丁秀芳；陶杨；张丽华；张雪；高磊；孙学刚；陈育尧；吕志平
目的 探讨精索静脉曲张Marmar术式的解剖学基础.方法 选择雄性SD大鼠100只,随机分为手术组80只和对照组20只,手术组分离及缩窄左肾静脉,对照组只分离不缩窄左肾静脉,同一条件下饲养8周,分别解剖两组大鼠精索静脉,并做血管铸型,记录及比较精索静脉系统分支数目、直径、侧枝循环数目和曲张程度.结果 手术组有51只SD大鼠可以观察到精索静脉明显曲张,腹股沟内环口水平以上及外环口水平以下精索静脉的直径较对照组明显增粗,差异均有统计学意义.手术组大鼠出现明显增粗的侧枝循环,出现的侧枝循环大部分位于外环口平面以下.对照组无或1～2支极细侧枝血管.结论 选择外环口平面以下可以有效结扎曲张的精索静脉避免漏扎导致复发.
作者：曾静；黄桂晓；黄树声；吴先哲；李伟东 刊期： 2012年第06期
目的 对新发现的华支睾吸虫亲肌素样蛋白(CsMLP)进行克隆、原核表达,初步了解其重组产物的免疫学功能.方法 应用生物信息学分析软件,分析CsMLP的序列特点和基本理化特征；将CsMLP基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,诱导表达并用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,用纯化的CsMLP蛋白免疫SD大鼠获得抗血清;用Western blot进行免疫反应性及免疫原性分析；应用免疫荧光方法观察CsMLP在华支睾吸虫成虫的定位.结果 该cDNA序列全长为900 bp,编码190个氨基酸,具有Calponin功能域；PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a (+)-CsMLP重组质粒构建成功;SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中获得高效表达,分子量为21 300 Mr;经亲和层析获得了高纯度蛋白；重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清、感染了华支睾吸虫的SD大鼠血清识别；CsMLP主要定位于虫体富含肌肉组织的口、腹吸盘、咽部,在表膜、肠壁也有分布.结论 CsMLP可在原核表达系统中呈现高效的可溶性表达,具有免疫原性,其主要分布在华支睾吸虫肌肉丰富的组织.
作者：李文芳；黄艳；余新炳；胡月；李然；徐劲 刊期： 2012年第06期
目的 观察慢性应激状态下大鼠一般状况,血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)浓度,蓝斑(LC)中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、即刻早期基因c-fos的表达,以及逍遥散对其的干预效应.方法 将18只SD健康雄性大鼠随机分为正常对照、模型、逍遥散治疗组,每组6只.采用束缚的方法造模,观察大鼠行为、饮食、排便的变化；造模21d后取出蓝斑,用ELISA法检测血清中CRH浓度,Real-time PCR检测蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA的表达.结果 模型组大鼠行为、排便、饮食出现明显异常；与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH浓度升高,蓝斑中CRF mRNA和c-fosmRNA表达均上调(P＜0.01)；与模型组比较,逍遥散组大鼠血清CRH浓度下降,蓝斑中CRF mRNA和c-fos mRNA表达下调(P＜0.01)；逍遥散组较对照组CRH浓度升高、CRF mRNA和c-fos mRNA表达上调,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 神经递质CRF介导了慢性束缚应激中LC的激活,转录因子c-fos亦参与了其调控,而逍遥散则可以有效地进行干预,下调其过表达.
作者：丁秀芳；陶杨；张丽华；张雪；高磊；孙学刚；陈育尧；吕志平 刊期： 2012年第06期
目的 对广州地区血小板输注无效患者进行两种不同试验方法的交叉配型并检测人类白细胞抗原(HLA)抗体特异性.方法 对62名临床不同疾病类型血小板输注＞2次的患者分别做流式细胞血小板交叉配型( Flow-XM)试验和经典补体依赖微量淋巴细胞毒交叉配型(NIH-CDC)试验,并进行群体反应性抗体(PRA)分析.结果 62例血小板输注无效患者通过NIH-CDC试验,得出血小板配型阳性标本22例,阳性率为35.48％;Flow-XM试验比NIHCDC试验阳性检出率高,为70.97％,两种配型结果的阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.01).分析配型阳性患者的HLA抗体特异性,除2例为阴性外,其余都证实存在针对供者的HLA抗体.结论 Flow-XM试验对于检测HLA抗体具有较高的灵敏度,值得推荐.
