行探讨.结果 272例侧切术病人中8例发生医院感染,术后感染率为2.94%.经调查,会阴侧切缝合术后住院天数≥3 d(X2=0.01,P=0.01)、住院时有合并症(Fisher's Exect Test,P=0.04)是产科会阴侧切术产妇医院感染发生的危险因素,而产房物品表面(>5 cfu/m2)及病房空气(>200 cfu/m3)细菌污染严重可能为该次医院感染发生的直接原因.结论 提高手术质量,做好产后护理及产房与病房的消毒工作是预防产妇会阴侧切伤口发生医院感染的重要措施.
作者:邱莉芳;刘凤仁;梁享生;董建;王文玲;张起文 刊期: 2012年第06期
目的 研究脑梗死相关蛋白在评估急性脑梗死(ACI)患者脑血管狭窄程度中的作用.方法 选取2010-2012年在珠江医院因ACI住院的患者,选取脑动脉造影结果狭窄程度>70%及闭塞者为试验组(n=29),≤70%者及正常者为对照组(n=23).检测所有患者外周血脑梗死相关蛋白含量.结果 试验组患者超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血栓前体蛋白(TpP)、脂蛋白α(Lpα)外周血中含量分别为(3.51±2.25) mg/L、(1 797.08±162.35) μg/L、(363.81±218.34) mg/L,均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).D-二聚体(DDI)、纤维蛋白原(Fg)、血小板凝聚因子(vWF)的含量无明显变化.hs-CRP(P=0.029,OR =2.232)、TpP(P=0.032,OR=1.014)、Lpα( P=0.024,OR=1.009)与脑大动脉粥样硬化病变导致的脑血管狭窄程度相关,DDI(P=0.671)、Fg(P=0.248)、vWF (P=0.090)与脑血管的狭窄程度相关性不明显.高血压(P=0.029,OR=4.582)是脑血管狭窄的危险因素.结论 hs-CRP、TpP、Lpα、高血压是脑大动脉粥样硬化病变导致的ACI患者脑血管重度狭窄的危险因素,血清中hs-CRP、TpP、Lpα含量升高同时伴有高血压的ACI患者脑血管重度狭窄的可能性增大.
作者:刘鹏;刘亚杰;贺雄军;罗丽丽 刊期: 2012年第06期
目的 了解2008-2011年广州地区腹泻儿童空肠弯曲菌(CJ)的感染和耐药情况及其变迁,为CJ感染的临床治疗提供参考.方法 采用API-Campy鉴定系统及多重PCR对CJ进行鉴定,采用纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 4 423例粪便样本共检出345株CJ,总检出率为7.8%,2008-2011年各年检出率分别为8.0%、7.8%、7.9%、7.5%.CJ对复方新诺明和头孢哌酮几乎全部耐药,对氨苄西林、四环素及喹诺酮类药物的耐药率为23.0%~48.3%,但对亚胺培南、阿米卡星、氯霉素、红霉素、阿奇霉素则普遍敏感,耐药率在8.1%以下.CJ对氨苄西林的耐药率从2008年的23.0%上升到2011年的36.0%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率从2008年的2.3%上升至2011年的12.8%,但对其余抗生素的耐药率则变化不大.结论 广州地区儿童空肠弯曲菌仍有较高的感染率,CJ对氨苄西林等部分抗生素的耐药率有逐年升高的趋势.
作者:李彩金;谢永强;周珍文;邓秋连;黄钰君;何艳明 刊期: 2012年第06期
低密度脂蛋白受体( LDLR)对于维持血浆脂蛋白代谢平衡起到十分重要的作用.LDLR基因突变会导致血脂代谢紊乱,而血脂异常与动脉粥样硬化密切相关,是心脑血管疾病发生和发展的重要危险因素.本文就LDLR基因多态性与血脂异常、高血压及心脑血管疾病之间的关系进行综述.