作者：全星；杨红玲；顾晓琼；王嘉励 刊期： 2012年第06期
目的 探讨用美沙酮替代治疗是否有效降低吸毒者肺部并发症罹患率,为美沙酮替代治疗对吸毒者并发症的影响提供更多的科学依据.方法 走访美沙酮替代治疗门诊和市戒毒所,调查、筛选和确定样本量,选取90例坚持用美沙酮替代治疗吸毒者(病例组)和90例不用美沙酮替代治疗吸毒者(对照组)进行摄胸片检查,对两组胸片X射线影像改变特征进行统计学分析.结果 两组人员性别和调查前吸毒时间差异无统计学意义(P＞0.05);在研究中,病例组的治疗脱失率和对照组的跟踪脱落率均较高,分别为36.67％和33.33％;病例组X射线胸片检查异常6例,阳性率10.53％,主要病变为双肺纹理增粗4例,肺结核和肺感染各1例,X射线特征单一;对照组X射线胸片检查异常26例,阳性率43.33％,主要病变是肺结核病8例,双肺纹理增粗7例,并见胸积液4例、气胸3例和心影改变2例等,X射线特征复杂多样；两组胸片阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 坚持用美沙酮替代治疗可以有效降低吸毒者肺部并发症的罹患率.
作者：关晓熙；张焕彩；梁定宇；司徒荣阮；梁坚忠；陈缘超；吴松润 刊期： 2012年第06期
目的 通过对江西省上饶县晚期血吸虫病人医疗救治项目实施情况进行分析,为进一步加强晚期血吸虫医疗救助项目的管理提供科学依据.方法 采用《江西省晚期血吸虫病人治疗救助信息管理系统》,对2005-2009年接受医疗救助的607例晚期血吸虫病人的相关资料进行分析.结果 607例晚期血吸虫病人中,男性占62.6％,女性占37.4％,50岁以上患者占83％.其中腹水型病人551例,占90.8％,救治1252例次,人均治疗2.3次；巨脾型病人56例,占9.2％,救治56例次,治疗次数均为1次.临床治愈及好转患者占89.0％.结论 上饶县晚期血吸虫医疗救助项目取得良好社会效益,达到了症状改善,病情好转的基本救治目的.
作者：周红；赵奀琴；黄书春；周玉玲；程立毅；陈远新；宁安 刊期： 2012年第06期
目的 研究人热休克因子1( HSF1)对Fas配体(FasL)启动子转录活性的影响.方法 用在线启动子分析软件分析FasL启动子区转录因子结合位点；凝胶阻滞实验(EMSA)研究内源性HSF1与FasL启动子区的热休克元件(HSE)结合能力；将组成型活化的HSF1突变体与FasL启动子表达载体FasL-luc共同转染HeLa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统,检测荧光索酶活性.结果 在FasL启动子区发现HSE核心序列(nGAAnnTTCn),HSF1可以与该HSE体外结合；荧光素酶活性测定发现HSF1明显上调FasL-luc转录活性,突变该HSE,则转录激活作用消失.结论 HSF1对FasL具有转录调控作用.
作者：鄂顺梅；陈茶；曾建明；邹江英 刊期： 2012年第06期
目的 探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、前清蛋白(PA)和心肌酶谱在儿童感染性疾病中的意义.方法 将548例感染性疾病患儿依据病情分为细菌感染和病毒感染组,另选112例健康儿童作为对照组.检测各组血清的hsCRP、PA和心肌酶谱数值,分析其变化与疾病的关系.结果 细菌感染组的hs-CRP显著增高(45.2 mg/L),PA显著降低[( 107.15±28.17) mg/L],与病毒感染组和对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).而病毒感染组儿童心肌酶谱各项检测值则明显高于细菌感染组(P＜0.01).结论 在儿童感染性疾病诊治中,同时检测hs-CRP、PA与心肌酶谱对于鉴别细菌与病毒感染具有重要意义,不仅有利于疾病早期诊断,而且对病情监测及判断预后均有重要的临床价值.