作者:罗显云;姚震;王天松;张云波 刊期: 2012年第06期
目的 探讨精索静脉曲张Marmar术式的解剖学基础.方法 选择雄性SD大鼠100只,随机分为手术组80只和对照组20只,手术组分离及缩窄左肾静脉,对照组只分离不缩窄左肾静脉,同一条件下饲养8周,分别解剖两组大鼠精索静脉,并做血管铸型,记录及比较精索静脉系统分支数目、直径、侧枝循环数目和曲张程度.结果 手术组有51只SD大鼠可以观察到精索静脉明显曲张,腹股沟内环口水平以上及外环口水平以下精索静脉的直径较对照组明显增粗,差异均有统计学意义.手术组大鼠出现明显增粗的侧枝循环,出现的侧枝循环大部分位于外环口平面以下.对照组无或1~2支极细侧枝血管.结论 选择外环口平面以下可以有效结扎曲张的精索静脉避免漏扎导致复发.
作者:曾静;黄桂晓;黄树声;吴先哲;李伟东 刊期: 2012年第06期
目的 对我市流感样病例标本进行病原学检测,分析其病原学特点,为流感防控提供病原学依据.方法 采用MDCK细胞(狗肾细胞)培养法分离流感病毒,用血凝抑制试验对病毒株进行分型鉴定.结果 从哨点医院采集的520份标本中共分离出流感病毒41株,分离率为7.9%,以新甲型H1N1为主.其中新甲型H1N1 26株(63.4%),H3N2型5株(12.2%),B(Yamagata)型l株(2.4%),B(Victoria)型9株(22.0%).流感流行高峰出现在春季的1-3月和秋季的8-9月.健康人群血清中流感抗体的阳性率不高,高为新甲型H1N1抗体阳性率41.9%,低为B(Yamagata)的抗体阳性率,仅8.1%.对2010年2株新甲型H1N1进行基因测序,结果显示甲型H1N1基因未发生变异,暂时不会造成大的流行.结论 惠州市流感病毒的流行时间有明显的季节性,活动相对平缓,新甲型H1N1流感病毒是春季的优势毒株,下半年逐渐转变为H3N2型流感病毒.
作者:曾健君;方巧云;刘燕;严宇斌;罗泽燕;徐励琴 刊期: 2012年第06期
目的 筛选主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因.方法 选取主动脉夹层患者为病例组(150例),按照性别、年龄、是否吸烟、合并高血压、糖尿病情况与病例组匹配的原则入选排除主动脉夹层、重大心血管疾病及肿瘤的志愿者为对照组(250例),均从外周血提取基因组DNA,采用DNA混合池技术为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选主动脉夹层发病相关的遗传易感基因.结果 对照组女性数量明显多于病例组(P<0.01);在年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数方面差异均无统计学意义(P>0.05).根据芯片扫描结果,挑选silhouette width计算值大于0.7,小等位基因频率(MAF)大于0.05,且SNPs位于已知名称基因上的前5个SNPs位点.结果发现,遗传变异位点SNP rs2970873(位于PPARGC1A基因)、SNPrs12678080(位于SGCZ基因)、SNP rs489526(位于UNC13C基因)、SNP rs6928665(位于TRAM2基因)和SNP rs17837003(位于ACCN1基因上)可能与主动脉夹层的发病机制有关.结论 SNPs rs2970873、rs12678080、rs489526、rs6928665和rs17837003可能与主动脉夹层发病机制相关.
作者:陈逸飞;钟诗龙;罗建方;薛凌;黎明;胡孜阳 刊期: 2012年第06期
目的 分析深圳市公明街道2005-2010年其他感染性腹泻流行特征,为有效控制其他感染性腹泻提供流行病学依据.方法 对深圳市公明街道2005-2010年疾病监测信息报告管理系统中报告的其他感染性腹泻病例进行流行病学描述性分析.结果 2005-2010年深圳市公明街道共报告其他感染性腹泻病例9 258例,年均发病率为214.64/10万(9258/4313263),其中2008年发病率高为301.00/10万(2273/755161).5岁以下年龄组占全部发病数的90.38%,散居儿童占总病例数的91.00%;10-12月为发病高峰.报告发病率居前5位的村镇为将石、公明、上村、合水口、长圳.轮状病毒感染所致的其他感染性腹泻病例4966例,占报告病例总数的53.64%.结论 深圳市公明街道2005-2010年感染性腹泻报告病例主要集中在0~5岁散居儿童,秋冬季是好发季节,轮状病毒感染为主要病因.