作者：王淑慧；李梅爱；林爱君 刊期： 2012年第06期
目的 采用原核基因工程技术重组表达梅毒螺旋体TP47蛋白,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用.方法 PCR扩增获得TP47基因片段并构建pET28b-TP47原核表达重组质粒,转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导蛋白质表达,经镍柱纯化后通过质谱技术进行鉴定.采用免疫印迹法测定其与梅毒患者血清的免疫反应性.建立基于重组TP47抗原的ELISA间接法并对30份TPPA阳性血清和75份TPPA阴性血清进行方法学验证.结果 PCR扩增获得约1.1 kb的基因片段,成功构建原核表达载体pET28b -TP47.重组蛋白在细菌中以包涵体形式表达,约占菌体蛋白含量的70％,分子量约39 000 Mr,经纯化后其纯度约95％.经质谱分析表明重组蛋白为TP47蛋白.免疫印迹法证实TP47蛋白能够与梅毒患者血清发生特异性反应,ELISA测定TPPA阳性血清和阴性血清的符合率分别为97％(29/30)和97％ (73/75).结论 通过DNA重组技术成功获得了梅毒螺旋体TP47蛋白,证实其与梅毒阳性血清具有良好的反应性,为研发新一代梅毒感染诊断试剂盒奠定了基础.
作者：林勇平；俞辉；张婷；林毅妍；宋金龙；刘忠民 刊期： 2012年第06期
目的 克隆表达一个新的旋毛虫组织蛋白酶基因CathepsinX,初步探讨其免疫学特性,为研究新的防治方法奠定科学基础.方法 从GenBank旋毛虫核酸数据库中筛选出功能未知的CathepsinX基因部分EST序列,使用RACE-PCR方法得到其全长编码基因序列.半定量RT-PCR分析该基因的转录.构建该基因的原核表达载体pET30a-TsCPX,大肠杆菌中IPTG诱导表达,His-tag亲和层析纯化获重组蛋白TsCPX；将纯化的重组蛋白40μg/只免疫BALB/c小鼠,免疫前1周及每次免疫后2周收集免疫血清,间接ELISA检测血清总IgG、亚类IgG1、IgG2a抗体浓度.结果 RACE-PCR克隆出TsCPX全长基因序列,共1227 bp；RT-PCR揭示TsCPX在旋毛虫三个发育时期均有380 bp扩增条带,条带光密度分析显示高转录水平出现在新生幼虫期.E.coli原核表达体系中成功克隆表达出重组蛋白TsCPX;重组蛋白免疫小鼠二次后,免疫血清总Igc迅速上升,三次免疫后达到峰值(P＜0.001)；IgG亚类IgG1抗体浓度随着免疫次数的增加迅速上升,亚类IgG2a无明显上升,两者间差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功克隆的TsCPX基因在旋毛虫的三个生长发育时期均有转录表达,TsCPX重组蛋白具有较强免疫原性,能引起宿主(小鼠)Th2型为主的免疫应答,具有作为旋毛虫病免疫预防研究靶分子的潜在价值.
作者：周阳芳；贾飞飞；占建华；胡旭初；周兴旺 刊期： 2012年第06期
目的 对深圳市2004-2011年伤寒沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型及耐药性分析,为临床用药和追踪传染源提供依据.方法 采用K-B法对42株伤寒沙门菌进行20种抗菌药物敏感性测试,并用PFGE对其进行分子分型.结果 42株伤寒沙门菌株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、甲氧苄啶、氯霉素和四环素17种药物的敏感率均超过90％,对萘啶酸耐药率高达61.5％.42株伤寒沙门菌株可分为SZ0001 -SZ0028共28个PFGE型别,其中流行优势型为SZ0023型别.结论 结合药物敏感试验结果和PFGE分子分型结果可以判断伤寒疫情的优势株型.
作者：林一曼；李迎慧；扈庆华；吕东月；邱亚群；石晓路 刊期： 2012年第06期
目的 为调查2009年8-10月深圳某医院妇产科产妇会阴侧切伤口发生医院感染事件的原因和预防相关院内感染的发生.方法 采用描述性分析和病例对照的方法,了解某医院产科医院感染发生情况并对医院感染发生相关因素进行探讨.结果 272例侧切术病人中8例发生医院感染,术后感染率为2.94％.经调查,会阴侧切缝合术后住院天数≥3 d(X2=0.01,P=0.01)、住院时有合并症(Fisher's Exect Test,P=0.04)是产科会阴侧切术产妇医院感染发生的危险因素,而产房物品表面(＞5 cfu/m2)及病房空气(＞200 cfu/m3)细菌污染严重可能为该次医院感染发生的直接原因.结论 提高手术质量,做好产后护理及产房与病房的消毒工作是预防产妇会阴侧切伤口发生医院感染的重要措施.
作者：邱莉芳；刘凤仁；梁享生；董建；王文玲；张起文 刊期： 2012年第06期
目的 探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义.方法 从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本.其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶)；32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶).运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平.结果 相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890) vs (6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P＜0.05).而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P＜0.05).结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点.
作者：邓治亮；简志祥；孙建 刊期： 2012年第06期
目的 观察柴芪益肝颗粒治疗四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的疗效及其对Leptin、TGF-β1和IL-13因子的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为模型组、柴芪益肝颗粒组、复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组和空白对照组,每组10只.大鼠腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化,光镜观察肝组织病理学改变,放射免疫分析法检测肝纤四项,液相芯片检测血清细胞因子.结果 与模型组比较,柴芪益肝颗粒组肝脏病理变化显著减轻,肝小叶结构基本清晰,细胞索、肝窦无明显异常；与模型组比较,透明质酸(P=0.001)、层粘连蛋白(P=0.005)和Ⅳ型胶原(P=0.000)水平显著降低,瘦素(P=0.012)、转化生长因子β1 (TGF-β1) (P=0.000)和白介素13(IL-13)(P=0.016)水平亦显著降低,差异均有统计学意义.结论 柴芪益肝颗粒显著改善肝纤维化,可能与其通过降低瘦素、TGF-β1和IL-13水平,抑制细胞外基质沉积有关.
作者：游敏玲；胡世平；罗满芳；廖蔚茜；靖林林 刊期： 2012年第06期
目的 了解2008-2011年广州地区腹泻儿童空肠弯曲菌(CJ)的感染和耐药情况及其变迁,为CJ感染的临床治疗提供参考.方法 采用API-Campy鉴定系统及多重PCR对CJ进行鉴定,采用纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 4 423例粪便样本共检出345株CJ,总检出率为7.8％,2008-2011年各年检出率分别为8.0％、7.8％、7.9％、7.5％.CJ对复方新诺明和头孢哌酮几乎全部耐药,对氨苄西林、四环素及喹诺酮类药物的耐药率为23.0％～48.3％,但对亚胺培南、阿米卡星、氯霉素、红霉素、阿奇霉素则普遍敏感,耐药率在8.1％以下.CJ对氨苄西林的耐药率从2008年的23.0％上升到2011年的36.0％,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率从2008年的2.3％上升至2011年的12.8％,但对其余抗生素的耐药率则变化不大.结论 广州地区儿童空肠弯曲菌仍有较高的感染率,CJ对氨苄西林等部分抗生素的耐药率有逐年升高的趋势.
作者：李彩金；谢永强；周珍文；邓秋连；黄钰君；何艳明 刊期： 2012年第06期
目的 对我市流感样病例标本进行病原学检测,分析其病原学特点,为流感防控提供病原学依据.方法 采用MDCK细胞(狗肾细胞)培养法分离流感病毒,用血凝抑制试验对病毒株进行分型鉴定.结果 从哨点医院采集的520份标本中共分离出流感病毒41株,分离率为7.9％,以新甲型H1N1为主.其中新甲型H1N1 26株(63.4％),H3N2型5株(12.2％),B(Yamagata)型l株(2.4％),B(Victoria)型9株(22.0％).流感流行高峰出现在春季的1-3月和秋季的8-9月.健康人群血清中流感抗体的阳性率不高,高为新甲型H1N1抗体阳性率41.9％,低为B(Yamagata)的抗体阳性率,仅8.1％.对2010年2株新甲型H1N1进行基因测序,结果显示甲型H1N1基因未发生变异,暂时不会造成大的流行.结论 惠州市流感病毒的流行时间有明显的季节性,活动相对平缓,新甲型H1N1流感病毒是春季的优势毒株,下半年逐渐转变为H3N2型流感病毒.
作者：曾健君；方巧云；刘燕；严宇斌；罗泽燕；徐励琴 刊期： 2012年第06期
目的 构建含有人nestin第二内含子的荧光素酶报告基因并检测其活性.方法 从NCBI数据库获得nestin 的DNA全长序列(NC_000001),用vector NTI软件分析找到其第二内含子位置,通过PCR的方法从人血全基因组DNA中钓取nestin的第二内含子全长片段,克隆到报告基因pGL3-promoter载体上,将报告基因载体转染至293T细胞,采用双荧光素酶报告基因系统评估第二内含子的活性.结果 成功钓取nestin第二内含子片段,长度为1 688 bp,测定其DNA序列正确.瞬时转染293T细胞,经双荧光报告实验显示转染了pGL3-nes-promoter载体的细胞其相对荧光素酶活性相比于空载组,大约提高了3.39倍,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功构建了含有nestin第二内含子的荧光素酶报告载体,为进一步研究nestin的调控机制奠定基础.