作者:汪东篱;郑庆鸣;钟晓;列义;姚炜 刊期: 2012年第06期
目的 探讨中医体质与大学生疲劳发生的相关性.方法 整群抽样抽取广州某大学6 029名大学生,进行问卷调查了解疲劳状况及中医体质分型,进行卡方检验、多分类Logistic回归分析.结果 疲劳发生情况为“总是”占3.3%(196)、“经常”占19.7%(1 187).男、女大学生发生疲劳的差异有统计学意义(x2=44.725,P=0.000).多分类Logistic回归分析显示,“总是”发生疲劳时平和质为保护因素,气虚质、瘀血质及湿热质为危险因素;“经常”发生疲劳时平和质为保护因素,气虚质、瘀血质为危险因素;“有时”发生疲劳时只有平和质密切相关,为保护因素;“很少”发生疲劳时各体质对模型无贡献.结论气虚质、瘀血质和湿热质是大学生发生疲劳的危险因素,而平和质是保护因素.
作者:严美花;陈晶;孙晓敏;谭为;张乐;肖雅;谢豪杰;罗仁;赵晓山 刊期: 2012年第06期
目的 调查配偶之间人类血小板抗原(HPA)的不配合率并评估其在新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)中的作用.方法 采用SSP法对200对广州汉族配偶进行了HPA-1~-16基因分型.结果 配偶双方HPA- 1~-6及HPA-15均在同一HPA位点具有不同基因型,HPA-7~- 14及HPA-16均为a/a纯合子.得到HPA-1~-16的等位基因频率,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6、HPA-5、HPA-1和HPA-4的不配合率为别为37.42%、37.02%、8.02%、3.84%、2.44%、0.75%和0.24%,其余HPA位点的不配合率为0.结论 HPA-5可能是广州汉族人群NAP重要的一个HPA系统,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6和HPA-4也分别具有其免疫学意义,这为HPA的抗体检测以及NAIT的诊断治疗提供了实验依据.
作者:周豪杰;杨承东;聂咏梅 刊期: 2012年第06期
目的 研究人热休克因子1( HSF1)对Fas配体(FasL)启动子转录活性的影响.方法 用在线启动子分析软件分析FasL启动子区转录因子结合位点;凝胶阻滞实验(EMSA)研究内源性HSF1与FasL启动子区的热休克元件(HSE)结合能力;将组成型活化的HSF1突变体与FasL启动子表达载体FasL-luc共同转染HeLa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统,检测荧光索酶活性.结果 在FasL启动子区发现HSE核心序列(nGAAnnTTCn),HSF1可以与该HSE体外结合;荧光素酶活性测定发现HSF1明显上调FasL-luc转录活性,突变该HSE,则转录激活作用消失.结论 HSF1对FasL具有转录调控作用.
作者:鄂顺梅;陈茶;曾建明;邹江英 刊期: 2012年第06期
目的 探讨N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)在妊娠高血压疾病(PIH)心功能评估中的价值.方法 将102例PIH孕妇分为妊娠高血压组37例,轻度子痫前期组33例,重度子痫前期组32例,另外选取正常妊娠组32例及正常未孕育龄妇女32例作为对照组,采用电化学发光法测定患者血清NT-proBNP浓度.结果 PIH组、正常妊娠组和对照组的NT-proBNP水平分别为(300.52±134.44)、( 83.42±26.26)和(59.83±12.89)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠高血压组的NT-proBNP水平分别为(488.56±155.54)、(323.39±148.90)和(185.73±43.78)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).NT-proBNP与孕妇体重指数(BMI)呈正相关(r=0.602),与新生儿体重呈负相关(r=-0.279).结论 孕后NT-proBNP有所升高,而且是能够用于评估PIH孕妇心功能的敏感指标之一.
作者:陈晓燕;周俐琼;陈冀莹 刊期: 2012年第06期
目的 探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义.方法 从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本.其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶);32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶).运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平.结果 相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890) vs (6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P<0.05).而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P<0.05).结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点.
作者:邓治亮;简志祥;孙建 刊期: 2012年第06期