作者：朱媛媛；安靓 刊期： 2012年第06期
目的 探讨短期和长期过氧化状态对Sestrin2( Sesn2)及PKB胰岛素信号的影响及调控机理.方法 在人肝HepG2细胞株以葡萄糖氧化酶(GO)和含糖培养基共培养4h或16h分别造成细胞短期和长期氧化状态；或胰岛素刺激(15 min或16 h),然后以蛋白印迹法检测Sesn2蛋白含量和胰岛素信号变化(如PKB Ser473和Thr308磷酸化水平).为明确Sesn2作用,用Sesn2 siRNA沉默Sesn2后,探讨胰岛素信号及相关信号变化.结果 GO和胰岛素处理均可明显增加HepG2细胞Sens2蛋白水平；GO短期(4 h)处理可明显刺激胰岛素标志性信号分子PKB Ser473的磷酸化并刺激细胞Sesn2蛋白升高；而长时间(16h)GO处理则可抑制胰岛素刺激的Sesn2表达作用;Sesn2siRNA转染后,可增强胰岛素刺激的PKB Ser473和Thr308位点的磷酸化作用.因此,Sesn2对上述不同机制调控的两个PKB磷酸化位点均有抑制作用.结论 HepG2细胞在短期氧化状态下,可激活PKB活性(PKB Ser473磷酸化)并诱导Sesn2蛋白表达；长期过氧化及胰岛素刺激情况下能激活Sesn2功能,而Sesn2可分别通过对PKBSer473及PKB Thr308两个活性位点的抑制性作用和调控,实现对胰岛素信号及PKB活性的长期负反馈平衡作用.
作者：王国玉；何惠君；于志文 刊期： 2012年第06期
目的 了解开平市农村居民华支睾吸虫病防治知识、态度、行为的状况,为制定该病的干预对策提供科学依据.方法 2010年在开平市按东、南、西、北、中各选1个镇的1个村委,每村按整群抽样对年龄≥8岁的居民进行问卷调查200人以上,采用广东省疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所制定的《华支睾吸虫病卫生知识与卫生行为问卷》.用Epidata3.1和SAS9.0对资料进行统计分析.结果 调查5个镇5个村的居民917人,年龄8～91岁,以农民为主,占68.16 ％(625/917),学生占26.17％(240/917),其他占5.67％(52/917).该人群对肝吸虫病防治知识知晓率达96.00％(880/917),其中对该病感染途径知晓率为95.53％、知道其危害的占94.98％、知道感染后需就医治疗的占97.06％、而知道如何预防的仅占71.10％.态度正确率,自愿接受检查或主动就医检查的占68.27％(626/917)人,但支持或赞成开展肝吸虫病防治仅有34.13％(313/917).吃淡水鱼生或未煮熟的淡水鱼、用生鱼喂养猫狗等家畜、生熟食品蛄板未分开的等易感危险行为发生率分别为46.46％、56.92％和11.12％.结论 开平市农村居民华支睾吸虫病防治知识知晓率已处于较高水平,但态度和行为的正确率偏低,需进一步探索有针对性的干预措施.
作者：陈缘超；吴丽兰；许楠；黄立本 刊期： 2012年第06期
目的 探讨霍乱弧菌O1群稻叶型流行株和非流行株的蛋白表达的差异.方法 利用裂解液处理霍乱弧菌,提取全菌蛋白；采用pH梯度等电聚焦对菌蛋白进行双向电泳；考马斯亮蓝染色后获得的双向电泳图谱,并利用ImageMaster 2D Elite 5.0图象分析软件进行分析,找出差异蛋白；在此基础上,胰蛋白酶消化这些特殊差异蛋白,并进行质谱( MALDI-TOF-MS)分析.结果 获得了(1081±16)个蛋白斑点,蛋白主要集中在pI 4.00～7.20之间,重复胶的匹配点数为(1057±28),匹配率为97,85％;发现了有明显差异的21个蛋白点,并进行了质谱鉴定.结论 获得了霍乱弧菌O1群稻叶型流行株和非流行株的差异表达蛋白.
作者：林静佳；李军涛；邓志爱；陈守义 刊期： 2012年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
